Phát hiện các gene blaoxa ở acinetobacter baumannii bằng phương pháp multiplex PCR‐ELISA

Nghiên cứu Y học <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 6 * 2014<br /> <br />  <br /> <br /> PHÁT HIỆN CÁC GENE BLAOXA Ở ACINETOBACTER BAUMANNII <br /> BẰNG PHƯƠNG PHÁP MULTIPLEX PCR‐ELISA <br /> Nguyễn Sĩ Tuấn*, Lưu Trần Linh Đa*, Lê Duy Nhất*, Hứa Mỹ Ngọc*, Nguyễn Ngọc Thanh*,  <br /> Phạm Thị Thanh Thủy*, Phạm Văn Dũng*, Nguyễn Thúy Hương** <br /> <br /> TÓM TẮT <br /> Đặt  vấn  đề:  Acinetobacter baumannii (AB) kháng đa kháng sinh bằng nhiều cơ chế, bao gồm giảm tính <br /> thấm  qua  màng,  biểu  hiện  quá  mức  bơm  thải  kháng  sinh  và  sản  xuất  carbapenemase.  Năm  2013,  AB  kháng <br /> carbapenem bùng phát mạnh ở nhiều bệnh viện. Tính kháng này có thể do sự sản xuất các carbapenemase, trong <br /> đó các oxacillinase thủy phân carbapenem thuộc lớp D (OXA‐23, OXA‐40, OXA‐58 và OXA‐51) được công bố <br /> phổ biến nhất ở Châu Á – Thái Bình Dương.  <br /> Mục tiêu: Phát hiện các gene blaOXA lưu hành trong các chủng AB ở bệnh viện Đa khoa Thống Nhất, Đồng <br /> Nai năm 2013. <br /> Phương  pháp  nghiên  cứu:  Multiplex PCR – ELISA được tiến hành để phát hiện các blaOXA mã hoá các <br /> oxacillinase thuỷ phân carbapenem ở AB và sau đó, kết quả được kiểm tra bằng multiplex PCR truyền thống. <br /> Kết  quả:  Trong 66 chủng AB thử nghiệm, có 83,3% kiểu gene kháng carbapenem là blaOXA‐23 và 16,67% <br /> blaOXA‐58. Có tới 97% các chủng AB mang gene blaOXA‐51. <br /> Kết luận: Cần tiến hành cách ly các bệnh nhân nhiễm trùng do AB có lưu hành các blaOXA, đặc biệt là các <br /> gene nằm trên plasmid, nhằm ngăn ngừa sự phát tán gene kháng thuốc. <br /> Từ khóa: Acinetobacter baumannii, carbapenem, carbapenemase,blaOXA‐23, blaOXA‐51, blaOXA‐58. <br /> <br /> ABSTRACT <br /> DETECT BlaOXA GENES OF ACINETOBACTER BAUMANNII BY MULTIPLEX PCR – ELISA <br /> METHOD <br /> Nguyen Si Tuan, Luu Tran Linh Da, Le Duy Nhat, Hua My Ngoc, Nguyen Ngoc Thanh,  <br /> Pham Thi Thanh Thuy, Pham Van Dung, Nguyen Thuy Huong <br />  * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 ‐ Supplement of No 6‐ 2014: 458 – 462 <br /> Background:  Acinetobacter  baumannii  (AB)  multiple  antibiotic  resistance  by  various  mechanisms, <br /> including decreased membrane permeability, antibiotic pump overexpression and carbapenemase production. In <br /> 2013, outbreak of carbapenem which are resistant to AB occured in many hospitals. This resistance may be due to <br /> the production of carbapenemase, in which the hydrolysis oxacillinase carbapenem class D (OXA ‐ 23, OXA ‐ 40, <br /> OXA ‐ 58 and OXA ‐ 51) was documented most in Asian Pacific Ocean. <br /> Objectives: To detect the gene blaOXA in AB strains accuired at Thong Nha‐ Dong Nai General Hospital in 2013. <br /> Methods: Multiplex PCR ‐ ELISA was performed to detect blaOXA encoded oxacillinase in AB and then, the <br /> results were confirmed by multiplex PCR. <br /> Result: In 66 AB strains tested, 83.3% genotypes resisted to carbapenem was blaOXA‐23 and 16.67% blaOXA‐58. <br /> Up to 97% of the AB strain was carrying blaOXA‐51 gene. <br /> Conclusion: It is necessary to isolate patients infected AB carrying the blaOXA, especially the genes located on <br /> plasmid in order to prevent the spread of resistance genes. <br /> **ĐH Bách Khoa TP.HCM – Đại học Quốc gia TP.HCM <br /> Bệnh viện Đa khoa Thống Nhất, Đồng Nai  <br /> Tác giả liên lạc: Ths. Nguyễn Sĩ Tuấn  <br /> ĐT: 0919563 323 <br /> Email: nsituan@gmail.com <br /> *<br /> <br /> 458<br /> <br /> Chuyên Đề Y Tế Công Cộng <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 6 * 2014 <br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br />  <br /> Key words: Acinetobacter baumannii, carbapenem, carbapenemase,blaOXA‐23, blaOXA‐51, blaOXA‐58. <br /> <br /> ĐẶT VẤN ĐỀ <br /> Trong suốt thế kỷ trước, sự bùng phát các vụ <br /> dịch Acinetobacter baumannii đa kháng thuốc gây <br /> nhiễm khuẩn bệnh viện, đặc biệt ở những bệnh <br /> nhân  suy  giảm  miễn  dịch  trong  các  đơn  vị  Hồi <br /> sức Cấp cứu (ICU), đã được ghi nhận ở khắp các <br /> vùng  địa  lý  khác  nhau  trên  toàn  thế  giới(1,10). <br /> Những  nhiễm  trùng  này  bao  gồm  nhiễm  trùng <br /> huyết, nhiễm trùng vết mổ, viêm màng não thứ <br /> cấp, nhiễm trùng đường niệu và viêm phổi liên <br /> quan  thở  máy(1,10).  Tuy  nhiên,  sự  phát  triển  gần <br /> đây  của  các  chủng  Acinetobacter  baumannii  sản <br /> xuất  Carbapenemase  lớp  D  (chủ  yếu  là <br /> oxacillinase),  là  mối  quan  tâm  lớn  nhất  đối  với <br /> cộng  đồng  khoa  học  quốc  tế,  kể  từ  khi <br /> Carbapenem  được  sử  dụng  thường  xuyên  để <br /> điều trị nhiễm các chủng Acinetobacter baumannii <br /> đa kháng kháng sinh(2,8). Vì những lý do này, đề <br /> nghị cần thiết phải có một chương trình giám sát <br /> trong đó bao gồm theo dõi sự kháng kháng sinh <br /> và các nhiễm trùng mắc phải tại ICU (là gì?), với <br /> việc  sử  dụng  các  phương  pháp  nhanh  chóng, <br /> hiệu  quả  và  đáng  tin  cậy.  Multiplex  PCR  – <br /> ELISA  là  một  phương  pháp  chẩn  đoán  mới  để <br /> trực  tiếp  phát  hiện  các  gene  mã  hóa  OXA  – <br /> carbapenemase trong các bệnh phẩm lâm sàng.  <br /> <br /> Mục tiêu nghiên cứu <br /> Xác định tỷ lệ các nhóm gene blaOXA lưu hành <br /> ở  Acinetobacter baumannii  tại  bệnh  viện  Đa khoa <br /> Thống Nhất, Đồng Nai năm 2013 bằng multiplex <br /> PCR‐ELISA. <br /> Xác  định  lại  kết  quả  bằng  phương  pháp <br /> multiplex PCR. <br /> <br /> ĐỐI TƯỢNG ‐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU <br /> Bệnh phẩm lâm sàng và chủng vi khuẩn <br /> 66 mẫu bệnh phẩm, bao gồm: 4 ca cấy máu <br /> dương  tính,  6  ca  cấy  mủ  vết  thương,  2  ca  cấy <br /> nước tiểu và 54 ca cấy đàm, được thu thập trong <br /> năm  2013  tại  Bệnh  viện  Đa  khoa  Thống  Nhất, <br /> Đồng  Nai.  Các  bệnh  phẩm  được  phân  lập  trên <br /> môi trường MacConkey (MC). Định danh được <br /> <br /> Chuyên Đề Y Tế Công Cộng <br /> <br /> tiến  hành  bằng  bộ  định  danh  API  20NE, <br /> Biomerieux, Pháp. <br /> <br /> Kiểm tra nhạy cảm kháng sinh <br /> Các  chủng  Acinetobacter  baumannii  thuần <br /> được  thử  nghiệm  nhạy  cảm  kháng  sinh  bằng <br /> phương  pháp  Kirby‐Bauer  với  đĩa  kháng  sinh <br /> của  4  nhóm:  aminoglycoside,  β‐lactam <br /> (Imipenem  và  Meropenem),  quinolon,  và <br /> polymycine  (colistin)  của  hãng  Biomerieux, <br /> Pháp.  Các  chủng  kháng  carbapenem  được  tiến <br /> hành thử nghiệm nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) <br /> của  imipenem  và  meropenem  bằng  phương <br /> pháp E‐TEST, Biomerieux, Pháp. <br /> <br /> Tách chiết DNA và blaOXA PCR <br /> Các khuẩn lạc đơn – thuần khiết (một khuẩn <br /> lạc) được huyền phù trong 500 μl multiplex lysis <br /> buffer.  Lysis  buffer  được  ủ  10  phút  trong <br /> thermoblock ở 990C.Sau đó ly tâm 1000 vòng/ 2 <br /> phút,  hút  5  μl  dịch  nổi  để  tiến  hành  PCR.  Các <br /> gene  mã  hóa  oxacillinase  được  xác  định  bằng <br /> cách  sử  dụng  kỹ  thuật  multiplex  PCR  với  các <br /> mồi đặc hiệu cho blaOXA‐23, blaOXA‐40, blaOXA‐51, blaOXA‐<br /> 58 <br /> (OXA‐23F: <br /> 5’GATCGGATTGGAGAACCAGA3’;  OXA‐23R: <br /> 5’–ATTTCTGACCGCATTTCCAT–3’;  OXA‐40F: <br /> 5’–<br /> GGAATTCCATGAAAAAATTTATACTTCC–3’; <br /> OXA‐40R: <br /> 5’–<br /> CIIIATCCCGTTAAATGATTCCAAGAIIIICTA<br /> GCG <br /> – <br /> 3’; <br /> OXA‐51F: <br /> 5’ <br /> – <br /> TAATGCTTTGATCGGCCTTG–3’;  OXA‐51R: <br /> 5’–TGGATTGCACTTCATCTTGG–3’;  OXA‐58F: <br /> 5’–AAGTATTGGGGCTTGTGCTG–3’; <br /> OXA‐<br /> 58R: 5’–CCCCTCTGCGCTCTACATAC–3’). Mỗi <br /> phản ứng multiplex PCR gồm 5 μl dịch nổi/5 μl <br /> chứng âm, 1 μl dung dịch Nucleotide, 2 μl dung <br /> dịch  mồi,  5  μl  PCR  buffer  10x,  0.2  μl  DNA <br /> polymerase 1U, thêm H2O cất 2 lần cho đủ 50 μl. <br /> <br /> PCR – ELISA <br /> Sản  phẩm  PCR  được  lai  đặc  hiệu  với  các <br /> oligonucleotide trong hệ thống ELISA. <br /> <br /> 459<br /> <br /> Nghiên cứu Y học <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 6 * 2014<br /> <br />  <br /> <br />  <br /> Hình 1. Lưu đồ PCR‐ELISA phát hiện oxacillinase ở Acinetobacter baumannii <br /> phân  lập  từ  các  bệnh  phẩm  đàm,  mủ,  máu  và <br /> Thống kê, phân tích số liệu <br /> nước  tiểu  trong  số  2.288  mẫu  cấy  dương  tính. <br /> Nghiên  cứu  được  tiến  hành  theo  phương <br /> Chọn  ngẫu  nhiên  66  chủng  để  tiến  hành  thử <br /> pháp  cắt  ngang  mô  tả,  mẫu  không  xác  suất  và <br /> nghiệm, bao gồm: 4 chủng từ cấy máu, 2 chủng <br /> thuận tiện. Số liệu được nhập bằng Epi‐data 3.1 <br /> từ  cấy  catheter  thông  tiểu,  6  chủng  từ  mủ  vết <br /> và xử lý bằng phần mềm Stata 11.0. <br /> thương hậu phẫu và 54 chủng từ đàm. <br /> <br /> KẾT QUẢ  <br /> <br /> Trong nghiên cứu trước trong năm 2013, 369 <br /> chủng  Acinetobacter  baumannii  (16,13%)  được <br /> Bảng 1: Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của 66 chủng A. Baumannii thử nghiệm <br /> Nhóm<br /> Amino glycoside<br /> Fluroquinolon<br /> Tetracycline<br /> <br /> Cephem<br /> <br /> β-lactam/ức chế β-lactamase<br /> <br /> Carbapenem<br /> Lipopeptide<br /> Ức chế biến dưỡng Folate<br /> <br /> 460<br /> <br /> Kháng sinh<br /> Amikacine<br /> Gentamycine 10µg<br /> Netilmycine<br /> Ciprofloxacine<br /> Doxycyline<br /> Cefatadizime<br /> Cefotaxime<br /> Cefpodoxim<br /> Cefuroxim<br /> Cefepime<br /> Ampicillin/Sulbactam<br /> Cephaperazone/Sulbactam<br /> Piperacillin/ tazobactam<br /> Ticarcillin/ clavulanic acid<br /> Imipenem<br /> Meropenem<br /> Colistin<br /> Bactrim<br /> <br /> Kháng (%)<br /> 81,13<br /> 95<br /> 80,39<br /> 94,12<br /> 48,72<br /> 89,89<br /> 100<br /> 100<br /> 98,04<br /> 88,89<br /> 42,86<br /> 48,28<br /> 92,59<br /> 89,19<br /> 90,2<br /> 92,73<br /> 0<br /> 86,36<br /> <br /> Nhạy (%)<br /> 11,32<br /> 5<br /> 19,61<br /> 5,88<br /> 51,28<br /> 10,11<br /> 0<br /> 0<br /> 1,96<br /> 11,11<br /> 42,86<br /> 31,03<br /> 7,41<br /> 5,41<br /> 9,8<br /> 5,45<br /> 100<br /> 9,09<br /> <br /> Trung gian (%)<br /> 7,55<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 14,29<br /> 20,69<br /> 0<br /> 5,41<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 4,55<br /> <br /> Chuyên Đề Y Tế Công Cộng <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 6 * 2014 <br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br />  <br /> Từ  bảng  1  thấy,  đa  số  A.  baumannii  thử <br /> nghiệm  kháng  cao  với  hầu  hết  các  kháng  sinh, <br /> kháng  trung  bình  với  tetracycline  và  β‐<br /> lactam/sulbactam  và  nhạy  100%  lipopeptide <br /> (colistin). <br /> <br /> 599 bp) và blaOXA‐51 (kích thước 353 bp) được phát <br /> hiện  khi  tiến  hành  điện  di  sản  phẩm  DNA <br /> khuếch  đại  trên  agarose  gel.  Nhóm  đầu  tiên <br /> trong  các  chủng  thử  nghiệm  dương  tính  với  cả <br /> OXA‐51  và  OXA‐23  (83,3%).  Nhóm  thứ  hai <br /> dương tính với cả OXA‐51 và OXA‐58 (16,67%). <br /> Nhóm thứ ba, chỉ dương tính với OXA‐58 (2 ca, <br /> chiếm 0,03%). <br /> <br />  <br />  <br /> Hình 2: Phương pháp multiplex PCR – ELISA phát <br /> hiện Oxacillinase ở A. baumannii. <br /> Bảng 2: MIC Meropenem và Imipenem ở 66 <br /> Acinetobacter baumannii thử nghiệm <br /> Số chủng<br /> A. baumannii<br /> 2<br /> 1<br /> 1<br /> 1<br /> 1<br /> 60<br /> <br /> MIC<br /> của Meropenem<br /> 0,125<br /> 0,38<br /> 0,75<br /> 4<br /> 14<br /> >32<br /> <br /> MIC<br /> của Imipenem<br /> 0,25<br /> 0,38<br /> 0,5<br /> 0,19<br /> 2<br /> >32<br /> <br /> Từ bảng 2 cho thấy, đa số các chủng trong lô <br /> thử  nghiệm  (>  92%)  có  MIC  (carbapenem)  >14 <br /> μg/ml. Đây là các chủng Acinetobacter baumannii <br /> có kiểu hình kháng carbapenem bằng E‐TEST. <br /> Bảng 3: Các nhóm gene blaOXA trong số 66 chủng A. <br /> baumannii nghiên cứu <br /> PCR-ELISA<br /> A. baumannii<br /> blaOXA-23<br /> blaOXA-40<br /> blaOXA-51<br /> blaOXA-58<br /> <br /> MÁU<br /> 4<br /> 4<br /> 0<br /> 4<br /> 0<br /> <br /> BỆNH PHẨM<br /> NƯỚC<br /> TIỂU<br /> MỦ<br /> 2<br /> 6<br /> 0<br /> 6<br /> 0<br /> 0<br /> 2<br /> 6<br /> 2<br /> 0<br /> <br /> ĐÀM<br /> 54<br /> 45<br /> 0<br /> 50<br /> 9<br /> <br /> Từ hình 3 và bảng 3 cho thấy, các nhóm gene <br /> blaOXA‐23(kích  thước  501  bp),  blaOXA‐58  (kích  thước <br /> <br /> Chuyên Đề Y Tế Công Cộng <br /> <br /> Hình 3: Kết quả được thiết lập sau khi multiplex PCR <br /> được tiến hành, sử dụng agarose gel 2% để phát hiện <br /> các gene blaOXA trong các Acinetobacter baumannii. <br /> BlaOXA‐51  là  một  gene  nội  tại  của  A. <br /> Baumannii(6). Đây là gene nằm trên nhiễm sắc thể, <br /> cần  thiết  để  điều  hoà  vùng  thượng  nguồn  bởi <br /> ISAba1 để kích thích tính kháng carbapenem. Tỷ lệ <br /> blaOXA‐51  trong  các  chủng  Acinetobacter baumannii <br /> phân  lập  từ  lâm  sàng  trong  thử  nghiệm  này  là <br /> gần  97%.  Số  liệu  này  thấp  hơn  các  phát  hiện <br /> trong  nghiên  cứu  được  tiến  hành  ở  Iran  bởi <br /> Feizabadi  và  cộng  sự  (2008),  theo  đó  có  100% <br /> chủng có gene blaOXA‐51 (3). <br /> Tỷ lệ blaOXA‐23 ở các chủng AB phân lập từ lâm <br /> sàng  trong  nghiên  cứu  này  là  83,3%.  Phát  hiện <br /> này cao hơn nhiều so tỷ lệ blaOXA‐23 chung là 66,5% <br /> phát  hiện  ở  các  quốc  gia  Châu  Á‐Thái  Bình <br /> Dương  (Ấn  Độ,  Trung  Quốc,  Thái  Lan, <br /> Singapore,  Hồng  Kông  và  Hàn  Quốc;  không  có <br /> Việt  Nam)(5).  Tuy  nhiên,  dựa  trên  nghiên  cứu <br /> khác  được  tiến  hành  bởi  Feizabadi  và  cộng  sự <br /> (2008), cho thấy có 36,5% các chủng Acinetobacter <br /> baumannii  phân  lập  từ  lâm  sàng  có  tỷ  lệ  mang <br /> gene  blaOXA‐23  khác  biệt  nhau  ở  trên  thế  giới(3). <br /> BlaOXA‐23  là  một  gene  đề  kháng  carbapenem  mắc <br /> phải  nằm  trên  plasmid  của  Acinetobacter <br /> baumannii,  vì  thế  có  một  tỷ  lệ  khác  nhau  được <br /> <br /> 461<br /> <br /> Nghiên cứu Y học <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 6 * 2014<br /> <br />  <br /> phát  hiện  so  với  gene  blaOXA‐51  là  gene  kháng <br /> carbapenem  xuất  hiện  tự  nhiên  nằm  trên  nhiễm <br /> sắc thể của AB(6,7). Tỷ lệ blaOXA‐58 trong các AB phân <br /> lập  từ  lâm  sàng  trong  nghiên  cứu  này  chiếm <br /> 16,67%.  Số  liệu  này  cao  hơn  tỷ  lệ  15%  blaOXA‐58  ở <br /> AB trong nghiên cứu của Feizabadi và cộng sự tại <br /> Iran  năm  2008(3).  BlaOXA‐58  là  gene  vừa  nằm  trên <br /> nhiễm sắc thể, vừa nằm trên plasmid nên các tỷ lệ <br /> phân lập trên thế giới có sự khác biệt(7).  <br /> Các kết quả này cũng phù hợp với các tổng <br /> kết  gần  đây  của  Tada  và  cộng  sự  công  bố  năm <br /> 2013 tại chính 2 bệnh viện Bạch Mai và Chợ Rẫy, <br /> theo đó trong cơ chế tiết enzyme phá hủy kháng <br /> sinh  carbapenem,  các  OXA‐carbapenemase  lớp <br /> D (Ambler carbapenemase lớp D) phổ biến trên <br /> toàn  thế  giới  và  khu  vực  Châu  á  –  Thái  Bình <br /> Dương lưu hành chủ yếu các chủng Acinetobacter <br /> baumannii mang gene mã hóa nhóm OXA‐23(9). <br /> <br /> quan  tới  khả  năng  lây  lan  của  chủng  vi  khuẩn <br /> này, theo đó phát tán các gene kháng thuốc, cần <br /> được điều tra nghiên cứu trong tương lai. <br /> <br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO <br /> 1.<br /> <br /> Bergogne‐Berezin  E.,  Towner  KJ.  (1996).  Acinetobacter  spp.  as <br /> nosocomial  pathogens:  microbiological,  clinical,  and <br /> epidemiological features. Clinical microbiology Reviews. 9(2) 148. <br /> <br /> 2.<br /> <br /> Brown S, Amyes SGB (2005). The sequences of seven class D <br /> β‐lactamases <br /> isolated <br /> from <br /> carbapenem‐resistant <br /> Acinetobacter  baumannii  from  four  continents.  Clinical <br /> Microbiology And Infection. 11(4), 326‐329. <br /> <br /> 3.<br /> <br /> Feizabadi  MM,  Fathollahzadeh  B,  Taherikalani  M  (2008). <br /> Antimicrobial  susceptibility  patterns  and  distribution  of <br /> blaOXA  genes  among  Acinetobacter  spp.  isolated  from <br /> patients at Tehran hospitals. J Infect Dis. 61(4). 274‐8. <br /> <br /> 4.<br /> <br /> Lain  A.  Gustavo  MC.  Saruar  B.  Anton  YP.  (2013). <br /> Carbapenem  resistance  in  Acinetobacter  baumannii.  Expert <br /> Rev Anti Infect Ther. 11(4). 395 – 409. <br /> <br /> 5.<br /> <br /> Mendes RE, Bell JM, Turnidge JD, Castanheira M, Jones RN <br /> (2009). Emergence and widespread dissemination of OXA‐23. <br /> ‐24/40 and –58  carbapenemases among  Acinetobacter  spp  in <br /> Asia‐Pacific  nations:  report  from  the  SENTRY  Surveillance <br /> Program. Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 63. 55‐59. <br /> <br /> 6.<br /> <br /> Merkier AK, Centrón D (2006). Bla‐OXA‐51‐type β‐lactamase <br /> genes  are  ubiquitous  and  vary  within  a  strain  in <br /> Acinetobacter baumannii. International Journal Of Antimicrobial <br /> Agents. 28(2). 110‐113. <br /> <br /> 7.<br /> <br /> Perez  F,  Hujer  AM,  Hujer  KM,  Decker  BK,  Rather  PN, <br /> Bonomo  RA,  (2007).  Global  challenge  of  multidrug‐resistant <br /> Acinetobacter  baumannii.  Antimicrobial  agents  and <br /> chemotherapy. 51(10). 3471‐3484. <br /> <br /> 8.<br /> <br /> Poirel  L,  Nordmann  P  (2006).  Carbapenem  resistance  in <br /> Acinetobacter  baumannii:  mechanisms  and  epidemiology. <br /> Clinical microbiology and infection. 12(9). 826‐836. <br /> <br /> 9.<br /> <br /> Tada T, Miyoshi‐Akiyama T, Kato Y (2013). Emergence of 16S <br /> rRNA  methylase‐producing  Acinetobacter  baumannii  and <br /> Pseudomonas  aeruginosa  isolates  in  hospitals  in  Vietnam. <br /> BMC infectious diseases. 13(1). 251. <br /> <br /> 10.<br /> <br /> Villegas  MV,  Hartstein  AI  (2003).  Acinetobacter  Outbreaks. <br /> 1977‐2000. Infection control and hospital epidemiology. 24(4). 284‐<br /> 295. <br /> <br /> KẾT LUẬN <br /> Acinetobacter  baumannii  kháng  cao  với  hầu <br /> hết  các  kháng  sinh,  kháng  trung  bình  với <br /> tetracycline  và  β‐lactam/sulbactam  và  nhạy <br /> 100% lipopeptide.  <br /> Sau khi hoàn thành nghiên cứu này, có bằng <br /> chứng  rõ  ràng  rằng  các  nhóm  gene  blaOXA <br /> (carbapenemase lớp D) là một vấn đề trong các <br /> chủng  Acinetobacter  baumannii  phân  lập  từ  lâm <br /> sàng  tại  bệnh  viện  Đa  khoa  Thống  Nhất,  Đồng <br /> Nai. Các nhóm blaOXA nằm trên plasmid (OXA‐23 <br /> và có thể là OXA‐58) có tỷ lệ khác biệt so với các <br /> nghiên cứu khác trên thế giới. <br /> Kỹ thuật multiplex PCR‐ELISA được chứng <br /> minh là kỹ thuật nhanh và chính xác để kiểm tra <br /> nhạy cảm kháng sinh. Tuy nhiên, vẫn còn nhiều <br /> việc  phải  cải  tiến  để  có  thể  áp  dụng  kỹ  thuật <br /> multiplex  PCR  như  là  1  chọn  lựa  thay  thế  cho <br /> các xét nghiệm nhạy cảm kháng sinh hiện nay. <br /> <br /> KIẾN NGHỊ <br /> <br />   <br /> <br /> Ngày nhận bài báo:    <br /> <br />  <br /> <br /> 10/5/2014 <br /> <br /> Ngày phản biện nhận xét bài báo:   16/6/2014 <br /> Ngày bài báo được đăng:  <br />  <br /> <br />  <br /> <br /> 14/11/2014 <br /> <br /> Khả năng Acinetobacter baumannii tăng trưởng <br /> trong màng biofilms đặt ra một mối đe doạ liên <br />  <br /> <br />  <br /> <br /> 462<br /> <br />  <br /> <br /> Chuyên Đề Y Tế Công Cộng <br /> <br />