GI I TRÌNH T DNAẢ Ự
DNA SEQUENCING
TS. BS. Đ Th Thanh Th yỗ ị ủ
1. GI I TRÌNH T DNAẢ Ự
Gi i trình t DNA là m t thí nghi m cho k t ả ự ộ ệ ế
qu th t s p x p các nucleotide trong ả ứ ự ắ ế
đo n DNA đó.ạ
Vd:
5’CGGCTAGCAGTCTCGCGGGGGCACGCCCAAATCTC
CAGGCATTGAGCGGGTTTGATCCAAGAAAGGACCCGG
TCGTCCTGGCAATTCCGGTGTACTCACCGGTTCCGCA
GACCACTATGGCTCTCCCGGGAGGGGGGATCCTGGA
GGCTGCACGACACTCATACTAACGCCATGGCTAGACG
CTTAATAGAACAANAAA3’
2. HAI PH NG PHÁP GI I TRÌNH T DNAƯƠ Ả Ự
Ph ng pháp hoá h c gi i trình t DNA ươ ọ ả ự
c a Maxam & Guilbert (1977)ủ
Nobel hóa h c 1980 (ph ng pháp gi i trình t )ọ ươ ả ự
Walter Gilbert
Ph ng pháp enzyme gi i trình t c a ươ ả ự ủ
Frederick Sanger (1977)
Nobel hoá h c 1958 (c u trúc protein: Insulin) ọ ấ
Nobel hóa h c 1980 (ph ng pháp gi i trình t )ọ ươ ả ự
2.1. GI I TRÌNH T DNA B NG PP HÓA H CẢ Ự Ằ Ọ
1. Đánh d u m t đ u c a đo n DNA b ng g c phospho ấ ộ ầ ủ ạ ằ ố
đ ng v phóng x (ồ ị ạ 32P).
2. X lý các đo n DNA đã đánh d u ử ạ ấ 32P b ng hóa ch t ằ ấ
làm bi n đ i đ c hi u m t ho c hai lo i base c a ế ổ ặ ệ ộ ặ ạ ủ
nucleotide trên đo n DNAạ