ĐỊNH LƢỢNG CHÌ NIỆU
I. NGUYÊN LÝ
- Định lượng chì niệu bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử sử dụng lò
điện.
- Nguyên lý: Một lượng nhỏ mẫu được hóa hơi và nguyên tử hóa ở nhiệt độ cao
trong ống graphit. Các nguyên tử chì (Pb) tự do sinh ra trong ống graphit hấp thụ tia
sáng đơn sắc từ đèn catod (cathode) rỗng tạo thành phổ hấp thụ nguyên tử và được
xác định bởi bộ phận phát hiện (detector) nhân quang điện.
II. CHUẨN BỊ
1. Ngƣời thực hiện: nhân viên thực hiện xét nghiệm có trình độ phù hợp
2. Phƣơng tiện, hóa chất
2.1. Máy móc
- Các loại máy quang phổ hấp thụ nguyên tử sử dụng lò điện.
- Máy ly tâm
2.2. Hoá chất
- Dung dịch chuẩn Pb 1g/L – Merck
- QC 2 mức: cho xét nghiệm chì niệu.
- Axit nitric đặc 65% Suprapure - Merck
- Triton X-100 - Sigma-Alldrich T9284
- Chất chống bọt Antifoam B - Sigma A6707
- Khí Argon có độ tinh khiết cao
- Nước khử ion
3. Ngƣời bệnh: người bệnh và người nhà cần được giải thích về mục đích của việc
lấy nước tiểu 24h, cách thức lấy nước tiểu 24h để làm xét nghiệm định lượng chì
niệu.
4. Phiếu xét nghiệm:
- Phiếu xét nghiệm theo đúng quy định của Bộ Y tế và bệnh viện
- Trên phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ thông tin của người bệnh: họ và tên, tuổi,
giới tính, số giường, khoa phòng, chẩn đoán, xét nghiệm cần làm.
- Trên phiếu xét nghiệm cần có: chữ ký và họ tên bác sĩ chỉ định xét nghiệm, họ tên
người lấy mẫu, thời gian chỉ định xét nghiệm và thời gian lấy mẫu bệnh phẩm.
III. CÁC BƢỚC TIẾN HÀNH
1. Lấy bệnh phẩm
- Nước tiểu 24h không cần chất bảo quản
- Lượng mẫu cần 60 µl mẫu nước tiểu cho mỗi phép đo ( ít hơn cũng có thể
định lượng bằng cách pha loãng mẫu)
- Lưu ý: dụng cụ chứa mẫu BP không được phép nhiễm Cu.
(Khuyến cáo: Các dụng cụ được rửa bằng acid có thể sử dụng chứa BP và
yêu cầu này phải được tuân thủ).
.2. Tiến hành kỹ thuật
- Chuẩn bị hóa chất
+ Axit HNO3 6,5%: Pha chuẩn
Cho khoảng 60 mL nước khử ion vào bình định mức 100 mL, thêm 10 mL
axit HNO3 đặc 65% vào, thêm nước khử ion định mức tới vạch 100mL, đậy
nắp và lắc kỹ.
+ Dung dịch pha loãng mẫu (0,1% Triton X-100; 0,1% NH4H2PO4 trong
nước deion)
+ Dung dịch rửa ( 0.01% HNO3 và 0.002% Triton X-100)
+ Chuẩn bị các dung dịch chuẩn làm việc
Xử lý mẫu
Chuẩn bị các ống Eppendorf 1,5 mL để xử lý mẫu
Bước
Dung dịch
Blank, chuẩn từ 1-
5
MẫuQC
Mẫu bệnh
phẩm
1
Pha loãng mẫu
450 µL
450 µL
450 µL
2
Blank hoặc chuẩn từ
1- 5
50 µL
3
QC 2 mức cho nước
tiểu
50 µL
50 µL
4
BP
5
Trộn kỹ bằng máy lắc va cho sang cup để chạy máy
Mẫu sau khi đã xử lý được đưa vào phân tích trên máy theo quy trình vận hành máy.
IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Giá trị tham chiếu: Chì trong nước tiểu:
- Bình thường: < 80 µg/24 h
- Giá trị báo động: > 125 µg/24 h
V.NHỮNG YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG VÀ XỬ TRÍ
Thu thập không đủ lượng nước tiểu 24h. Cần thu thập lại