Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Nghiên cứu biểu hiện và đánh giá hoạt tính sinh miễn dịch của protein P72 tái tổ hợp của virus gây bệnh dịch tả lợn Châu Phi (African swine fever) trên Nicotiana benthamiana

Luận văn này trình bày nghiên cứu về biểu hiện, tinh sạch và đánh giá hoạt tính sinh miễn dịch của protein p72 tái tổ hợp từ virus gây bệnh dịch tả lợn châu Phi (ASFV) trên cây thuốc lá Nicotiana benthamiana. Mục tiêu là tạo ra một ứng cử viên vaccine tiềm năng bằng công nghệ tái tổ hợp thực vật, một hướng đi mới với nhiều ưu điểm so với các hệ thống biểu hiện truyền thống. Nghiên cứu tập trung vào protein p72, một protein cấu trúc chính của ASFV, và đánh giá khả năng kích thích đáp ứng miễn dịch của nó trên mô hình chuột thí nghiệm, đặc biệt khi kết hợp với hạt nano silica để tăng cường tính sinh miễn dịch.

Nghiên cứu này hướng đến việc phát triển một loại vaccine tiểu đơn vị tiềm năng phòng bệnh dịch tả lợn châu Phi, sử dụng công nghệ biểu hiện tái tổ hợp trên thực vật và tăng cường tính sinh miễn dịch bằng hạt nano silica.

Luận văn đi sâu vào nghiên cứu biểu hiện protein p72 tái tổ hợp trên cây thuốc lá Nicotiana benthamiana thông qua phương pháp agroinfiltration, tối ưu hóa quy trình tách chiết và tinh sạch protein từ thực vật. Các thí nghiệm được thực hiện để tạo phức hợp nano silica-p72 và đánh giá khả năng kích thích đáp ứng miễn dịch dịch thể trên chuột. Cụ thể, nghiên cứu đã:

1. **Thiết kế và xây dựng thành công vector biểu hiện** mang gen mã hóa vùng Ectodomain của protein p72, một protein cấu trúc quan trọng của virus ASFV, và xác nhận sự biểu hiện của protein này trong mô lá cây thuốc lá.
2. **Tối ưu hóa quy trình tách chiết protein** từ mô lá cây thuốc lá, bao gồm việc lựa chọn đệm chiết phù hợp và xác định điều kiện nhiệt độ tối ưu để loại bỏ tạp chất mà không làm ảnh hưởng đến hoạt tính của protein.
3. **Nghiên cứu tạo phức hệ nano silica-p72**, trong đó protein p72 được gắn kết lên bề mặt hạt nano silica để tăng cường khả năng trình diện kháng nguyên và kích thích đáp ứng miễn dịch.
4. **Đánh giá tính sinh miễn dịch của protein p72 tái tổ hợp và phức hệ nano silica-p72** trên mô hình chuột BALB/c, kết quả cho thấy phức hệ nano silica-p72 có khả năng kích thích đáp ứng miễn dịch dịch thể mạnh mẽ hơn so với protein p72 đơn thuần.
5. **Phân tích mức độ đáp ứng kháng thể IgG đặc hiệu** protein p72, bằng phương pháp ELISA, cho thấy phức hệ nano silica-p72 kích thích đáp ứng miễn dịch mạnh hơn so với protein p72 tái tổ hợp đơn thuần.