355
126. ĐỊNH LƢỢNG PHENOBARBITAL
I. NGUYÊN LÝ
Phenobarbital là thuốc chống co giật thuộc nhóm barbiturat.
Phenobarbital được định lượng bằng phương pháp miễn dịch sandwich sử dụng
công nghệ hóa phát quang.
Định lượng Phenobarbital là xét nghiệm một bước để định lượng phenobarbital trong
huyết thanh hoặc huyết tươngngười
Mẫu, anti-phenobarbital phủ trên vi hạt thuận từ, và chất kết hợp phenobarbital có
đánh dấu acridinium (chất có khả năng phát quang) được kết hợp để tạo hỗn hợp phản
ứng. nti-phenobarbital phủ trên vi hạt thuận từ gắn với phenobarbital có trong mẫu
và chất kết hợp phenobarbital có đánh dấu acridinium.
Kết quả của phản ứng hóa phát quang được tính bằng đơn vị ánh sáng tương đương
(RLU). Sự tương quan gián tiếp giữa lượng phenobarbital trong mẫu và RLUs sẽ
được bộ phận quang học trong máy phát hiện.
II. CHUẨN BỊ
1. Ngƣời thực hiện
01 cán bộ đại học, 01 kỹ thuật viên chuyên ngành hóa sinh.
2. Phƣơng tiện, hóa chất
- Phương tiện: Máy xét nghiệm rchitect.
- Hóa chất: Hóa chất xét nghiệm Phenobarbital, chất chuẩn Phenobarbital, chất kiểm
tra chất lượng Phenobarbital.
3. Ngƣời bệnh
Người bệnh cần được giải thích về mục đích của việc lấy máu để làm xét nghiệm.
4. Phiếu xét nghiệm
Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ thông tin về tên, tuổi, giới tính, khoa phòng, chẩn
đoán của người bệnh và ghi rõ chỉ định xét nghiệm
III. CÁC BƢỚC TIẾN HÀNH
1. Lấy bệnh phẩm
- Lấy 3 ml máu tĩnh mạch vào ống không có chất chống đông hay ống có chất chống
đông là Sodium EDT (dùng cho ống nhựa). Nếu lấy máu bằng ống thủy tinh, có thể
dùng các chất cống đông Li, Na-Heparin và Na,K-EDTA và Potassium Oxalat. Máu
không vỡ hồng cầu.
356
- Sau khi lấy máu, đem ly tâm tách lấy huyết thanh hoặc huyết tương.
- Bệnh phẩm ổn định 2 ngày ở 15 - 30°C, 8 ngày ở 2-8°C, bảo quản 6 tháng ở -20°C.
- Bệnh phẩm chỉ rã đông 1 lần và phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phòng trước khi
phân tích. Để tránh hiện tượng bay hơi, bệnh phẩm, chất chuẩn, chất kiểm tra chất
lượng nên phân tích trong vòng 2 giờ.
2. Tiến hành kỹ thuật
- Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: Máy đã được cài
đặt chương trình xét nghiệm Phenobarbital. Máy đã được chuẩn với xét nghiệm
Phenobarbital. Kết quả kiểm tra chất lượng với xét nghiệm Phenobarbital đạt yêu cầu
không nằm ngoài dải cho phép và không vi phạm luật kiểm tra chất lượng.
- Người thực hiện phân tích mẫu nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉ định xét
nghiệm vào máy phân tích hoặc hệ thống mạng (nếu có).
- Nạp mẫu bệnh phẩm vào máy phân tích
- Ra lệnh cho máy thực hiện phân tích mẫu bệnh phẩm
- Đợi máy phân tích mẫu theo protocol của máy
- Khi có kết quả cần xem xét đánh giá kết quả sau đó in báo cáo hoặc ghi kết quả vào
phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh.
IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
- Kết quả được xác định bằng các phương pháp khác nhau sẽ có nồng độ khác nhau.
Do vậy không nên dùng các phương pháp khác nhau khi xét nghiệm cho 1 người
bệnh.
- Liều điều trị thường có nồng độ ở mức 15 – 40 µg/mL.
- Nồng độ Phenobarbital cao, gây ngộ độc thần kinh trung ương. Người bệnh mắc
bệnh thận dễ bị ngộ độc Phenobarbital hơn.
V. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
- Những yếu tố gây nhiễu cho kết quả xét nghiệm. Kết quả xét nghiệm không bị ảnh
hưởng khi:
+ Huyết thanh vàng: Bilirubin < 15 mg/dL .
+ Tán huyết: Hemoglobin <500 mg/dl.
+ Huyết thanh đục: Triglyceride < 2500 mg/dl.
- Khắc phục: Có thể hòa loãng bệnh phẩm và thực hiện lại xét nghiệm sau đó nhân kết
quả với độ hòa loãng (Trường hợp có hòa loãng tự động trên máy thì kết quả không
cần nhân với độ hòa loãng do máy đã tự tính toán).