GVHD:Tr n Th Dungầ ị
SVTH: Nguy n Th Hoàng Y nễ ị ế 61103239
Nguy n Văn Cễ ư 61103020
Hu nh Th Mai Thyỳ ị 61103315
MÔN KỸ THUẬT DI TRUYỀN
PHƯƠNG PHÁP
SOUTHERN BLOT
M c l c:ụ ụ
§I. Gi i thi u v ph ng pháp Southern blot.ớ ệ ề ươ
§II. Nguyên lý và nguyên t c.ắ
•1.Nguyên lý.
•2.Nguyên t c.ắ
§III. T o m u dò.ạ ẫ
•1.T o m u dò nh Plasmidạ ẫ ờ
•2.T o Probe nh ng d ng PCRạ ờ ứ ụ
•3.Đánh d u Probeấ
§IV. Quy trình c a ph ng pháp Southern Blot.ủ ươ
•1.Giai đo n 1.ạ
•2.Giai đo n 2.ạ
I. Gi i thi u v ph ng pháp ớ ệ ề ươ
Southern blot
Phương pháp lai Southern blot là phương pháp lai giữa
DNA của tế bào với mẫu dò DNA. Phương pháp này cho
phép nghiên cứu DNA của bộ gen, kiểm tra kết quả
chuyển gen hoặc kiểm tra sự có mặt của một gen nào đó
trong bộ gen của tế bào.
Southern blot - một kĩ thuật chủ yếu trong
việc phân tích cấu trúc của gene, được phát
triển vào giữa thập niên 1970 do Edwin
Southern ở MRC một bộ phân của genome động
vật hữu nhũ ở Edinburgh (Southern, 1975).
Phương pháp Southern Blot được triển khai nhờ
một số kỹ thuật nền tảng của công nghệ sinh học
phân tử như:
ØTách chiết gen
ØPCR
ØThẩm tích các phân tử acid nucleotide lên màng lai
ØLai phân tử (lai với mẫu dò đặc hiệu)
Ø…
Đến nay, kỹ thuật lai Southern đã được cải tiến đi
rất nhiều, chủ yếu bao gồm:
ØTăng độ nhạy
ØGiảm một số bước trong quá trình lai
II. Nguyên lý và Nguyên t cắ