SecA kết hợp chọn lọc với trình tự tín hiệu trong các chuỗi protein mới sinh vẫn gắn trên ribosome

Chia sẻ: Nguyen Phuonganh | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:7

Thêm vào BST

Báo xấu

112
lượt xem 8
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Cơ chế Công trình này sử dụng hệ thống dị thể (heterologous system) không có SecA nội sinh và các protein vi khuẩn khác để giải thích vai trò bài tiết chọn lọc protein vi khuẩn của SecA. Cách tiếp cận này cho phép Karamychev và Johnson đánh giá tương tác của SecA với các chuỗi protein mới sinh gắn quang hoạt với ribosome khi không có TF, SecB, Ffh (hợp phần protein vi khuẩn của phân tử nhận biết tín hiệu gọi là SRP), và phức hệ chuyển vị (translocon) SecYEG trong màng plasma của vi khuẩn. ...

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: SecA kết hợp chọn lọc với trình tự tín hiệu trong các chuỗi protein mới sinh vẫn gắn trên ribosome

SecA kết hợp chọn lọc với trình tự tín hiệu trong các chuỗi protein mới sinh vẫn gắn trên ribosome: vai trò hướng ribosome tới màng tế bào vi khuẩn của SecA Cơ chế Công trình này sử dụng hệ thống dị thể (heterologous system) không có
SecA nội sinh và các protein vi khuẩn khác để giải thích vai trò bài tiết chọn lọc protein vi khuẩn của SecA. Cách tiếp cận này cho phép Karamychev và Johnson đánh giá tương tác của SecA với các chuỗi protein mới sinh gắn quang hoạt với ribosome khi không có TF, SecB, Ffh (hợp phần protein vi khuẩn của phân tử nhận biết tín hiệu gọi là SRP), và phức hệ chuyển vị (translocon) SecYEG trong màng plasma của vi khuẩn. Khi không có màng, SecA quang liên kết chéo (photocrosslinked) một cách hiệu quả với cơ chất
chuyển vị OmpA mới tổng hợp trong phức hệ ribosome-protein mới sinh (RNCs) theo một tương tác không phụ thuộc vào cả ATP lẫn SecB. Tuy nhiên, protein màng mới tổng hợp (thường được hướng đích bởi SRP) lại không tham gia quang liên kết chéo. Biến đổi trình tự tín hiệu khám phá rằng ái lực của nó với SecA và Ffh tỷ lệ nghịch. Kết quả sắc ký lọc gel cho thấy ecA gắn chặt với các ribosome dịch mã cũng như không dịch mã. Khi tinh chế, phức hệ SecA*RNC chứa OmpA mới tổng hợp tiếp xúc với các bọng màng trong (inner
membrane vesicles) không có SecA chức năng. Ở đó, chuỗi mới sinh được hướng đích hiệu quả tới phức hệ chuyển vị SecYEG. Tuy nhiên, nếu không có SecA thì RNCs không thể hướng tới các màng này. Các dữ liệu này chỉ ra một cách rõ ràng là SecA trong bào tương tham gia bài xuất chọn lọc các protein bằng cách gắn đồng dịch mã với trình tự tín hiệu của các protein không nằm trên màng và hướng các chuỗi mới sinh này tới phức hệ chuyển vị. Selective SecA association with signal sequences in ribosome-
bound nascent chains: A potential role for SecA in ribosome targeting to the bacterial membrane. Karamyshev AL, Johnson AE. J Biol Chem. 2005 Aug 23 Sau đây là đánh giá về nghiên cứu này tại F1000 ngày 8-9-2005 F1000 Factor 3.0 Koreaki Ito Kyoto University, Japan MICROBIOLOGY Công trình này không thừa nhận
quan điểm trước đây là vai trò của SecA trong việc điều hướng protein tới phức hệ chuyển vị SecYEG ở vi khuẩn xảy ra sau dịch mã. Để tránh bị nhiễu bởi các chaperone và các yếu tố hướng đích khác, các tác giả đã sử dụng hệ thống dịch mã dị biệt trong mầm đại mạch để tạo ra phức hệ chuỗi protein mới sinh vẫn gắn với ribosome. Sau đó quang liên kết chéo phức hệ này với SecA, tổ hợp của các hốc màng SecA và SecYEG hoặc các yếu tố khác tại những vị trí xác định. Kết quả cho thấy SecA tương tác đặc hiệu với trình tự tín hiệu của protein tiền bài tiết nhưng không với trình tự chuyển màng loại I, SecA gắn với
ribosome, và SecA có thể hướng chuỗi mới sinh vẫn gắn với ribosome tới phức hệ chuyển vị SecY ít nhất trong mô hình hệ thống in vitro này.