Tổng hợp và xác định độ tinh khiết của Dehydronifedipin (tạp A) và Dehydronitroso nifedipin (tạp B) của nifedipin

Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 2 * 2016<br /> <br /> <br /> TỔNG HỢP VÀ XÁC ĐỊNH ĐỘ TINH KHIẾT<br /> CỦA DEHYDRONIFEDIPIN (TẠP A) VÀ DEHYDRONITROSO NIFEDIPIN<br /> (TẠP B) CỦA NIFEDIPIN<br /> Trần Văn Mười*, Nguyễn Xuân Thanh**, Văn Kim Thành**, Nguyễn Đức Tuấn**<br /> <br /> TÓM TẮT<br /> Mở đầu – Mục tiêu: Dehydronifedipin (tạp A) và dehydronitroso nifedipin (tạp B) là hai tạp chất liên<br /> quan của nifedipin, phát sinh do phản ứng oxy hóa của nifedipin dưới tác dụng của oxy không khí hoặc ánh<br /> sáng tử ngoại. Do đó, Dược điển Việt Nam IV và Dược điển một số nước như BP 2013, USP 38 đều qui<br /> định phải kiểm tra giới hạn hàm lượng tạp A và tạp B cả trong nguyên liệu và thành phẩm nifedipin. Trong<br /> khi đó, chuẩn tạp A và tạp B đang được bán với giá rất đắt và phải đặt mua từ nước ngoài nên gây khó<br /> khăn, bị động cho công tác kiểm nghiệm tạp chất này trong nguyên liệu và thành phẩm nifedipin. Cho đến<br /> nay, ở Việt Nam chưa có nghiên cứu nào trong nước công bố qui trình tổng hợp tạp A và tạp B của<br /> nifedipin. Từ nhu cầu thực tế trên, nghiên cứu này được thực hiện với mục tiêu tổng hợp hai tạp A và B<br /> đạt độ tinh khiết cao, có thể dùng để thiết lập chất đối chiếu.<br /> Đối tượng: Dehydronifedipin (tạp A) và dehydronitroso nifedipin (tạp B) của nifedipin.<br /> Phương pháp nghiên cứu: Tạp A đã được tổng hợp từ nifedipin bằng phản ứng oxy hóa với tác nhân<br /> HNO3 – SiO2. Tạp B đã được tổng hợp từ nifedipin bằng phản ứng quang hóa dưới tia tử ngoại. Sản phẩm sau<br /> khi tổng hợp và kết tinh đã được xác định cấu trúc bằng các kỹ thuật phổ nghiệm như IR, MS và NMR, được xác<br /> định độ tinh khiết bằng phương pháp HPLC qui về 100% diện tích pic.<br /> Kết quả: Tạp A và tạp B của nifedipin đã được tổng hợp với hiệu suất lần lượt là 31,1% (khoảng 1 g) và<br /> 73,4% (khoảng 1,7 g). Sản phẩm tổng hợp đạt độ tinh khiết sắc ký trên 99%.<br /> Kết luận: Dehydronifedipin (tạp A) và dehydronitroso nifedipin (tạp B) của nifedipin đã được tổng hợp<br /> thành công với độ tinh khiết sắc ký trên 99%, đủ điều kiện thiết lập chất đối chiếu.<br /> Từ khóa: Tạp chất liên quan của nifedipin, dehydronifedipin (tạp A của nifedipin), dehydronitroso nifedipin<br /> (tạp B của nifedipin), tổng hợp dehydronifedipin, tổng hợp dehydronitroso nifedipin.<br /> ABSTRACT<br /> SYNTHESIS AND PURITY DETERMINATION OF DEHYDRONIFEDIPINE (IMPURITY A) AND<br /> DEHYDRONITROSO NIFEDIPINE (IMPURITY B) AS RELATED SUBSTANCE OF NIFEDIPINE<br /> Tran Van Muoi, Nguyen Xuan Thanh, Van Kim Thanh, Nguyen Duc Tuan<br /> * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Supplement of Vol. 20 - No 2 - 2016: 170 - 176<br /> <br /> Background - Objectives: Dehydronifedipine (impurity A, DH-NIF) and dehydronitroso nifedipine<br /> (impurity B, DHN-NIF), two related compounds of nifedipine, are arisen by oxydation of nifedipine by<br /> atmospheric oxygen and UV light. The Vietnamese pharmacopoeia IV, BP 2013 and USP 38 require conducting<br /> the impurity test in nifedipine pharmaceutical substance as well as corresponding finished product. Additionally,<br /> two mentioned impurity reference standards are costly with limited accessibility that affects implementation of<br /> these impurity test. There have been no published local studies on chemical synthesis of two nifedipine impurities<br /> so far. Therefore, this study was conducted with the aim of synthesis of DH-NIF and DHN-NIF with high purity<br /> that conform to establish reference standard.<br /> <br /> *Sở Y tế Thành phố Hồ Chí Minh **Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh<br /> Tác giả liên lạc: PGS. TS. Nguyễn Đức Tuấn ĐT: 0913 799 068 Email: diemnhim@yahoo.com<br /> 170 Chuyên Đề Dược<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 2 * 2016 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Method: The subject of this study was DH-NIF and DHN-NIF. Method: DH-NIF was synthesized from<br /> nifedipine by redox reaction, using nitric acid suported by silica gel (HNO3 – SiO2). DHN-NIF was synthesized<br /> by exposure of nifedipine to UV light. The synthetic and crystallized products were determined chemical structure<br /> from their IR, MS and NMR spectroscopic data, purified by HPLC using peak area normalization method.<br /> Results: DH-NIF and DHN-NIF were synthesized with 31.1% (ca. 1 g) and 73.4% yields (ca. 1.7 g),<br /> respectively. By using HPLC-PDA, their chromatographic purity was determined over 99% on the basis of peak<br /> area normalization method.<br /> Conclusion: DH-NIF and DHN-NIF were successfully synthesized with their purity over 99% that<br /> conform to establish reference standards.<br /> Key words: Related compound of nifedipine, dehydronifedipine (nifedipine impurity A), dehydronitroso<br /> nifedipine (impurity B), synthesis of dehydronifedipine, synthesis of dehydronitroso nifedipine.<br /> ĐẶT VẤN ĐỀ Nguyên vật liệu<br /> Dehydronifedipin (tạp A) và dehydronitroso Nguyên liệu nifedipin: nhà sản xuất Moehs<br /> nifedipin (tạp B) là hai tạp chất liên quan của (Tây Ban Nha), hàm lượng 98% - 102%, hạn<br /> nifedipin, phát sinh do phản ứng oxy hóa của dùng 11/2014.<br /> nifedipin dưới tác dụng của oxy không khí hoặc Hóa chất và dung môi: acid nitric, methanol,<br /> ánh sáng tử ngoại(7), gây ảnh hưởng đến hiệu dicloromethan, ethyl acetat, n-hexan đạt tiêu<br /> quả điều trị và đặc tính an toàn của nifedipin đối chuẩn phân tích. Acetonitril (ACN), methanol<br /> với bệnh nhân(8). Do đó, Dược điển Việt Nam IV (MeOH) đạt tiêu chuẩn dùng cho sắc ký lỏng.<br /> và Dược điển một số nước như BP 2013, USP 38 Trang thiết bị: hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng<br /> đều qui định phải kiểm tra giới hạn hàm lượng cao (HPLC) Hitachi 2000, đầu dò PDA. Máy<br /> tạp A và tạp B cả trong nguyên liệu và thành quang phổ IR Bruker alpha-T. Máy LC-MS<br /> phẩm nifedipin(2,3,9). Trong khi đó, chuẩn tạp A Agilent 1200 nguồn ESI. Máy cộng hưởng từ hạt<br /> và tạp B đang được bán với giá rất đắt và phải nhân Bruker Advance II. Đèn UVA Reptile Vision<br /> đặt mua từ nước ngoài nên gây khó khăn, bị Exo Terra 26W. Bản mỏng silica gel F254. Máy đo<br /> động cho công tác kiểm nghiệm tạp chất này nhiệt độ nóng chảy Gallenkamp Sanyo. Cân<br /> trong nguyên liệu và thành phẩm nifedipin. Cho phân tích ABT 220 – 5DM (Kern).<br /> đến nay, ở Việt Nam chưa có nghiên cứu nào<br /> Phương pháp nghiên cứu<br /> trong nước công bố qui trình tổng hợp tạp A và<br /> tạp B của nifedipin. Từ nhu cầu thực tế trên, Tổng hợp tạp A của nifedipin<br /> nghiên cứu này được thực hiện với mục tiêu (dehydronifedipin)<br /> tổng hợp hai tạp A và B đạt độ tinh khiết cao, có Dehydronifedipin được tổng hợp từ<br /> thể dùng để thiết lập chất đối chiếu. nifedipin bằng phản ứng oxy hóa khử, sử dụng<br /> tác nhân oxy hóa là HNO3 - SiO2. Phản ứng tổng<br /> ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU<br /> hợp như sau(1):<br /> Đối tượng nghiên cứu<br /> Tạp A và tạp B của nifedipin.<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Nifedipin Dehydronifedipin (tạp A)<br /> <br /> <br /> <br /> Chuyên Đề Dược 171<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 2 * 2016<br /> <br /> <br /> Tổng hợp tạp B của nifedipin Dehydronitroso nifedipin được tổng hợp từ<br /> (dehydronitroso nifedipin) nifedipin bằng phản ứng quang hóa với tác nhân<br /> là tia tử ngoại. Phản ứng tổng hợp như sau(4,5):<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Nifedipin Dehydronitroso nifedipin (tạp B)<br /> Sản phẩm sau khi tổng hợp được tinh chế nồng độ 250 µg/ml ACN. Qui trình xác định độ<br /> bằng kỹ thuật sắc ký cột và được kết tinh trong tinh khiết tạp F được thẩm định dựa theo hướng<br /> hỗn hợp aceton - nước dẫn của ICH(6).<br /> Sắc ký cột: cột silicagel (60 x 4 cm, 80 g), pha KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN<br /> động ethyl acetat - n-hexan (2 : 8), mẫu thử:<br /> Tổng hợp và tinh chế tạp A của nifedipin<br /> khoảng 2 g sản phẩm thô được hòa tan với một<br /> (dehydronifedipin)<br /> lượng tối thiểu dicloromethan. Kiểm tra các<br /> phân đoạn (5 ml/phân đoạn) bằng sắc ký lớp Tạp A được tổng hợp bằng cách cân khoảng<br /> mỏng với hệ dung môi ethyl acetat - n-hexan (tỷ 3,46 g nifedipin ( 0,01 mol), cho vào bình cầu,<br /> lệ 2 : 8 với tạp A và 4 : 6 với tạp B). Quá trình sắc thêm 100 ml dicloromethan. Cân 2,5 g hỗn hợp<br /> ký cột kết thúc khi trên bản mỏng không còn HNO3-SiO2 đã chuẩn bị trước (2 g silicagel + 3,2<br /> xuất hiện vết sản phẩm. ml HNO3 đậm đặc, trộn đều 10 phút), cho vào<br /> bình cầu chứa nifedipin, khuấy đều 15 phút. Lọc<br /> Sản phẩm sau khi tinh chế được sơ bộ kiểm<br /> hỗn hợp phản ứng qua giấy lọc, hứng dịch lọc<br /> tra độ tinh khiết bằng nhiệt độ nóng chảy và sắc<br /> vào bình chiết, rửa bình cầu 2 lần, mỗi lần 10 ml<br /> ký lớp mỏng với 3 hệ dung môi có độ phân cực<br /> dicloromethan, cho nước rửa vào bình chiết,<br /> khác nhau.<br /> thêm tiếp 50 ml nước cất, lắc đều, để yên và lấy<br /> Sắc ký lớp mỏng: bản mỏng silicagel F254 (10 x dịch dicloromethan, cho vào cốc có mỏ. Tiếp tục<br /> 2 cm). Hệ dung môi: n-hexan - ethyl acetat (8 : 2), thực hiện 2 - 3 lần với 50 ml nước cất cho đến khi<br /> n-hexan - ethyl acetat (6 : 4), n-hexan - aceton (4 : dịch nước không làm giấy quỳ xanh chuyển<br /> 6). Mẫu thử: 1 mg/ml dicloromethan. sang đỏ (đã loại hết HNO3). Lọc dịch<br /> Sản phẩm sau khi thử tinh khiết được xác dicloromethan qua giấy lọc chứa Na2SO4 khan,<br /> định cấu trúc bằng các phương pháp phổ hứng dịch lọc vào bình cầu. Tiến hành cô chân<br /> nghiệm IR, MS và NMR. không đến khô và sấy chân không ở nhiệt độ<br /> Xác định độ tinh khiết tạp A và tạp B bằng không quá 50 oC. Cho sản phẩm thô vào lọ màu<br /> nâu, đậy kín và bảo quản ở nhiệt độ 4 oC. Tiến<br /> HPLC-PDA<br /> hành sắc ký cột sản phẩm thô và tinh chế sản<br /> Độ tinh khiết của tạp A và tạp B được xác<br /> phẩm thu được trong một lượng tối thiểu aceton<br /> định bằng phương pháp HPLC qui về 100% diện<br /> trong cốc có mỏ, thêm từ từ nước cất cho tới khi<br /> tích pic. Điều kiện sắc ký: cột Phenomenex Gemini<br /> hỗn hợp trở nên đục, để hỗn hợp ở nhiệt độ 4 oC<br /> NX C18 (150 x 4,6 mm; 3 µm), pha động ACN -<br /> trong 2 giờ sẽ xuất hiện tinh thể. Lọc dưới áp<br /> nước (50 : 50), tốc độ dòng 0,8 ml/phút, đầu dò<br /> suất giảm, thu sản phẩm kết tinh và sấy chân<br /> PDA với bước sóng phát hiện 254 nm, thể tích<br /> không ở nhiệt độ không quá 50 oC để thu sản<br /> tiêm mẫu 20 µl, nhiệt độ cột 30 oC. Mẫu thử có<br /> <br /> <br /> 172 Chuyên Đề Dược<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 2 * 2016 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> phẩm. Hiệu suất toàn phần khoảng 31,1% cấu tạo của dehydronifedipin: IR (KBr): max (cm-<br /> (khoảng 1 g). 1) C=O (1728), NO2 (1524), C-O (1111). Phổ ESI-<br /> <br /> <br /> Sản phẩm sau khi kết tinh được đo nhiệt MS(+) của sản phẩm sau khi kết tinh có m/z =<br /> độ nóng chảy 3 lần, cho kết quả 104,6 ± 1 oC, 367,0908 [M-Na]+; M phù hợp với công thức<br /> tương đương với nhiệt độ nóng chảy của phân tử của dehydronifedipin: C17H16N2O6 (M =<br /> dehydronifedipin. Kết quả khai triển sắc ký 344,3). Dữ liệu phổ 13C-NMR và phổ 1H-NMR<br /> lớp mỏng với 3 hệ dung môi có độ phân cực của sản phẩm sau khi kết tinh được trình bày<br /> khác nhau cho thấy sản phẩm chỉ cho một vết trong bảng 1. Phân tích dữ liệu phổ 13C-NMR và<br /> 1H-NMR cho thấy số lượng và vị trí của proton,<br /> duy nhất.<br /> carbon của sản phẩm kết tinh phù hợp với công<br /> Phổ IR của sản phẩm sau khi kết tinh xuất<br /> thưc cấu tạo của dehydronifedipin (tạp A).<br /> hiện các đỉnh đặc trưng phù hợp với công thức<br /> Bảng 1: Dữ liệu phổ NMR của sản phẩm sau khi kết tinh<br /> 1 13<br /> H-NMR(500 MHz, DMSO-d6): H (ppm) C-NMR(125 MHz,DMSO-d6): C (ppm)<br /> 8,26 (d; J = 9,5 Hz); 1H; H3’ 23,10; 2C; CH3 gắn vòng pyridin<br /> 7,81 (t; J = 7,75 Hz); 1H; H5’ 52,23; 1C; CH3 ester<br /> 7,73 (t; J = 10 Hz); 1H; H4’ 124,35; 2C; C3, C5<br /> 7,29 (d; J = 5 Hz); 1H; H6’ 124,46; 1C; C3’<br /> 3,44; s; 6H; CH3 nhóm ester 130,35; 1C; C5’<br /> 2,55; s; 6H; CH3 gắn vòng pyridin 130,60; 1C; C6’<br /> 130,81; 1C; C4’<br /> 133,80; 1C; C1’<br /> 144,67; 1C; C4<br /> 146,81; 1C; C2’<br /> 156,05; 2C; C2,C6<br /> 166,54; 2C; C=O ester<br /> <br /> <br /> Công thức cấu tạo của dehydronifedipin (tạp A)<br /> <br /> Tổng hợp và tinh chế tạp B của nifedipin dòng khí argon và sấy chân không để thu sản<br /> (dehydronitroso nifedipin) phẩm. Hiệu suất toàn phần khoảng 73,4%<br /> (khoảng 1,7 g).<br /> Tạp B được tổng hợp bằng cách cân khoảng<br /> 1,73 g nifedipin ( 0,005 mol), cho vào cốc có mỏ Sản phẩm sau khi kết tinh được đo nhiệt độ<br /> 250 ml. Thêm 50 ml methanol, khuấy đều, chiếu nóng chảy 3 lần, cho kết quả 94 ± 1oC, tương<br /> đèn UV trong khoảng 15 giờ (khoảng cách từ đương với nhiệt độ nóng chảy của<br /> đèn tới bề mặt dung dịch khoảng 10 cm, che toàn dehydronitroso nifedipin. Kết quả khai triển sắc<br /> bộ hệ thống bằng thùng carton kín). Sau phản ký lớp mỏng với 3 hệ dung môi có độ phân cực<br /> ứng lắc dung dịch phản ứng với Na2SO4, chuyển khác nhau cho thấy sản phẩm chỉ cho một vết<br /> dung dịch thu được vào bình cầu, rửa cốc có mỏ duy nhất.<br /> với methanol 2 lần, mỗi lần 10 ml, cho nước rửa Phổ IR của sản phẩm sau khi kết tinh xuất<br /> vào bình cầu. Tiến hành cô quay loại dung môi hiện các đỉnh đặc trưng phù hợp với công thức<br /> và sấy chân không sản phẩm thu được ở nhiệt cấu tạo của dehydronitrso nifedipin: IR (KBr):<br /> độ không quá 50oC. Cho sản phẩm thô vào lọ max (cm-1) C=O (1729), NO (1492), C-O (1110).<br /> màu nâu, đậy kín và bảo quản ở nhiệt độ 4oC. Phổ ESI-MS(+) của sản phẩm sau khi kết tinh có<br /> Tiến hành sắc ký cột sản phẩm thô và tập trung m/z = 351,0956 [M-Na]+; M phù hợp với công<br /> các phân đoạn có vết cùng vị trí khi kiểm tra thức phân tử của dehydronitroso nifedipin:<br /> bằng sắc ký lớp mỏng. Bay hơi dung môi dưới C17H16N2O5 (M = 328,32). Dữ liệu phổ 13C-NMR<br /> <br /> <br /> Chuyên Đề Dược 173<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 2 * 2016<br /> <br /> và phổ 1H-NMR của sản phẩm sau khi kết tinh 135,01; 1C; C4’<br /> được trình bày trong bảng 2. Phân tích dữ liệu 139,95; 1C; C1’<br /> 144,40; 1C; C4<br /> phổ 13C-NMR và 1H-NMR cho thấy số lượng và<br /> 156,46; 1C; C2’<br /> vị trí của proton, carbon của sản phẩm kết tinh 161,64; 2C; C2,C6<br /> phù hợp với công thưc cấu tạo của 167,71; 2C; C=O<br /> dehydronitroso nifedipin (tạp B). ester<br /> <br /> Bảng 2: Dữ liệu phổ NMR của sản phẩm sau khi kết<br /> tinh Công thức cấu tạo của dehydronitroso<br /> 1 13 nifedipin (tạp B)<br /> H-NMR (500 MHz, CDCl3): H (ppm) C-NMR (125<br /> MHz, CDCl3): C Xác định độ tinh khiết tạp A và tạp B bằng<br /> (ppm)<br /> 7,72 (t; J = 7,5 Hz); 1H; H5’ 23,52; 2C; CH3<br /> HPLC-PDA<br /> gắn vòng pyridin Kết quả thẩm định qui trình xác định độ<br /> 7,52 (d; J = 5 Hz); 1H; H3’ 52,02; 1C; CH3 tinh khiết tạp A và tạp B của nifedipin bằng kỹ<br /> ester<br /> 7,44 (t; J = 7,5 Hz); 1H; H4’ 107,86; 2C; C3, thuật HPLC-PDA được trình bày trong bảng 3<br /> C5 và bảng 4.<br /> 6,55 (d; J = 10 Hz); 1H; H6’ 127,27; 1C; C3’<br /> 3,39; s; 6H; CH3 nhóm ester 128,86; 1C; C5’<br /> 2,67; s; 6H; CH3 gắn vòng pyridin 130,68; 1C; C6’<br /> Bảng 3: Kết quả khảo sát tính phù hợp hệ thống của phương pháp (n = 6)<br /> Giá trị thống kê tR (phút) S (µV x giây) As N<br /> Tạp A Trung bình 6,446 8588137 1,16 10839<br /> RSD 0,02% 0,73% 0,00% 1,09%<br /> Tạp B Trung bình 7,167 6399361 1,06 28073<br /> RSD 0,18% 0,12% 1,31% 1,79%<br /> Nhận xét : RSD của thông số sắc ký như (As) trong khoảng 0,8 – 1,5. Như vậy qui trình<br /> diện tích đỉnh (S), thời gian lưu (tR) và số đĩa xác định độ tinh khiết tạp A và tạp B đạt tính<br /> lý thuyết (N) đều nhỏ hơn 2%, hệ số bất đối phù hợp hệ thống.<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> (a)<br /> (b)<br /> (c)<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Hình 1: Sắc ký đồ mẫu trắng (a), mẫu thử tạp A (b), pha động (c)<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 174 Chuyên Đề Dược<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 2 * 2016 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> (a)<br /> (b)<br /> (c)<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Hình 2: Sắc ký đồ mẫu thử tạp B (a), mẫu trắng (b), pha động (c)<br /> Kết quả khảo sát tính chọn lọc cho thấy trong KẾT LUẬN<br /> cùng điều kiện phân tích: sắc ký đồ mẫu trắng và Dehydronifedipin (tạp A) và dehydronitroso<br /> mẫu pha động không xuất hiện pic có thời gian nifedipin (tạp B) của nifedipin đã được tổng hợp<br /> lưu tương ứng với pic tạp A và tạp B trên sắc ký thành công với hiệu suất toàn phần lần lượt<br /> đồ mẫu thử. Sắc ký đồ mẫu thử không xuất hiện khoảng 31,1% (khoảng 1 g) và 73,4% (khoảng 1,7<br /> pic tạp trùng với pic tạp A và B. Pic tạp A và pic g). Cả 2 tạp đã được đánh giá để làm chất đối<br /> tạp B tinh khiết. Vậy qui trình có tính chọn lọc chiếu với độ tinh khiết trên 99%, có thể được sử<br /> (Hình 1 và Hình 2). dụng trong kiểm nghiệm tạp chất liên quan của<br /> Bảng 4: Kết quả khảo sát khoảng tuyến tính, độ chính nifedipin.<br /> xác và độ đúng của phương pháp<br /> Tạp A Tạp B<br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO<br /> Phương trình hồi qui ŷ = 26507786X ŷ = 25684885X 1. Arash GC, Mohsen N, Hamid GI, Lotfi S, Zahra C (2009),<br /> “Oxidation of Hantzsch 1,4-Dihydropyridines Using<br /> Khoảng tuyến tính 50 - 500 30 - 700<br /> Supported Nitric Acid on Silica Gel and Poly Vinyl<br /> (ppm)<br /> Pyrrolidone (PVP) under Mild and Heterogeneous<br /> Hệ số tương quan (R) 0,9999 0,9999<br /> Conditions”, Bull. Korean Chem. Soc, 30(4), 972-974.<br /> Độ chính xác (RSD, 0,22% 0,16% 2. Bộ Y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất bản Y học,<br /> n=6) Hà Nội, tr. 435-436.<br /> Độ tinh khiết sắc ký 99,56% 99,71% 3. BP 2013, CD-ROM.<br /> 4. Henk de V, Gerard MJ Beijersbergen van H (1998)<br /> Kết quả thẩm định cho thấy qui trình xác “Photoreactivity of nifedipine in vitro and in vivo”, Journal of<br /> định độ tinh khiết tạp A và tạp B của nifedipin photochemistry and photobiology B, 43, 217-221.<br /> 5. Henkde V, Gerard MJ, Beijersbergen Van H (1995),<br /> có tính chọn lọc, khoảng tuyến tính rộng với giá “Photodegradation of nifedipine under in vivo related<br /> trị của hệ số tương quan cao, đạt yêu cầu về độ circumstances”, Photochemistry and Photobiology, 62(6), 959-<br /> 963.<br /> chính xác. Tạp A và tạp B có độ tinh khiết sắc ký 6. ICH Harmonized tripartite guideline (2005), Validation of<br /> analytical procedures: text and methodology, pp. 1 – 13.<br /> lần lượt là 99,56% và 99,71% nên đủ điều kiện để<br /> 7. Nguyễn Thị Kim Thanh, Cao Ngọc Anh, Mai Thanh Hà, Lê<br /> thiết lập chất đối chiếu. Quang Thảo (2007), “Nghiên cứu tạo tạp chất nifedipin<br /> nitrophenylpyridin analog (tạp A) và nifedipin<br /> nitrosophenylpyridin analog (tạp B) để kiểm tra sự phù hợp<br /> của hệ thống sắc ký và xác định tạp chất trong nguyên liệu<br /> <br /> <br /> <br /> Chuyên Đề Dược 175<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 2 * 2016<br /> <br /> nifedipin bằng phương pháp HPLC”, Tạp chí Kiểm nghiệm Ngày nhận bài báo: 30/10/2015<br /> thuốc, số 3, 13-18.<br /> Ngày phản biện nhận xét bài báo: 20/11/2015<br /> 8. Syed LA (1989), Analytical profiles of drug substances,<br /> Academic Press, volume 18, pp. 221-268.<br /> Ngày bài báo được đăng: 20/02/2016<br /> 9. USP 38, Electronic Edition.<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 176 Chuyên Đề Dược<br />