Bài giảng Hóa dược: Phương pháp phân tích công cụ

Chia sẻ: _ _ | Ngày: | Loại File: PPT | Số trang:71

Thêm vào BST

Báo xấu

14
lượt xem 6
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bài giảng "Hóa dược: Phương pháp phân tích công cụ" cung cấp cho người học những nội dung kiến thức như: cơ sở lý thuyết và phát biểu được định luật Lambert-Beer; nguyên tắc của phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS và phương pháp sắc ký. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết bài giảng.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Bài giảng Hóa dược: Phương pháp phân tích công cụ

PHƯƠNG PHÁP PHÂN PHÂN TÍCH PHƯƠNG PHÁP TÍCH CÔNG CỤ DỤNG CỤ
Mục tiêu học tập *Kiến thức 1.Trình bày được cơ sở lý thuyết và phát biểu được định luật Lambert-Beer. 2.Trình bày được nguyên tắc của phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS và phương pháp sắc ký. * Kỹ năng 3. Định lượng được hàm lượng một số mẫu theo phương pháp đường chuẩn, thêm chuẩn trong phương pháp đo phổ UV – VIS 4. Phân tích được một số ứng dụng của phương pháp sắc ký trong y, dược. * Năng lực tự chủ và trách nhiệm 5. Thể hiện được tính tích cực trong học tập. Sử dụng tốt công nghệ thông tin để tự nghiên cứu, giải quyết bài tập. Phối hợp tốt với các thành viên trong nhóm.
TỔNG KẾT KẾT QUẢ TỰ HỌC CÓ HƯỚNG DẪN - KQ kiểm tra trắc nghiệm trên link: Lớp/ Sĩ Kiểm tra kiến thức Kiểm tra thực kĩ năng số Đạt (n/ %) Chưa đạt (n/ %) Đạt (n/ %) Chưa đạt (n/ %)
CÂU HỎI THẮC MẮC CỦA SV VỀ NỘI DUNG BÀI HỌC
NỘI DUNG 1. Phương pháp phổ hấp thụ UV-VIS 2. Phương pháp sắc kí + Sắc ký lớp mỏng + Sắc ký cột + Sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC
C¸c phƯ ¬ng ph¸p ph©n tÝc h dô ng c ô • 1. Phư ¬ng ph¸p quang phæ hÊp thô UV.VIS Ip Io Il Ih Io = Ih + Ip + Il Io = Ih + Il
Vùng phổ hấp thụ tử ngoại –khả kiến là gì ? Vùng UV là vùng tử ngoại +Vùng tử ngoại xa, bước sóng < 200nm + Vùng tử ngoại gần, bước sóng từ 200- 400nm Vùng VIS là vùng ánh sáng nhìn thấy được Bước sóng 400-800nm
Phổ hấp thụ phân tử UV-VIS là phổ đám (phổ băng)
ĐÞnh luËt Lam b e rt Be e r Lo g arit c ña tØ s è g iữ a c ư ê ng ®é ¸nh s ¸ng tíi I0 vµ c ư ê ng ®é ¸nh s ¸ng lã Il tØ lÖ thuËn víi nång ®é dung dÞc h C vµ bÒ dµy líp dung dÞc h L mµ ¸nh s ¸ng truyÒn qua. 1 I0 A= D= lg = lg = K.C.L T D Il E1%1c m = ............ L.C E1%1c m ®ư îc g äi lµ hÖ s è hÊp thô riªng , ®Æc trư ng c ho tõ ng c hÊt.
• ĐiÒu kiÖn ¸p d ô ng ®Þnh luËt Lam b e rt Be e r: ¸nh s ¸ng ph¶i ®¬n s ¾c Kho ¶ng nång ®é ph¶i thÝc h hîp (®Þnh luËt c hØ ®ó ng tro ng mé t g iíi h¹n nhÊt ®Þnh c ña nång ®é ) Dung dÞc h ph¶i tro ng s uè t ChÊt thö ph¶i bÒn
LÀM THẾ NÀO ĐỂ ĐO ĐƯỢC QUANG PHỔ UV-VIS?
Cấu tạo chung của máy quang phổ Bộ phận ghi và Lăng kính Bộ phận chọn ánh xử lý tín hiệu sáng đơn sắc quang thành tín hiệu điện Màn hình Nguồn sáng Bộ phận tán sắc Bộ phận điện tử chứa mẫu (Cuvet)
Máy quang phổ một chùm tia •Trong hệ thống 1 chùm tia, ánh sáng đi thẳng đến 1 cuvet đo mẫu và 1 đầu dò •Hệ thống 1 chùm tia sử dụng 1 cốc đo, ban đầu sẽ đo cốc mẫu trắng, sau đó đổ mẫu trắng đi và đo với mẫu thât.
Máy đo quang phổ hai chùm tia •Ánh sáng được tách ra thành 2 tia bằng 1 bán gương: một nửa đi qua mẫu đo (sample) và 1 nửa đi qua đường so sánh (referent) thường chứa mẫu trắng. •Hệ thống 2 chùm tia sử dụng 2 cốc đo, ban đầu cả 2 cốc đều chứa mẫu trắng và đo tín hiệu mẫu trắng. Sau đó cốc ở vị trí mẫu sẽ được đổ đi và thay vào đó bằng mẫu cần đo. Cốc tại vị trí so sánh vẫn để yên trong suốt quá trình đo.
Nguyên tắc của phép đo phổ UV – VIS • Hòa tan chất phân tích vào trong một dung môi phù hợp • Chiếu vào dung dịch mẫu chứa hợp chất cần phân tích một chùm tia sáng có năng lượng phù hợp • Thu, phân ly phổ đó và chọn vùng sóng hấp thụ cực đại của chất phân tích và đo cường độ hấp thụ quang A
Những hợp chất nào có thể áp dụng phương pháp đo quang phổ UV-VIS? - Các chất có màu là do phân tử có chứa nhiều nối đôi, nối ba C=C; C=O; C=N; N=N; -NO2… - < 150nm liên kết xích ma của hợp chất no - > 150nm: liên kết bội - Vòng benzen : 200nm – 260nm - > 280 hệ liên hợp - Bước sóng càng lớn: hệ hiên hợp càng dài
Những hợp chất nào có thể áp dụng phương pháp đo quang phổ UV-VIS? 1. Hợp chất chứa kim loại chuyển tiếp (VIS) 2. Hợp chất chứa nối đôi trong phân tử 3. Hợp chất chứa các nguyên tố như N, O, S còn cặp e chưa tham gia liên kết OH 180nm; Amin 220nm; halogen 190nm CO 270-295nm  Các hợp chất phải bền dưới tác dụng của tia UV-VIS
ỨNG DỤNG ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG DƯỢC CHẤT Giảm cholesterol NHCOCH3 OH Định tính, định lượng Paracetamol HO O Hoà tan 50mg chế phẩm trong methanol và pha loãng với methanol thành 100ml. H5C2 O O H3C C C O Lấy 1ml dung dịch này, thêm 0,5ml acid H H CH3 hydrocloric 0,1M và pha loãng với methanol vừa đủ 100ml. Dung dịch đã pha H3C tránh ánh sáng và đo ngay độ hấp thụ tại Phương pháp quang phổ UV-VIS: có 3 bước sóng 249nm. Độ hấp thụ riêng cực đại hấp thụ ở các bước sóng 231, 238 và A(1%, 1cm) trong khoảng từ 860-980. 247 nm (dung dịch 0,5% trong acetonitril).
ỨNG DỤNG ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG DƯỢC CHẤT • Vitamin B12 có 3 cực đại hấp thụ ở các bước sóng 278 ± 1nm, 361 ± 1nm và 550 ± 1nm. Đồng thời tỷ số D361/D278 nằm trong khoảng 1,7 -1,9 và D361/D550 nằm trong khoảng 3,15 - 3,40. • Vitamin B2 có 4 cực đại hấp thụ ở các bước sóng 223, 267, 357 và 444 nm.