Sự thay đổi phân bố Lysyl oxidase tại tế bào nội mô mạch máu võng mạc trong môi trường nồng độ glucose cao

Chia sẻ: _ _ | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:3

Thêm vào BST

Báo xấu

1
lượt xem 0
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bài viết trình bày đánh giá sự thay đổi phân bố Lysyl oxidase (LOX) tại tế bào nội mô mạch máu võng mạc trong môi trường nồng độ glucose cao và ảnh hưởng của nó tới độ thẩm thấu của tế bào.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Sự thay đổi phân bố Lysyl oxidase tại tế bào nội mô mạch máu võng mạc trong môi trường nồng độ glucose cao

vietnam medical journal n01&2 - february- 2020 bởi tính hiệu quả của nó, dễ sử dụng và không lực lượng này, kiên quyết không thanh quyết gây tác hại như hóa chất (42,9% hộ gia đình toán đối với địa phương không hoàn thành trang bị) hay nhang muỗi (19,7% trang bị nhang nhiệm vụ. Xem xét công tác tuyên truyền trên muỗi), 9,5% hộ gia đình có trang bị máy loa-đài phát thanh, tờ rơi và cán bộ y tế vì hiệu đuổi/hút muỗi. Kết quả của nghiên cứu của quả không cao như mong đợi. Nhấn mạnh khẩu Nguyễn Thị Hải Hà là 33% đối tượng sử dụng hiệu “không có lăng quăng không có SXH” khi đi hóa chất [2]. Tình trạng vật chưa có lăng quăng: vãng gia. 27,9% hộ gia đình tại thời điểm điều tra có dụng cụ chứa nước có lăng quăng. Có thể nói trong TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Lê Thị Tài, Nguyễn Văn Hiến, Lê Thị Lan Anh, thời điểm mùa mưa thì tỷ lệ này là con số cần Hoàng Thị Hải Vân, Vũ Minh Tuấn (2013), nghiêm túc chú ý và có biện pháp xử lý, tránh Kiến thức, thực hành về bệnh SXH Dengue của bệnh SXH có điều kiện lây lan trong cộng đồng. người dân tại hai xã, huyện Chư Sê, tỉnh Gia Lai năm 2013, Tạp chí Y học dự phòng, tập XXV, số 6 V. KẾT LUẬN (166) 2015 Số đặc biệt. Vãng gia không đạt mục tiêu chiến dịch 2. Nguyễn Thị Hải Hà và cộng sự (2012), Kiến (90%). Cần tập trung vào giải pháp để hoạt thức, thái độ, thực hành về phòng chống SXH của người dân tại xã Minh Đạo thuộc huyện Tiên Du, động này hiệu quả hơn như: Nâng cao hiểu biết tỉnh Bắc Ninh năm 2016. của lực lượng vãng gia về bệnh sốt xuất huyết, 3. Ủy ban nhân dân tỉnh Bình Dương (2018), kế ban chỉ đạo chiến dịch các cấp tăng cường giám hoạch tổ chức chiến dịch tổng vệ sinh môi trường sát để nắm rõ tình hình thực hiện nhiệm vụ của phòng chống SXH, tay chân miệng và zika năm 2018. SỰ THAY ĐỔI PHÂN BỐ LYSYL OXIDASE TẠI TẾ BÀO NỘI MÔ MẠCH MÁU VÕNG MẠC TRONG MÔI TRƯỜNG NỒNG ĐỘ GLUCOSE CAO Nguyễn Ngân Hà1,2,3, Nguyễn Minh Phú2, Trần Huy Thịnh1, Sayon Roy3 TÓM TẮT Từ khoá: Lysyl oxidase, tế bào nội mô mạch máu võng mạc, độ thẩm thấu tế bào. 52 Mục tiêu: Đánh giá sự thay đổi phân bố lysyl oxidase (LOX) tại tế bào nội mô mạch máu võng mạc SUMMARY trong môi trường nồng độ glucose cao và ảnh hưởng của nó tới độ thẩm thấu của tế bào. Phương pháp CHANGES OF LYSYL OXIDASE nghiên cứu: Nghiên cứu thử nghiệm. Tế bào nội mô DISTRIBUTION IN RETINAL ENDOTHELIAL mạch máu võng mạc chuột được chia thành 3 nhóm CELLS UNDER HIGH GLUCOSE CONDITION nuôi cấy trong môi trường bình thường, môi trường Purpose: Evaluate the changes of lysyl oxidase nồng độ glucose cao, và môi trường nồng độ glucose (LOX) distribution and its effect on cell permeability in cao ủ với LOXsiRNA. Kỹ thuật nhuộm miễn dịch huỳnh retinal endothelial cells under high glucose conditon. quang giúp xác định mật độ LOX. Kỹ thuật phân tích Methods: Experimental research. Rat retinal độ thẩm thấu sử dụng FITC-dextran được dùng để endothelial cells were grown in normal, high glucose đánh giá độ thẩm thấu của tế bào. Kết quả: Mật độ medium, and high glucose medium with LOXsiRNA. LOX trong protein toàn phần và chất nền ngoại bào Immunostatining was performed to detemine LOX tăng trong môi trường glucose nồng độ cao. Bên cạnh density in 3 groups. The in vitro permeability assay đó, độ thẩm thấu của tế bào tăng khi nuôi cấy trong using FITC-dextran was performed to assess cell điều kiện nồng độ glucose cao và được điều hoà bởi permeability. Results: LOX density in total protein LOXsiRNA. Kết luận: Môi trường glucose nồng độ and extracellular protein increased under high glucose cao gây tăng mật độ LOX tại tế bào nội mô mạch máu condition. Cell permeability increased significantly in võng mạc và điều hoà LOX có thể giúp ngăn ngừa cells grown under high glucose condition and was hiện tượng tăng độ thẩm thấu tế bào. regulated by LOXsiRNA. Conclusion: High glucose promotes LOX overexpression in total protein and extracellular protein. Moreover, blockage of LOX 1Trường Đại học Y Hà Nội expression helps reduce cell permeability. 2Bệnh viện Mắt Trung ương Keywords: Lysyl oxidase, retinal endothelial cells, 3Trường Đại học Boston, Hoa Kỳ cell permeability. Chịu trách nhiệm chính: Nguyễn Ngân Hà I. ĐẶT VẤN ĐỀ Email: dr.nganha@gmail.com. Ngày nhận bài: 9.12.2019 Cơ chế sinh bệnh của bệnh lý vi mạch do đái Ngày phản biện khoa học: 13.01.2020 tháo đường nói chung và bệnh lý võng mạc đái Ngày duyệt bài: 21.01.2020 tháo đường nói riêng, bị ảnh hưởng bởi sự thay 204
TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 487 - THÁNG 2 - SỐ 1&2 - 2020 đổi về chất lượng và số lượng các thành phần được nhuộm miễn dịch huỳnh quang với kháng màng đáy mạch máu [1]. Sự ổn định về hình thể nguyên phát là kháng thể kháng LOX dòng thái và chức năng của màng đáy phụ thuộc vào chuột (1:50, Catalog No. 373995, Santa Cruz, các liên kết chéo giữa các bó sợi collagen mà Dallas, Texas, Hoa Kỳ) và kháng thể thứ phát là quá trình hình thành được xúc tác bởi LOX [2]. kháng thể kháng chuột. Sinh hiển vi điện tử LOX là một enzym xúc tác quá trình oxy hoá được dùng để chụp lại những hình ảnh nhuộm. khử peptidyl và hydroxylysin dư thừa tạo nên các Sự khác biệt về mật độ phân bố LOX của 3 nhóm sợi collagen và elastin không hoà tan hình thành được phân tích bằng phần mềm ImageJ (Wayne nên màng đáy hoàn chỉnh [2]. Nhiều nghiên cứu Rasband, National Institutes of Health, Bethesda, đã chỉ ra vai trò quan trọng của liên kết chéo MD, Hoa Kỳ). qua trung gian LOX đối với tính toàn vẹn và chức 2.4.4. Xác định độ thẩm thấu tế bào. Sau khi năng của mô, đặc biệt là mô mạch máu và mô 7 ngày nuôi cấy và ủ với LOXsiRNA, dung dịch liên kết [2, 5]. Cùng nằm trong nhóm bệnh có nuôi cấy được thay thế bởi 600 μl FITC-dextran tổn thương màng đáy mạch máu nhưng hiểu biết 0.5 mg/ml trong 1 giờ. Tiếp đó, 200 μl dung dịch về vai trò của LOX trong bệnh võng mạc đái tháo FITC-dextran từ 3 nhóm được bơm vào các khay đường còn chưa rõ ràng. Do đó, trong nghiên đưa vào máy phân tích độ thẩm thấu tế bào cứu này, chúng tôi đánh giá sự thay đổi phân bố (SpectraMax Gemini Vmax, Molecular Devices, LOX tại tế bào nội mô mạch máu võng mạc trong SunnySunnyvale, CA). môi trường nồng độ glucose cao và ảnh hưởng 2.5. Xử lý số liệu. Tất cả các số liệu được của nó tới độ thẩm thấu của tế bào. tính theo giá trị trung bình. Các giá trị của nhóm đối chứng được coi là 100% và giá trị của các II. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU nhóm glucose nồng độ cao được tính theo phần 2.1. Đối tượng nghiên cứu: trăm của nhóm đối chứng. So sánh giữa các - Nhóm nghiên cứu: Nhóm các tế bào nội mô nhóm sử dụng thuật toán 1-way ANOVA theo mạch máu võng mạc chuột nuôi cấy trong môi kiểm định Bonferroni. Mức p < 0.05 được coi là trường glucose nồng độ cao và nhóm các tế bào có ý nghĩa thống kê. nội mô mạch máu võng mạc chuột nuôi cấy trong môi trường glucose nồng độ cao ủ với III. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU LOXsiRNA. 3.1. Sự phân bố LOX trong protein toàn - Nhóm đối chứng: Các tế bào nội mô mạch phần. Phân tích hình ảnh thu được qua kỹ thuật máu võng mạc chuột nuôi cấy trong môi trường nhuộm miễn dịch huỳnh quang cho thấy mật độ nồng độ glucose bình thường. LOX tại các tế bào được nuôi cấy trong môi 2.3. Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu thử trường nồng độ glucose cao tăng đáng kể so với nghiệm. Mỗi thử nghiệm được lặp lại 6 lần. nhóm tế bào nuôi cấy trong môi trường bình 2.4. Phương pháp nghiên cứu thường (179 ± 7% nhóm đối chứng, p
vietnam medical journal n01&2 - february- 2020 3.2. Sự phân bố LOX trong chất nền trong protein toàn phần và chất nền ngoại bào. ngoại bào Thêm vào đó, khi tế bào nuôi cấy trong môi Kết quả phân tích qua phần mềm ImageJ cho trường glucose nồng độ cao được ủ LOXsiRNA, thấy mật độ LOX tăng rõ rệt tại chất nền ngoại mật độ LOX giảm về gần mức bình thường. Bên bào của các tế bào nuôi cấy trong môi trường cạnh đó, độ thẩm thấu của tế bào tăng rõ rệt khi nồng độ glucose cao (160 ± 7% nhóm đối tế bào được nuôi cấy ở môi trường glucose nồng chứng, p