Các kỹ thuật chính của công nghệ nuôi cấy mô, tế bào thực vật

Chia sẻ: Tranhoai Nam | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:26

Thêm vào BST

Báo xấu

409
lượt xem 142
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Nhân giống vô tính in vitro: * Là quá trình sản xuất một lượng lớn cây hoàn chỉnh, từ các bộ phận, cơ quan như chồi, mất ngủ, vảy củ, đoạn thân, lá... của cây mẹ ban đầu thông qua kỹ thuật nuôi cấy in vitro.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Các kỹ thuật chính của công nghệ nuôi cấy mô, tế bào thực vật

Ch−¬ng iii C¸c kü thuËt chÝnh cña c«ng nghÖ nu«i cÊy m«, tÕ tÕ bµo thùc vËt I.nh©n gièng v« tÝnh in vitro in ( vi nh©n gièng c©y trång ) nh tr 1
1.Kh¸I niÖm chung ni Nh©n gièng v« tÝnh in vitro: L qu¸ tr×nh s¶n xuÊt mét l−îng lín c©y ho n chØnh, tõ c¸c bé phËn, c¬ quan nh− chåi, m¾t ngñ, v¶ycñ, ®o¹n th©n, l¸,...cña c©y mÑ ban ®Çu th«ng qua kü thuËt nu«i cÊy in vitro. Nh©n nhanh in vitro ®−îc øng dông v o: Duy tr× v nh©n nhanh c¸c kiÓu gen quÝ l m vËt liÖu cho c«ng t¸c gièng. Nh©n nhanh c¸c lo i hoa, c©y c¶nh khã trång b»ng h¹t. Duy tr× nh©n nhanh c¸c dßng bè mÑ v c¸c dßng lai ®Ó t¹o h¹t gièng c©y rau, c©y hoa v c©y trång kh¸c. Nh©n nhanh kÕt hîp víi l m s¹ch virus. B¶o qu¶n nguån gen in vitro −u ®iÓm cña kü thuËt nh©n nhanh in vitro: Ph−¬ng ph¸p cã hÖ sè nh©n rÊt cao v cho ra c¸c c¸ thÓ t−¬ng ®èi ®ång nhÊt vÒ mÆt di truyÒn Cã thÓ nh©n gièng c©y trång ë qui m« c«ng nghiÖp (kÓ c¶ trªn c¸c ®èi t−îng khã nh©n b»ng ph−¬ng ph¸p th«ng th−êng) DÔ d ng t¹o ®−îc c©y s¹ch virus C¸c c©y sau nh©n in vitro cã xu h−íng ®−îc trÎ ho¸---->n©ng cao hiÖu qu¶ nh©n b»ng c¸c ph−¬ng ph¸p th«ng th−êng sau ®ã 2
H¹n chÕ cña kü thuËt nh©n nhanh in vitro: Chi phÝ cao so víi c¸c ph−¬ng ph¸p nh©n gièng v« tÝnh kh¸c nªn gi¸ th nh kh«ng c¹nh tranh Kh«ng ph¶i bÊt cø lo i c©y n o còng cã thÓ vi nh©n gièng Mét sè lo i c©y trång rÊt dÔ bÞ biÕn dÞ khi nh©n gièng in vitro 2.C¸c b−íc chÝnh trong nh©n v« tÝnh in vitro LÊy mÉu B−íc I Nu«i cÊy khëi ®éng B−íc 2 B−íc 0 Nh©n nhanh lùa chän c©y mÑ Vi gi©m c nh ThÝch nghi B−íc 3 Ra rÔ Giai ®o¹n v−ên −¬m B−íc 4 ChuyÓn ra m«i tr−êng tù nhiªn H×nh 27. C¸c b−íc trong nh©n c©y trång b»ng nu«i cÊy m« Nguån: Robert N. Trigiano Dennis J. Gray, 2000 3
B−íc 0: Chän läc v chuÈn bÞ c©y mÑ 0: Ch chu Tr−íc khi tiÕn h nh nh©n gièng in vitro cÇn chän läc cÈn thËn c¸c c©y mÑ (c©y cho nguån mÉu nu«i cÊy). C¸c c©y n y cÇn ph¶i s¹ch bªnh, ®Æc biÖt l bÖnh virus v ë giai ®o¹n sinh tr−ëng m¹nh. ViÖc trång c¸c c©y mÑ trong ®iÒu kiÖn m«i tr−êng thÝch hîp víi chÕ ®é ch¨m sãc v phßng trõ s©u bÖnh hiÖu qu¶ tr−íc khi lÊy mÉu cÊy sÏ l m gi¶m tû lÖ mÉu nhiÔm, t¨ng kh¶ n¨ng sèng v sinh tr−ëng cña mÉu cÊy in vitro. B−íc 1: Nu«i cÊy khëi ®éng ®é L giai ®o¹n khö trïng ®−a mÉu v o nu«i cÊy in vitro. Giai ®o¹n n y cÇn ®¶m b¶o c¸c yªu cÇu: Tû lÖ nhiÔm thÊp, tû lÖ sèng cao, m« tån t¹i v sinh tr−ëng tèt. -Khi lÊy mÉu cÇn chän ®óng lo¹i m«, ®óng giai ®o¹n ph¸t triÓn cña c©y: m« non, Ýt chuyªn ho¸ ( ®Ønh chåi, m¾t ngñ, l¸ non, v¶y cñ...) -X¸c ®Þnh chÕ ®é khö trïng mÉu cÊy thÝch hîp:th−êng dïng c¸c chÊt: HgCl2 0,1% xö lý trong 5-10 phót, NaOCl, Ca(OCl)2 5-7% xö lý trong 15-20 phót, hoÆc H2O2, dung dÞch Br... 4
B−íc 2: Nh©n nhanh L giai ®o¹n kÝch thÝch m« nu«i cÊy ph¸t sinh h×nh th¸i v¨ t¨ng nhanh sè l−îng th«ng qua c¸c con ®−êng: ho¹t ho¸ chåi n¸ch, t¹o chåi bÊt ®Þnh v t¹o ph«i v« tÝnh. VÊn ®Ò l ph¶i x¸c ®Þnh ®−îc m«i tr−êng v ®iÒu kiÖn ngoaÞ c¶nh thÝch hîp ®Ó cã hiÖu qu¶ l cao nhÊt. Theo nguyªn t¾c chung m«i tr−êng cã nhiÒu xytokinin sÏ kÝch thÝch t¹o chåi. ChÕ ®é nu«i cÊy th−êng l : 25-270C, 16 giê chiÕu s¸ng/ ng y, c−êng ®é ¸nh s¸ng 2000- 4000 lux. B−íc 3: t¹o c©y in vitro ho n chØnh ch §Ó t¹o rÔ cho chåi, ng−êi ta chuyÓn chåi tõ m«i tr−êng nh©n nhanh sang m«i tr−êng t¹o rÔ. M«i tr−êng t¹o rÔ th−êng ®−îc bæ sung mét l−îng nhá auxin. Mét sè chåi cã thÓ ph¸t sinh rÔ ngay sau khi chuyÓn tõ m«i tr−êng nh©n nhanh gi u xytokinin sang m«i tr−êng kh«ng chøa chÊt ®iÒu tiÕt sinh tr−ëng. §èi víi c¸c ph«i v« tÝnh th−êng chØ cÇn gieo chóng trªn m«i tr−êng kh«ng cã chÊt ®iÒu tiÕt sinh tr−ëng hoÆc m«i tr−êng cã chøa nång ®é thÊp cña xytokinin ®Ó ph«i ph¸t triÓn th nh c©y ho n chØnh 5
B−íc 4: thÝch øng c©y in vitro 4: thÝch in ngo i ®iÒu kiÖn tù nhiªn. ngo §Ó ®−a c©y tõ èng nghiÖm ra v−ên −¬m víi tû lÖ sèng cao, c©y sinh tr−ëng tèt cÇn ®¶m b¶o mét sè yªu cÇu: C©y trong èng nghiÖm ® ®¹t nh÷ng tiªu chuÈn h×nh th¸i nhÊt ®Þnh (sè l¸, sè rÔ, chiÒu cao c©y). Cã gi¸ thÓ tiÕp nhËn c©y invitro thÝch hîp: gi¸ thÓ s¹ch, t¬i xèp, tho¸t n−íc. Ph¶i chñ ®éng ®iÒu chØnh ®−îc Èm ®é, sù chiÕu s¸ng cña v−ên −¬m còng nh− cã chÕ ®é dinh d−ìng phï hîp. C¸c ph−¬ng thøc nh©n gièng ph v« tÝnh in vitro (Nguån: E.F. George, 1993) Meristem Nu«i cÊy chåi ®Ønh Nh©n gièng tõ chåi n¸ch C©y con §Ønh chåi Nu«i cÊy ®o¹n th©n T¹o chåi M¾t ngñ C©y tõ ph«i trùc tiÕp MÉu cÊy Ph¸t sinh h×nh T¹o ph«i th¸i trùc tiÕp trùc tiÕp T¹o chåi MÉu cÊy Nh©n gièng tõ gi¸n tiÕp C©y mÑ Callus C©y con chåi bÊt ®Þnh v Chåi bÊt ®Þnh ph«i v« tÝnh Callus Ph¸t sinh h×nh T¹o ph«i th¸i gi¸n tiÕp gi¸n tiÕp C©y Ph«i v« tÝnh gièng HuyÒn phï tÕ b o 6
Ho¹t ho¸ chåi n¸ch Sù ph¸t triÓn cña chåi n¸ch ®−îc kÝch thÝch b»ng c¸ch lo¹i bá −u thÕ ngän khi nu«i cÊy c¸c ®Ønh chåi v ®o¹n th©n mang m¾t ngñ. Theo ph−¬ng thøc n y sù ph¸t triÓn chåi diÔn ra theo hai c¸ch: -C©y ph¸t triÓn trùc tiÕp tõ chåi ®Ønh hoÆc chåi n¸ch. Tr−êng hîp n y th−êng x¶y ra khi nu«i cÊy c©y hai l¸ mÇm nh− thuèc l¸, khoai t©y, hoa cóc... -T¹o côm chåi tõ chåi ®Ønh hoÆc chåi n¸ch. Tr−êng hîp n y hay gÆp víi c©y 1 l¸ mÇm nh− mÝa, lóa,... 7
T¹o chåi bÊt ®Þnh bÊt Trong tr−êng hîp n y cÇn ph¶i thùc hiÖn qu¸ tr×nh ph¶n ph©n ho¸ v t¸i ph©n ho¸ tÕ b o ®Ó b¾t c¸c tÕ b o soma h×nh th nh chåi trùc tiÕp hoÆc gi¸n tiÕp th«ng qua giai ®o¹n ph¸t triÓn m« seo. ë c¸c ®èi t−îng mét l¸ mÇm nh− lan, døa, chuèi, hoa loa kÌn... th−êng gÆp sù ph¸t triÓn c©y qua giai ®o¹n dÎ h nh (protocorm): cïng mét lóc mÉu cÊy t¹o th nh h ng lo¹t protocorm, c¸c thÓ n y hoÆc tiÕp tôc s¶n sinh protocorm míi hoÆc ph¸t triÓn th nh c©y. 8
T¹o ph«i v« tÝnh T−¬ng tù nh− t¹o chåi bÊt ®Þnh, ®Ó t¹o ph«i v« tÝnh còng cÇn ph¶i thùc hiÖn qu¸ tr×nh ph¶n ph©n ho¸ v t¸i ph©n ho¸ tÕ b o ®Ó b¾t c¸c tÕ b o soma h×nh th nh ph«i trùc tiÕp hoÆc gi¸n tiÕp th«ng qua giai ®o¹n ph¸t triÓn m« sÑo.Nh−ng ph«i v« tÝnh cã cÊu tróc l−ìng cùc bao gåm c¶ chåi mÇm v rÔ mÇm C¸c ph«i v« tÝnh cã thÓ t¸i sinh th nh c©y ho n chØnh hoÆc sö dông l m nguyªn liÖu s¶n xuÊt h¹t gièng nh©n t¹o. T¹o ph«i v« tÝnh Sù h×nh th nh ph«i cã 2 b−íc: Sù ph©n ho¸ c¸c tÕ b o cã kh¶ n¨ng ph¸t sinh ph«i: cÇn m«i tr−êng gi u auxin. C¸c tÕ b o cã kh¶ n¨ng ph¸t sinh ph«i l c¸c tÕ b o nhá, nh©n lín, nhiÒu h¹ch nh©n, kh«ng cã kh«ng b o, tÕ b o chÊt ®Ëm ®Æc, gi u protein v ARN th«ng tin. Sù ph¸t triÓn cña nh÷ng tÕ b o ph«i míi h×nh th nh: cÇn m«i tr−êng nghÌo hoÆc kh«ng cã auxin. Nång ®é cao cña auxin kÝch thÝch sù h×nh th nh ph«i v« tÝnh nh−ng øc chÕ qu¸ tr×nh ph©n ho¸ v ph¸t triÓn tiÕp theo cña c¸c ph«i n y. 9
B A C H×nh 28. Sù h×nh th nh ph«i v« tÝnh cña c©y c¶i dÇu. A: giai ®o¹n sím (7-10 ng y); B: giai ®o¹n gi÷a (10-14 ng y); C: giai ®o¹n cuèi 10
S¶n xuÊt h¹t nh©n t¹o tõ ph«i v« tÝnh Kh¸i niÖm Cã thÓ sö dông c¸c polyme sinh häc ®Ó bao gãi 1 ph«i v« tÝnh víi mét thÓ tÝch nhÊt ®Þnh m«i tr−êng dinh d−ìng ®Ó t¹o h¹t nh©n t¹o H¹t nh©n t¹o ®−îc dïng trong nh©n gièng c¸c c©y lai F1cã gi¸ trÞ cao, c©y chuyÓn gen, b¶o tån c©y cã nguy c¬ tuyÖt chñng v nguån gen −u tó (elit)… S¶n xuÊt h¹t nh©n t¹o tõ ph«i v« tÝnh ¦u thÕ cña h¹t nh©n tao: Cã gi¸ c¹nh tranh do s¶n xuÊt tù ®éng ho¸ Cã thÓ sö dông gieo trång trùc tiÕp trªn ®ång ruéng kh«ng cÇn giai ®o¹n thÝch øng Cã thÓ bæ sung v o phÇn “vá” h¹t c¸c chÊt b¶o vÖ thùc vËt, chÊt kÝch thÝch sinh tr−ëng DÔ d ng b¶o qu¶n v vËn chuyÓn 11
S¶n xuÊt h¹t nh©n t¹o tõ ph«i v« tÝnh §iÒu kiÖn: HÖ thèng s¶n xuÊt h¹t gièng nh©n t¹o ph¶i cã kh¶ n¨ng s¶n xuÊt víi sè l−îng lín c¸c thÓ ph«i soma v ph«i soma ®−îc s¶n xuÊt ®ång nhÊt, ®Ó cã thÓ ®−îc trång trät b»ng nh÷ng kü thuËt truyÒn thèng mét c¸ch trùc tiÕp. HÖ thèng s¶n xuÊt h¹t nh©n t¹o ph¶i ®−îc c¬ giíi hãa v kh«ng phô thuéc v o nh÷ng thiÕt bÞ ®¾t tiÒn v nhÊt l tháa m n yªu cÇu v« trïng. S¶n xuÊt h¹t nh©n t¹o tõ ph«i v« tÝnh C¸c b−íc t¹o h¹t nh©n t¹o T¹o huyÒn phï ph«i v« tÝnh trong m«i tr−êng dinh d−ìng víi mËt ®é phï hîp v bæ sung Na-alginate ®−îc l m tan trong n−íc víi nång ®é 2-4% Dïng pipet (m¸y nhá giät) nhá 100-150µl huyÒn phï nªu trªn cã chøa 1 ph«i soma v o dung dÞch CaCl2 (2- 2,5%). Khi ®ã sÏ sinh ra ph¶n øng trao ®æi ion Na-Ca v h¹t nh©n t¹o ®−îch×nh th nh, cã ®ñ ®é cøng thÝch hîp. Sau ®ã chuyÓn qua ng©m trong n−íc l m cøng h¹t 12
S¶n xuÊt h¹t nh©n t¹o tõ ph«i v« tÝnh Dïng Ca-alginate th−êng h¹t lu«n lu«n Èm −ít bÒ mÆt, hiÖn nay ng−êi ta dïng mét lo¹i polymer Elvax 4260 ®Ó bao líp alginate. Giai ®o¹n kÕ tiÕp l l m kh« h¹t ®Ó gióp h¹t nh©n t¹o dÔ d ng b¶o qu¶n v nÈy mÇm khi cÇn thiÕt. Kitto & Janick, ®Æt h¹t c©y c rèt trªn khay cã chøa 25% polyoxyethylene ®Ó l m mÊt n−íc, v khi l m −ít l¹i th× h¹t ®−îc t¸i sinh v ph¸t triÓn th nh c©y ho n chØnh. Callus ph«i Protocor ho¸ m C©y C©y Côm ph«i v« mÑ tÝnh mÑ T¹o h¹t nh©n t¹o H¹t n¶y mÇm in vitro H¹t t¹o tõ ph«i v« tÝnh H¹t t¹o tõ protocorm H¹t n¶y mÇm in vitro C©y tõ h¹t nh©n t¹o C©y in vitro ë v−ên −¬m C©y tõ h¹t nh©n t¹o 13
Nh©n gièng qua t¹o cñ in vitro T¹o cñ khoai t©y in vitro Nh©n gièng qua t¹o cñ in vitro T¹o cñ loa kÌn in vitro 14
C¸c tån t¹i cña nh©n gièng c©y trång b»ng nu«i cÊy m« 1.TÝnh bÊt ®Þnh vÒ mÆt di truyÒn (genetic instability). Môc ®Ých cña nh©n gièng in vitro l t¹o ra quÇn thÓ c©y ®ång nhÊt (True-to-type) víi sè l−îng rÊt lín. Tuy nhiªn, trong mét sè tr−êng hîp ph−¬ng ph¸p n y còng tao ra nh÷ng biÕn dÞ soma. TÇn sè biÕn dÞ còng ho n to n kh¸c nhau v kh«ng lÆp l¹i. c©y t¹o ra do nu«i cÊy tÕ b o m« sÑo cã nhiÒu biÕn dÞ h¬n so víi nu«i cÊy chåi ®Ønh. Nh÷ng nh©n tè g©y ra biÕn dÞ tÕ b o soma cã thÓ l ; KiÓu di truyÒn (Genotype): TÇn sè biÕn dÞ ¶nh h−ëng bëi genotyp cña c¸c lo i c©y trång kh¸c nhau. Nãi chung c©y c ng cã møc béi thÓ cao th× c ng dÔ biÕn bÞ. Sè lÇn cÊy chuyÓn (Subcultures) sè lÇn cÊy chuyÓn c ng nhiÒu th× ®é biÕn dÞ c ng cao. Theo Amstrong v Phillips (1988): khi nu«i cÊy l©u d i th−êng g©y ra biÕn dÞ nhiÔm s¾c thÓ. Lo¹i m« (Tissue): Nãi chung nu«i cÊy ®Ønh sinh tr−ëng trong nh©n nhanh in vitro Ýt bÞ biÕn dÞ h¬n so víi nu«i cÊy c¸c c¬ quan kh¸c. BiÕn dÞ trong nh©n gièng døa Cayen Chåi dÞ d¹ng Chåi bÞ säc l¸, b¹ch t¹ng 15
C¸c tån t¹i cña nh©n gièng c©y trång b»ng nu«i cÊy m« 2.Sù nhiÔm mÉu (explant contamination). C¸c vi sinh vËt nh− nÊm, vi khuÈn nãi chung ®Òu bÞ lo¹i trõ khi khö trïng mÉu ®−a v o nu«i cÊy. Tuy nhiªn, mét sè lo¹i vi khuÈn nh−: Agrobacterium, Bacillus, Corylabacterium, Erwinnia v Pseudomonas cã thÓ x©m nhiÔm v o m« dÉn, tån t¹i trong m« v b¾t ®Çu g©y t¸c h¹i khi tÕ b o b¾t ®Çu ph©n chia (sau 1-2 tuÇn nu«i cÊy). §Ó kh¾c phôc ®−îc hiÖn t−îng trªn cÇn: Tr−íc hÕt cÇn ph¶i lùa chän c©y mÑ ®óng tiªu chuÈn. Cã thÓ sö dông mét sè chÊt kh¸ng sinh ®Ó chèng hiÖn t−îng nhiÔm khuÈn v nÊm . Nh−ng m« thùc vËt rÊt mÉn c¶m víi kh¸ng sinh v cã ph¶n øng ®Õn kiÓu di truyÒn do ®ã cÇn rÊt thËn träng khi sö dông kh¸ng sinh. ChÊt kh¸ng sinh th−êng g©y ra nh÷ng huû ho¹i ë ty thÓ v l¹p thÓ nªn cã ¶nh h−ëng ®Õn di truyÒn tÕ b o chÊt. Sù nhiÔm mÉu cÊy 16
C¸c tån t¹i cña nh©n gièng c©y trång b»ng nu«i cÊy m« 3.ViÖc s¶n sinh c¸c chÊt ®éc tõ m« nu«i cÊy (Toxic compounds phenol). Trong nu«i cÊy m« th−êng quan s¸t thÊy hiÖn t−îng ho¸ n©u hay ®en mÉu, mÉu n y cã thÓ khuyÕch t¸n trong m«i tr−êng. HiÖn t−îng n y l do mÉu nu«i cÊy cã chøa nhiÒu chÊt tanin hoÆc hydroxyphenol. ThÝ dô c¸c chÊt phenol eucomicacid v tyramine ® l m ho¸ n©u mÉu c©y lan Cattleya khi nu«i cÊy. C¸c ph−¬ng ph¸p lo¹i trõ sù ho¸ n©u: Bæ sung than ho¹t tÝnh v o m«i tr−êng nu«i cÊy (0,1 - 0,3%): ph−¬ng ph¸p n y ®Æc biÖt cã hiÖu qu¶ trªn c¸c lo i phong lan Phalenopsis, Cattleya v Aerides. Tuy nhiªn than ho¹t tÝnh cã thÓ l m chËm qu¸ tr×nh nh©n nhanh c©y do hÊp phô mét sè chÊt ®iÒu tiÕt sinh tr−ëng v dinh d−ìng cÇn thiÕt kh¸c. Bæ sung polyvinyl pyrolidone (PVP) cã t¸c dông khö n©u ho¸ tèt ë mÉu mét sè c©y ¨n qu¶, (t¸o, hång). Sö dông m« non, g©y vÕt th−¬ng nhá nhÊt khi khö trïng. Ng©m mÉu v o dung dÞch ascorbic v xytric v i giê tr−íc khi cÊy. Nu«i cÊy mÉu trong m«i tr−êng láng, O2 thÊp, kh«ng cã ¸nh s¸ng (1 - 2 tuÇn). CÊy chuyÓn mÉu liªn tôc(1-2ng y/lÇn) sang m«i tr−êng t−¬i trong 1 - 2 tuÇn Sù tiÕt ®éc tè tõ mÉu cÊy 17
C¸c tån t¹i cña nh©n gièng c©y trång b»ng nu«i cÊy m« 4.HiÖn t−îng thuû tinh ho¸ (Vitrification). C©y bÞ “thuû tinh ho¸”- th©n l¸ c©y mäng n−íc,trong suèt, c©y rÊt khã sèng khi ®−a ra ngo i m«i tr−êng do bÞ mÊt n−íc rÊt m¹nh. Th−êng x¶y ra khi nu«i cÊy trong m«i tr−êng láng hay m«i tr−êng Ýt agar, sù trao ®æi khÝ thÊp. §Æc biÖt th−êng x¶y ra khi nu«i cÊy t¸o, mËn, hoa cÈm ch−íng, hoa ®ång tiÒn v hoa cóc. C©y bÞ thuû tinh ho¸ th−êng cã h m l−îng líp s¸p b¶o vÖ thÊp, cÊu t¹o cã nhiÒu ph©n tö ph©n cùc nªn dÔ hÊp thô n−íc. C©y in vitro th−êng cã mËt ®é khÝ khæng cao, khÝ khæng cã d¹ng trßn chø kh«ng elip, khÝ khæng më liªn tôc trong qu¸ tr×nh nu«i cÊy. §Ó tr¸nh hiÖn t−îng thuû tinh ho¸ cã thÓ tiÕn h nh mét sè gi¶i ph¸p: Gi¶m sù hót n−íc cña c©y b»ng c¸ch t¨ng nång ®é ®−êng hoÆc c¸c chÊt g©y ¸p suÊt thÈm thÊu cao. Gi¶m nång ®é c¸c chÊt chøa nit¬ trong m«i tr−êng. Gi¶m sù s¶n sinh ethylen trong b×nh nu«i cÊy. Sö lý axit absixic hoÆc mét sè chÊt øc chÕ sinh tr−ëng. Nh÷ng c«ng nghÖ míi trong vi nh©n gièng c©y trång 1.C«ng nghÖ vi nh©n gièng quang tù d−ìng L b−íc ph¸t triÓn cña c«ng nghÖ nu«i cÊy m« tÕ b o do gi¸o s− T. Koyoki Kozai ®Ò xuÊt v nghiªn cøu tõ h¬n 2 thËp kû qua. C«ng tr×nh nghiªn cøu tËp trung v o vÊn ®Ò nh©n gièng c©y nu«i cÊy m« trªn m«i tr−êng kh«ng cã ®−êng nh−ng ®−îc ®iÒn khiÓn chñ ®éng chÕ ®é ¸nh s¸ng v cung cÊp CO2. C«ng nghÖ n y ® ®−îc thö nghiÖm th nh c«ng trªn nhiÒu ®èi t−îng c©y trång nh− c chua; khoai lang; rau spinach; d−a chuét; x l¸ch; keo; c phª; xo i; tre; th«ng; ... C«ng nghÖ n y ®ang ®−îc tiÕp tôc ho n thiÖn ®Ó l m c¬ së cho hÖ thèng nh©n gièng c«ng nghiÖp hãa (T. Kozai; F.Afreen; S.M.A.Zobayed - 2005) 18
Nh÷ng c«ng nghÖ míi trong vi nh©n gièng c©y trång(tiÕp) Lîi Ých cña vi nh©n gièng sö dông hÖ thèng quang tù d−ìng Tèc ®é sinh tr−áng, chÊt l−îng v tû lÖ sèng cña m« thùc vËt ®−îc n©ng cao ë tÊt c¸c c¸c b−íc trong nh©n gièng trong ®iÒu kiÖn tù d−ìng. ThiÖt h¹i do sù nhiÔm mÉu ®−îc h¹n chÕ do kh«ng sö dông ®−êng trong m«i tr−êng. Tû lÖ ®ét biÕn cã thÓ ®−îc gi¶m v× c©y ®ùoc nu«i trong ®iÒu kiÖn m«i tr−êng gièng tù nhiªn. Tù ®éng ho¸ v do ®ã gi¶m ®−îc chi phÝ lao ®éng. Nh÷ng c«ng nghÖ míi trong vi nh©n gièng c©y trång (tiÕp) Nh−îc ®iÓm: Chi phÝ cao cho viÖc ®iÒu khiÓn m«i tr−êng ( ¸nh s¸ng, nhiÖt ®é, CO2, O2) C©y vÉn sinh tr−ëng trong ®iÒu kiÖn v« trïng v× vËy vÉn dÉn ®Õn chi phÝ cao cho hÖ thèng b×nh nu«i chuyªn dông v chuÈn bÞ gi¸ thÓ. Hép nu«i c©y sö dông trong hÖ thèng quang tù d−ìng. D i x Réng x Cao = 610 x 31 x 105 mm, thÓ tÝch 20 lÝt ( Zobayed et al., 2000). 19
20