Tìm hiểu R-plasmid ở một số chủng Salmonella typhi phân lập tại Hà Nội, Huế và thành phố Hồ Chí Minh

Chia sẻ: Sunshine_3 Sunshine_3 | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:6

Thêm vào BST

Báo xấu

66
lượt xem 5
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Thương hàn là một bệnh truyền nhiễm hay gây thành dịch, do một số loài thuộc giống Salmonella gây nên, trong đó hay gặp nhất là do Salmonella typhi. Nhiều nghiên cứu trên thế giới cho thấy S. typhi đề kháng kháng sinh chủ yếu qua R- plasmid- đó là những phân tử ADN mang thông tin di truyền nằm ngoài nhiễm sắc thể với các gen mã hoá cho sự đề kháng nhiều kháng sinh khác nhau. Cho đến nay, tại Việt Nam, S. typhi kháng đa kháng sinh đã xuất hiện ở nhiều tỉnh, thành phố và đã gây nhiều...

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Tìm hiểu R-plasmid ở một số chủng Salmonella typhi phân lập tại Hà Nội, Huế và thành phố Hồ Chí Minh

TCNCYH 23 (3) 2003 T×m hiÓu R-plasmid ë mét sè chñng Salmonella typhi ph©n lËp t¹i Hµ Néi, HuÕ vµ thµnh phè Hå ChÝ Minh NguyÔn §¾c Trung1, Lª V¨n Phñng2 vµ Lª Huy ChÝnh2 1 §¹i häc Y Th¸i Nguyªn 2 §¹i häc Y Hµ Néi C¸c chñng Salmonella typhi ®a ®Ò kh¸ng hiÖn ®· lan trµn tíi hÇu hÕt c¸c vïng trong c¶ n−íc. Nghiªn cøu ®· dïng 90 chñng Salmonella typhi ph©n lËp tõ Hµ Néi, HuÕ vµ Thµnh phè Hå ChÝ Minh ®Ó nghiªn cøu vÒ c¸c plasmid cña chóng. KÕt qu¶ cho thÊy: §· t×m thÊy hai plasmid 120 Kb vµ 102 Kb ë c¸c chñng kÓ trªn, plasmid 120 Kb cã 2 copy. Plasmid 120 Kb lµ mét R-plasmid lín, cã kh¶ n¨ng tù truyÒn cho chñng kh¸c vµ mang Ýt nhÊt 5 gene kh¸ng kh¸ng sinh: chloramphenicol, tetracycline, ampicillin, trimethoprim vµ sulphamethoxazole. Ph©n tÝch b»ng enzyme h¹n chÕ EcoR I cho thÊy, c¸c R-plasmid tõ c¸c chñng Salmonella ph©n lËp ë Hµ Néi, HuÕ vµ Thµnh phè Hå ChÝ Minh ®Òu gièng nhau. I. ®Æt vÊn ®Ò truyÒn tÝnh kh¸ng thuèc cña vi khuÈn ë céng ®ång vµ trong bÖnh viÖn cßn rÊt h¹n chÕ. §Ó Th−¬ng hµn lµ mét bÖnh truyÒn nhiÔm hay gãp phÇn lµm râ thªm vÒ vÊn ®Ò nµy, chóng t«i g©y thµnh dÞch, do mét sè loµi thuéc gièng tiÕn hµnh ®Ò tµi víi môc tiªu: Salmonella g©y nªn, trong ®ã hay gÆp nhÊt lµ 1. T×m hiÓu vÒ plasmid ë S. typhi vµ nghiªn do Salmonella typhi. cøu mét sè ®Æc ®iÓm cña chóng (®é lín, sè NhiÒu nghiªn cøu trªn thÕ giíi cho thÊy S. l−îng c¸c b¶n sao). typhi ®Ò kh¸ng kh¸ng sinh chñ yÕu qua R- 2. X¸c ®Þnh R-plasmid tù truyÒn ë c¸c plasmid- ®ã lµ nh÷ng ph©n tö ADN mang th«ng chñng S. typhi ®a ®Ò kh¸ng qua tiÕp hîp. tin di truyÒn n»m ngoµi nhiÔm s¾c thÓ víi c¸c gen m· ho¸ cho sù ®Ò kh¸ng nhiÒu kh¸ng sinh 3. So s¸nh R-plasmid tù truyÒn cña c¸c kh¸c nhau. chñng S. typhi ph©n lËp tõ nh÷ng vïng kh¸c nhau trong n−íc. Cho ®Õn nay, t¹i ViÖt Nam, S. typhi kh¸ng ®a kh¸ng sinh ®· xuÊt hiÖn ë nhiÒu tØnh, thµnh II. §èi t−îng vµ ph−¬ng ph¸p phè vµ ®· g©y nhiÒu æ dÞch th−¬ng hµn l−u nghiªn cøu hµnh trong toµn quèc [1]. Møc ®é vµ kiÓu c¸ch 1. §èi t−îng nghiªn cøu kh¸ng thuèc cña vi khuÈn còng ngµy mét gia t¨ng vµ phøc t¹p. §øng tr−íc thùc tr¹ng ®ã, 90 chñng S. typhi ®−îc ph©n lËp tõ c¸c bÖnh viÖc gi¸m s¸t tû lÖ vµ møc ®é kh¸ng thuèc cña nh©n th−¬ng hµn: vi khuÈn ®· ®−îc tiÕn hµnh th−êng xuyªn t¹i nhiÒu khu vùc. Tuy vËy, nh÷ng nghiªn cøu vÒ - Hµ Néi : 30 chñng c¬ chÕ ®Ò kh¸ng còng nh− ph−¬ng thøc lan 32
TCNCYH 23 (3) 2003 - HuÕ : 30 chñng * Enzyme h¹n chÕ EcoR I (BioRad, Ph¸p) - Tp Hå ChÝ Minh : 30 chñng * Kh¸ng sinh bét vµ khoanh giÊy kh¸ng sinh (Meiji, NhËt B¶n). Nh÷ng chñng S. typhi ®−îc nghiªn cøu ®Òu ®· ®−îc x¸c ®Þnh møc ®é nh¹y c¶m víi 4 3. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu kh¸ng sinh: chloramphenicol (CHL), ampicillin 3.1. X¸c ®Þnh l¹i c¸c chñng S. typhi: (AMP), tetracycline (TET) vµ co-trimoxazole (SXT). Nh÷ng chñng kh¸ng CHL ®Òu lµ nh÷ng Theo th−êng quy chuÈn cña WHO [9] chñng ®a kh¸ng thuèc (kh¸ng víi 2 kh¸ng sinh 3.2. Kü thuËt t¸ch chiÕt ADN vµ nghiªn trë lªn). cøu vÒ plasmid: 2. VËt liÖu Theo ph−¬ng ph¸p cña Kado vµ Liu [6]. * Chñng vi khuÈn mÉu: Do tr−êng ®¹i häc - X¸c ®Þnh kÝch cì plasmid qua ®iÖn di trªn Gifu, NhËt B¶n cung cÊp (40-Tsukasa-machi, gel agarose 0,8% vµ tÝnh to¸n b»ng ®å thÞ trªn Gifu, Japan), gåm E.coli V517 (mang 8 thang logarit. plasmid mÉu, ®· biÕt tr−íc kÝch cì) vµ E.coli - X¸c ®Þnh sè l−îng b¶n sao c¸c plasmid GGS 75 (nh¹y c¶m víi CHL, kh¸ng víi theo c«ng thøc: Nalidixic axit). % ADN plasmid KÝch cì chromosome Sè l−îng b¶n sao = x % ADN chromosome KÝch cì plasmid 3.3. X¸c ®Þnh R-plasmid tù truyÒn qua - 63/ 69 chñng S. typhi kh¸ng CHL (91,3%) tiÕp hîp: cã plasmid. Theo Roy Curtiss (1981) [8]. - 6/ 69 chñng S. typhi kh¸ng CHL (8,7%) III. KÕt qu¶ kh«ng t×m thÊy plasmid, 6 chñng nµy lµ nh÷ng chñng ®Æc biÖt. Chóng ®a kh¸ng thuèc (theo hå 1. Tû lÖ mang plasmid ë 90 chñng S. typhi s¬) nh−ng l¹i kh«ng t×m thÊy plasmid nµo, v× ph©n lËp t¹i Hµ Néi, HuÕ vµ Tp Hå ChÝ vËy, chóng ®· ®−îc kiÓm tra l¹i møc ®é nh¹y Minh: c¶m víi 4 kh¸ng sinh CHL, AMP, TET vµ CHL Sè l−îng plasmid ∑ SXT. KÕt qu¶ cho thÊy cã 1 chñng trë nªn nh¹y c¶m víi c¸c kh¸ng sinh ®−îc thö, 5 chñng cßn (n=90) 0 1 2 l¹i vÉn gi÷ nguyªn kh¶ n¨ng ®Ò kh¸ng. Nh¹y c¶m 20 1 0 21 2. Sè l−îng vµ ®é lín plasmid §Ò kh¸ng 6 31 32 69 Sau khi tiÕn hµnh t¸ch chiÕt plasmid theo quy tr×nh cña Kado vµ Liu vµ quan s¸t trªn ∑ 26 32 32 90 ®iÖn di gel agarose chóng t«i ®· x¸c ®Þnh ®−îc % 28,8 35,6 35,6 sù xuÊt hiÖn cña 2 lo¹i plasmid ë c¸c chñng S. typhi ®−îc nghiªn cøu (H×nh 1). - 64/ 90 chñng S. typhi (71,1%) cã plasmid. 33
TCNCYH 23 (3) 2003 H×nh 1 : Hai lo¹i plasmid ë Salmonella typhi 1. S. typhi VCMM 1142 4. S. typhi VCMM 1022 7. S. typhi VCMM 465 2. S. typhi VCMM 250 5. S. typhi VCMM 1024 8. S. typhi VCMM 466 3. S. typhi VCMM 254 6. S. typhi VCMM 463 9. S. typhi VCMM 1048 10. S. typhi VCMM 470 11. S. typhi VCMM 468 (chñng nh¹y c¶m) - Lo¹i plasmid thø nhÊt xuÊt hiÖn ë ®a sè 3. Sè l−îng b¶n sao plasmid 120 Kb nh÷ng chñng S. typhi ®a kh¸ng thuèc ph©n lËp Trªn c¬ së kÕt qu¶ tû lÖ ADN cña plasmid ë c¶ ba khu vùc ®−îc nghiªn cøu. Qua ®iÖn di vµ chromosome t−¬ng øng qua phÐp ®o mËt ®é trªn gel agarose, ë c¸c chñng ®a kh¸ng thuèc, mµu hai thµnh phÇn nµy, kÝch cì plasmid vµ chóng t«i thÊy b¨ng ADN plasmid nµy ®Òu chromosome cña chñng S. typhi ®· biÕt, cho xuÊt hiÖn ë mét vÞ trÝ gièng nhau. ViÖc lËp ®å phÐp chóng t«i x¸c ®Þnh ®−îc sè b¶n sao ®Æc thÞ logarit biÓu diÔn mèi t−¬ng quan gi÷a kÝch tr−ng so víi chromosome cña plasmid 120 Kb cì plasmid vµ kho¶ng c¸ch ®iÖn di t−¬ng ®èi lµ 2. cña chóng ®· cho phÐp chóng t«i x¸c ®Þnh ®−îc kÝch cì cña plasmid nµy lµ kho¶ng 120 Kb. 4. R-plasmid tù truyÒn ë S. typhi ®a Plasmid 120 Kb nµy ®Òu kh«ng thÊy xuÊt hiÖn kh¸ng thuèc ë bÊt kú mét chñng S. typhi nh¹y c¶m CHL nµo Sù xuÊt hiÖn phæ biÕn cña plasmid 120 Kb ë ®−îc nghiªn cøu. ®a sè nh÷ng chñng S. typhi ®a kh¸ng thuèc - Ngoµi plasmid 120 Kb kÓ trªn, qua nghiªn ph©n lËp t¹i Hµ Néi, HuÕ vµ Tp Hå ChÝ Minh, cøu chóng t«i còng ®· x¸c ®Þnh ®−îc plasmid còng nh− kÝch cì vµ sè l−îng b¶n sao cña thø 2 víi kÝch cì kho¶ng 102 Kb (H×nh 1). plasmid nµy cho phÐp hiÓu r»ng ®©y cã thÓ lµ Plasmid 102 Kb kh«ng tån t¹i riªng rÏ mµ mét plasmid tiÕp hîp mang mét sè gen kh¸ng th−êng ®i kÌm víi plasmid 120 Kb ë nh÷ng thuèc cña vi khuÈn (R-plasmid tù truyÒn). chñng ®a kh¸ng thuèc nµy. Tuy nhiªn, plasmid nµy cßn ®−îc t×m thÊy duy nhÊt ë mét chñng S. §Ó x¸c ®Þnh vai trß cña plasmid nµy trong c¬ chÕ ®Ò kh¸ng còng nh− sù lan truyÒn cña typhi nh¹y c¶m CHL ph©n lËp t¹i HuÕ. Nh− mét sè gen kh¸ng kh¸ng sinh ë S. typhi, chóng vËy, cã thÓ s¬ bé nghÜ r»ng plasmid nµy kh«ng t«i ®· tiÕn hµnh thùc nghiÖm tiÕp hîp gi÷a mét mang gen kh¸ng thuèc. chñng S. typhi kh¸ng CHL (mang 1 plasmid 120 Kb) nh−ng nh¹y c¶m NAL víi chñng 34
TCNCYH 23 (3) 2003 E.coli GGS 75 nh¹y c¶m CHL (kh«ng mang ®−îc theo dâi cïng n»m trªn plasmid nµy vµ plasmid) nh−ng kh¸ng NAL. plasmid nµy ®· ®−îc truyÒn hoµn chØnh sang chñng nhËn E.coli (v× ë chñng vi khuÈn lai xuÊt KÕt qu¶ thùc nghiÖm tiÕp hîp cho thÊy tÝnh hiÖn mét b¨ng ADN cã cïng vÞ trÝ víi b¨ng kh¸ng thuèc cña S. typhi ®· ®−îc truyÒn sang plasmid 120 Kb ë chñng S. typhi tr−íc khi cho chñng E.coli GGS 75 th«ng qua R-plasmid mang vµo tiÕp hîp (H×nh 2). 120 Kb. C¸c gen ®Ò kh¸ng víi nh÷ng kh¸ng sinh th«ng th−êng (CHL, AMP, TET vµ SXT) H×nh 2 : KÕt qu¶ t¸ch chiÕt ADN plasmid sau thùc nghiÖm tiÕp hîp 1. E. coli V517 (chøng plasmid) 2. E. coli GGS 75 3. S. typhi VCMM 250 4. E. coli lai 5. KÕt qu¶ ph©n tÝch R-plasmid tù truyÒn Cã thÓ thÊy, h×nh ¶nh c¸c m¶nh c¾t c¸c b»ng enzyme h¹n chÕ: plasmid ë 3 vïng kh¸c nhau lµ gièng nhau. Nghiªn cøu b−íc ®Çu dïng enzyme h¹n chÕ Iv. Bµn luËn EcoR I ph©n tÝch R-plasmid 120 Kb ë 3 chñng 1. Tû lÖ mang plasmid ë S. typhi: S. typhi ®a kh¸ng thuèc ph©n lËp t¹i Hµ Néi, Trong sè 69 chñng S. typhi ®a ®Ò kh¸ng HuÕ vµ Tp Hå ChÝ Minh ®−îc tr×nh bµy trong ®−îc nghiªn cøu, ®· t×m thÊy 2 lo¹i plasmid. h×nh 3. Cã 63 (91,3%) chñng cã mang Ýt nhÊt 1 plasmid cßn 6 chñng kh«ng t×m thÊy plasmid nµo. HiÖn t−îng vi khuÈn ®Ò kh¸ng trë nªn nh¹y c¶m víi c¸c kh¸ng sinh sau mét thêi gian dµi l−u gi÷ vµ cÊy chuyÓn ®· ®−îc y v¨n ghi nhËn tõ l©u. Trong nghiªn cøu nµy, 1 chñng S. typhi ®· cã hiÖn t−îng nh− vËy, hiÖn t−îng nµy ®−îc gi¶i thÝch lµ do chóng ®· mÊt c¸c gen ®Ò kh¸ng víi nh÷ng kh¸ng sinh ®ã khi gi÷ chóng trong H×nh 3. C¸c m¶nh c¾t plasmid b»ng EcoR I nh÷ng ®iÒu kiÖn kh«ng cã ¸p lùc chän läc. Cßn hiÖn t−îng kh«ng t×m thÊy plasmid vµ gi÷ 1. Hµ Néi; 2. HuÕ; 3. Kiªn Giang nguyªn kh¶ n¨ng ®Ò kh¸ng víi c¸c kh¸ng sinh th«ng th−êng (nghÜa lµ c¸c gen kh¸ng thuèc 35
TCNCYH 23 (3) 2003 vÉn tån t¹i trong tÕ bµo vi khuÈn) ë 5 chñng S. nhau. Tuy ch−a cã ®iÒu kiÖn x¸c ®Þnh chÝnh typhi cßn l¹i cã thÓ do c¸c plasmid ®· bÞ ph©n x¸c kÝch cì cña c¸c m¶nh c¾t, song cã thÓ thÊy ly thµnh nh÷ng thµnh phÇn cã kÝch cì nhá h¬n râ trªn H×nh 3: 3 plasmid ë 3 chñng S. typhi ®a [2], nªn víi kü thuËt t¸ch chiÕt plasmid ®· sö kh¸ng thuèc ph©n lËp t¹i ba khu vùc kh¸c nhau dông, kh«ng ph¸t hiÖn ®−îc; hoÆc cã thÓ do c¸c ®Òu gièng nhau. transposon mang c¸c gen kh¸ng thuèc ®· C¸c R-plasmid tù truyÒn, gièng nhau lµ mét chuyÓn vÞ trÝ tõ R-plasmid vµo nhiÔm s¾c thÓ chØ ®iÓm dÞch tÔ häc ph©n tö quan träng ®Ó coi cña vi khuÈn [3, 5]. chóng cã cïng mét nguån gèc. Nh− vËy, víi 2. §Æc ®iÓm cña c¸c plasmid: viÖc bïng ph¸t dÞch th−¬ng hµn kh¸ng thuèc tõ Plasmid lín th−êng cã cÊu t¹o gåm ®Çy ®ñ Kiªn Giang n¨m 1993, cã thÓ coi Kiªn Giang c¸c thµnh phÇn cÇn thiÕt ®Ó cã thÓ tù truyÒn cho ®· lµ nguån gèc cña c¸c chñng S. typhi ®a ®Ò vi khuÈn kh¸c [3, 4]. Plasmid 120 kb trong kh¸ng vµ tõ ®ã, chóng lan trµn ra c¶ n−íc. nghiªn cøu nµy còng lµ mét plasmid lín vµ ®· Ph©n tÝch nh− trªn, mét lÇn n÷a, nh¾c nhë ®−îc chøng minh lµ cã kh¶ n¨ng tù truyÒn: chóng ta ph¶i dïng kh¸ng sinh thËn träng, ph¶i plasmid nµy xuÊt hiÖn ë c¸c chñng lai (H×nh 2) gi÷ vÖ sinh m«i tr−êng tèt ®Ó tr¸nh sù xuÊt hiÖn sau khi tiÕp hîp mµ kh«ng cÇn t¸c ®éng b»ng vµ lan trµn c¸c chñng vi khuÈn kh¸ng thuèc, bÊt cø ®iÒu kiÖn nµo kh¸c. Sè l−îng b¶n sao g©y ra nh÷ng hËu qu¶ trÇm träng. plasmid nµy rÊt thÊp (2 b¶n sao) phï hîp víi V. KÕt luËn quy luËt th−êng thÊy ë vi khuÈn: kÝch cì plasmid th−êng tû lÖ nghÞch víi sè c¸c b¶n sao 1. Hai plasmid víi kÝch cì kho¶ng 120 vµ sè c¸c b¶n sao plasmid lµ h»ng ®Þnh ë mét Kb vµ 102 Kb ®· ®−îc t×m thÊy ë c¸c chñng S. loµi vi khuÈn nhÊt ®Þnh, vÝ dô 2 plasmid: typhi ph©n lËp t¹i ba khu vùc ®−îc nghiªn cøu. pBR322 (kÝch cì 4,36 Kb) cã 15-20 b¶n sao, Plasmid 120 Kb cã 2 b¶n sao. pUC (kÝch cì 2,69 Kb) cã tíi 500-700 b¶n sao [7]. 2. Plasmid 120 Kb lµ mét R- plasmid tù truyÒn, mang Ýt nhÊt c¸c gen ®Ò kh¸ng víi Plasmid 120 kb chØ xuÊt hiÖn ë c¸c chñng chloramphenicol, ampicillin, tetracycline vµ ®a ®Ò kh¸ng, kh«ng thÊy ë bÊt cø chñng nh¹y trimethoprim/sulfamethoxazole. Qua tiÕp hîp, c¶m nµo. Nh− vËy, plasmid nµy cã liªn quan tíi toµn bé kiÓu c¸ch ®Ò kh¸ng nµy cña S. typhi ®· c¬ chÕ ®Ò kh¸ng còng nh− sù lan truyÒn cña ®−îc truyÒn sang chñng nhËn E. coli th«ng qua mét sè gen kh¸ng thuèc ë nh÷ng chñng S. typhi R-plasmid 120 Kb. nµy. Nh÷ng chñng nhËn ®−îc plasmid nµy sau tiÕp hîp ®Òu trë nªn ®Ò kh¸ng víi c¸c kh¸ng 3. Ph©n tÝch b−íc ®Çu R-plasmid tù sinh vèn tr−íc ®ã chóng vÉn nh¹y c¶m, ®ång truyÒn ë c¸c chñng S. typhi ph©n lËp t¹i ba khu thêi, kiÓu c¸ch ®Ò kh¸ng cña c¸c chñng lai vùc b»ng enzyme h¹n chÕ EcoRI, s¬ bé cho gièng hÖt kiÓu c¸ch ®Ò kh¸ng cña c¸c chñng thÊy c¸c R-plasmid gièng nhau. cho; v× vËy, plasmid ®· truyÒn nµy ®· mang c¸c Tµi liÖu tham kh¶o gene ®Ò kh¸ng. Nh÷ng plasmid nh− thÕ, trong y v¨n gäi lµ c¸c R-plasmid [3]. 1. Lª §¨ng Hµ (1996): T×nh h×nh th−¬ng hµn ®a kh¸ng thuèc t¹i viÖn Y häc l©m sµng 3. So s¸nh c¸c plasmid tù truyÒn: c¸c bÖnh nhiÖt ®íi (1988-1995). Bé Y tÕ, ViÖn Trªn ®iÖn di gel agarose c¸c plasmid 120 YHLSCBN§. Tµi liÖu tËp huÊn. Kb sau khi c¾t b»ng EcoR I ®Òu xuÊt hiÖn c¸c 2. Chopra G. S., Basu S. K., Bhattacharya b¨ng (m¶nh c¾t) víi sè l−îng vµ vÞ trÝ gièng S. R (1992): Present phage types and antibiotic 36
TCNCYH 23 (3) 2003 susceptibility of Salmonella. Indian J Pathol 7. Sambrook J., Fritsch E. F., Maniatis T. Microbiol. 35 (4): 345-350. (1989): Molecular cloning. A laboratory manual. 2nd ed, Vol 1. New York: Cold Spring 3. Fox A. P.: Bacterial Genetics. In: Harbor Laboratory Press. Medical microbiology. 2nd ed. Edit. by Murray P. R., Kobayashi G. S., Pfaller M. A., 8. Roy Curtiss (1981): Gene Transfer, Rosenthal K. S. Missouri: Mosby. 1994: 28-45. Mannal of Methods for General Bacterilogy, American Society for Microbiology, 14: 243- 4. Hoa N. T., Diep T. S., Wain J. et al 265. (1998): Community-acquired septicaemia in southern Viet Nam: the importance of 9. WHO (1991). Blood culture. In: Basic multidrug- resistant Salmonella typhi. Trans R Laboratory Procedures in Clinical Soc Trop Med Hyg. 92 (5): 503-508. Bacteriology. 21-25. 5. Holmes R. K. (1986): Genitics. In: C¶m ¬n: C«ng tr×nh nµy ®−îc thùc Medical microbiology. 2nd ed. Edit. by Baron S. hiÖn t¹i labo Trung t©m Y sinh häc vµ bé California: Addison-Wesley. 243: 261-264. m«n Vi sinh Y häc tr−êng §¹i häc Y Hµ Néi. 6. Kado C. I., Liu S. T. (1981): Rapid procedure for detection and isolation of large and small plasmids. J Bacteriol. 145: 1365- 1373. Summary r-plasmid in several salmonella typhi strains isolated from Ha Noi, Hue and Ho Chi Minh city The multi-antibiotic resistant Salmonella typhi strains have already spread over the country. Authors analysed 90 Salmonella typhi strains isolated in Ha Noi, Hue and Ho Chi Minh city and had some observation as follows. - Two plasmids with size about 120 kilobase (Kb) and 102 Kb had been found in S. typhi strains isolated in 3 studied areas. Plasmid 120 Kb had two copies. - Plasmid 120 Kb is a conjugated R-plasmid and carrying at least antibiotic resistant genes to chloramphenicol, ampicillin, tetracycline and trimethoprim/sulfamethoxazole. By conjugation, all the resistant genes of S. typhi were transferred to recipient E. coli strains through R-plasmid 120 Kb. Through the initial analysis on the R-plasmids in S. typhi strains isolated in 3 areas by a restricted enzyme of EcoR I, we saw that these self-transmitted R-plasmids may have the same origin. 37