CH TH PHÂN TỈ Ị Ử
K THU T AFLP Ỹ Ậ
(Amplified fragment length polymorphisms)
Giảng viên:
TS. Nguyễn Thị Thu Liên
Học viên:
Nguyễn Hữu Nhân
Nguyễn Bảo Triệu
Hu - 12/2011ế
ĐẠI HỌC KHOA HỌC HUẾ
KHOA SINH HỌC
N I DUNG TRÌNH BÀYỘ
1. Giới thiệu.
2. Nguyên lý của kỹ thuật AFLP.
3. Hóa chất, dụng cụ, trang thiết bị.
4. Ứng dụng.
5. Kỹ thuật cDNA-AFLP.
6. Ưu, nhược điểm
7. Kết luận.
8. Tài liệu tham khảo.
Gi i thi uớ ệ
Kỹ thuật AFLP được phát triển bởi công ty KeyGene trong đầu
những năm 1990 và đã trở thành một trong những công nghệ in dấu
vân tay di truyền (fingerprinting) phổ biến nhất trên toàn thế giới.
Kỹ thuật AFLP dựa trên nguyên lý kết hợp giữa kỹ thuật RFLP
(Restriction Fragment Length Polymorphism) và PCR để khuếch đại
những đoạn DNA có chiều dài giới hạn sau khi được cắt hạn chế bởi
enzyme cắt hạn chế.
Phương pháp có độ nhạy cao trong việc tìm dấu vết của DNA
của bất kỳ nguồn gốc nào hay sự phức tạp nào
Có thể thực hiện với DNA của toàn hệ gen hay với cDNA (bản
sao nguyên bản).
Kỹ thuật AFLP được cấp bằng sáng chế vào năm 1991 và tại
thời điểm này được ban hành ở nhiều quốc gia như Canada, Châu Âu,
Nhật Bản, Úc và Mỹ. Hiện nay đã được ứng dụng rộng rãi trên thế giới.
Nguyên lý c a k thu t AFLPủ ỹ ậ
- DNA được phân giải bởi hai enzyme cắt hạn chế khác nhau.
- Phần nối (adapter) oligonucleotide được nối với những đầu tận cùng
của các phân đoạn DNA.
- Tập con đặc trưng của các sản phẩm phân giải DNA được khuyếch đại,
sử dụng kết hợp các primer chọn lọc.
- Phát hiện sự đa hình có thể được thực hiện với các đồng vị phóng xạ,
nhuộm các màu huỳnh quang hay nhuộm bạc.
Hình 1.Tổng quan về kỹ thuật AFLP
Nguyên lý c a k thu t AFLPủ ỹ ậ