Đề tài: Vai trò của sucrose và sự khác nhau của cytokinin trong ống nghiệm đối với sự phát sinh hình dạng của hoa hồng (hybrid trà) cv

Chia sẻ: Minh Minh | Ngày: | Loại File: PPT | Số trang:38

Thêm vào BST

Báo xấu

138
lượt xem 10
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Đề tài: Vai trò của sucrose và sự khác nhau của cytokinin trong ống nghiệm đối với sự phát sinh hình dạng của hoa hồng (hybrid trà) cv giới thiệu với người đọc tổng quan về hoa, vật liệu và phương pháp thí nghiệm, kết luận. Đây là tài liệu tham khảo chuyên ngành Công nghệ sinh học.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Đề tài: Vai trò của sucrose và sự khác nhau của cytokinin trong ống nghiệm đối với sự phát sinh hình dạng của hoa hồng (hybrid trà) cv

Bộ Giáo Dục Và Đào Tạo Trường Đại Học Yersin Đà Lạt Khoa: Công nghệ sinh học
SINH LÝ CHỨC NĂNG THỰC VẬT NHÓM 4 VAI TRÒ CỦA SUCROSE VÀ SỰ KHÁC NHAU CỦA CYTOKININ TRONG ỐNG NGHIỆM ĐỐI VỚI SỰ PHÁT SINH HÌNH DẠNG CỦA HOA HỒNG (HYBRID TRÀ) CV. GVHD: PGS.TS. Dương Tấn Nhựt Thạc sĩ. Nguyễn Thanh Hải
Các thành viên của nhóm  Võ Thị Kim Hiền  Kiều Quốc Long Hoàng  Phạm Kim Ngọc Hiệp  Trần Văn Hoàng  Nguyễn Văn Hiếu  Trần Thị Huyền  Bùi Thị Hoa  Quế Thị Mai Hương  Hòang Thị Hồng Hoa  Nguyễn Thị Hường  Ngô Thị Thùy Hoa  Quách Trần Bạch Lan  Trịnh Thị Hòa
Mục lục:  I. Giới thiệu  II. Vật liệu và phương pháp  III. Kết luận  IV. Tài liệu tham khảo
I. Giới thiệu:  Hoa là một cơ chế phức tạp, nhạy cảm với môi trường, có ý nghĩa trong khoa học phát triển và sinh lý học và là một trong những nền tảng cơ bản nhất của nông nghiệp. Khả năng nuôi cấy để tạo thành hoa trong ống nghiệm phụ thuộc vào rất nhiều yếu tố, nội bộ và bên ngoài, hóa học và vật lý, và hầu như tất cả đều tương tác bằng nhiều cách phức tạp và không thể đoán trước  Hoa hồng đáng yêu với màu sắc khác nhau, hình dáng đẹp và mùi hấp dẫn đã được yêu thích nhất hoa trang trí cho một thời gian dài. Ngày nay, chúng được trồng trên toàn thế giới như hoa cắt, trồng cây trong chậu và trang trí cho khu vườn.
 Trong sự phát sinh hình dạng của hoa hồng thì sucrose và cytokinin đóng vai trò quan trọng. cytokinin có tác dụng kích thích về hoa cảm ứng,ngược lại nó ức chế có hoa, nhưng kích thích tăng trưởng sinh dưỡng. Về cơ bản, sucrose được biết đến là nguồn cacbon của sự lựa chọn cho nền văn hóa trong các nghiên cứu in vitro hoa.
 Trong bài báo này, khả năng ra hoa in vitro của hoa hồng (hybrid trà) cv. cành hoa được nghiên cứu bằng cách điều chỉnh một số yếu tố ảnh hưởng đến hoa như nồng độ sucrose, điều hòa sinh trưởng thực vật (PGR), vĩ mô và vi mô vô cơ và hữu cơ các yếu tố trong MS (Murashige và Skoog, 1962) trung bình.
II.Vật liệu và phương pháp: 1. Vật Liệu :  Cành hoa hồng (hybrid trà) khỏe mạnh trong giai đoạn trước khi nở chứa khoảng 8-9 chồi xanh không hoạt động được thu từ khu vườn hoa hồng ở Đà Lạt  Môi trường nuôi cấy là môi trường MS (Murashige và Skoog, 1962) có bổ sung nước dừa 10%, adenine sulphate 40mg/L, saccharose 20g/L, maltose 10 g/L, agar 9g/L, than hoạt tính 3g/L. Môi trường được bổ sung các chất điều hòa sinh trưởng thực vật là 6- benzyladenine (BA), kinetin (KN) và naphthalene -1acetic acid (NAA) ở các nồng độ khác nhau.
2.Các bước tiến hành:  Nuôi cấy mô tế bào cây hoa hồng trà bằng cách tái sinh chồi trực tiếp từ mẫu mô được thu từ khu vườn hoa hồng ở Đà Lạt . Vật liệu nuôi cấy: Chủ yếu là những khối mô và cơ quan tách rời: mô phân sinh, đỉnh sinh trưởng,  Các bước tiến hành: + Lựa chọn vật liệu + Khử trùng vật liệu nuôi cấy + Cấy vào môi trường mẫu + Nhân nhanh chồi + Chuyển sang môi trường tạo rễ,tạo cây hoàn chỉnh.
 Bước 1: Lựa chọn vật liệu Chọn những cành cây khỏe mạnh gồm 8-9 chồi xanh không hoạt động.  Bước 2: Khử trùng vật liệu nuôi cấy Tất cả tiết điêm đã được tẩy rửa trong buồng ̉ vô trùng và đặt dưới nước sinh hoạt trong vòng 40 phút, sau đó khử trùng bằng HgCl2 0,1% trong 10 phút, rồi xả lại bốn lần với nước cất. Cuối cùng, bắn một ít mô ngoại vi vào chồi không hoạt động ( đường kính khoảng 0.5cm) đã được vô trùng ngăn cách với tiết điêm phần ̉ và đặt trên các môi trường nuôi cấy ban đầu.
Bước 3: Cấy vào môi trường mẫu MS được sử dụng như là môi trường nuôi cấy cơ bản. Tất cả môi trường nuôi cấy đã được điều chỉnh để pH 5,8 với KOH 1N hoặc HCl 1N trước khi khử trùng tại 121oC, 1 atm trong vòng 40 phút. Phytohormones đã được thêm vào trước khi khử trùng. Sự nuôi cấy được duy trì dưới nhiệt độ mát khoảng 25 ± 20C, dưới ánh sáng huỳnh quang, cung cấp một mật độ thông lượng lượng tử của 45µmol m–2 s–1.
Bước 4:Nhân nhanh chồi Chồi thu được sau khoảng 45 ngày kể từ ngày được cắt , tách chồi và được cấy trên môi trường bổ sung 3,0 mg l-1 BA và 0,05 mg l-1 NAA. Cấy truyền được thực hiện 60 ngày trên cùng một môi trường. Nhân chồi cây hoa hồng trong bình serum 500 ml.
Bước 5: Chuyển sang môi trường tạo rễ,tạo cây hoàn chỉnh - Khi cây đạt tiêu chuẩn về chiều cao, số lá thì chuyển sang MT tạo rễ. Đó là MT dinh dưỡng thích hợp bổ sung chất KT auxin, IBA. - Chuyển cây sang MT thích ứng gần giống với MT tự nhiên về: nhiệt độ, độ ẩm, ánh sáng...
3. Vai trò sucrose và cytokinin trong thí nghiệm in vitro: • a. Sucrose: (đường) - Vai trò quan trọng của sucrose đã được quan sát thấy trong sự thích ứng ở nhiều loài. Đường đã được xem là nguồn cacbon cần thiết trong môi trường nuôi cấy và sự phát triển của hoa (Scorza, 1982). Jumin và Nito (1996) quy định rằng việc bổ sung các sucrose 3-7% vào môi trường là cần thiết cho sự thích ứng của hoa Fortunella hindsii.
- Sự hình thành của hoa Pisum sativum L. chỉ được quan sát thấy khi sucrose tập trung được ở 30-60 g ml-1 (Franklin et al., 2000).
Vai trò của sucrose trên sự phát sinh hình dạng của hoa Ảnh hưởng của sucrose trên các cành mang nụ hoa được ghi nhận sau 3 tháng nuôi Nồng độ đường sucrose Chồi hoa (%) (g l–1) 15 0 30 20.0bz 45 33.3a Vai trò của sucrose trong sự phát sinh hình dạng của hoa sau 2 tháng nuôi.
 Bảng 1 Cho thấy phần trăm của sự hình thành chồi hoa có xu hướng tăng khi nồng độ sucrose tăng lên, nhưng không có nụ hoa trong môi trường cấy truyền vừa có chứa 15 g l- 1 sucrose. Các chồi hoa được hình thành trong thử nghiệm này không thể phát triển hơn nữa, tất cả chúng sẽ héo khi đường kính của nó đạt 1-2 mm (Hình 1a).
-Vai trò chính của sucrose được ghi lại trong thí nghiệm, nơi mà số chồi hoa được tỷ lệ thuận với nồng độ sucrose. Tại 15 g l-1 sucrose, sự thích ứng của hoa bị ức chế . Chúng ta có thể kết luận rằng nồng độ giới hạn sucrose ảnh hưởng lên sự thích ứng của hoa. - Hơn nữa, quan sát thấy nụ hoa bị héo khi chúng đạt được đường kính từ 1-2 mm. Điều này cho thấy rằng sucrose là một yếu tố cần thiết trong sự thích ứng của nụ hoa hoặc phát triển ban đầu, khác yếu tố (s) là bắt buộc để giúp chúng phát triển đầy đủ trong giai đoạn sinh trưởng và phát triển của hoa trong ống nghiệm.