Khả năng phân hủy dầu diesel của chủng G10 phân lập từ kho xăng Việt Hoàng tỉnh Thái Nguyên

Lê Thị Nhi Công và Đtg<br /> <br /> Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ<br /> <br /> 101(01): 103 - 108<br /> <br /> KHẢ NĂNG PHÂN HỦY DẦU DIESEL CỦA CHỦNG G10 PHÂN LẬP<br /> TỪ KHO XĂNG VIỆT HOÀNG TỈNH THÁI NGUYÊN<br /> Lê Thị Nhi Công1, Khuông Trường Giang2,<br /> Đỗ Thị Dịu , Cung Thị Ngọc Mai1, Nghiêm Ngọc Minh1*<br /> 3<br /> <br /> 1<br /> <br /> Viện Công nghệ sinh học; 2Đại học Thái Nguyên;<br /> 3<br /> Đại học Nông nghiệp Hà Nội<br /> <br /> TÓM TẮT<br /> Chủng vi khuẩn G10 có khả năng phân hủy dầu diesel cao được phân lập từ kho xăng Việt Hoàng<br /> tỉnh Thái Nguyên. Chủng G10 thuộc nhóm vi khuẩn Gram dương, khuẩn lạc tròn, lồi, bóng, ướt,<br /> có màu trắng đục, đường kính từ 1,8 ÷ 2,2 mm. Tế bào có hình que ngắn, hai đầu tù với kích thước<br /> 0,6 ÷ 0,8 × 1,6 ÷ 2,3 µm. Dựa trên một số đặc điểm hình thái và trình tự nucleotide của gen mã<br /> hóa 16S rRNA đầy đủ, chủng G10 có độ tương đồng cao với các chủng thuộc chi Klebsiella và<br /> được đặt tên là Klebsiella sp. G10. Chủng vi khuẩn này được đăng ký trên ngân hàng NCBI với<br /> mã số là JX983098. Chủng G10 có thể phát triển tốt trong môi trường có bổ sung 10% dầu diesel và<br /> có khả năng phân hủy tới 53,46% dầu diesel sau 7 ngày nuôi lắc.<br /> Từ khóa: Klebsiella sp. G10, dầu diesel, 16S rRNA, vi khuẩn, Thái Nguyên<br /> <br /> ĐẶT VẤN ĐỀ*<br /> Từ khi được phát hiện đến nay, dầu mỏ đã và<br /> đang là nguồn nguyên liệu quý giá của mỗi<br /> quốc gia nói riêng và toàn nhân loại nói<br /> chung. Sản phẩm của dầu mỏ có mặt trong<br /> hầu hết các lĩnh vực của đời sống sinh hoạt<br /> cũng như trong công nghiệp. Việt Nam là<br /> nước có tiềm năng về dầu khí, cùng với sự<br /> phát triển mạnh mẽ của ngành công nghiệp<br /> dầu khí thế giới, nước ta cũng đang có những<br /> bước tiến lớn, góp phần giữ vững an ninh<br /> quốc phòng với các nước trong khu vực và<br /> trên thế giới. Bên cạnh những lợi ích mà<br /> ngành công nghiệp dầu khí mang lại, tình<br /> trạng ô nhiễm môi trường do các chất thải có<br /> chứa dầu gây ra đã làm hủy hoại hệ sinh thái<br /> và gây hại trực tiếp đến sức khỏe con người.<br /> Với mục tiêu góp phần bảo vệ môi trường,<br /> ngày nay trên thế giới và ở Việt Nam đã áp<br /> dụng thành công nhiều phương pháp để xử lý<br /> nước ô nhiễm dầu. Tuy nhiên, các phương<br /> pháp vật lý và hóa học thường tốn kém và gây<br /> ô nhiễm thứ cấp cho môi trường, vì vậy<br /> phương pháp phân hủy sinh học đang được<br /> chú ý tới bởi các đặc tính ưu việt của nó như<br /> giá thành thấp, triệt để và an toàn cho hệ sinh<br /> thái. Trong đó, sử dụng các chủng vi sinh vật<br /> có khả năng chuyển hóa các thành phần dầu<br /> gây ô nhiễm mang lại hiệu quả xử lý cao bởi<br /> *<br /> <br /> Tel: 0988 886930, Email: nghiemminh@ibt.ac.vn<br /> <br /> đặc tính trao đổi chất đa dạng, dễ dàng phân<br /> lập và nuôi cấy.<br /> Hiện nay, có một số lượng lớn các vi sinh vật<br /> có khả năng phân hủy dầu mỏ đã được công<br /> bố bao gồm: Achromobbacter, Aeromonas,<br /> Alcaligenes,<br /> Arthrobacter,<br /> Bacillus,<br /> Brevebacterium,<br /> Coryneforms,<br /> Flavobacterium, Klebsiella, Lactobacillus,<br /> Pseudomonas,<br /> Streptomyces,<br /> Vibrio,<br /> Xanthomyces, v.v… [6].<br /> NỘI DUNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU<br /> Nội dung nghiên cứu<br /> - Lấy mẫu, phân lập và tuyển chọn các chủng<br /> vi khuẩn có khả năng sử dụng dầu diesel [1]<br /> - Nghiên cứu ảnh hưởng của điều kiện pH,<br /> nồng độ muối NaCl lên khả năng phân hủy<br /> dầu diesel [1]<br /> - Đánh giá khả năng phân hủy dầu diesel<br /> của chủng vi khuẩn phân lập được ở điều<br /> kiện tối ưu<br /> - Phân loại vi khuẩn tuyển chọn bằng phương<br /> pháp sinh học phân tử.<br /> Phương pháp nghiên cứu<br /> Thu thập mẫu<br /> Mẫu đất và nước nhiễm dầu được chúng tôi<br /> thu thập tại kho xăng Việt Hoàng thuộc xã Yên<br /> Đổ, huyện Phú Lương, tỉnh Thái Nguyên.<br /> Phân lập vi khuẩn phân hủy diesel<br /> Từ mẫu ban đầu, tiến hành làm giàu 3 lần trên<br /> 50 ml môi trường muối khoáng Gost có bổ<br /> 103<br /> <br /> Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên<br /> <br /> http://www.lrc-tnu.edu.vn<br /> <br /> Lê Thị Nhi Công và Đtg<br /> <br /> Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ<br /> <br /> sung 0,1% vitamin, 1% dầu diesel (v/v), nuôi<br /> lắc ở 200 vòng/phút, 37oC trong 7 ngày [2].<br /> Sau mỗi lần làm giàu, cấy gạt kiểm tra thu<br /> được tập đoàn vi sinh vật và làm sạch để có<br /> các chủng đơn. Để khảo sát khả năng sử dụng<br /> dầu diesel của từng chủng, chúng tôi nuôi đơn<br /> chủng trên 20 ml môi trường muối khoáng<br /> Gost có bổ sung dầu diesel với nồng độ tăng<br /> dần từ 1%, 2%, 5% đến 10%. Quan sát độ đục<br /> dịch nuôi và đo mật độ quang học ở bước<br /> sóng 600 nm (OD600) theo ngày, thí nghiệm<br /> được tiến hành trong 7 ngày.<br /> Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của<br /> vi khuẩn<br /> Bao gồm hình thái khuẩn lạc, hình thái tế bào<br /> và nhóm Gram. Nhuộm Gram chủng vi khuẩn<br /> được tiến hành theo phương pháp Hucker cải<br /> tiến dựa trên cấu trúc thành tế bào vi khuẩn [8].<br /> Đánh giá ảnh hưởng của một số điều kiện<br /> hóa lý tới khả năng phân hủy dầu diesel<br /> Đánh giá khả năng phân hủy 10% dầu diesel<br /> của chủng vi khuẩn phân lập được trên môi<br /> trường muối khoáng Gost, có dải pH (6; 6,5;<br /> 7; 7,5; 8; 8,5 và 9) và ở các nồng độ muối<br /> NaCl khác nhau (0; 0,5; 1; 1,5; 2; 2,5 và 3%),<br /> trong điều kiện nuôi lắc 200 vòng/phút, 37oC.<br /> Xác định khả năng phân hủy dầu diesel của<br /> vi khuẩn<br /> Chủng vi khuẩn chọn lựa được nuôi cấy trên<br /> 50 ml môi trường muối khoáng Gost, bổ sung<br /> 10% dầu diesel. Sau 7 ngày nuôi lắc ở 37oC,<br /> 200 vòng/phút, tiến hành định lượng hàm<br /> lượng dầu diesel của mẫu chứa chủng vi<br /> khuẩn và mẫu đối chứng. Lượng dầu diesel<br /> được xác định bằng phương pháp phân tích<br /> khối lượng theo tiêu chuẩn TCVN 4582 – 88<br /> tại Viện Hóa công nghiệp.<br /> <br /> 101(01): 103 - 108<br /> <br /> KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN<br /> Phân lập và tuyển chọn các chủng vi khuẩn<br /> có khả năng phân hủy dầu diesel<br /> Khi nuôi vi sinh vật trong môi trường muối<br /> khoáng Gost nghèo dinh dưỡng có bổ sung<br /> dầu diesel, vi sinh vật sẽ sử dụng dầu diesel<br /> đó như là nguồn carbon và năng lượng duy<br /> nhất [7]. Thông qua sự phát triển của vi sinh<br /> vật cũng phần nào đánh giá được khả năng<br /> phân hủy dầu diesel của chúng. Sau mỗi lần<br /> làm giàu, tiến hành cấy gạt kiểm tra trên môi<br /> trường muối khoáng Gost thạch có bổ sung<br /> nguồn cơ chất tương ứng để thu được tập<br /> đoàn vi sinh vật. Sau khi quan sát và làm<br /> sạch, phân lập được 10 chủng vi khuẩn với<br /> đặc điểm được liệt kê trong bảng 1.<br /> Kết quả khảo sát khả năng sử dụng dầu diesel<br /> cho thấy, ở nồng độ 1% có 6 chủng phân hủy<br /> dầu diesel mạnh nhất và được chọn lựa để<br /> đánh giá ở nồng độ 2% dầu diesel tiếp theo,<br /> chọn ra 5 chủng để đánh giá tiếp đến 5% dầu<br /> diesel, chọn lọc được 4 chủng mạnh nhất là<br /> G2, G6, G8 và G10. Ở nồng độ dầu diesel<br /> 10%, chủng G10 có khả năng phát triển mạnh<br /> nhất (Hình 2). Vì vậy, chủng G10 được chúng<br /> tôi lựa chọn cho các nghiên cứu tiếp theo.<br /> Đặc điểm sinh học chủng G10<br /> Chủng G10 thuộc nhóm vi khuẩn Gram<br /> dương. Khuẩn lạc trên môi trường MPA<br /> thạch, sau 24 giờ nuôi cấy có hình tròn, lồi,<br /> bóng, ướt, màu trắng đục, đường kính 1,8 ÷<br /> 2,2 mm. Dưới kính hiển vi điện tử quét JEOL<br /> 5410 LV với độ phóng đại 10.000 lần, tế bào<br /> có dạng hình que ngắn, hai đầu tù, kích thước<br /> 0,6÷0,8 × 1,6÷2,3 µm. Kết quả thể hiện trên<br /> hình 1.<br /> <br /> Phân loại vi khuẩn<br /> Chủng vi khuẩn được định tên bằng phương<br /> pháp giải trình tự một phần gen mã hóa cho<br /> tiểu phần ribosome 16S. So sánh trình tự 16S<br /> rRNA của chủng vi khuẩn mục tiêu với các<br /> chủng vi khuẩn chuẩn trên LPSN, dựa vào phần<br /> mềm Clustal X và Mega4 để xây dựng cây phát<br /> sinh chủng loại của chủng vi khuẩn này.<br /> <br /> Hình 1. Đặc điểm khuẩn lạc và hình thái tế<br /> bào chủng G10<br /> <br /> 104<br /> <br /> Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên<br /> <br /> http://www.lrc-tnu.edu.vn<br /> <br /> Lê Thị Nhi Công và Đtg<br /> <br /> Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ<br /> <br /> 101(01): 103 - 108<br /> <br /> Bảng 1. Đặc điểm của các chủng vi khuẩn vi khuẩn phân lập được từ mẫu đất và nước nhiễm dầu<br /> Chủng vi khuẩn<br /> Nguồn gốc<br /> Đặc điểm khuẩn lạc<br /> G1<br /> N0.10-3<br /> Tròn, dẹp, trắng đục, mép nhăn, d=1,2-1,8 mm<br /> G2<br /> Đ2.10-5<br /> Tròn, lồi, bóng, ướt, trắng đục, d=0,8-1,5 mm<br /> G3<br /> N1.10-3<br /> Tròn, xanh trong, dẹt, d=1,8-2 mm<br /> G4<br /> Đ1.10-5<br /> Tròn, bóng, màu vàng nhạt, d=0,5-0,8 mm<br /> G5<br /> N2.10-5<br /> Tròn, bóng, màu vàng nghệ, d = 1,2 -1,5<br /> G6<br /> N2.10-5<br /> Tròn, dẹt, màu xanh trong, d = 1,8-2,2 mm<br /> G7<br /> Đ1.10-5<br /> Tròn, trắng, dẹt, d = 2-3 mm<br /> G8<br /> Đ2.10-5<br /> Tròn, dẹt, mép nhăn, màu trắng đục, d=1-1,2 mm<br /> G9<br /> Đ2.10-3<br /> Tròn, lồi, màu vàng nghệ, d=1,8-2 mm<br /> G10<br /> N2.10-1<br /> Tròn, lồi, bóng, ướt, trắng đục, d=1,8-2,2 mm<br /> N: Phân lập từ mẫu nước, Đ: Phân lập từ mẫu đất, 10x: Độ pha loãng, N(Đ)y: y là số lần làm giàu, tương<br /> ứng lần 1, lần 2 hoặc lần 3<br /> <br /> a<br /> b<br /> Hình 2. Khả năng phân hủy 10% dầu diesel của 4 chủng vi khuẩn G2, G6, G8 và G10<br /> a. Đặc điểm dịch nuôi chủng vi khuẩn trên môi trường muối khoáng Gost có bổ sung 10% dầu diesel<br /> sau 5 ngày nuôi cấy. b. Đồ thị mật độ quang phổ. K. Mẫu đối chứng không có vi sinh vật.<br /> <br /> Ảnh hưởng của pH, nồng độ NaCl đến khả<br /> năng phân hủy dầu disel chủng G10<br /> Nghiên cứu ảnh hưởng của các điều kiện hóa<br /> lý đến khả năng phân hủy dầu diesel của vi<br /> sinh vật nhằm mục đích xác định các điều<br /> kiện tối ưu để vi sinh vật đó phát triển từ đó<br /> có thể kiểm soát được quá trình phân hủy các<br /> nguồn ô nhiễm của vi sinh vật theo mong<br /> muốn và đạt được hiệu quả cao nhất. Các yếu<br /> tố pH, nồng độ muối được xem là có ảnh<br /> hưởng lớn nhất, trực tiếp nhất đến sự phát<br /> triển cũng như khả năng phân hủy dầu diesel<br /> của vi sinh vật, đồng thời đây cũng là yếu tố<br /> dễ kiểm soát nhất. Chủng vi khuẩn G10 được<br /> nuôi đánh giá khả năng phân hủy dầu diesel<br /> trên môi trường muối khoáng Gost có các giá<br /> trị pH từ 6 ÷ 9, với giá trị OD600 đầu vào của<br /> các chủng là như nhau và bằng 0,3. Tuy<br /> nhiên, khi thử nghiệm với các giá trị pH là 8,5<br /> và 9 thì khả năng phân hủy dầu diesel giảm đi<br /> rõ rệt. Điều này có thể lý giải là do chủng vi<br /> khuẩn G10 được phân lập từ các mẫu lấy ở<br /> kho xăng Việt Hoàng, nên pH của mẫu có giá<br /> trị trung tính.<br /> <br /> Hình 3. Ảnh hưởng của pH đến khả năng phân<br /> hủy dầu diesel chủng G10<br /> <br /> Kết quả trên hình 3 cho thấy, ở pH 8 khả năng<br /> phân hủy dầu diesel của chủng G10 là mạnh<br /> nhất và đạt được giá trị OD600 = 4,06 sau 5<br /> ngày nuôi cấy, tiếp đến là các pH 7,5; 7; 6,5<br /> và 6. Điều này cũng phù hợp với nghiên cứu<br /> của Sharma và Pant (2001) [7]. Như vậy,<br /> chủng G10 phân hủy dầu diesel mạnh nhất ở<br /> pH 8 và pH này được lựa chọn để đánh giá tiếp<br /> ảnh hưởng của nồng độ muối NaCl (hình 4).<br /> 105<br /> <br /> Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên<br /> <br /> http://www.lrc-tnu.edu.vn<br /> <br /> Lê Thị Nhi Công và Đtg<br /> <br /> Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ<br /> <br /> Hình 4. Khả năng phân hủy dầu diesel chủng G10<br /> ở các nồng độ muối khác nhau<br /> <br /> Nồng độ muối liên quan đến áp suất tế bào,<br /> ảnh hưởng đến quá trình trao đổi chất và<br /> chuyển hóa các chất ô nhiễm. Vì vậy, việc<br /> nghiên cứu về ảnh hưởng của nồng độ muối<br /> đến khả năng phân hủy dầu disel chủng vi<br /> khuẩn là rất quan trọng cho việc ứng dụng về<br /> sau. Nồng độ muối NaCl được sử dụng trong<br /> thí nghiệm nằm trong dải từ 0 ÷ 3. Tuy nhiên,<br /> với nồng độ muối cao hơn 2,5, khả năng sinh<br /> trưởng và phân hủy dầu diesel của chủng vi<br /> khuẩn G10 giảm đi rõ rệt.Từ hình 4, nhận<br /> thấy ở pH 8 giá trị OD600 thu được là cao<br /> nhất. Như vậy, ở pH 8, nồng độ muối NaCl<br /> 2% là điều kiện tối ưu cho khả năng phân hủy<br /> dầu diesel chủng vi khuẩn G10.<br /> <br /> 101(01): 103 - 108<br /> <br /> Khả năng phân hủy dầu diesel chủng G10<br /> Sau 7 ngày nuôi lắc với điều kiện pH 8, nồng<br /> độ muối NaCl 2%, ở 37oC, 200 vòng/phút,<br /> mẫu được gửi đi phân tích tại Viện Hóa công<br /> nghiệp – Bộ Công thương. Kết quả phân tích<br /> cho thấy, so với mẫu đối chứng (49720 mg/l),<br /> mẫu chứa chủng G10 hàm lượng dầu còn lại<br /> là 23140 mg/l và đạt hiệu suất phân hủy là<br /> 53,46%.<br /> Phân loại, định tên và xây dựng cây phát<br /> sinh chủng loại dựa trên trình tự đoạn gen<br /> mã hóa 16S rRNA của chủng vi khuẩn G10<br /> Chủng G10 được định danh bằng phương<br /> pháp giải trình tự đoạn gen 16S rRNA. Kết<br /> quả so sánh trình tự 16S rRNA của chủng vi<br /> khuẩn mục tiêu với các chủng vi khuẩn chuẩn<br /> trên LPSN cho thấy, chủng G10 có độ tương<br /> đồng cao với các chủng thuộc chi Klebsiella,<br /> đặc biệt tương đồng đến 99% so với loài<br /> Klebsiella pneumoniae (Hình 5), do vậy<br /> chủng G10 được đặt tên là Klebsiella sp. G10<br /> và được đăng ký trên ngân hàng Genbank với<br /> mã số là JX983098.<br /> <br /> Bảng 2. Một số chủng có trình tự 16S rRNA tương đồng với chủng G10<br /> TT<br /> 1<br /> 2<br /> 3<br /> 4<br /> 5<br /> 6<br /> 7<br /> 8<br /> <br /> Tên vi sinh vật<br /> Enterobacter aerogenes<br /> Klebsiella ornithinolytica<br /> Klebsiella oxytoca<br /> Klebsiella pneumoniae subsp. ozaenae<br /> Klebsiella planticola ATCC 33531T<br /> Klebsiella pneumoniae<br /> Klebsiella pneumoniae ATCC13884T<br /> Klebsiella singaporensis LX3<br /> <br /> Mã số<br /> AB004750<br /> U78182<br /> AF129440<br /> AF130982<br /> AF129443<br /> X87276<br /> Y17657<br /> AF250285<br /> <br /> Mức độ tương đồng<br /> 1367/1391 (98%)<br /> 1359/1391 (98%)<br /> 1335/1372 (97%)<br /> 1358/1372 (99%)<br /> 1340/1372 (98%)<br /> 1390/1393 (99%)<br /> 1385/1392 (99%)<br /> 1264/1282 (99%)<br /> <br /> Dựa trên các chủng vi khuẩn có trình tự 16S rRNA tương đồng ở bảng 2, chúng tôi xây dựng<br /> được cây phát sinh chủng loại của chủng Klebsiella sp. G10 (Hình 6).<br /> <br /> 106<br /> <br /> Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên<br /> <br /> http://www.lrc-tnu.edu.vn<br /> <br /> Lê Thị Nhi Công và Đtg<br /> <br /> Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ<br /> <br /> Hiện nay, chưa có nhiều công bố về khả năng<br /> phân hủy dầu diesel của các chủng vi khuẩn<br /> thuộc chi Klebsiella. Tuy nhiên, một số tác<br /> giả trên thế giới đã công bố về khả năng phân<br /> hủy dầu DO của chi Pseudomonas. Nghiên<br /> cứu mới nhất của nhóm tác giả Kaczorek và<br /> cộng sự (cs) năm 2011 khi nghiên cứu về khả<br /> năng phân hủy sinh học các hợp chất<br /> hydrocarbon đã phân lập được chủng vi<br /> khuẩn Pseudomonas alcaligenes S22 có khả<br /> năng phân hủy 92% dầu DO sau 21 ngày nuôi<br /> cấy có bổ sung thêm Triton X-100 [4]. Năm<br /> 2009, tác giả Adeline và cs., đã phân lập được<br /> chủng Pseudomonas lundensis UTAR FPE2<br /> từ lò nhiên liệu của nhà máy có khả năng<br /> phân hủy 69% dầu diesel trong 3 ngày đầu<br /> tiên [1]. Năm 2006, nhóm tác giả Ueno A và<br /> cs., đã phân lập được chủng Pseudomonas<br /> aeruginosa WatG trong đất ô nhiễm dầu có<br /> khả năng phân hủy 51% tổng lượng<br /> hydrocarbon mạch thẳng có trong dầu DO [9].<br /> Năm 2004, nhóm tác giả Hong và cs đã phân<br /> lập được chủng vi khuẩn Pseudomonas<br /> aeruginosa IU5 có khả năng phân hủy 60% dầu<br /> DO (8500 mg/kg) sau 13 ngày nuôi cấy [3].<br /> Ở Việt Nam đã có công bố của một số nhóm<br /> tác giả về các chủng vi khuẩn có khả năng sử<br /> dụng dầu DO. Năm 2010, nhóm tác giả tại<br /> Phòng Vi sinh vật Dầu mỏ, Viện Công nghệ<br /> sinh học đã nghiên cứu khả năng tạo chất hoạt<br /> động bề mặt từ chủng vi khuẩn Pseudomonas<br /> pseudomalei H24 giúp tăng cường khả năng<br /> phân hủy dầu DO của vi sinh vật từ mẫu cát<br /> biển có khả năng phân hủy 67% và 37% với<br /> nồng độ dầu ban đầu là 39,2 g/l [5].<br /> Như vậy, so sánh với các chủng vi khuẩn có<br /> khả năng phân hủy dầu DO trên thế giới và<br /> Việt Nam, chủng Klebsiella sp. G10 nhận<br /> được trong nghiên cứu có khả năng phân hủy<br /> dầu khá lớn. Chủng vi khuẩn này cũng đã<br /> chứng minh ưu thế xử lý dầu trong nước thải<br /> công nghiệp. Do đó có thể bổ sung chủng<br /> G10 vào tập đoàn giống tạo bùn hoạt tính để<br /> nâng cao hiệu quả xử lý nước thải công<br /> nghiệp nhiễm diesel.<br /> KẾT LUẬN<br /> Đã phân lập được 10 chủng vi khuẩn từ<br /> nguồn mẫu ban đầu, trong đó, chủng G10 có<br /> <br /> 101(01): 103 - 108<br /> <br /> có khả năng phân hủy dầu diesel mạnh nhất.<br /> Chủng G10 có khuẩn lạc tròn, lồi, bóng, ướt,<br /> màu trắng đục, đường kính 1,8 – 2,2 mm. Tế<br /> bào có dạng hình que ngắn, kích thước (0.6 ÷<br /> 0.8) µm × (1.6 ÷ 2.3) µm. Trình tự đoạn gen<br /> mã hóa 16S rRNA có độ tương đồng cao với<br /> các chủng thuộc chi Klebsiella nên được đặt<br /> tên là Klebsiella sp. G10 và được đăng ký<br /> trên ngân hàng NCBI với mã số JX983098.<br /> Điều kiện tối ưu cho khả năng phân hủy dầu<br /> diesel của chủng vi khuẩn G10 là ở pH 8,<br /> nồng độ muối NaCl 2%. Ở điều kiện tối ưu,<br /> hiệu suất phân hủy 10% dầu diesel đạt<br /> 53,46% sau 7 ngày nuôi lắc với hàm lượng<br /> ban đầu là 49720 mg/l.<br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO<br /> [1]. Adeline S.Y. Ting, Carol H.C. Tan and Aw<br /> C.S. (2009), Hydrocarbon-degradation by isolate<br /> Pseudomonas lundensis UTAR FPE2. Malaysian<br /> Journal of Microbiology 5(2), 104-108.<br /> [2]. Cung Thị Ngọc Mai, Nguyễn Thùy Linh,<br /> Nguyễn Văn Bắc, Vũ Thị Thanh, Nghiêm Ngọc<br /> Minh (2011), Nghiên cứu khả năng phân hủy<br /> diesel của chủng vi khuẩn BTL5 phân lập từ nước<br /> thải công nghiệp, Tạp chí Sinh học, 33(4), 86-91.<br /> [3]. Hong J.H., Kim J., Choi O.K., Cho K.S. and<br /> Ryu H.W. (2005), Characterization of a dieseldegrading bacterium, Pseudomonas aeruginosa<br /> IU5, isolated from oil-contaminated soil in Korea,<br /> World<br /> Journal<br /> of<br /> Microbiology<br /> and<br /> Biotechnology, 21, 381-384.<br /> [4]. Kaczorek E., Moszynska S., Olszanowski A.,<br /> (2011), Modification of cell surface properties of<br /> Pseudomonas alcaligenes S22 during hydrocarbon<br /> biodegradation, Biodegradation, 22(2), 359-366.<br /> [5]. Lại Thúy Hiền, nguyễn Thị Thu Huyền, Đỗ<br /> Thu Phương, Phạm Thị Hằng, Vương Thị Nga, Lê<br /> Thị Nhi Công, Nguyễn Thị Yên, Nguyễn Bá Tú,<br /> Hoàng Văn Thắng (2010), Nghiên cứu tạo chất<br /> hoạt hóa bề mặt sinh học từ vi sinh vật nhằm ứng<br /> dụng trong các ngành công nghiệp và xử lý môi<br /> trường, Hội nghị Khoa học kỷ niệm 35 năm Viện<br /> Khoa học và Công nghệ Việt Nam, 199-209.<br /> [6]. Nduka K.J., Umeh N.L., Okerulu O.I.,<br /> Umedum N.L., Okoye H.N. (2012), Utilization of<br /> Different Microbes in Bioremediation of<br /> Hydrocarbon Contaminated Soils Stimulated With<br /> Inorganic and Organic Fertilizers. Petroleum &<br /> Environmental 3(2), 1-9.<br /> [7]. Sharma S. L. and Pant A. (2001), Crude oil<br /> degradation by a actinomycete Rhodococcus sp,<br /> Indian Journal of Marine Science, 30, 146-150.<br /> <br /> 107<br /> <br /> Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên<br /> <br /> http://www.lrc-tnu.edu.vn<br /> <br />