ứng dụng DNA strip trong định danh và tính kháng thuốc của mycobacterium

Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ bản của Số 1 * 2015<br /> <br /> ỨNG DỤNG DNA STRIP TRONG ĐỊNH DANH<br /> VÀ TÍNH KHÁNG THUỐC CỦA MYCOBACTERIUM<br /> Nguyễn Ngọc Trương*, Raymond Zanda**, Mai Nguyệt Thu Hồng***, Nguyễn Thúy Hương****,<br /> Nguyễn Trường Sơn*<br /> <br /> TÓM TẮT<br /> Tổng quan: Trong nghiên cứu này, Chúng tôi đánh giá Genotype MTBDRplus assay phát hiện nhanh vi<br /> khuẩn lao và tính kháng thuốc với Isoniazid và Rifampin. Phương pháp thông thường hiện nay việc xác định vi<br /> khuẩn lao và tính kháng thuốc cần vài tuần đến vài tháng. Genotype MTBDRplus assay dựa trên kỹ thuật DNA<br /> strip: DNA vi khuẩn lao được ly trích tử mẫu đàm đã xử lý, khuếch đại, lai với đoạn dò đặc hiệu được gắn trên<br /> thanh giấy, cho phép định danh Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) và tính kháng thuốc của MTBC<br /> với Isoniazid và Rifampin, từ mẫu đàm.<br /> Mục đích: Đánh giá kết quả Genotype MTBDRplus assay trong định danh MTBC và tính kháng thuốc của<br /> MTBC với Isoniazid (INH), với Rifampin (RIF) và lao đa kháng thuốc (cù ng khá ng INH và RIF) (MDR).<br /> Phương pháp: Nghiên cứu thực hiện trên 326 mẫu đàm của bệnh nhân được chẩn đoán lao phổi, từ 08/2013<br /> đến 06/2014 . Mẫu đàm đươc xử lý theo phương pháp NALC NaOH (14). Mỗi mẫu thực hiện: (1)Soi kính hiển<br /> vi (KHV) phát hiện vi khuẩn kháng acide alcooh (AFB: Acide Fast Bacilli) sử dụng hai phương pháp nhuộm<br /> Ziehl-Neelsen và huỳnh quang, nuôi cấy theo phương pháp môi trường Lowenstein-Jensen (LJ) và<br /> Mycobacterium Growth Indicator Tube (MGIT) và kháng sinh đồ theo phương pháp môi trường MGIT phát hiện<br /> tính kháng thuốc Isoniazid và Rifampin; (2)Thực hiện Genotype MTBDRplus asssay để định danh và xác định<br /> tính kháng thuốc với Isoniazid và Rifampin của MTBC. Phân tích kết quả dựa vào độ nhạy, độ đặc hiệu, thời gian<br /> trung bình thực hiện của từng phương pháp.<br /> Kết quả: Phát hiện AFB và MTBC: Soi KHV 220/326 (67.5%) mẫu AFB dương tính, nuôi cấy định danh<br /> 226/326 (69.3%) MTBC dương tính. Kết quả Genotype MTBDRplus assay (TUB) 226/326 (69.3%) MTBC<br /> dương tính. Genotype MTBDRplus assay cho độ nhạy và độ đặc hiệu xác định MTBC là 99.1%, 98.0% (căn cứ<br /> kết quả nuôi cấy là tiêu chuẩn vàng). Phát hiện tính kháng thuốc: thực hiện 224 kháng sinh đồ kết quả là: 66/224<br /> (29.5%) trường hợp INH kháng, 26/224 (11.6%) trường hợp RIF kháng và MDR 24 (10.7%) trường hợp.<br /> Genotype MTBDRplus assay 224 trường hợp kết quả là: 67/224 (30.0%) trường hợp INH kháng, 26/224<br /> (11.6%) trường hợp RIF kháng và MDR 25 (11.2%) trường hợp. Genotype MTBDRplus assay cho độ nhạy và<br /> độ đặc hiệu xác định tính kháng thuốc của MTBC với Isonaizid là 98.7%, 98.5%, với Rifampin là 99.5%, 96.2%<br /> và lao đa kháng thuốc là 99.2%, 96.7% (căn cứ kết quả kháng sinh đồ là tiêu chuẩn vàng). Thời gian trung bình<br /> từng phương pháp: Thời gian trung bình thực hiện một mẫu: nuôi cấy là 31 ngày, kháng sinh đồ là 11 ngày và<br /> Genotype MTBDRplus assay là 6 giờ.<br /> Kết luận: Genotype MTBDRplus assay cho kết qủa định danh và xác định tính kháng thuốc của vi khuẩn lao<br /> tương đương với phương pháp nuôi cấy và kháng sinh đồ thông thường nhưng thời gian ngắn hơn nhiều. Độ<br /> nhạy và độ đặc hiệu xác định MTBC là 99.1% 98.0% và xác định tính kháng thuốc với Isonaizid là 98.7%,<br /> 98.5%, với Rifampin là 99.5%, 96.2%, lao đa kháng thuốc là 99.2%, 96.7% từ mẫu đàm, thời gian là 6 giờ,.<br /> Genotype MTBDRplus assay là xét nghiệm thực sự tạo thuận lợi trong xác định MTBC và chọn phác đồ điều trị<br /> * Bệnh viện Chợ rẫy,<br /> <br /> ** FV Hospital<br /> <br /> *** Trường Đại học Y Phạm Ngọc Thạch,<br /> 4<br /> <br /> **** Trường Đại học Bách khoa ĐHQG HCM<br /> Tác giả liên lạc: BS. Mai Nguyệt Thu Hồng<br /> ĐT: 0909753294<br /> <br /> 408<br /> <br /> Emaill: mnth59@yahoo.com<br /> <br /> Chuyên Đề Nội Khoa<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ bản của Số 1 * 2015<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> thích hợp cho bệnh nhân lao đa kháng thuốc, sớm hơn nhiều so với kết quả phương pháp thông thường.<br /> Từ khóa: DNA strip Mycobacterium, Genotype MTBDRplus assay.<br /> <br /> ABSTRACT<br /> APPLICATION OF DNA- STRIP FOR THE IDENTIFICATION AND DETERMINATION OF<br /> DRUG-RESISTANCE OF MYCOBACTERIUM<br /> Nguyen Ngoc Truong, Raymond Zanda, Mai Nguyet Thu Hong, Nguyen Thuy Huong,<br /> Nguyen Truong Son * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 19 - Supplement of No 1 - 2015: 408 - 413<br /> Background: In this prospective study, we assessed the performance of the Genotype MTBDRplus assay for<br /> the simultaneous identification of Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) and its ability for rapid detection<br /> of resistance to Isoniazid and Rifampin in sputum samples, compared to serveral weeks to months with<br /> conventional methods. Genotype MTBDRplus assay is based on DNA-Strip technology where MTBC DNA is<br /> extracted from the specimen, targeted MTBC DNA amplified via PCR and detected on a membrane strip using<br /> reverse hybridization and an enzymatic color reaction. The test enables the simultaneous detection of MTBC and<br /> its ability to detect resistance to Isoniazid and Rifampin in Sputum samples.<br /> Objective: Evaluation of the Genotype MTBDRplus assay for identification of MTBC and its ability to<br /> detect resistance to Isoniazid (INH), Rifampin (RIF) and Multidrug-resistant (MDR) in Sputum samples.<br /> Methods: 326 sputum samples were collected from patients with clinical suspicions of MTBC by chest X –<br /> ray findings from August 2013 to June 2014. Sputum specimens were processed by the WHO standard<br /> decontamination method of NALC NaOH method (12). AFB and MTBC detection was determined by (1) Acid<br /> Fast Bacilli (AFB) screening by fluorecence microscopy, two conventional culture methods (gold standard) of<br /> Lowenstein-Jensen (LJ) and Mycobacterium Growth Indicator Tube (MGIT) and Drug Sensitivity Testing (DST)<br /> using MGIT method to detect INH and RIF resistance (gold standard); (2) The Genotype MTBDRplus assay for<br /> the detection of MTBC and its ability to detect resistance to Isoniazid and Rifampin. Statistical analysis were<br /> performed for the detection rate of MTBC for each method and the sensitivity, specificity and the average time of<br /> each method.<br /> Results: Detection of of AFB and MTBC: Mycobacterium by Microscopy results in 67.5% AFB positive,<br /> Combined culture method results 69.3% MTBC positive. Genotype MTBDRplus assay 69.3% MTBC positive.<br /> The Genotype MTBDRplus assay sensitivity and specificity for the detection of MTBC were 99.1%, 98.0%<br /> respectively (against the gold standard of conventional culture). Detection of the drug-resistance: MGIT DST was<br /> performed on 224 cases that were MTBC positive: Of these positive MTBC cases 29.5% Resistant cases to INH,<br /> 11.6% resistant cases to RIF and multidrug-resistant (MDR - resistant to RIF and INH) cases were 10.7%. The<br /> MTBDRplus assay DST was performed on 224 cases (case (TUB)-positive): 30% Resistant cases to INH, 11.6%<br /> resistant cases to RIF and MDR cases were 11.2%. thuốc (căn cứ kết quả kháng sinh đồ là tiêu chuẩn vàng) .The<br /> sensitivity and specificity with Isonaizid were 98.7%, 98.5%, Rifampin were 99.5%, 96.2% and MDR-TB were<br /> 99.2%, 96.7%, Genotype MTBDRplus assay to detection of drug resistance (against the gold standard of<br /> conventional DST). The average Turn arount Time (TAT): The average TAT for the detection of MTBC by<br /> conventional culture methods was 31days. The TAT for DST using the conventional cultures and the<br /> MTBDRplus methods was 11 days and 6 hours respectively.<br /> Conclusions: Genotype MTBDRplus assay for Sensitivity and specificity for the identification of MTBC<br /> was highly comparible and the determination of drug-resistance of MTBC as comparied to the conventional DST<br /> method was much shorter by less than 10days. The Genotype MTBDRplus sensitivity and specificity of MTBC<br /> <br /> Nhiễm<br /> <br /> 409<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ bản của Số 1 * 2015<br /> <br /> for identified was 99.1%, 98.0% and drug-resistance to Isonaizid was 98.7%, 98.5%, Rifampin was 99.5%,<br /> 96.2% and MDR-TB is (99.2%, 96.7%) with a TAT of 6 hours. Genotype MTBDRplus assay application for<br /> detection of MDR – TB facilitates rapid and accurate testing to select the appropriate treatment regiments in<br /> earliy for TB disease as compared toconventional methods.<br /> Key word: DNA strip Mycobacterium, Genotype MTBDRplus assay.<br /> <br /> MỞ ĐẦU<br /> Theo Báo cáo của Tổ chức Y tế thế giới năm<br /> 2013, khoảng 1/3 dân số thế giới bị nhiễm lao, 12<br /> triệu người hiện mắc lao, 8,6 triệu người mới<br /> mắc lao, 1,3 triệu người tử vong do lao.Việt nam<br /> đứng hàng thứ 12 trong số 22 quốc gia có tỷ lệ<br /> bệnh lao cao nhất thế giới. Hàng năm, Việt nam<br /> có khoảng 130.000 người mắc lao mới, 170.000<br /> người mắc bệnh lao, khoảng 3.500 người mắc lao<br /> đa kháng thuốc và 18.000 người tử vong do<br /> bệnh lao(4).<br /> Trước tình bệnh lao gia tăng báo động hiện<br /> nay việc phát hiện sớm, điều trị kịp thời hiệu<br /> quả, nhằm ngăn chặn sự gia tăng của bệnh lao là<br /> việc làm cấp thiết.<br /> Kỹ thuật để phát hiện nhanh vi khuẩn lao là<br /> DNA Strip chỉ mất 6 giờ. Kỹ thuật DNA strip:<br /> DNA vi khuẩn lao được ly trích tử mẫu đàm đã<br /> xử lý, khuếch đại, lai với đoạn dò đặc hiệu được<br /> gắn trên thanh giấy, cho phép định danh<br /> Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) và<br /> tính kháng thuốc của MTBC với Isoniazid (gen<br /> rpoB) và Rifampin (gen katG, inhA), trực tiếp từ<br /> mẫu đàm chỉ trong thời gian 6 giờ(5).<br /> <br /> Thực hiện phát hiện vi khuẩn và tính kháng<br /> thuốc của MTBC theo phương pháp thông<br /> thường:<br /> - Phát hiện vi khuẩn: mẫu đàm đã xử lý, soi<br /> kính hiển vi (KHV); cấy 01 tuýp môi trường<br /> MGIT (Mycobacteria Growth Indicator Tube) ủ<br /> máy Bactec 960 theo dõi 42 ngày và 02 tuýp môi<br /> trường Lowenstein Jensen (LJ) ủ tủ ấm 35oC theo<br /> dõi 08 tuần(8). Khi máy Bactec báo có vi khuẩn<br /> mọc trong MGIT hoặc quan sát thấy khuẩn lạc<br /> hình bông cải thì thực hiện nhuộm ZiehlNeelsen(ZN). Nếu kết quả ZN là vi khuẩn kháng<br /> acid alcool (AFB) dạng thừng (cording), thực<br /> hiện GenProbe định danh MTBC(10,8).<br /> - Phát hiện tính kháng thuốc: kết quả nuôi<br /> cấy là MTBC, thực hiện theo phương pháp trong<br /> môi trường MGIT (SIRE) gồm: Streptomycin,<br /> Isoniazid, Rifampicin và Ethambutol trên máy<br /> Bactec 960 từ canh cấy MGIT hay khuẩn lạc<br /> LJ(12). Kết quả kháng đồ được máy Bactec 960<br /> báo tính kháng thuốc của từng kháng sinh.<br /> Trong nghiên cứu này chú trọng kết quả kháng<br /> sinh đồ của INH và RIF.<br /> <br /> Mẫu thử<br /> <br /> Thực hiện phát hiện vi khuẩn và tính kháng<br /> thuốc<br /> của<br /> MTBC<br /> bằng<br /> Genotype<br /> MTBDRplus assay<br /> <br /> Mẫu thử là đàm, được thu nhận từ nhũng<br /> bệnh nhân được chẩn đoán bệnh lao phổi. Tổng<br /> số mẫu 326, thời gian thực hiện từ 08/2013 đến<br /> 06/2014.<br /> <br /> Thực hiện mù từ mẫu đàm đã được xử lý:<br /> DNA vi khuẩn lao được ly trích, khuếch đại, lai<br /> với đoạn dò đặc hiệu được gắn trên thanh giấy,<br /> đọc kết quả so thanh giấy với bảng chuẩn(5).<br /> <br /> Xử lý mẫu<br /> <br /> - Ly trích DNA: 0,5 ml cặn lắng, ủ cách thủy<br /> 90oC trong 20 phút, Ultrasonic 15 phút, Ly tâm<br /> 13000 vòng/phút trong 5 phút.<br /> <br /> VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU<br /> <br /> Mẫu đàm đươc xử lý bằng phương pháp<br /> NALC-NaOH (N-Acetyl-L-Cysteine & Sodium<br /> Hydroxide)(8).<br /> Thực hiện phát hiện vi khuẩn và tính kháng<br /> thuốc của MTBC:<br /> <br /> 410<br /> <br /> - Khuếch đại (PCR): 45μl mix (35 μl PNM, 05<br /> μl 10x buffer PCR, 02 μl MgCl2,03 μl H2O, 0.2 μl<br /> HotStar Taq DNA polymarase) và 05 μl DNA.<br /> <br /> Chuyên Đề Nội Khoa<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ bản của Số 1 * 2015<br /> - Lai phát hiện: biến tính DNA, lai trong<br /> dung dịch đệm trên Twincubator ở 45 oC, phát<br /> hiện và đọc kết quả so thanh giấy với bảng<br /> chuẩn.<br /> Phát hiện MTBC Genotype MTBDRplus<br /> assay (TUB) xuất hiện vạch tương ứng và tính<br /> kháng thuốc với INH và RIF của MTBC được xác<br /> định khi trên thanh giấy không xuất hiện ít nhất<br /> một đoạn dò hoang dại hay xuất hiện ít nhất một<br /> đoạn dò đột biến.<br /> 4. Phân tích so sánh kết quả dưa vào độ<br /> nhạy, độ đặc hiệu và thời gian trung bình của<br /> từng phương pháp(11).<br /> <br /> KẾT QUẢ<br /> Trong nghiên cứu 326 mẫu đàm thực hiện<br /> soi KHV, nuôi cấy kháng sinh đồ và Genotype<br /> MTBDRplus assay cho kết quả như sau:<br /> <br /> Phát hiện vi khuẩn<br /> - Soi KHV: 220/326(67.5%) mẫu AFB dương<br /> tính và 106/326 mẫu AFB âm tính.<br /> - Nuôi cấy định danh: 226/326 (69,3%) MTBC<br /> dương tính ,79 MTBC âm tính và 21 NonTuberculous Mycobateria (NTM).<br /> - Kết quả Genotype MTBDRplus assay định<br /> danh (TUB): 226/326 (69,3%) MTBC dương tính,<br /> 100/326 MTBC âm tính.<br /> Bảng 1: Kết quả soi KHV, nuôi cấy và Genotype<br /> MTBDRplus assay:<br /> Soi KHV (n=326)<br /> Nuôi cấy (n=326)<br /> Genotype MTBDRplus<br /> assay (n=326)<br /> <br /> Kết quả (+)<br /> 220(67.5%)<br /> 226(69.3%)<br /> <br /> Kết quả (-)<br /> 106<br /> 100 (79+21)<br /> <br /> 226(69.3%)<br /> <br /> 100<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Phát hiện tính kháng thuốc của vi khuẩn<br /> - Kháng sinh đồ phương pháp môi trường<br /> MGIT: thực hiện 224 kết quả với INH 158/224<br /> nhạy, 66/224 kháng, với RIF 198/224 nhạy, 26/224<br /> kháng và MDR 24 trường hợp.<br /> - Genotype MTBDRplus assay: thực hiện 224<br /> mẫu với INH 157/224 nhạy, 67/224 kháng ;với<br /> RIF 198/224 nhạy, 26/224 kháng và MDR là 25<br /> trường hợp.<br /> <br /> Thời gian trung bình thực hiện từng<br /> phương pháp<br /> Thời gian trung bình thực hiện một mẫu<br /> nuôi cấy là 31 ngày, kháng sinh đồ là 11 ngày và<br /> Genotype MTBDRplus assay là 6 giờ.<br /> - Phương pháp thông thường: Nuôi cấy(31)+<br /> Kháng sinh đồ(11) → Kết quả 42 ngày<br /> - Genotype MTBDRplus assay: ly trích,<br /> khuếch đại, lai → Kết quả 06 giờ<br /> <br /> BÀN LUẬN<br /> Từ kết quả của 326 mẫu đàm có thể phân tích<br /> kết quả như sau:<br /> Trong kết quả 326 trường hợp soi KHV, nuôi<br /> cấy kháng sinh đồ và Genotype MTBDRplus có:<br /> - 217 trương hợp cả ba phương pháp đều<br /> dương tính và 97 trường hợp cả ba phương pháp<br /> cùng âm tính.<br /> - 07 trường hợp nuôi cấy (+) ,MTBDRplus<br /> assay (+), soi KHV (-) và trường hợp<br /> 01 trường hợp nuôi cấy (+), Genotype<br /> MTBDRplus assay (-), soi KHV(-) trường hợp<br /> này cũng do AFB trong mẫu thử quá ít(10,9,8,12).<br /> <br /> (+): dương tính, (-): âm tính<br /> <br /> Bảng 2: Kết quả phát hiện vi khuẩn của soi KHV, nuôi cấy và Genotype MTBDRplus assay:<br /> <br /> Soi KHV(+) (n=220)<br /> Soi KHV(-) (n=106)<br /> Tổng cộng (n=326)<br /> <br /> Nuôi cấy (+) (n=226)<br /> MTBDRplus assay(+)<br /> MTBDRplus assay(-)<br /> 217<br /> 1<br /> 7<br /> 1<br /> 224<br /> 2<br /> <br /> - 01 trường hợp nuôi cấy (-) ,Genotype<br /> MTBDRplus assay (+), soi KHV(+) đây là trường<br /> <br /> Nhiễm<br /> <br /> Nuôi cấy (-) (n=100)<br /> MTBDRplus assay(+) MTBDRplus assay(-)<br /> 1<br /> 1<br /> 1<br /> 97<br /> 2<br /> 98<br /> <br /> hợp bệnh nhân đang điều trị nên vi khuẩn đã<br /> chết(2,6,8,5).<br /> <br /> 411<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ bản của Số 1 * 2015<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> - 01 trường hợp nuôi cấy (-), Genotype<br /> MTBDRplus assay (-), soi KHV(+) trường hợp<br /> <br /> này AFB là NTM(2,8,12,5 ).<br /> <br /> Bảng 3: Kết quả nuôi cấy và Genotype MTBDRplus assay (TUB)<br /> Nuôi cấy (+)<br /> MTBDRplus assy TUB(+) (n=226)<br /> MTBDRplus assy TUB(-) (n=100)<br /> Tổng cộng (n=236)<br /> <br /> Độ nhạy: 99,1%<br /> Giá trị tiên đoán dương tính (PPV): 99,1%<br /> Độ đặc hiệu: 980%<br /> <br /> Nuôi cấy (-)<br /> <br /> 224<br /> 2<br /> 226<br /> <br /> 2<br /> 98<br /> 100<br /> <br /> Độ nhạy và độ đặc hiệu (99,1%; 98,0%)<br /> Genotype MTBDRplus assay để phát hiện MTBC<br /> (căn cứ kết quả nuôi cấy là tiêu chuẩn vàng).<br /> <br /> Giá trị tiên đoán dương tính (NPV): 98,0%<br /> Bảng 4: Kết quả 224 trường hợp kháng sinh đồ và Genotype MTBDRplus assay:<br /> Kháng sinh đồ (n=224)<br /> INH<br /> <br /> Genotype- MTBDRplus assay<br /> (n=224)<br /> <br /> INH<br /> RIF<br /> <br /> S(n=157)<br /> R(n=67)<br /> S(n=198)<br /> R(n=26)<br /> <br /> Độ nhạy và độ đặc hiệu với Isonaizid là<br /> (98.7%, 98,5%), với Rifampin là (99.5%, 96.2%),<br /> và lao đa kháng thuốc là (99,2%, 96,7% )<br /> Genotype MTBDRplus assay để phát hiện tính<br /> kháng thuốc (căn cứ kết quả kháng sinh đồ là tiêu<br /> chuẩn vàng).<br /> Nhìn chung kết quả phát hiện tính kháng<br /> thuốc giữa thử nghiệm kháng sinh đồ và<br /> Genotype MTBDRplus assay không khác biệt<br /> nhiều.Trong 224 mẫu thử so sánh giữa kết kháng<br /> sinh đồ và Genotype MTBDRplus assay: 02<br /> trường hợp INH kết quả kháng sinh đồ nhạy<br /> nhưng Genotype MTBDRplus assay kháng và 01<br /> trương hợp RIF kháng sinh đồ nhạy mà<br /> Genotype MTBDRplus assay lại kháng trường<br /> hợp này gen ở trạng thái lặn vì kết quả kháng<br /> sinh đồ thể hiện kiểu hình còn Genotype<br /> MTBDRplus assay phát hiện gen(6,9).<br /> Kết quả nghiên cứu này phù hợp với kết quả<br /> nghiên cứu khác<br /> Kết quả tham khảo nghiên cứu của bắc Ấn<br /> độ: thực hiện 120 mẫu đàm với hai phương pháp<br /> kháng sinh đồ thông thường và Genotype<br /> MTBDRplus assay (Correlation with conventional<br /> DST and GenoType® MTBDRplus assay)(7).<br /> <br /> 412<br /> <br /> S (n=158)<br /> 156<br /> 2<br /> <br /> RIF<br /> R (n=66)<br /> 1<br /> 65<br /> <br /> S (n=198)<br /> <br /> R (n=26)<br /> <br /> 197<br /> 1<br /> <br /> 1<br /> 25<br /> <br /> Bảng 5: Kết quả của nghiên cứu này và nghiên cứu<br /> của Ấn độ<br /> Nghiên cứu<br /> INH RIF MDR<br /> Độ nhạy (%):<br /> 98.7 99.5 99.2<br /> Độ đặc hiệu(%): 98.5 96.2 96.7<br /> PPV (%):<br /> 99.4 99.5 99.2<br /> NPV (%):<br /> 97.0 96.2 96,7<br /> <br /> INH<br /> 96.3<br /> 98.4<br /> 98.1<br /> 96.7<br /> <br /> Ấn Độ<br /> RIF MDR<br /> 95.8 97.7<br /> 98.5 99.1<br /> 97.8 97.7<br /> 97.2 99.1<br /> <br /> Phương pháp soi KHV độ nhạy và độ đặc<br /> hiệu không cao, Phương pháp này chì phát hiện<br /> AFB chứ không phân biệt là MTBC hay NTM, vi<br /> khuẩn còn sống hay chết và có kháng thuốc hay<br /> không kháng thuốc .<br /> Nuôi cấy cho kết quả rất nhạy và chính xác,<br /> thời gian trung bình là 31 ngày.<br /> Kháng sinh đồ cho kết quả rất chuẩn thể<br /> hiện đúng tính kháng thuốc của vi khuẩn và<br /> thực hiện được nhiều loại kháng sinh nhưng<br /> phải phụ thuộc thời gian nuôi cấy. Thời gian<br /> trung bình kháng sinh đồ là 11ngày.<br /> Genotype MTBDRplus assay dể thực hiện,<br /> an toàn sinh học, giá thành thấp so với phương<br /> pháp thông thường, cho kết quả định danh và<br /> tính kháng thuốc với INH, với RIF của MTBC, từ<br /> mẫu đàm trong 06 giờ .<br /> <br /> Chuyên Đề Nội Khoa<br /> <br />