Phản ứng PCR phát hiện vi khuẩn lao trên một số đối tượng khác nhau

Y Hoïc TP. Hoà Chí Minh * Taäp 9 * Phuï baûn cuûa Soá 1 * 2005<br /> <br /> Nghieân cöùu Y hoïc<br /> <br /> PHAÛN ÖÙNG PCR PHAÙT HIEÄN VI KHUAÅN LAO<br /> TREÂN MOÄT SOÁ ÑOÁI TÖÔÏNG KHAÙC NHAU<br /> Mai Nguyeät Thu Hoàng*, Cao Minh Nga**, Huyønh Thanh Bình***<br /> <br /> TOÙM TAÉT<br /> Nhaèm öùng duïng kyõ thuaät khueách ñaïi chuoãi gen (PCR) ñeå phaùt hieän vi khuaån lao treân moät soá ñoái<br /> töôïng khaùc nhau, chuùng toâi ñaõ khaûo saùt 83 maãu ñaøm ñöôïc thu thaäp taïi moät soá cô sôû y teá ôû TP. HCM töø<br /> thaùng 01/2001 ñeán thaùng 10/2003. Nhoùm chöùng laø 32 maãu ñaøm thu ñöôïc töø ngöôøi ñeán tieâm phoøng beänh<br /> lao taïi Vieän Pasteur TP. HCM.<br /> Keát quaû khaûo saùt cho thaáy 100% (21/21) beänh nhaân lao cho keát quaû PCR döông tính, trong khi chæ coù<br /> 90,47% (19/21) maãu cho keát quaû nuoâi caáy döông tính. ÔÛ nhoùm nghi ngôø maéc beänh lao 19,39% (8/46) maãu<br /> beänh phaåm coù keát quaû PCR döông tính, nhoùm coù tieáp xuùc beänh lao thì 15,35% (4/26) maãu cho keát quaû<br /> PCR döông tính vaø ôû nhoùm chöùng laø 6,25% (2/32). ÔÛ taát caû caùc nhoùm naøy, keát quaû nuoâi caáy ñeàu aâm tính.<br /> Keát quaû treân cho thaáy thöû nghieäm PCR nhaïy hôn phöông phaùp nuoâi caáy ñeå phaùt hieän vi khuaån lao<br /> trong maãu beänh phaåm.<br /> <br /> SUMMARY<br /> DETECTION OF MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS ON DIFFERENT SUBJECTS<br /> BY PCR<br /> Mai Nguyet Thu Hong, Cao Minh Nga, Huynh Thanh Binh<br /> * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 9 * Supplement of No 1 * 2005: 68 – 72<br /> <br /> The PCR test has been developed for detection of M. tuberculosis on different subjects. In order to<br /> apply this technique, we studied 93 sputum‘sample of the patients and tuberculosis contact group in the<br /> Health Centers in Ho Chi Minh city from 1/2001 to 10/2003. The control group is the BCG vaccination<br /> group in Pasteur Institute in HCM city.<br /> The result showed that 100% (21/21) tuberculosis patients had the positive PCR test but only 90.47%<br /> (19/21) positive samples for the culture medium.<br /> We also detected 17.39% (8/46) positive samples in high risk group, 15.35% (4/26) in tuberculosis<br /> contact group in applying the PCR test for detection the M. tuberculosis. And the ratio of positive samples<br /> of control group is 6.25% (2/32). In all these groups, the culture medium gave the negative result.<br /> This result demonstrated that the PCR test is more sensitive than the culture technique for detection<br /> of Mycobacterium tuberculosis.<br /> <br /> ÑAËT VAÁN ÑEÀ<br /> Lao laø moät trong nhöõng beänh truyeàn nhieãm coù<br /> tæ leä maéc vaø töû vong ñöùng haøng ñaàu treân theá giôùi.<br /> Hôn 1/3 daân soá theá giôùi nhieãm lao vôùi 8,4 trieäu ca<br /> maéc môùi vaø 1,9 trieäu ca töû vong haøng naêm. 95% ca<br /> <br /> maéc vaø 98% ca töû vong ñeàu xaûy ra ôû caùc nöôùc chaäm<br /> phaùt trieån.<br /> Söï buøng phaùt beänh lao ngaøy caøng gia taêng cuøng<br /> vôùi söï xuaát hieän ñaïi dòch HIV. Caùc thoáng keâ cho thaáy<br /> 1/3 soá beänh nhaân AIDS töû vong ñeàu laø nhöõng ca ñoàng<br /> nhieãm beänh lao.<br /> <br /> * Vieän Pasteur TP. HCM<br /> ** Boä moân Vi sinh – Khoa Y – Ñaïi Hoïc Y Döôïc TP. HCM<br /> *** Boä moân Mieãn dòch-Sinh lyù beänh – Khoa Y – Ñaïi Hoïc Y Döôïc TP. HCM<br /> <br /> 68<br /> <br /> Chuyeân ñeà Y Hoïc cô sôû<br /> <br /> Nghieân cöùu Y hoïc<br /> <br /> Y Hoïc TP. Hoà Chí Minh * Taäp 9 * Phuï baûn cuûa Soá 1 * 2005<br /> <br /> Laø beänh coù khaû naêng laây lan cao, nhöng vieäc phaùt<br /> hieän vaø ñieàu trò beänh laïi ñoøi hoûi thôøi gian daøi. Phöông<br /> phaùp chaån ñoaùn chính xaùc ñöôïc aùp duïng laø nuoâi caáy<br /> vi khuaån caàn phaûi sau 2 thaùng môùi coù theå xaùc ñònh<br /> beänh. Phöông phaùp nhuoäm soi vi khuaån coù theå phaùt<br /> hieän beänh raát sôùm, nhöng chæ chaån ñoaùn ñöôïc caùc<br /> tröôøng hôïp beänh phaåm coù chöùa nhieàu vi khuaån vaø deã<br /> boû soùt caùc ca beänh.<br /> Vì vaäy, nhieàu phöông phaùp chaån ñoaùn nhanh vi<br /> khuaån lao ñöôïc öùng duïng nhö nuoâi caáy beänh phaåm<br /> treân moâi tröôøng loûng, xaùc ñònh vi khuaån baèng phöông<br /> phaùp phaùt hieän ñoaïn gen ñaëc hieäu……, nhöng chöa<br /> phaûi laø tieâu chuaån vaøng ñeå xaùc ñònh caùc tröôøng hôïp<br /> döông tính. Do ñoù, caàn coù theâm caùc nghieân cöùu thöïc<br /> nghieäm ñeå laøm cô sôû xaùc ñònh ñoä nhaïy, ñoä ñaëc hieäu<br /> vaø caùc giaù trò tieân ñoaùn cuûa caùc phöông phaùp naøy ôû<br /> caùc ñoái töôïng nghieân cöùu khaùc nhau.<br /> Ñeå goùp phaàn vaøo caùc nghieân cöùu thöïc nghieäm<br /> naøy, ñeà taøi seõ khaûo saùt tæ leä phaùt hieän vi khuaån lao<br /> baèng phöông phaùp phaùt hieän ñoaïn gen ñaëc hieäu<br /> IS6110 treân maãu beänh phaåm ñaøm ôû caùc ñoái töôïng<br /> khaùc nhau. Töø ñoù so saùnh tæ leä phaùt hieän vi khuaån<br /> baèng phöông phaùp nuoâi caáy coå ñieån (ñöôïc ñaùnh giaù laø<br /> tieâu chuaån vaøng) vaø chaån ñoaùn hình aûnh X Quang<br /> phim phoåi.<br /> Khaûo saùt seõ xaùc ñònh ñöôïc ñoä ñaëc hieäu, ñoä nhaïy<br /> caûm vaø giaù trò tieân ñoaùn cuûa thöû nghieäm phaùt hieän<br /> chuoãi gen treân caùc ñoái töôïng nghieân cöùu vaø goùp theâm<br /> cô sôû döõ lieäu cho caùc nhaø laâm saøng öùng duïng phöông<br /> phaùp chaån ñoaùn naøy.<br /> <br /> MUÏC TIEÂU<br /> Ñeà taøi "Phaûn öùng khueách ñaïi chuoãi gen (PCR) ñeå<br /> phaùt hieän vi khuaån lao treân moät soá ñoái töôïng khaùc<br /> nhau” nhaèm caùc muïc ñích sau ñaây:<br /> -Xaùc ñònh tình traïng nhieãm vi khuaån M.<br /> tuberculosis trong maãu ñaøm baèng phöông phaùp PCR,<br /> phöông phaùp nuoâi caáy vaø chaån ñoaùn hình aûnh ôû beänh<br /> nhaân lao, nhoùm nghi ngôø maéc beänh lao, ngöôøi tieáp<br /> xuùc beänh nhaân lao vaø ngöôøi laønh (khoâng coù phaûn öùng<br /> lao toá vaø ñöôïc tieâm phoøng beänh lao).<br /> -Xaùc ñònh ñoä tin caäy, ñoä ñaëc hieän vaø caùc giaù trò<br /> <br /> Vi Sinh<br /> <br /> tieân ñoaùn cuûa phöông phaùp PCR ôû beänh nhaân lao,<br /> nhoùm nghi ngôø maéc beänh lao, ngöôøi tieáp xuùc beänh<br /> nhaân lao vaø ngöôøi laønh (khoâng coù phaûn öùng lao toá vaø<br /> ñöôïc tieâm phoøng beänh lao).<br /> <br /> ÑOÁI TÖÔÏNG-PHÖÔNG PHAÙP NGHIEÂN CÖÙU<br /> Ñoái töôïng nghieân cöùu<br /> Maãu nghieân cöùu<br /> <br /> Goàm 125 caù theå thuoäc caùc nhoùm ñoái töôïng sau:<br /> -Beänh nhaân lao ñöôïc xaùc ñònh taïi beänh vieän<br /> Phaïm Ngoïc Thaïch (n=21)<br /> -Nhoùm nghi ngôø maéc beänh lao: coù bieåu hieän laâm<br /> saøng soát, ho dai daúng, coù tieàn söû tieáp xuùc vôùi beänh<br /> nhaân lao, phaûn öùng lao toá treân 15mm (n=46).<br /> -Nhoùm tieáp xuùc thöôøng xuyeân vôùi beänh nhaân lao<br /> (n=26).<br /> -Nhoùm chöùng: coù phaûn öùng lao toá aâm tính vaø<br /> ñöôïc tieâm phoøng vaécxin phoøng beänh lao (n=32).<br /> Phöông phaùp nghieân cöùu<br /> Ñaây laø nghieân cöùu moâ taû caét ngang. Chuùng toâi<br /> tieán haønh laáy maãu ñaøm vaøo luùc saùng sôùm. Beänh nhaân<br /> ñöôïc kích thích ho vaø khaïc ñaøm ñeå xeùt nghieâm.<br /> Maãu ñaøm ñöôïc chöùa trong loï voâ truøng vaø ñöôïc<br /> chuyeån ñeán phoøng thí nghieäm trong voøng 4 giôø. Maãu<br /> ñaøm ñöôïc baûo quaûn ôû –20oC tröôùc khi tieán haønh thí<br /> nghieäm.<br /> Xöû lyù beänh phaåm(1,6)<br /> <br /> - Taùch chaát nhaøy, huyeát töông trong beänh phaåm<br /> ñaøm baèng proteinase K.<br /> - UÛ caùch thuûy 600C qua ñeâm.<br /> Chaån ñoaùn laâm saøng<br /> <br /> Beänh nhaân ñöôïc nghi ngôø coù bieåu hieän laâm saøng<br /> cuûa beänh lao neáu coù caùc trieäu chöùng sau (tieâu chuaån<br /> chaån ñoaùn laâm saøng cuûa chöông trình choáng lao quoác<br /> gia):<br /> -Soát treân 38oC vaø keùo daøi treân 3 tuaàn<br /> -Ho dai daúng treân 2 thaùng<br /> -Phaûn öùng lao toá treân 15mm<br /> -Toác ñoä laéng maùu sau 2 giôø treân 100mm<br /> <br /> 69<br /> <br /> Y Hoïc TP. Hoà Chí Minh * Taäp 9 * Phuï baûn cuûa Soá 1 * 2005<br /> Hình aûnh X Quang<br /> <br /> Nghieân cöùu Y hoïc<br /> <br /> Baûng 1. Ñaëc tính cuûa maãu nghieân cöùu (n=125)<br /> <br /> Phim phoåi coù toån thöông daïng lao phoåi ñang tieán<br /> trieån (keát luaän cuûa khoa X Quang taïi beänh vieän Lao vaø<br /> beänh phoåi Phaïm Ngoïc Thaïch)<br /> Phöông phaùp nuoâi caáy vi khuaån<br /> <br /> Ñaëc tính maãu<br /> <br /> 6)<br /> <br /> ñoaïn gen ñaëc hieäu<br /> <br /> - Ly trích DNA cuûa teá baøo M. tuberculosis baèng<br /> phöông phaùp Boom.<br /> - Thöû nghieäm PCR ñöôïc thöïc hieän vôùi PCR mix<br /> coù caùc ñoaïn moài (primers) laø Pt18 vaø INS2 ñaëc hieäu<br /> cho M. tuberculosis. Söû duïng caùc sinh phaåm cuûa<br /> haõng AB gene, töï pha cheá PCR mix taïi Phoøng Y Sinh<br /> hoïc Ñaïi hoïc Y Döôïc TP. HCM.<br /> - Phaûn öùng PCR ñöôïc thöïc hieän treân maùy luaân<br /> nhieät (thermal cycler) cuûa haõng Bio-Rad, theo<br /> chöông trình ñaõ caøi ñaët goàm caùc böôùc sau:<br /> Chu kyø 1: (x1)<br /> <br /> Nam<br /> <br /> 54<br /> <br /> 43,2<br /> <br /> Nöõ<br /> <br /> 71<br /> <br /> 56,8<br /> <br /> 5 – 10<br /> <br /> 16<br /> <br /> 12,8<br /> <br /> 11 – 20<br /> <br /> 16<br /> <br /> 12,8<br /> <br /> 21 – 30<br /> <br /> 22<br /> <br /> 17,6<br /> <br /> Tuoåi<br /> <br /> 31 – 40<br /> <br /> 20<br /> <br /> 16,0<br /> <br /> 41 – 5 0<br /> <br /> 23<br /> <br /> 18,4<br /> <br /> 51 – 60<br /> <br /> 14<br /> <br /> 11,2<br /> <br /> 61 – 70<br /> <br /> 8<br /> <br /> 6,4<br /> <br /> 71 – 80<br /> <br /> 6<br /> <br /> 4,8<br /> <br /> Chaån ñoaùn laâm saøng<br /> Baûng 2. Chaån ñoaùn laâm saøng coù trieäu chöùng lao phoåi<br /> ñang tieán trieån.<br /> Nhoùm ñoái töôïng<br /> <br /> Soá ca khaûo Soá ca chẩn ñoaùn laâm Tæ leä<br /> saùt<br /> saøng döông tính<br /> (%)<br /> <br /> Böôùc 1: 400C; x: 10 phuùt<br /> <br /> Beänh nhaân lao<br /> <br /> 21<br /> <br /> 21<br /> <br /> 100<br /> <br /> Chu kyø 2: (x40)<br /> <br /> Nghi ngôø maéc<br /> beänh lao<br /> <br /> 46<br /> <br /> 46<br /> <br /> 100<br /> <br /> Böôùc 2: 650C; x: 2 phuùt<br /> <br /> Tieáp xuùc beänh<br /> nhaân lao<br /> <br /> 26<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> Böôùc 3: 720C; x: 3 phuùt<br /> <br /> Nhoùm chöùng<br /> <br /> 32<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> Toång coäng<br /> <br /> 125<br /> <br /> 0<br /> <br /> Böôùc 1: 94 C; x: 1 phuùt 30 giaây<br /> <br /> Chu kyø 3: (x1)<br /> Böôùc 1: 720C; x: 60 phuùt<br /> Ñoïc keát quaû<br /> <br /> Baèng caùch xaùc ñònh saûn phaåm PCR qua ñieän di<br /> treân thaïch agarose 1,5% coù ethidium bromide.<br /> Duøng phaàn meàm Excel ñeå xöû lyù soá lieäu.<br /> <br /> KEÁT QUAÛ<br /> Ñaëc tính cuûa maãu nghieân cöùu<br /> Trong 125 beänh nhaân nghieân cöùu coù 54 nam<br /> (43,2%) vaø 71 nöõ (56,8%). Thuoäc löùa tuoåi töø 5 ñeán 74<br /> (baûng 1).<br /> <br /> 70<br /> <br /> Tæ leä (%)<br /> <br /> Giôùi<br /> <br /> Nuoâi caáy vi khuaån treân moâi tröôøng Lowenstein<br /> Jensen (theo phöông phaùp chaån ñoaùn cuûa chöông<br /> trình choáng lao quoác gia)<br /> Phöông phaùp PCR(1,<br /> IS6110<br /> <br /> Soá ca<br /> <br /> Chaån ñoaùn X quang phoåi coù hình aûnh<br /> lao phoåi ñang tieán trieån<br /> Baûng 3. Chaån ñoaùn X quang coù hình aûnh lao phoåi<br /> ñang tieán trieån.<br /> Nhoùm ñoái töôïng<br /> <br /> Soá ca Soá ca chaån ñoaùn X Tæ leä<br /> khaûo saùt quang döông tính (%)<br /> <br /> Beänh nhaân lao<br /> <br /> 21<br /> <br /> 21<br /> <br /> 100<br /> <br /> Nghi ngôø maéc beänh lao<br /> <br /> 46<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> Tieáp xuùc Beänh nhaân lao<br /> <br /> 26<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> Nhoùm chöùng<br /> <br /> 32<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> Toång coäng<br /> <br /> 125<br /> <br /> Chuyeân ñeà Y Hoïc cô sôû<br /> <br /> Y Hoïc TP. Hoà Chí Minh * Taäp 9 * Phuï baûn cuûa Soá 1 * 2005<br /> <br /> Nghieân cöùu Y hoïc<br /> <br /> Chaån ñoaùn nuoâi caáy vi khuaån lao treân<br /> moâi tröôøng Lowenstein Jensen<br /> Baûng 4. Chaån ñoaùn nuoâi caáy vi khuaån lao treân moâi<br /> tröôøng Lowenstein Jensen<br /> Soá ca Soá ca nuoâi caáy vi Tæ leä<br /> khaûo saùt khuaån döông tính (%)<br /> <br /> Nhoùm ñoái töôïng<br /> Beänh nhaân lao<br /> <br /> 21<br /> <br /> 19<br /> <br /> 90,47<br /> <br /> Nghi ngôø maéc beänh lao<br /> <br /> 46<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> Tieáp xuùc beänh nhaân lao<br /> <br /> 26<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> Nhoùm chöùng<br /> <br /> 32<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> Toång coäng<br /> <br /> 125<br /> <br /> Chaån ñoaùn phaùt hieän ñoaïn gen IS6110<br /> Baûng 5. Chaån ñoaùn phaùt hieän ñoaïn gen IS6110<br /> Nhoùm ñoái töôïng Soá ca khaûo Soá ca phaùt hieän ñoaïn Tæ leä (%)<br /> saùt<br /> gen IS6110<br /> Beänh nhaân lao<br /> <br /> 21<br /> <br /> 21<br /> <br /> 100<br /> <br /> Nghi ngôø maéc<br /> beänh lao<br /> <br /> 46<br /> <br /> 8<br /> <br /> 17,39<br /> <br /> Tieáp xuùc beänh<br /> nhaân lao<br /> <br /> 26<br /> <br /> 4<br /> <br /> 15,35<br /> <br /> Nhoùm chöùng<br /> <br /> 32<br /> <br /> 2<br /> <br /> 6,25<br /> <br /> Toång coäng<br /> <br /> 126<br /> <br /> Phaân tích keát quaû phaùt hieän chuoãi gen<br /> Baûng 6. Chaån ñoaùn phaùt hieän ñoaïn gen IS6110<br /> Nhoùm beänh<br /> lao<br /> <br /> Nhoùm khoâng<br /> maéc lao<br /> <br /> Toång soá<br /> <br /> PCR döông tính<br /> <br /> 21<br /> <br /> 14<br /> <br /> 35<br /> <br /> PCR aâm tính<br /> <br /> 0<br /> <br /> 90<br /> <br /> 90<br /> <br /> Toång soá<br /> <br /> 21<br /> <br /> 104<br /> <br /> 135<br /> <br /> Töø keát quaû treân, cho thaáy:<br /> -Ñoä nhaïy cuûa phaûn öùng phaùt hieän chuoãi gen laø<br /> 100%<br /> -Ñoä ñaëc hieäu cuûa phaûn öùng phaùt hieän chuoãi gen<br /> laø 86,35%<br /> -Giaù trò tieân ñoaùn döông cuûa phaûn öùng phaùt hieän<br /> chuoãi gen laø 60%<br /> -Giaù trò tieân ñoaùn aâm cuûa phaûn öùng phaùt hieän<br /> chuoãi gen 100%<br /> <br /> Vi Sinh<br /> <br /> BAØN LUAÄN<br /> ÖÙng duïng caùc kyõ thuaät môùi ñeå phaùt hieän nhanh<br /> vi khuaån lao raát caàn thieát trong chieán löôïc phoøng<br /> ngöøa söï laây nhieãm vi khuaån lao vaø ñieàu trò kòp thôøi<br /> beänh lao. Thöïc vaäy, do khaû naêng laây lan nhanh qua<br /> ñöôøng hoâ haáp, khaû naêng kyù sinh noäi teá baøo cuûa vi<br /> khuaån vaø tính ñeà khaùng ña khaùng sinh neân ñieàu trò<br /> beänh lao ñoøi hoûi raát nhieàu thôøi gian, nhöng vaãn coù tæ<br /> leä thaát baïi trong ñieàu trò.<br /> Vì vaäy, vieäc tìm caùc phöông phaùp chaån ñoaùn<br /> nhanh beänh lao raát coù giaù trò goùp phaàn giaûm tæ leä maéc<br /> vaø töû vong do beänh lao, nhaát laø trong tình hình ñaïi<br /> dòch HIV hieän nay.<br /> Keát quaû khaûo saùt vi khuaån lao trong 125 maãu<br /> ñaøm baèng phaûn öùng khueách ñaïi chuoãi gencho thaáy:<br /> -Ñoä nhaïy cuûa phaûn öùng: 100%<br /> -Ñoä ñaëc hieäu: 86,35%<br /> -Giaù trò tieân ñoaùn döông: 60%<br /> -Giaù trò tieân ñoaùn aâm: 100%<br /> Caên cöù keát quaû treân cho thaáy 21/21 (100%)<br /> tröôøng hôïp beänh lao ñeàu ñöôïc phaùt hieän baèng phaûn<br /> öùng PCR.<br /> Tuy nhieân, ñoä ñaëc hieäu cuûa phaûn öùng chöa cao.<br /> Ñoái vôùi caùc tröôøng hôïp khoâng bò beänh lao, coù 14/125<br /> tröôøng hôïp cho keát quaû döông tính giaû. Ñieàu naøy<br /> gioáng vôùi keát quaû nghieân cöùu cuûa moät soá taùc giaû<br /> khaùc(1, 5, 6) vaø coù theå giaûi thích nhö sau:<br /> -8 tröôøng hôïp coù trieäu chöùng laâm saøng nghi ngôø<br /> beänh lao, nhöng khoâng phaùt hieän treân hình aûnh X<br /> Quang, 4 tröôøng hôïp coù tieáp xuùc vôùi beänh nhaân lao vaø<br /> 2 tröôøng hôïp thuoäc nhoùm chöùng. Chuùng toâi nhaän<br /> thaáy ngoaøi 2 ñoái töôïng thuoäc nhoùm chöùng, caùc<br /> tröôøng hôïp coøn laïi ñeàu thuoäc nhoùm nguy cô cao vaø<br /> raát deã coù khaû naêng phaùt beänh. Vì vaäy, PCR döông tính<br /> vôùi vi khuaån lao laø moät daáu hieäu ñeå giuùp nhaø laâm saøng<br /> vaø dòch teã quan taâm nhieàu hôn ñeán caùc ñoái töôïng naøy<br /> khi ñeà nghò caùc chieán löôïc ñieàu trò vaø phoøng choáng<br /> beänh.<br /> -2 tröôøng hôïp döông tính thuoäc nhoùm chöùng coù<br /> theå do beänh nhaân coù tieáp xuùc vôùi ngöôøi beänh nhöng<br /> <br /> 71<br /> <br /> Y Hoïc TP. Hoà Chí Minh * Taäp 9 * Phuï baûn cuûa Soá 1 * 2005<br /> <br /> Nghieân cöùu Y hoïc<br /> <br /> hoaøn toaøn khoâng bieát.<br /> <br /> soá ñeà xuaát nhö sau:<br /> <br /> -Côõ maãu nghieân cöùu chöa ñaïi dieän vaø chöa ñuû ñeå<br /> cho keát quaû chính xaùc. Soá löôïng maãu ôû töøng nhoùm<br /> ñoái töôïng chöa phuø hôïp. Vì vaäy, caàn thöïc hieän theâm<br /> moät nghieân cöùu tieáp theo döïa treân cô sôû cuûa nghieân<br /> cöùu ban ñaàu naøy, ñeå coù ñöôïc caùc soá lieäu ñaày ñuû vaø<br /> chính xaùc nhaát<br /> <br /> -Treân cô sôû nghieân cöùu thaêm doø naøy, neân tieán<br /> haønh vôùi côõ maãu ñaày ñuû hôn ñeå thu ñöôïc keát quaû<br /> chính xaùc nhaát.<br /> <br /> Giaù trò tieân ñoaùn aâm 100%, neân taát caû tröôøng hôïp<br /> PCR aâm tính ñeàu cho keát quaû khaúng ñònh laø khoâng<br /> nhieãm vi khuaån lao<br /> <br /> -Phoå bieán kyõ thuaät chaån ñoaùn ñeán caùc phoøng thí<br /> nghieäm vi sinh ñeå giuùp nhaø laâm saøng coù ñònh höôùng<br /> sôùm trong chaån ñoaùn vaø ñieàu trò.<br /> <br /> Giaù trò tieân ñoaùn döông chæ coù 60%, neân phaûn<br /> öùng PCR döông tính chöa theå chaéc chaén laø beänh<br /> nhaân bò lao. Tuy nhieân, töø keát quaû nghieân cöùu naøy<br /> cuõng khaúng ñònh ñöôïc beänh nhaân thuoäc nhoùm nguy<br /> cô cao, caàn phaûi theo doõi.<br /> <br /> -Quan taâm ñaëc bieät ñeán ñoái töôïng coù phaûn öùng<br /> PCR döông tính vì laø nhoùm coù nguy cô cao, deã phaùt<br /> beänh.<br /> <br /> TAØI LIEÄU THAM KHAÛO<br /> 1<br /> <br /> 2<br /> <br /> KEÁT LUAÄN<br /> Qua nghieân cöùu “PCR phaùt hieän vi khuaån lao treân<br /> moät soá ñoái töôïng khaùc nhau”, chuùng toâi coù nhöõng keát<br /> luaän sau ñaây:<br /> -Ñoä nhaïy cuûa phaûn öùng: 100%<br /> <br /> 3<br /> <br /> 4<br /> <br /> -Ñoä ñaëc hieäu: 86,35%<br /> -Giaù trò tieân ñoaùn döông: 60%<br /> <br /> 5<br /> <br /> -Giaù trò tieân ñoaùn aâm: 100%<br /> Tuy ñoä ñaëc hieäu chöa cao, nhöng nhoùm coù phaûn<br /> öùng PCR döông tính cuõng thuoäc nhoùm coù nguy cô<br /> cao, caàn coù keá hoaïch chaêm soùc söùc khoûe.<br /> Töø coâng trình nghieân cöùu naøy, chuùng toâi coù moät<br /> <br /> 72<br /> <br /> 6<br /> <br /> Thierry D, Chureau C, Aznar C, Luc Guesdon J (1992).<br /> The detection of M. tuberculosis in uncultured clinical<br /> specimens using the polymerase chain reaction and a<br /> non-radioactive DNA probe.<br /> Kaplan JE. et al (1998). Opportunistic Infections in<br /> Immunodeficient Populations. Emerging Infectious<br /> Disease 4 (3): 421-422. Centers for Disease Control.<br /> Kolk A.H.J., Kox L.F.F., Van Leeuwen J. and Kuijper<br /> (1996). PCR assay for Mycobacterium tuberculosis<br /> complex and other Mycobacteria. Department of<br /> Biomedical Research, Royal Tropical Institute.<br /> Amsterdam. The Netherlands.<br /> Memish ZA, Mah MW, Mahmooh SA et al (2000).<br /> Clinico – diagnostic experience with tuberculosis<br /> lymphadenitis in Saudi Arabia. Clin Microbiol Infect<br /> 2000 Mar; 63: 137-41.<br /> Vivan J., Alden MJ., Curry JI., Keichii K., Knott CA,<br /> Roger L., Wolfe JM., Moore DF. (1993). Detection and<br /> identification of M. tuberculosis directly from sputum<br /> sediments by amplification of rRNA<br /> Nguyeãn Ngoïc Lan (2001). Nghieân cöùu aùp duïng kyõ<br /> thuaät phaûn öùng chuoãi polymerase (polymerase chain<br /> reaction) trong chaån ñoaùn lao. Luaän aùn Tieán só Y hoïc.<br /> TP. Hoà Chí Minh.<br /> <br /> Chuyeân ñeà Y Hoïc cô sôû<br /> <br />