Tạo dòng tế bào k562 đồng biểu hiện các thụ thể kháng nguyên nhân tạo CD137L, CD86, CD64, CD19 và IL15

Bài báo này trình bày nghiên cứu về việc tạo dòng tế bào K562 biểu hiện đồng thời các kháng nguyên nhân tạo CD137L, CD86, CD64, CD19 và IL15. Mục tiêu là tạo ra nguyên liệu khởi đầu cho liệu pháp tế bào CAR-T hướng đích CD19, một phương pháp điều trị đầy hứa hẹn cho bệnh bạch cầu nguyên bào lympho cấp tính (ALL). Nghiên cứu này có ý nghĩa quan trọng trong việc phát triển các liệu pháp miễn dịch hiệu quả hơn cho bệnh ung thư.

Nghiên cứu này hướng đến việc phát triển nguyên liệu cho liệu pháp tế bào CAR-T, một phương pháp điều trị ung thư đầy triển vọng. Dòng tế bào K562 được tạo ra có thể được sử dụng để kích thích và mở rộng tế bào T, từ đó tăng cường khả năng tiêu diệt tế bào ung thư của hệ miễn dịch.

Nghiên cứu này đã thành công trong việc tạo ra dòng tế bào K562 đồng biểu hiện các kháng nguyên CD137L, CD86, CD64, CD19 và IL15 bám màng. Quá trình thực hiện bao gồm các bước chính sau:

1. **Tổng hợp gen nhân tạo:** Sử dụng phương pháp "gapless PCR" để tổng hợp hai đoạn gen chứa các cấu trúc di truyền cần thiết.
2. **Tách dòng gen:** Các đoạn gen được tách dòng và nối vào vector pJET1.2.
3. **Xây dựng plasmid:** Plasmid pSBbi-Pur-CD19-CD137-CD86-CD64-mIL15 được xây dựng từ tế bào E. coli DH10b.
4. **Chuyển nạp gen vào tế bào K562:** Sử dụng hệ thống Transposon-transposase và tối ưu hóa các điều kiện chuyển nạp bằng hệ thống Amaxa 4D-Nucleofector.
5. **Sàng lọc và chọn dòng:** Tế bào K562 biểu hiện các kháng nguyên mục tiêu được sàng lọc bằng kháng sinh puromycin.