Chế tạo khung nền 3 chiều từ polyme phân hủy sinh học (polycaprolactone) và khảo sát sự phát triển của tế bào gốc trung mô từ tủy xương người

Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số 6 * 2016<br /> <br /> <br /> CHẾ TẠO KHUNG NỀN 3 CHIỀU TỪ POLYME PHÂN HỦY SINH HỌC<br /> (POLYCAPROLACTONE) VÀ KHẢO SÁT SỰ PHÁT TRIỂN CỦA TẾ BÀO<br /> GỐC TRUNG MÔ TỪ TỦY XƯƠNG NGƯỜI<br /> Hồ Thị Kim Ngân* , Nguyễn Thị Mai Trâm* , Nguyễn Thành Trung*, Nguyễn Trọng Nam*<br /> * *<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> TÓM TẮT<br /> Mở đầu: Kỹ nghệ mô đang được quan tâm trong những thập kỷ gần đây như là một liệu pháp mới trong<br /> điều trị và tái tạo mô. Đặc biệt, khung nền 3 chiều đóng vai trò là một cấu trúc vật lý tạm thời hỗ trợ cho sự phát<br /> triển của tế bào và tạo thành các mô mới. Tại Việt Nam, hiện có rất ít các nghiên cứu trong lĩnh vực nhiều tiềm<br /> năng này.<br /> Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Báo cáo tổng kết quy trình chế tạo khung nền 3 chiều từ polyme<br /> phân hủy sinh học (polycaprolactone) bằng phương pháp đông khô nhũ tương. Khung nền 3 chiều này được kiểm<br /> tra khả năng phân hủy sinh học và thử nghiệm nuôi cấy tế bào gốc trung mô người.<br /> Kết quả: Khung nền từ polyme phân hủy sinh học (Polycaprolactone -PCL) được chế tạo với hai phần trăm<br /> khối lượng nước khác nhau trong nhũ tương (gọi tắt là 20% và 40%). Các khung nền được dùng để khảo sát,<br /> kiểm tra ảnh hưởng đối với sự tương thích sinh học và sự phát triển của tế bào gốc trung mô lấy từ tủy xương<br /> người (bone marrow derived human mesenchymal stem cell - hBMMSC). hBMMSC đã được cấy lên và phát<br /> triển trên khung nền thành công. Sau lần lượt 1, 3, 7 ngày nuôi cấy trong buồng phản ứng sinh học, sự phát<br /> triển của tế bào cấy trong khung nền được ghi nhận thông qua việc kiểm tra độ gia tăng số lương tế bào bằng<br /> phương pháp MTT cải tiến (khoảng 6% và 16% tế bào phát triển sau 7 ngày lần lượt cho khung nền chế tạo với<br /> 20% nước và 40% nước trong nhũ tương).<br /> Kết luận: Chúng tôi đã thành công trong việc chế tạo khung nền 3 chiều từ PCL và khảo sát sự tương thích<br /> sinh học của loại vật liệu này với tế bào gốc trung mô từ tủy xương người. hBMMSC được cấy lên thành công và<br /> phát triển khá tốt trên loại vật liệu này. Kết quả nghiên cứu thể hiện tiềm năng của việc ứng dụng loại vật liệu<br /> này trong kỹ nghệ mô tại Việt Nam.<br /> Từ khóa: Khung nền 3 chiều từ polyme, poly (ɛ-caprolactone), đông khô nhũ tương, tế bào gốc trung mô<br /> người.<br /> ABSTRACT<br /> POLYMERIC SCAFFOLD FABRICATION AND PRELIMINARY INVESTIGATION OF BONE STEM<br /> CELL PROLIFERATION<br /> Ho Thi Kim Ngan , Nguyen Thi Mai Tram , Nguyen Thanh Trung, Nguyen Trong Nam<br /> * *<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * No 6 - 2016: 228 - 234 *<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Background: Tissue engineering has been focused in the past decades as a new therapy for tissue repair and<br /> regeneration. Specifically, 3D scaffold plays an important role as a type of temporary architecture to assist cell<br /> growth and tissue formation.<br /> This study reports the fabrication of polymeic 3D scaffolds for bone tissue regeneration using emulsion freeze-<br /> drying method. Poly (ɛ-caprolactone) was specially chosen as the biodegradable polymer. Water-in-oil emulsion of<br /> PCL in dichloromethane and water was investigated using Span80 as the surfactant. Cell proliferation, cell<br /> <br /> * * Trường Đại học Quốc Tế, đại học quốc gia TPHCM ** Đại học Y Dược TPHCM<br /> Tác giả liên lạc: TS. Nguyễn Trọng Nam ĐT: 0963195863Email: nam.nguyen@hcmiu.edu.vn<br /> <br /> 228<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số 6 * 2016 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> biocompatibility and biodegradation of PCL scaffolds were examined. The former was monitored by MTT assay.<br /> Method: PCL foams with different percentages of water (20% and 40%) were successful fabricated,<br /> characterized by scanning election microscopy and tested with bone marrow derived human mesenchymal stem<br /> cell (hBMMSC) for biocompatibility and cell proliferation. hBMMSC was successfully seeded and grown on PCL<br /> scaffolds. After 1, 3, and 7 days of culturing on scaffold, increased cell viability observed via modified MTT assay.<br /> After 7 days of cell culture, cells proliferated by around 6% and 16% with 20% water scaffold and 40% scaffold<br /> accordingly.<br /> Result: This study highlighted the cell biocompatibility and cell proliferation of hBMMSC originated from a<br /> Vietnamese donor on successfully fabricated PCL scaffolds. Emulsion freeze-drying method is a feasible and<br /> approachable method for scaffold fabrication. The results outline the potential of applying this type of material to<br /> tissue engineering in Vietnam.<br /> Keywords: Polymeic 3D scaffold, poly (ɛ-caprolactone), emulsion freeze-drying, human mesenchymal stem<br /> cell<br /> ĐẶT VẤN ĐỀ trên khung nền được khảo sát trong rất nhiều<br /> nghiên cứu in vitro và in vivo(1,3,5,7). Đặc biệt, các<br /> Kỹ nghệ mô (tissue engineering–TE) đã phát<br /> hợp chất polyme tổng hợp có thành phần chủ<br /> triển nhanh trong những thập kỷ gần đây, chứng<br /> yếu là PCL được chứng minh là có khả năng<br /> minh khả năng phát triển, tái tạo hoặc thay thế<br /> tương tác tốt với dòng nguyên bào xương<br /> mô, áp dụng cho việc thay đổi hoàn toàn những<br /> (osteoblast) trích từ người. 4<br /> <br /> mô và cơ quan sinh học bệnh và bị tổn thương,<br /> So với thế giới, lĩnh vực y học tái tạo hiện<br /> cụ thể như mô xương(7,9) mô sụn(3,5), và mô cơ(1).<br /> đang vẫn còn mới mẻ ở Việt Nam. Vì vậy,<br /> Trong hướng nghiên cứu này, khung nền 3 chiều<br /> nghiên cứu này tập trung vào việc chế tạo khung<br /> (3D scaffold) hoạt động như là một kiến trúc vật<br /> nền 3 chiều từ polyme PCL và khảo sát sự tương<br /> lý tạm thời cho sự phát triển của tế bào(2,6,10). Rất<br /> tác và sự phát triển của tế bào trên loại vật liệu<br /> nhiều loại vật liệu được sử dụng để thay thế và<br /> này. Phương pháp đông khô nhũ tương được áp<br /> điều trị các mô xương bệnh hoặc mô tổn thương<br /> dụng chính để chế tạo khung nền. Đây là lần<br /> bao gồm: kim loại, sứ, và vật liệu cao phân tử<br /> đầu tiên tại Việt Nam, khung nền được chế tạo<br /> (polyme, tự nhiên và tổng hợp). Trong số đó, vật<br /> thủ công và khảo sát sự hỗ trợ cho tế bào gốc<br /> liệu cao phân tử (polyme) tổng hợp là một trong<br /> trung mô từ tủy xương người.<br /> những nhóm vật liệu sinh học được quan tâm<br /> nhiều trên thế giới(6). Nhóm vật liệu này được ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU<br /> nghiên cứu nhiều do tính chất vật lý, cơ lý, hóa<br /> Nguyên vật liệu<br /> học có thể điều chỉnh phù hợp với nhu cầu thực<br /> Tất cả hóa chất được mua từ công ty Sigma<br /> tế. Đồng thời chúng dễ dàng được tạo thành<br /> Chemical Co.. Khối lượng nguyên tử trung bình<br /> những hình thù và kích cỡ phù hợp cho việc<br /> (Mw) của PCL là 70000-90000. Dichloromethane<br /> thay thế các phần xương cần được chữa trị.<br /> tinh chất (DCM) and petroleum ether được sản<br /> Trong số các vật liệu trong nhóm này,<br /> xuất bởi công ty Fischer (Loughborough, UK). Tế<br /> polycaprolactone (PCL) là loại vật liệu polyme<br /> bào gốc trung mô được lấy từ Phòng thí nghiệm<br /> tổng hợp có đặc tính phân hủy sinh học được<br /> Tế bào gốc, Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học<br /> quan tâm nhiều vì nó được hiệp hội FDA (Food<br /> Quốc gia TPHCM. Môi trường nuôi tế bào<br /> and Drug Administration, USA) công nhận cho<br /> (MSCCult Kit medium) và trypsin-EDTA 0.25%<br /> sử dụng trong y học và thực phẩm.<br /> cũng được mua từ Phòng thí nghiệm Tế bào gốc<br /> Trong lĩnh vực kỹ nghệ mô xương, các loại tế (BioMedFactory, SCL). Môi trường MSCCult Kit<br /> bào đã được nuôi cấy và sự phát triển của chúng<br /> <br /> <br /> 229<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số 6 * 2016<br /> <br /> medium có chứa DMEM/F12 bổ sung thêm 15% Kiểm tra khả năng phân hủy sinh học của<br /> huyết thanh bào thai bê FBS (fetal bovine serum), khung nền<br /> kháng sinh, L-glutamine, EGF (epidermal Khối lượng ban đầu của khung nền (W ) 0<br /> <br /> growth factor) and bFGF (basic fibroblast growth được xác định bằng cân phân tích và sau đó khử<br /> factor) (Sigma Aldrich, St Louis, MO, USA). trùng bằng cách ngâm trong cồn 70% trong1 giờ,<br /> Phương pháp nghiên cứu rửa 1 lần với nước cất và 5 lần với dung dịch PBS<br /> Chế tạo khung nền từ PCL đã tiệt trùng. Sau khi loại bỏ nước đọng bằng<br /> giấy lọc sạch, khung nền được đặt trong đĩa 24<br /> Phương pháp chế tạo được phát triển bởi<br /> giếng và ngâm trong 2mL dung dịch PBS/giếng.<br /> Whang và Baker các cộng sự(1,8). Tất cả dụng cụ<br /> Đĩa được đặt trong tủ CO ở 38 C. Tại lần lượt các<br /> 2<br /> 0<br /> <br /> và khuôn 18 lỗ (được làm thủ công) (Hình 1)<br /> thời điểm cố định (ngày 10, 20, 30, 40), khung<br /> được hấp khử trùng ở 120 C trong 20 phút để<br /> 0<br /> <br /> nền được lấy ra và để khô tự nhiên trong 24<br /> chế tạo khung nền trong điều kiện gần như vô<br /> tiếng trước khi được kiểm tra khối lượng lần tiếp<br /> trùng. Cánh khuấy PTFE được ngâm trong cồn<br /> theo (W ). Phần trăm khối lượng giảm (%) được<br /> t<br /> 70% trong 3 giờ. 0,77g Polycaprolactone (PCL)<br /> tính bằng công thức (W W )/W x 100%.(1)<br /> 0- t 0<br /> được hòa tan trong 4,5mL dichloromethane<br /> (DCM) và 0,25g Span 80, được sử dụng như<br /> ® Nuôi cấy tế bào gốc trung mô<br /> chất hoạt động bề mặt, trong một bình cầu đáy Tế bào gốc trung mô lấy từ tủy xương người<br /> tròn 50mL. Sau khi polyme được hòa tan hết, (hBMMSC) được xét nghiệm âm tính với HBV,<br /> 2mL nước cất được nhỏ từng giọt vào hỗn HIV, mycoplasma, vi khuẩn và nấm. Tế bào<br /> hợp, sử dụng kim tiêm vô trùng 1mL. Khi thu được nuôi trong tủ CO (Galaxy 14S, New<br /> 2<br /> <br /> <br /> được nhũ tương, không khí bên trong nhũ Brunswick company) ở điều kiện 38 C, 95% 0<br /> <br /> <br /> <br /> tương sẽ được loại bỏ bằng máy hút chân không khí ẩm với nồng độ 5% CO . 20%wt và 2<br /> <br /> <br /> không và nhũ tương sẽ được cho vào khuôn 40%wt scaffold với độ dày từ 2-3mm và đường<br /> bằng muỗng. Sau khi để lắng trong 30 phút, kính 10mm được chọn cho bước nuôi tế bào. Tất<br /> khuôn sẽ được làm lạnh cấp tốc bằng ni-tơ cả khung nền được khử trùng trong 1 giờ bằng<br /> lỏng và chuyển vào máy đông khô chân cồn 70%, rửa qua một lần với nước cất và năm<br /> không. Mẫu được đông khô trong 24 giờ và lần với dung dịch PBS sạch. Nước sẽ được thấm<br /> ngâm trong 24 giờ tiếp theo để loại bỏ chất hút bớt bằng giấy lọc. Tám khung nền mỗi loại<br /> hoạt động bề mặt. Hình dạng và cấu trúc sẽ được cho vào một đĩa nuôi cấy tế bào 24<br /> khung nền được khảo sát bằng kình hiển vi giếng, trong mỗi loại 6 khung nền sẽ được phủ<br /> điện tử (SEM) vận hành tại 5,0kV. Khung nền bởi tế bào, 2 khung nền còn lại không có tế bào<br /> được cắt lớp và chụp dưới kính hiển vi điện tử để làm chất nền đối chiếu. 20µL dịch tế bào chứa<br /> không cân phủ. 1x10 tế bào được pipet lên bề mặt khung nền và<br /> 5<br /> <br /> <br /> <br /> để kết dính trong 2 giờ. 2mL của môi trường<br /> nuôi MSCCult Kit medium được lấp đầy các<br /> khung nền; khung nền sẽ nằm trong môi trường<br /> trong 7 ngày và được thay mới mỗi 2-3 ngày.(1)<br /> Kiểm tra sự phát triển của tế bào (Phương<br /> pháp MTT cải biến)<br /> Khi tế bào còn sống và diễn ra các hoạt động<br /> biến dưỡng, tế bào sẽ sản xuất ra một loại<br /> Hình 1: Khuôn 18 lỗ dùng để tạo hình cho khung nền enzyme gọi là succinate dehydrogenase, có thể<br /> chuyển hóa MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-<br /> <br /> <br /> 230<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số 6 * 2016 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> 2,5-diphenyltetrazolium bromide) thành tinh thể KẾT QUẢ<br /> formazan màu tím. Tuy nhiên, để có được kết<br /> Chế tạo khung nền PCL và khảo sát tính<br /> quả chính xác và tránh bỏ sót các tế bào nằm sâu<br /> bên trong lòng khung nền, phương pháp MTT chất<br /> với chu trình cải tiến bởi Baker được áp dụng. 1 Khung nền được chế tạo xốp và khá mềm,<br /> Một bước thêm vào so với phương pháp chuẩn với độ dày khoảng 2-3mm và đường kính 10mm.<br /> là sử dụng DCM để hòa tan hoàn toàn khung Nhũ tương được tạo thành khi nhỏ nước cất<br /> nền nhằm giải phóng các tinh thể nằm sâu bên từng giọt bằng kim tiêm tiệt trùng 1mL trong<br /> trong. Độ hấp thụ được đo trong cuvette thạch quá trình khuấy. Không khí trong nhủ tương<br /> anh ở bước sóng 570nm, sử dụng máy Cary 60 được loại bỏ trong môi trường chân không. Hình<br /> UV-Vis spectrophotometer - Simple Reads chụp SEM của hai loại khung nền cũng ghi nhận<br /> Application (Agilent Technologies). hệ thống lỗ trống bên trong khung nền. Kích<br /> thước lỗ xốp dao động từ 1µm đến 100 µm ở tất<br /> cả các hình chụp SEM (Xem Hình 2).<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Hình 2: Hình chụp ) mặt cắt của các khung nền bằng kính hiễn vi điện tử (SEM). % khối lượng nước (a,b) = 20 % (e,f)<br /> = 40%. (a,e) Scale 100μm, x50 (b,f) Scale 100μm, x250.<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 231<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số 6 * 2016<br /> <br /> <br /> Khả năng phân hủy sinh học của khung nhanh về khối lượng trong 30 ngày đầu ủ trong<br /> nền PBS ở 38 C (Hình 3). Điều tương tự cũng được<br /> 0<br /> <br /> <br /> <br /> ghi nhận ở 40% scaffold. Thêm vào đó, khung<br /> Hai khung nền scaffold mỗi loại được chọn<br /> nền có khối lượng lớn thì có khối lượng giảm ghi<br /> ngẫu nhiên để kiểm tra tính thích nghi sinh học<br /> nhận được cao hơn.<br /> của khung nền. 20% scaffold cho thấy sự giảm<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Hình 3: Phần trăm khối lượng giảm đi so với thời gian ủ. Khung nền được tạo ra bằng phương pháp đông khô nhũ tương với<br /> hai hàm lượng nước khác nhau trong nhũ tương.Khung nền được khử trùng trong 3 giờ bằng cồn 70% và ủ trong 40 ngày<br /> trong 2mL PBS sạch ở 38 C, 5% CO không khí. Hình 7A: PCL scaffold - % nước = 20%; Khối lượng ban đầu: mẫu 1:<br /> 0 2<br /> <br /> <br /> 0.1065g; mẫu 2: 0.0616g. Hình 7B: PCL scaffold - % nước = 40%, Khối lượng ban đầu: mẫu 1: 0.0498g, mẫu 2: 0.0411g<br /> Nuôi cấy tế bào gốc trung mô nền và sự phát triển của tế bào được kiểm tra<br /> bằng phương pháp MTT cải tiến sau thời gian 1,<br /> Tế bào trung mô được nuôi cấy theo quy<br /> 3, 7 ngày. Kết quả MTT (Hình 4) cho thấy 20%<br /> trình chuẩn của phòng thí nghiệm tế bào gốc,<br /> scaffold hỗ trợ tốt hơn cho sự phát triển của tế<br /> Đại học Khoa học Tự nhiên. Một lớp tế bào và<br /> bào, so với 40%wt scaffold do ghi nhận được giá<br /> 100mL môi trường được tiến hành nuôi cấy. Sau<br /> trị hấp thụ cao hơn.<br /> một tuần, số lượng tế bào ghi nhận tăng thêm 3<br /> lần. Các tế bào này được cấy lên bề mặt khung<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Hình 4 Kết quả MTT sau 7 ngày nuôi cấy cùng tế bào của hai loại khung nền.<br /> BÀN LUẬN sau: khối lượng polyme, độ nhớt của nhũ tương,<br /> không khí giữ trong nhũ tương trong quá trình<br /> Nghiên cứu này tập trung vào việc chế tạo khuấy, tốc độ cho nước, thể tích nước trong nhũ<br /> khung nền 3 chiều từ polyme PCL và khảo sát sự tương và sự có mặt của chất hoạt động bề mặt.<br /> phát triển của tế bào gốc trung mô trên loại vật Lần lượt từng loại nhũ tương với 20% và 40%<br /> liệu này nhằm ứng dụng trong kỹ nghệ mô được khảo sát. Kết quả cho thấy hai loại scaffold<br /> xương.Trong quá trình khảo sát, chất lượng có sự khác biệt về hình dáng và độ xốp. 40%<br /> khung nền có thể bị ảnh hưởng bởi các yếu tố<br /> scaffold có độ xốp cao hơn. Scaffold với nhiều<br /> <br /> <br /> 232<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số 6 * 2016 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> nước trong nhũ tương hơn sẽ mềm và xốp hơn. KẾT LUẬN<br /> Đặc tính này có thể làm ảnh hưởng đến sự phát<br /> Trong nghiên cứi này, chúng tôi đã thành<br /> triển của tế bào; vì kích thước lỗ trống sẽ thay<br /> công trong việc chế tạo khung nền 3 chiều từ<br /> đổi với độ xốp có thể dẫn đến vận chuyển trao<br /> PCL và khảo sát sự tương thích sinh học của loại<br /> đổi chất và hấp thu các chất dinh dưỡng của tế<br /> vật liệu này với tế bào gốc trung mô từ tủy<br /> bào trở nên hạn chế. Không khí bị giữ lại trong<br /> xương người. hBMMSC được cấy lên thành công<br /> nhũ tương có thể ảnh hưởng đến việc tạo ra<br /> và phát triển khá tốt trên loại vật liệu này. Đây là<br /> khung nền đạt tiêu chuẩn. Không khí có thể phá<br /> nghiên cứu đầu tiên về ứng dụng tế bào gốc trên<br /> vỡ hệ thống mạng lưới bên trong scaffold khi áp<br /> vật liêu sinh học được thực hiện tại Đại học<br /> suất tác động lên khung nền trong quá trình<br /> Quốc tế. Ngoài ra, phương pháp đông khô nhũ<br /> đông khô. Kết quả nghiên cứu cho thấy chỉ khi<br /> tương cũng khá dễ thực hiện và ít tốn kém, cùng<br /> áp dụng chân không để loại bỏ không khí, nhũ<br /> với kết quả thí nghiệm khả quan có thể là tiền đề<br /> tương thu được mới tạo thành scaffold với độ<br /> để mở rộng nghiên cứu này vào lĩnh vực kỹ<br /> xốp thích hợp.<br /> nghệ mô tại Việt Nam. Thêm vào đó, các loại vật<br /> Việc kiểm tra khả năng phân hủy sinh học liệu khác như PCL dạng mạch nhánh và mạch<br /> được tiến hành bằng cách ủ scaffold với PBS ở lưới cũng có thể được khảo sát để kiểm tra sự<br /> 38 C. Tất cả các mẫu đều được khử trùng trước<br /> 0<br /> tương thích với tế bào gốc trung mô.<br /> khi ủ. 20% scaffold ghi nhận khoảng 0,03% khối<br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO<br /> lượng bị hao hụt, trong khi 40% scaffold ghi<br /> 1. Baker SC, Rohman G, Southgate J, Cameron NR; Baker SC,<br /> nhận được gần 0,1% khối lượng hao hụt. Kết quả Rohman G, Southgate J, Cameron NR, (2009), The relationship<br /> này có thể do sự thủy phân của liên kết ester khi between the mechanical properties and cell behaviour on<br /> có sự hiện diện của vi khuẩn. PLGA and PCL scaffolds for bladder tissue engineering.<br /> Biomaterials 30 (7), 1321-1328.<br /> Tế bào gốc trung mô cần được quan tâm đặc 2. Cipitria A, Skelton A, Dargaville TR, Dalton PD, Hutmacher<br /> DW, (2011), Design, fabrication and characterization of PCL<br /> biệt khi tiến hành quá trình nuôi cấy. Trước khi<br /> electrospun scaffolds-a review. Journal of Materials Chemistry 21<br /> tiến hành cấy chuyền, tế bào phải được kiểm tra (26), 9419-9453.<br /> số lượng bằng buồng đếm haemocytometer. 3. Frenkel SR, Di Cesare PE, (2004), Scaffolds for Articular<br /> Cartilage Repair. Annals of Biomedical Engineering 32 (1), 26-34.<br /> Phương pháp MTT được dùng để xác định sự<br /> 4. Kweon H, Yoo MK, Park IK, Kim TH, Lee HC, Lee HS, Oh JS,<br /> tồn tại của tế bào trên khung nền. Sau 7 ngày Akaike T, Cho CS, (2003), A novel degradable<br /> nuôi cấy, số lượng tế bào sống gia tăng với ghi polycaprolactone networks for tissue engineering. Biomaterials<br /> 24 (5), 801-808.<br /> nhận giá trị hấp thụ của formazan gia tăng. Đối 5. Mercier NR., Costantino HR, Tracy MA, Bonassar LJ, (2005),<br /> với quy trình chế tạo và khảo sát MTT, khung Poly(lactide-co-glycolide) microspheres as a moldable scaffold<br /> nền luôn được giữ ở trạng thái vô trùng. Tất cả for cartilage tissue engineering. Biomaterials 26 (14), 1945-1952.<br /> 6. Puppi D, Chiellini F, Piras AM, Chiellini E, (2010), Polymeic<br /> dụng cụ đều được khử trùng cẩn thận, và khung materials for bone and cartilage repair. Progress in Polyme<br /> nền cũng được ngâm trong cồn 70% trong 1 giờ Science 35 (4), 403-440.<br /> 7. Rohner D, Hutmacher DW, Cheng TK, Oberholzer M,<br /> trước khi tiến hành phản ứng MTT để tránh việc<br /> Hammer B, (2003), In vivo efficacy of bone-marrow-coated<br /> nhiễm khuẩn. Thường các loại môi trường sử polycaprolactone scaffolds for the reconstruction of orbital<br /> dụng trong kỹ nghệ mô không bao gồm kháng defects in the pig. Journal of Biomedical Materials Research Part B:<br /> Applied Biomaterials 66B (2), 574-580.<br /> sinh trong thành phần để tránh không phát hiện 8. Whang K, Thomas CH, Healy KE, Nuber G, (1995), A novel<br /> được sự phát triển của vi khuẩn. Các nghiên cứu method to fabricate bioabsorbable scaffolds. Polyme 36 (4), 837-<br /> cho thấy việc vật liệu nhiễm khuẩn có thể gây 842.<br /> 9. Williams JM, Adewunmi A, Schek RM, Flanagan CL,<br /> nên hiện tượng viêm mãn tính trong các thí Krebsbach PH, Feinberg SE, Hollister SJ, Das S, (2005), Bone<br /> nghiệm in vivo Khử trùng với còn cũng giúp làm<br /> . tissue engineering using polycaprolactone scaffolds fabricated<br /> via selective laser sintering. Biomaterials 26 (23), 4817-4827.<br /> ẩm bề mặt và giúp nước thấm vào khung nền dễ<br /> dàng hơn.<br /> <br /> <br /> 233<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số 6 * 2016<br /> <br /> 10. Woodruff MA, Hutmacher DW, (2010), The return of a Ngày nhận bài báo: 05/08/2016<br /> forgotten polyme-Polycaprolactone in the 21st century.<br /> Progress in Polyme Science 35 (10), 1217-1256. Ngày phản biện nhận xét bài báo: /2016<br /> Ngày bài báo được đăng: 15/11/2016<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 234<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số 6 * 2016 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> <br /> NHÂN MỘT SỐ TRƯỜNG HỢP HUYẾT KHỐI TĨNH MẠCH SÂU<br /> DO HỘI CHỨNG MAY – THURNER<br /> Nguyễn Hoài Nam*, Lê Phi Long**<br /> <br /> TÓMTẮT<br /> Mục tiêu Khảo sát huyết khối tĩnh mạh sâu chi dưới do HC May – Thurner<br /> Phương pháp nghiên cứu mô tả hồi cứu từ tháng 01/ 2014 đến tháng 06 / 2016<br /> Kết quả Hồi cứu hồ sơ và khảo sát lại CTScan, chúng tôi ghi nhận 30 trường hợp HKTMSCD được<br /> can thiệp lấy huyết khối bằng Fogarty, trong đó có 9/30 trường hợp được xác định HC May – Thurner.<br /> Tuổi trung bình là 44,4, tỷ lệ nam/nữ là 1/8. Tỷ lệ tái huyết khối sớm cao là 89% và điểm số VCSS trung<br /> bình là 7,625. Can thiệp sửa chữa tổn thương giải phẫu của HC May-Thurner chỉ thành công về mặt kỹ<br /> thuật ở 01 trường hợp.<br /> Kết luận HKTMSCD do HC May-Thurner là bệnh cảnh thường gặp trên lâm sàng. Cần lưu ý hướng<br /> đến chẩn đoán này khi người bệnh có biểu hiện sưng phù 1 bên chân Trái. Phương tiện chẩn đoán xác định<br /> dựa vào hình ảnh học với vai trò của chụp CT Venography. Điều trị theo phác đồ hiện nay là lấy huyết khối<br /> với tiêu sợi huyết tại chỗ và sửa chữa thương tổn giải phẫu bằng nong bóng và stent.<br /> Từ khóa Huyết khối tĩnh mạch sâu chi dưới, hội chứng May-Thurner, Thang điểm độ nặng lâm sàng<br /> tĩnh mạch<br /> ABSTRACT<br /> DEEP VENOUS THROMBOSIS WITH PREVIOUSLY UNDIAGNOSTIC MAY-THURNER<br /> SYNDROME: A CASE SERIES<br /> Nguyen Kim Anh, Nguyen Hoai Nam * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * No 6 - 2016: 235 - 240<br /> <br /> Objective: To investigate the May-Thurner syndrome in acute deep venous thrombosis<br /> Methods: This is a descriptive retrospective study in which data was reviewed from January 2014 to<br /> June 2016.<br /> Results: Among the 30 patients who underwent surgical thrombectomy by Fogarty balloon, we<br /> identified 9/30 (30%) cases of May-Thurner syndrome. The mean age was 44.4. Male/female rate was 1/8.<br /> The early re-thrombosis rate was high as 89%, and the mean VCSS score was 7.265. The success rate of<br /> endovenous interventional reconstruction was seen in only 1 case technically.<br /> Conclusions: May-Thurner syndrome is considered as a common cause of deep venous thrombosis.<br /> This diagnosis should be confirmed, especially when the symptom is left leg swelling. The diagnosis is<br /> mainly based on the specific images of CTScan venography. Current guideline for the treatment suggests<br /> catheter directed thrombolysis following by endovenous ballooning and stent reconstruction.<br /> Keywords: Deep venous thrombosis, May-Thurner syndrome, Venous Clinical Severity score<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> * Bộ môn Phẫu thuật lồng ngực và Tim mạch - Đại học Y dược Thành phố Hồ Chí Minh.<br /> ** Khoa Lồng ngực – mạch máu, Bệnh viện Đại học Y Dược Hồ Chí Minh.<br /> Tác giả liên lạc: Ths. BS Lê Phi Long ĐT: 0989063999 Email: long.lp@umc.edu.vn<br /> <br /> <br /> 235<br />