564
211. ĐỊNH LƢỢNG NỒNG ĐỘ BILIRUBIN
TOÀN PHN VÀ TRỰC TIẾP
I. NGUYÊN LÝ
Bilirubin trong dịch chọc dò kết hợp với thuốc thử diazo (acid sulfanilic được
diazo hóa) tạo thành phức hợp azobilirubin màu hồng. Để định lượng bilirubin
toàn phần, dùng cafein để tách bilirubin gián tiếp ra khỏi albumin.
Thuốc thử diazo trên thể gây kết tủa protein làm ảnh hưởng đến mật độ
quang. Cho nên, ngày nay người ta có thể thay bằng 2,4 - diClooanilin được diazo hóa
hoặc 2,5-dichlorophenyl diazonium tetrafluoroborat (DPD).
II. CHUẨN BỊ
1. Ngƣời thực hiện
Bác sĩ và kỹ thuật viên được đào tạo chuyên ngành xét nghiệm hóa sinh.
2. Phƣơng tiện, hóa chất
- Thuốc thử Erhlich I.
- Thuốc thử Erhlich II.
- Dung dịch NaNO2 0,5%.
- Acid HClo 1,5%.
- Thuốc thử diazo pha trước khi dùng.
3. Ngƣời bệnh
Người bệnh cần được giải thích về việc cần thiết làm xét nghiệm
4. Phiếu xét nghiệm
Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ các thủ tục hành chính: họ tên người bệnh, tuổi,
số người bệnh, khoa phòng, tên xét nghiệm chỉ định, khoảng tham chiếu, bác
chỉ định xét nghiệm, ngày giờ lấy mẫu, người lấy mẫu, ngày giờ nhận mẫu bệnh
phẩm, người nhận mẫu.
Ghi yêu cầu xét nghiệm: Định lượng nồng độ Bilirubin toàn phần hoặc trực tiếp.
III. CÁC BƢỚC TIẾN HÀNH
1. Lấy bệnh phẩm
Định lượng Bilirubin các dịch cần ly tâm thu lấy dịch trong để định lượng.
2. Tiến hành kỹ thuật
Cho vào 4 ống nghiệm loại 10 ml:
565
Ống
chuẩn
Bilirubin toàn phần
Bilirubin trực tiếp
Ông trắng
Ông thử
Ông trắng
Bệnh phẩm
Nước cất
Dung dịch chuẩn
Erhlich I
Thuốc thử diazo
HClo 1,5%
-
1,5 ml
0,25 ml
0,5 ml
0,25 ml
-
0,25 ml
1,5 ml
-
0,5 ml
-
0,25 ml
0,25 ml
1,5 ml
-
0,5 ml
0,25 ml
-
0,25 ml
2,0 ml
-
-
-
0,25 ml
Lắc đều để yên 6 - 10 phút, đo màu ở bước sóng 546 nm.
IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Bình thường không bilirubin trng các dịch chọc dò. Khi xuất hiện thể
nghĩ đến hội chứng vàng da.
VI. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ