Trang chủ » Luận Văn - Báo Cáo » Nông - Lâm - Ngư

26 trang

170 lượt xem

Tổng số vi khuẩn hiếu khí tổng số nấm men nấm mốc trên rau xà lách

Thực phẩm là chất dinh dưỡng cho chúng ta nhưng cũng là môi trường để vi sinh vật sinh sống và phát triển. Đặc biệt là những thực phẩm tươi sống như rau xà lách có mật số vi sinh vật rất cao.

nphonhon

4. Nguyên Phu H n 4. Nguyên Phu H n

́ ơ ́ ơ

̃ ̣

5. Nguyên H u Thiên 5. Nguyên H u Thiên

ữ ữ

̃ ̣

6. Đô Đ c Thinh 6. Đô Đ c Thinh

̃ ứ ̃ ứ

̣ ́ ̀ ̣ ́ ̀

1 Đăt vân đê Đăt vân đê

2 Nôi dung ̣Nôi dung

́ ̣ ̀ ́ ̣ ́ ̣ ̀ ́ ̣

3 Kêt luân va kiên nghi Kêt luân va kiên nghi

Th c ph m là ch t dinh d ng cho chúng ta nh ng cũng là môi ự ẩ ấ ưỡ ư

tr t là nh ng ườ ng đ vi sinh v t sinh s ng và phát tri n. Đ c bi ố ể ể ặ ậ ệ ữ

th c ph m t i s ng nh rau xà lách có m t s vi sinh v t r t ự ẩ ươ ố ậ ố ậ ấ ư

ng pháp ki m tra m c đ v sinh c a th c ph m đã cao.Nhi u ph ề ươ ứ ộ ệ ủ ự ể ẩ

đ c đ ra và m t trong nh ng ph ng pháp hàng đ u chính là ượ ữ ề ộ ươ ầ

xác đ nh t ng s vi khu n hi u khí và t ng s n m men n m ố ấ ế ẩ ấ ổ ố ổ ị

m c trên xà lách. ố

Nh ng vi  Vi khu n hi u khí: ẩ ế ữ

khu n tăng tr ng và hình ẩ ưở

thành khu n l c trong đi u ẩ ạ ề

2. ki n có s hi n hi n c a O

ệ ủ ự ệ ệ

 T ng s vi khu n hi u khí ế ẩ ổ ố

E. coli trong m u: ẫ ch th m c đ ộ ị ứ ỉ

v sinh c a th c ph m. ệ ủ ự ẩ

Vi khu n hi u khí ế ẩ

ấ ồ Cân m uẫ đ ng nh t ồ m uẫ Pha loãng m u ẫ các dãy n ng ở đ th p phân ộ ậ

ệ

Ủ ở ề nhi ệ ộ Phân ph i ố m u ra đĩa ẫ ng môi tr đi u ki n t đ và th i ờ gian quy đ nhị ườ nuôi c yấ

Ch tiêu t ng s vi sinh v t hi u khí đ

c dùng đ đánh giá ch t ế ậ ổ ố ỉ ượ ể ấ

ng c a m u v vi sinh v t, nguy c h h ng, th i h n b o l ượ ơ ư ỏ ờ ạ ủ ề ậ ẫ ả

qu n c a s n ph m, m c đ v sinh trong quá trình ch bi n, ủ ả ế ế ộ ệ ứ ả ẩ

b o qu n s n ph m. ả ả ả ẩ

Trên c s xem m t khu n l c là sinh kh i phát tri n t ẩ ạ

m t t ơ ở ể ừ ộ ế ộ ố

bào hi n di n trong m u và đ c bi u bi n d ệ ệ ẫ ượ ễ ướ ạ i d ng s đ n v ị ố ơ ể

hình thành khu n l c (colony forming unit, CFU) trong m t đ n v ị ẩ ạ ộ ơ

kh i l ng th c ph m ố ượ ự ẩ

•Thi

2.1.1. Chu n b t t b , d ng c ẩ ị hi ế ị ụ ụ:

t b đ kh trùng khô (t ế ị ể ử ủ ấ s y) ho c đ kh trùng ặ ể ử ướ t (n i ồ

•Đĩa petri thu tinh đ

h p)ấ

•Pipet chia đ x h t có dung tích 1 ml và 10 ml, đ

ng kính 90 -100 mm ỷ ườ

c chia v ch ộ ả ế ượ ạ

0,1 và 0,5 ml t ng ng, v.v... ươ ứ

2.1.2. Chu n b môi tr ẩ ị ườ ng và hoá ch t ấ

: ng th ch tryptone glucose 2.1.2.1. S d ng môi tr ử ụ ườ ạ

- Tryptone : 5g

t n m men : 2,5g - Ch t chi ấ ế ấ

- Glucose : 1g

- Th ch : 15-20g ạ

- N c c t (đ nh m c) : 1L ị ướ ấ ứ

- pH cu i : 7,0 ± 0,2 ố

0C trong th i gian 15 phút

- Ti t trùng môi tr ng 120 ệ ườ ở ờ

Đun nh l a, qu y đ u đ hòa tan các ch t đ n khi sôi. Đ ngu i ộ

Cách pha chế

ấ ế ỏ ử ề ể ể ấ

oC, đi u ch nh pH sao cho sau khi ti

môi tr ng đ n 55 ± 5 t khu n ườ ế ề ỉ ệ ẩ

pH = 7,0 ± 0,2. Rót vào các bình th y tinh l ng môi tr ng không ủ ượ ườ

oC –

quá 1/2 dung tích bình. Ti t khu n trong n i h p nhi t đ 120 ệ ồ ấ ở ẩ ệ ộ

N u môi tr

15 phút.

n i cách ế ườ ng s d ng ngay, đ ngu i đ n 45 ± 1 ể ộ ế ử ụ ở ồ

th y, n u ch a s d ng thì c n b o qu n n i khô ráo, trong bóng ư ử ụ ả ở ơ ủ ế ầ ả

oC không quá 30 ngày. Tr

i v i nhi c khi nuôi c y t ố ớ t đ t ệ ộ ừ 0 đ n 5 ế ướ ấ

đun cách th y cho môi tr ủ ườ ng nóng ch y và đ ngu i đ n 45 ± 1 ể ộ ế ả

2.1.2.2. Th ch màng ạ

Th ch:ạ

N c c t:

5 – 10g

1000 ml ướ ấ

Cách pha chế:

Đun nh l a, qu y đ u đ hòa tan th ch đ n khi sôi. Đ ngu i ỏ ử ề ể ế ể ấ ạ ộ

oC, đi u ch nh pH sao cho sau khi ti

môi tr ng đ n 55 ± 5 t ườ ế ề ỉ ệ

khu n pH = 7,0 ± 0,2. Rót vào các ng nghi m m i ng 4 ml ỗ ố ệ ẩ ố

ho c bình th y tinh không quá 100 ml môi tr ng. Ti t khu n ủ ặ ườ ệ ẩ

oC – 15 phút.

trong n i h p nhi t đ 120 ồ ấ ở ệ ộ

2.1.3. Chu n b nguyên li u m u: ẩ ị ệ ẫ

Rau xà lách đ c r a s ch ượ ử ạ

2.1.4.1 Đ ng nh t và pha loãng m u ấ ẫ ồ

B c 1ướ : c t nh m u xà lách sau đó xay nhuy n b ng máy trong ễ ằ ỏ ẫ ắ

đi u ki n vô trùng cho t i khi đ c th đ ng nh t. ệ ề ớ ượ ể ồ ấ

B th đ ng nh t trên c 2ướ : cân chính xác 10g m u xà lách ẫ ở ể ồ ấ

(ho c hút 10 ml) cho vào bình ch a 90ml đ m pepton l c đ u 2-3 ứ ắ ề ệ ặ

phút thu đ ượ c dung d ch m u th 10 ử -1 ẫ ị

B c 3ướ : hút chính xác 1ml dung d ch m u th 10 ử -1 sang ng ố ẫ ị

nghi m ch a s n 9ml đ m pepton. Thu đ ứ ẵ ệ ệ ượ c dung d ch m u th ử ẫ ị

10-2.

B ng t đ có dung d ch pha loãng ti p theo. c 4ướ : làm t ươ ự ể ế ị

Cách pha loãng m uẫ

2.1.4.2. Đ đĩaổ

Nuôi c y m u trên v i 2 đ m đ , m i đ m đ dùng 2 đĩa petri và 1 ộ

ỗ ậ ấ ẫ ậ ớ ộ

-3 và 10-4.

 Dùng pipet vô trùng ho c pipetman v i đ u tip vô trùng chuy n 1ml

pipet vô khu n riêng. đây ta ch n 2 đ m đ 10 ẩ Ở ậ ọ ộ

ớ ầ ể ặ

 Rót vào t ng đĩa 12 – 15 ml môi tr

d ch m u pha loãng đã ch n vào gi a đĩa petri vô trùng. ị ữ ẫ ọ

ng th ch, tr n đ o đ u dung ừ ườ ề ả ạ ộ

ng b ng cách l c sang ph i và sang trái m i d ch m u và môi tr ị ẫ ườ ả ằ ắ ỗ

chi u 3 l n. ề ầ

2.1.4.2. Đ đĩaổ

Đ các đĩa th ch đông t

nhiên trên m t ngang.

ể

ạ

ự

ặ

khi b t đ u pha loãng m u đ n khi rót môi

Th i gian t ờ

ừ

ắ ầ

ế

ẫ

tr

ng không đ

c quá 30 phút.

ườ

ượ

N u d đoán trong s n ph m có ch a vi sinh v t m c ẩ

ự

ứ

ế

ậ

ả

ọ

lan trên m t th ch thì sau khi môi tr

ặ

ạ

ườ

ng đã đông đ ổ

ti p 4 ml th ch màng lên trên m t.

ế

ạ

ặ

2.1.4.2. Đ đĩaổ

Thao tác đ đĩaổ

2.1.4.3. mỦ ấ

Khi th ch đã đông, l

t s p các đĩa petri và đ vào t

ạ

ậ ấ

ể

ủ

nhi

t đ 30 ± 1

oC t

m ấ ở

ệ ộ

ừ

48 đ n 72 gi ế

. ờ

Sau 48 gi

tính k t qu s b b ng cách đ m nh ng

ờ

ả ơ ộ ằ

ữ

ế

khu n l c đã m c trên các đĩa nuôi c y, sau 72 gi

tính

ẩ ạ

ấ

ọ

ờ

k t qu chính th c. ế

ứ

ả

2.1.4.4. Cách tính k t quế

ả

A (CFU/g hay CFU/ml) =

n1Vf1+ ... + niVfi

bào (đ n v hình thành khu n l c) vi khu n trong ẩ ơ ị ẩ ạ

c trên các đĩa đã ch n. ẩ ạ ế ượ ọ

i đ pha loãng th i. ấ ạ ộ ứ

ẫ ấ ỗ ị

ươ ứ Trong đó: A: là s t ố ế 1g hay 1ml m u.ẫ N: T ng s khu n l c đ m đ ổ ố n1: s l ng đĩa c y t ố ượ V: th tích d ch m u (ml) c y vào trong m i đĩa. ể ng ng. fi: đ pha loãng t ộ

2.1.4.4. Cách tính k t quế

ả

ng h p phân tích 1g m u xà lách Ví dụ: Trong m t tr ộ ườ ẫ ợ

nh n đ c k t qu nh sau: ậ ượ ế ả ư

N ng đ pha loãng 10-3 10-4 ồ ộ

Đĩa 1 235 26 K t qu : ả ế

Đĩa 2 246 21

A= 2,4 x 105 (CFU/g)

ng đ ả ổ ế ượ c bi u ể

Các k t qu t ng s vi khu n hi u khí th ố ế di n d ườ ẩ i d ng s mũ c a c s th p phân. ủ ơ ố ậ ễ ướ ạ ố

ng pháp xác đ nh t ng vi ổ ị ế ươ

ng th ch n m men và n m s i (Yeast ấ ợ ẩ ử ụ nh ph ự ư ươ ẩ ự ấ ạ

ầ ư

t n m men : 3g t malt : 3g ế ấ ế

0C trong th i gian 15 phút

Ti n hành t ng t khu n hi u khí trong th c ph m. ế - S d ng môi tr ườ and mould agar). Thành ph n nh sau: Ch t chi ấ Ch t chi ấ Peptone : 5g Dextrose : 10g Th ch : 20g ạ N c c t : 1L ướ ấ pH cu i : 6,2 ± 0,2 ố t trùng môi tr Ti 121 ng ườ ở ệ ờ

3.1 K t lu n ế ậ

Ph ng pháp phân tích t ng s vi sinh v t hi u khí và t ng s n m ươ ố ấ ế ậ ổ ố ổ

men, n m m c trên rau xà lách là m t trong nh ng ph ng pháp ữ ấ ố ộ ươ

hàng đ u trong vi c ki m tra đ an toàn c a xà lách. ủ ệ ể ầ ộ

3.2 Ki n ngh ị ế

Ng ườ i dân nên l a ch n s d ng nh ng lo i rau xà lách có xu t x ấ ứ ữ ọ ử ụ ự ạ

ng an toàn v sinh và ngu n g c rõ ràng, đ ố ồ ượ c ki m đ nh ch t l ị ấ ượ ể ệ

th c ph m nh trong siêu th , các đ a đi m bán rau an toàn… ư ự ể ẩ ị ị

Tr n Linh Th ng pháp phân tích vi sinh v t ầ ướ Ph c, ươ ậ , Nhà

xu t b n giáo d c Vi t Nam. ấ ả ụ ệ

Tiêu chu n Vi t Nam các s 6189 (1,2), 6191 (1,2), 6404. ẩ ệ ố

Tài li u tham kh o internet: ệ ả