
169
59. ĐỊNH LƢỢNG FATTY ACID BIDING PROTEIN (H-FABP)
H-F BP (Fatty cid Binding Protein) là protein vận chuyển cid béo và được
xem là một dấu ấn sinh học tim mạch.
Protein gắn với acid béo (H-F BP) là protein bào tương khoảng 15kDa gắn
với acid béo chuỗi dài có vai trò quan trọng trong chuyển hóa lipid. Có các loại F BP
khác nhau: tim (H-FABP) gan (Liver-F BP), và ruột. Cơ tim người có nồng độ cao
H-F BP là một maker nhạy với xơ hóa cơ tim và dùng trong chẩn đoán và theo dõi
nhồi máu cơ tim
I. NGUYÊN LÝ
Kỹ thuật định lượng H-F BP dựa trên nguyên tắc phản ứng miễn dịch gắn
Enzym (ELIS ). Kỹ thuật sử dụng kháng thể nguồn gốc thỏ tinh chế ái lực kháng với
H-F BP cố định vào pha rắn (giếng) và một kháng thể thứ 2 kháng với H-FABP có
gắn với enzym peroxidase. H-FABP trong mẫu phản ứng trực tiếp với các kháng thể 1
và 2 kết quả hình thành kiểu phức hợp sandwich với 3 thành phần mà phân tử H-
F BP ở giữa. Sau khi ủ dung dịch sẽ có màu xanh do peroxidase xúc tác phân giải
TMB. Phản ứng đựơc dừng lại khi thêm dung dịch dừng phản ứng và hỗn hợp sẽ
chuyển màu xanh sang vàng và được đo ở 450 nm. Nồng độ H-F BP tỷ lệ thuận với
đậm độ màu đo được.
II. CHUẨN BỊ
1. Người thực hiện: 01 cán bộ đại học, 01 kỹ thuật viên được đào tạo chuyên ngành
Hóa sinh.
2. Phương tiện, hóa chất
2.1 . Phương tiện
- Pipet thể tích 50, 100, 150, và 300 ul
- Đầu pipet dùng 1 lần.
- Các ống xét nghiệm được chống đông bằng Li-Heparin hoặc EDT hoặc
không chống đông.
- Máy lắc
- Máy đọc màu giếng ELIS với kính lọc 450 nm, OD >2.0
Hoá chất
+ Giếng (đĩa) chứa kháng thể thỏ kháng H-F BP. (đĩa chứa 96 giếng trong túi
nắp kéo, có chất hút ẩm). Lưu trữ 2 – 8oC
+ Dung dịch kháng thể gắn enzym