iii
MỤC LỤC
MỞ ĐẦU………………………………………………………………………...……..1
Chương 1. TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU ..................................................................... 3
1.1. Nhựa PET ............................................................................................................. 3
1.1.1. Khái niệm nhựa PET ..................................................................................... 3
1.1.2. Cấu tạo của nhựa PET................................................................................... 3
1.1.3. Tính chất của nhựa PET ................................................................................ 3
1.1.4. Ứng dụng của nhựa PET ............................................................................... 4
1.1.5. Tình hình sử dụng nhựa PET ........................................................................ 5
1.1.6. Tái chế nhựa PET phế thải ............................................................................ 6
1.2. PETase .................................................................................................................. 7
1.2.1. Thông tin chung ............................................................................................ 7
1.2.2. Cấu trúc không gian của enzyme PETase ..................................................... 9
1.2.3. Hoạt tính phân rã nhựa PET của enzyme PETase ...................................... 10
1.3. Hệ thống vector pET biểu hiện protein tái tổ hợp .............................................. 11
1.3.1. Thông tin chung .......................................................................................... 11
1.3.2. Cấu trúc hệ vector pET ................................................................................... 12
1.3.3. Hệ vector pET-22b(+) ................................................................................. 13
1.3.4. Hệ vector pET-28a(+) ................................................................................. 14
Chương 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ................................. 16
2.1. Đối tượng nghiên cứu ......................................................................................... 16
2.1.1. Vật liệu sinh học ......................................................................................... 16
2.1.2. Hóa chất ...................................................................................................... 16
2.1.3 Thiết bị ......................................................................................................... 16
2.2. Phương pháp nghiên cứu .................................................................................... 17
2.2.1. Phương pháp thu thập thông tin lựa chọn gen mã hóa protein PETase, tối ưu
mã biểu hiện .......................................................................................................... 17
2.2.2. Nhân gen petase bằng kỹ thuật PCR .......................................................... 17
2.2.3. Tách dòng gen mã hóa PETase ................................................................... 18
2.2.4. Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào E. coli bằng phương pháp sốc nhiệt ........ 18
2.2.5. Tách chiết DNA từ các tế bào E. coli ......................................................... 19
2.2.6. Điện di DNA trên gel agarose ..................................................................... 20
2.2.7. Tách chiết DNA ra khỏi gel agarose ........................................................... 20
