Thực hành Pipet tốt

Biotechnology Centre of<br /> Ho Chi Minh City.<br /> 02 June / Athena Pham<br /> <br /> Thực Hành Pipet Tốt<br /> <br /> Những lỗi dùng pipets dẫn đến các thí nghiệm<br /> không thành công!<br /> <br /> 3<br /> <br /> Mục tiêu: lây nhiễm sang chuột bằng virus Cytomegalovirus ở LD50 của 1.5 x<br /> 106 PFU<br /> <br /> Lethality %<br /> <br /> - Vấn đề quan trọng là lây nhiễm với nồng độ không được quá thấp, hoặc quá cao<br /> Trước khi thí nghiệm, virus gốc sẽ phải<br /> được pha loãng lần lượt 10 lần để xác định<br /> Lethal Dose Curve<br /> nồng độ virus.<br /> 100<br /> 90<br /> - Đây là qúa trình chịu ảnh hưởng rất<br /> nhiều của kĩ thuật pipet<br /> 80<br /> 70<br /> - Các lỗi dùng pipet sẽ được tích lũy<br /> 60<br /> <br /> 10ul<br /> <br /> 10ul<br /> <br /> 10ul<br /> <br /> 10ul<br /> <br /> 10ul<br /> <br /> 50<br /> 40<br /> 30<br /> 20<br /> <br /> 100 ul<br /> <br /> 10<br /> <br /> 90ul<br /> <br /> 90ul<br /> <br /> 90ul<br /> <br /> 90ul<br /> <br /> 90ul<br /> <br /> 0<br /> 1<br /> <br /> 1.5<br /> <br /> Viral Dose<br /> <br /> 2<br /> <br /> (x106<br /> <br /> PFU)<br /> <br /> Nồng độ quá cao: loại bỏ<br /> <br /> Thử nghiệm với nồng độ vừa<br /> <br /> Những lỗi dùng pipets dẫn đến các thí nghiệm<br /> không thành công!<br /> Những lỗi tích lũy khi dùng Pipet sẽ dẫn đến nồng độ của dung dịch<br /> gốc quá thấp hoặc quá cao so với mong đợi<br /> Điều này dẫn đến không đúng liều tiêm, làm ảnh hưởng đến kết quả<br /> thí nghiệm<br /> Ảnh hưởng của các lỗi dùng pipet theo ước tính<br /> +5%<br /> số lỗi<br /> của<br /> pipet<br /> Hệ số chuẩn<br /> 105000<br /> 100000<br /> 11025<br /> 10000<br /> 1157.62<br /> 1000<br /> 121.55<br /> 100<br /> 12.76<br /> 10<br /> 1<br /> 1.34<br /> <br /> Hệ<br /> Lỗi đã tích lũy<br /> %<br /> 5<br /> 10.25<br /> 15.76<br /> 21.55<br /> 27.63<br /> 34.01<br /> <br /> -5%<br /> Hệ số lỗi<br /> của<br /> pipet<br /> 95000<br /> 9025<br /> 857.37<br /> 81.45<br /> 7.73<br /> 0.73<br /> <br /> Lỗi đã tích<br /> lũy %<br /> -5<br /> -9.75<br /> -14.26<br /> -18.55<br /> -22.62<br /> -26.49<br /> <br /> Overestimated titer leads to under-inoculation<br /> Underestimated titer leads to over-inoculation<br /> BOTH lead to FAILURE<br /> <br /> 4<br /> <br /> Evaluation and Selection<br /> <br /> Hướng dẫn thực hành tốt pipets giúp cải<br /> thiện tính chính xác và độ lặp lại của<br /> nhiều ứng dụng khoa học và đời sống.<br /> <br /> -<br /> <br /> Đánh giá và lựa chọn<br /> Kỹ thuật thao tác pipet<br /> Hiệu chỉnh và vận hành.<br /> <br /> 5<br /> <br /> Kế hoạch và quy trình làm việc<br /> <br /> 7<br /> <br /> Ứng dụng<br /> hay thí<br /> nghiệm<br /> Quy trình làm<br /> việc —từ mẫu<br /> ban đầu kết dữ<br /> liệu cuối cùng<br /> Số lượng mẫu<br /> yêu cầu cho việc<br /> thiết lập dữ liệu<br /> Định dạng cần<br /> thiết để đáp ứng<br /> nhu cầu với<br /> hiệu quả cao<br /> Công cụ cần<br /> thiết để đáp ứng<br /> nhu cầu công<br /> việc<br /> Xem xét hiệu<br /> quả/ thời gian<br /> <br />