293
105. ĐỊNH LƢỢNG Lambda (Phƣơng pháp đo độ đục)
I. NGUYÊN LÝ
Đa kháng thể hn hp các kháng th chuyên biệt thu được t vic to min
dch cho vt nuôi (dê) vi các protein của người. Hiu giá, tính ái lc tính tinh
khiết ca các kháng th này phù hợp trong phương pháp đo đ đục. Trong phương
pháp này, các protein trong huyết thanh mu bnh phm (Lambda) phn ng vi cht
kháng th đặc hiu (kháng protein) to tủa làm đc dung dch th đo mức độ đục
bằng máy đo quang để tính ra nng độ Lambda.
II. CHUN B
1. Ngƣời thc hin
Nhân viên thc hin xét nghim có trình độ phù hp.
2. Phƣơng tiện, hóa cht
- B kít cung cp
+ Dung dch 1: cht hot hóa kháng th 2 x 10 ml
+ Dung dch 2: kháng huyết thanh 2 x 1 ml
+ Dung dch 3: mu và cht chun 2 x 10 ml
- Điu kin bo qun : 2-8oC cho đến khi hết hn trên nhãn.
- Cnh báo: tt c các hóa chất đu chứa sodium azide <0.1%. Lưu ý cn thn,
không được nut, tránh tiếp xúc vi da và b mt h.
3. Ngƣời bnh
Cần được tư vấn v mục đích làm xét nghiệm
3. Phiếu xét nghiệm
Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ thông tin về tên, tuổi, giới tính, khoa phòng,
chẩn đoán của người bệnh và ghi rõ chỉ định xét nghiệm
III. CÁC BƢƠC TIẾN HÀNH
1. Chuẩn bị hóa chất và mẫu bệnh phẩm
- Mẫu huyết thanh hoặc huyết tương
- Mẫu ổn định trong vòng 4 ngày (2-80C), 4 tuần ở -200C
- Để hóa chất và mẫu bệnh phẩm ở nhiệt độ phòng trước khi sử dụng
- Dung dịch 3: pha loãng 20 lần với mẫu và với chất chuẩn
- Vẽ đường chuẩn cho mẫu lần xét nghiệm
2. Chuẩn bị đƣờng chuẩn
- Để vẽ đường chuẩn, pha loãng chất chuẩn Lambda với dung dịch 3 để đạt được 5
mức nồng độ bao gồm giữa cho đến quá giới hạn đường tuyến tính
294
- Đường tuyến tính : 150-2000 mg/dl
3. Pha mẫu
Phân bit các ống đo từ 1 đến 5 cho 5 ng chun
Pha mẫu đo như sau:
Mu
Chun
Dung dch 1
500 ul
500 ul
Mẫu (đã pha loãng 20 lần)
25 ul
--
Cht chuẩn (đã pha loãng 20 lần)
--
25 ul
Hòa trộn và đo độ hp thu A1
Dung dch 2
50 ul
50 ul
Hòa trộn và đợi 10 phút, đo độ hp thu A2
IV. NHẬN ĐỊNH KT QU
- V h thng Cartesian trên giấy đồ th: Nồng độ theo chiu ngang ( trc X) vi
đơn vị là mg/dl và độ hp thu theo chiu dc (trc Y)
- Đánh dấu Hiệu các độ hp thu (A2- A1) ca 5 mc chuẩn trong so sánh tương
quan nồng độ
- V đường đi qua 5 điểm
- Đánh dấu giá tr hp thu (A2- A1) ca mẫu để suy ra nồng độ
- Chỉ số tham khảo: nồng độ chuỗi Lambda 330-720 mg/dl
V. NHNG SAI SÓT VÀ X TRÍ
- Sử dụng MSDS để tham khảo các hóa chất nguy hiểm
- Giá trị đo được là giá trị tổng của toàn bộ chuỗi protein; chia 3 để đạt được giá trị
nồng độ của chuỗi nhẹ.