THI T K TRÌNH T M IẾ Ế Ự Ồ
TRONG PH N NG PCR Ả Ứ
B NG FASTPCR VÀ Ằ
DNA CLUB
M c tiêu c a bài h cụ ủ ọ
Thi t k đ c nh ng trình t primer cho nh ng ế ế ượ ữ ự ữ
trình t DNA khuôn (vi sinh v t, virus và các đ ng ự ậ ộ
v t khác)ậ
Phân tích đ c nh ng thông s c a primer qua ượ ữ ố ủ
các ph n m mầ ề
Tìm kim trình t sinh h cế ự ọ 2
Quá trình sao chép DNA trong t bàoế
Gi i thiu môn h cớ ệ ọ 3
Qui trình ph n ng PCRả ứ
Gi i thiu môn h cớ ệ ọ 4
Các vi sinh
v t,ậ
đ ng v tộ ậ
Thu nh n m uậ ẫ
K thu t PCR l n đ u tiên đ c Mullis và ỹ ậ ầ ầ ượ
c ng s mô t vào năm 1986 và cũng do ộ ự ả
chính phát minh này Mullis đã đ c trao ượ
gi i nobel vào năm 1993 ả
Thành ph n trong ph n ng PCRầ ả ứ
Ph n ng PCR đ c th c hi n khi có:ả ứ ượ ự ệ
DNA m uẫ
Primers (m i xuôi và ng c dài kho ng 18-30 bp ồ ượ ả
không b t c p b sung )ắ ặ ổ
Taq polymerase ( emzyme ch u nhi t tách t vi khu n ị ệ ừ ẩ
su i m c nóng Thermus aquaticus )ố ướ
4 lo i deoxiribomucleotid triph tphat (dATP , dCTP, ạ ọ
dTTP , dGTP) ,
Dung d ch đ m và Mg2+ị ệ
Gi i thiu môn h cớ ệ ọ 5