TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN T
KHOA NÔNG NGHIP
NGUYỄN THỊ BÉ MƯỜI
KHẢO SÁT XOẮN KHUẨN LEPTOSPIRA
LEPTOSPIROSIS TRÊN CHÓ Ở MỘT SỐ
TỈNH ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG
LUẬN ÁN TIẾN SĨ
CHUYÊN NGÀNH BỆNH LÝ HỌC VÀ CHỮA BỆNH VẬT NUÔI
MÃ SỐ: 62640102
2019
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN T
KHOA NÔNG NGHIP
NGUYỄN THỊ BÉ MƯỜI
KHẢO SÁT XOẮN KHUẨN LEPTOSPIRA
LEPTOSPIROSIS TRÊN CHÓ Ở MỘT SỐ
TỈNH ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG
LUẬN ÁN TIẾN SĨ
CHUYÊN NGÀNH BỆNH LÝ HỌC VÀ CHỮA BỆNH VẬT NUÔI
MÃ SỐ: 62640102
CÁN BỘ HƯỚNG DẪN
PGS. TS. HỒ THỊ VIỆT THU
2019
i
LỜI CẢM TẠ
Tôi xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: Ban Giám hiệu
Trường Đại học Cần Thơ, khoa Sau đại học, ban Chủ nhiệm Khoa Nông
Nghiệp, Bmôn Thú y, các Quý thầy, đã giảng dạy, hướng dẫn, giúp đỡ,
tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu thực
hiện luận án.
Tôi xin trân trọng y tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến hướng
dẫn PGS.TS. Hồ Thị Việt Thu đã động viên, giúp đỡ tạo
mọi điều kiện thuận lợi cho tôi học tập, nghiên cứu, chăm bồi kiến thức
hoàn thành luận án. Xin cảm ơn sâu sắc đến PGS.TS. Trần Đình T PGS.
TS. Cao Thị Bảo Vân đã tận tình chỉ bảo, hướng dẫn và tạo điều kiện thuận lợi
cho tôi thực hiện nuôi cấy xoắn khuẩn tại Viện Vệ Sinh Dịch Tễ. Xin cảm ơn
sâu sắc đến PGS.TS. Nguyễn Nhựt Xuân Dung PGS.TS Nguyễn Trọng
Ngữ đã động viên giúp đỡ trong việc xử sliệu phân tích trình tự
gene.
Xin chân thành cảm ơn chị Nguyễn Thị Hạnh Lan đã tận tình hướng dẫn
trực tiếp kỹ thuật nuôi cấy xoắn khuẩn tại phòng Sinh Học Phân Tử 3 của
Viện Vệ Sinh Dịch Tễ (Viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh) và em Trần Văn
Bé Năm phòng Sinh Học Phân Tử, Viện Công Nghệ Sinh Học Trường ĐHCT.
Xin được y tỏ lòng biết ơn các Q thầy, trong hội đồng
chấm luận án đã đóng góp cho tôi những ý kiến cùng quý giá để tôi thể
hoàn thiện hơn bản luận án của mình.
Xin gởi lời cám ơn chân thành đến các bạn bè, đồng nghiệp của tôi đang
công tác tại Bộ môn Thú y, Trường Đại học Cần Thơ, các anh chị em lớp NCS
khóa 1 (2013-2017) đã động viên, khích lệ giúp đỡ tôi trong suốt quá trình
thực hiện và hoàn thành luận án.
Tôi xin dành tất cả sự yêu thương lời cám ơn tới gia đình, người thân
yêu của tôi đã luôn ủng hộ, chia sẻ những buồn vui trong cuộc sống để tôi
thể an tâm và có thêm nghị lực hoàn thành luận án.
Tác giả luận án
Nguyễn Thị Bé Mười
ii
TÓM TẮT
Đề tài “Khảo sát xoắn khuẩn Leptospira Leptospirosis trên chó
một số tỉnh Đồng Bằng Sông Cửu Long được thực hiện từ m 2013 đến
2017, sử dụng phương pháp khảo sát huyết thanh học (MAT), lấy mẫu cắt
ngang được thực hiện trên 4 tỉnh Cần Thơ, Vĩnh Long, An Giang và Mau
với 18 nhóm huyết thanh Leptospira phổ biến.
Tổng số mẫu kiểm tra huyết thanh chó 1.433, chia thành: giống chó nội
giống chó ngoại; 3 nhóm tuổi: 4 tháng - 12 tháng tuổi, 1-6 năm 6
năm tuổi; giới tính đực cái; nuôi thả rong nuôi nhốt. Tổng số mẫu huyết
thanh chuột 647, với 3 loại chuột: chuột cống, chuột xạ chuột nhắt. Đề tài
thực hiện trên 4 nội dung là: (1) Điều tra tỷ lệ nhiễm Leptospira trên chó
chuột; (2) Phát hiện xoắn khuẩn Leptospira từ nước tiểu bằng kỹ thuật PCR và
nuôi cấy, giải trình tự đoạn gene 16S rRNA của xoắn khuẩn Leptospira; (3)
Khảo sát những biến đổi bệnh bệnh Leptospirosis trên chó thông qua xét
nghiệm máu nước tiểu (4) nghiên cứu biện pháp điều trị bệnh
Leptospirosis với 3 phác đồ điều trị bằng Shoptapen, Amoxicillin
Doxycycline.
Việc phát hiện xoắn khuẩn Leptospira được thực hiện trên 63 mẫu nghi
ngờ Leptospira từ 111 mẫu ớc tiểu của chó MAT 1: 400. Các biến
đổi về bệnh thực hiện trên 13 chó (6 con không có 7 triệu chứng lâm
sàng) dương tính với Leptospira bằng kỹ thuật PCR điều trị được thực hiện
tại 3 phòng mạch thú y tại TPCT.
Kết quả cho thấy tlệ nhiễm xoắn khuẩn Leptospira trung bình trên
chó 23,1%; cao nhất TP Vĩnh Long 26,59%, kế đến Cần Thơ
(24,46%), An Giang (20,15%) thấp nhất Mau (18,94%). Serogroup
phổ biến L. icteroheamorrhagiae (35,05%), L. canicola (18,34%), L.
hurstbridge (12,69%), L. bataviae (12,08%) và L. grypptophosa (12,08%). Tỷ
lệ nhiễm xoắn khuẩn Leptospira giữa nhóm giống chó nội (23,71%) chó
ngoại (22,24%) (P=0,51) cũng như các lứa tuổi chó khác nhau, từ 4 tháng đến
12 tháng tuổi (22,51%), 1-6 m tuổi (22,52%) 6 m tuổi (26,04%)
(P=0,32). Tlệ nhiễm Leptospira giữa chó đực (24,20%) con cái (22,01%)
(P=0,33). Tuy nhiên, phương thức nuôi ảnh hưởng rất ý nghĩa đến tỷ lệ
nhiễm Leptospira, chó thả rong 25,92% trong khi nuôi nhốt 17,56%
(P<0,01). Chuột tỷ lệ nhiễm Leptospira khá cao, chuột cống 46,32%, trong
khi chuột xạ chuột nhắt lần lượt 26,32 27,14% (P<0,01). Serogroup
nổi trội L. icteroheamorrhagiae (40,61%), L. canicola (20,52%), L.
bataviae (13,97%), L. panama (10,92%) L. hurstbridge (10,92%). T lệ
dương tính với Leptospira giữa chuột chó tương quan rất chặc chẻ (R2=
0,90).
iii
Kỹ thuật PCR đã phát hiện 13/63 mẫu nước tiểu dương tính với
Leptospira (20,63%) đã nuôi cấy thành công Leptospira từ 3/63 mẫu nước
tiểu này (4,76%). Kết quả định danh xác định các mẫu phát hiện thuộc hai loài
Leptospira interrogans (L. interrogans serovar icterohaemorrhagie) thuộc
nhóm Leptospira gây bệnh loài Leptospira fainei (L. fainei serovar
hurstbridge) thuộc nhóm xoắn khuẩn trung gian y bệnh hội hiện diện
trong nước tiểu chó ở TPCT.
Mười ba chó dương tính với Leptospira bạch cầu tổng số, bạch cầu
trung tính, lâm ba cầu, urea, creatinin, AST, ALT bilirubin tăng cao, trong
khi hồng cầu, hemoglobin, hematocrit tiểu cầu giảm so với chỉ số bình
thường, ngoài ra trong nước tiểu n xuất hiện hồng cầu protein cao. Bảy
chó triệu chứng m sàng như lừ đừ, ăn ít hoặc bỏ ăn (100%), niêm mạc
nhợt màu (85,71%) tiêu chảy (14,28%). Sáu mươi ba chó được điều trị với
ba phác đồ, kết quả Doxycycline t lệ khỏi bệnh cao nhất (61,90%), kế đến
là Amoxicilline (50%) và thấp nhất Shotapen (40%) (P=0,37).
Kết quả của đề tài chỉ rằng chó chuột hai động vật mắc bệnh
Leptospirois, tỷ lệ nhiễm Leptospira giữa chúng có quan hệ tuyến tính rất cao.
Các số liệu thu được của đề tài những dữ liệu cần thiết cho công tác phòng
chống bệnh trên chó cũng như góp phần làm hạn chế bệnh trên các động
vật khác và trên người.
Từ khóa: chó, chuột, Leptospira, serogroup, tỷ lệ nhiễm, điều trị.