Sinh tổng hợp Amilaza và Proteinaza ngoại bào của các chủng vi khuẩn ưa mặn phân lập từ các đầm nuôi tôm

29(3): 66-71 T¹p chÝ Sinh häc 9-2007<br /> <br /> <br /> <br /> Sinh tæng hîp amilaza vµ proteinaza ngo¹i bµo<br /> cña c¸c chñng vi khuÈn −a mÆn ph©n lËp tõ c¸c ®Çm nu«i t«m<br /> <br /> Phan ThÞ TUyÕt minh<br /> ViÖn C«ng nghÖ sinh häc<br /> T¨ng ThÞ ChÝnh<br /> ViÖn C«ng nghÖ m«i tr−êng<br /> <br /> HiÖn nay, ®¹i dÞch cóm gia cÇm, bÖnh bß vµ bïn ao nu«i t«m ®Òu nhËp tõ Th¸i Lan vµ<br /> ®iªn vµ bÖnh lë måm long mãng ë gia sóc ®ang Trung Quèc vÒ. Trong thêi gian gÇn ®©y, c¸c<br /> hoµnh hµnh kh¾p c¸c ch©u lôc th× nhu cÇu tiªu nhµ khoa häc ë n−íc ta ®· vµ ®ang tËp trung vµo<br /> thô c¸c s¶n phÈm thuû s¶n trong ®ã cã t«m xuÊt h−íng nghiªn cøu tuyÓn chän c¸c chñng vi sinh<br /> khÈu ®ang t¨ng lªn nhanh chãng. ViÖt Nam lµ vËt h÷u Ých vµ øng dông chóng vµo qu¸ tr×nh<br /> mét n−íc trong nh÷ng n−íc cã ®iÒu kiÖn khÝ hËu lµm s¹ch n−íc vµ bïn ë c¸c ao ®µm nu«i t«m<br /> thuËn lîi cho viÖc ph¸t triÓn nu«i trång thuû s¶n [4, 6, 7]. Trong bµi b¸o nµy chóng t«i tr×nh bµy<br /> phôc vô cho xuÊt khÈu. DiÖn tÝch nu«i t«m xuÊt kÕt qu¶ nghiªn cøu kh¶ n¨ng sinh tæng hîp<br /> khÈu ë n−íc ta ®ang t¨ng lªn nhanh chãng, nhµ amilaza vµ proteinaza ngo¹i bµo cña c¸c chñng<br /> n−íc kh«ng kiÓm so¸t ®−îc. Do v©y, mét vÊn ®Ò vi khuÈn −a mÆn ph©n lËp ®−îc tõ c¸c ao ®Çm<br /> bøc xóc ®ang ®Æt ra lµ trong qu¸ tr×nh nu«i t«m nu«i t«m ®Ó phôc vô cho viÖc nghiªn cøu s¶n<br /> cao s¶n lµ nguån n−íc vµ bïn ao ë ®©y th−êng xuÊt chÕ phÈm vi sinh vËt xö lý c¸c chÊt h÷u c¬<br /> bÞ « nhiÔm nÆng, do thøc ¨n thõa vµ c¸c chÊt d− thõa trong c¸c ao ®Çm nu«i t«m cao s¶n ë<br /> th¶i ra cña t«m lµm cho c¸c vi sinh vËt g©y bÖnh c¸c vïng ven biÓn.<br /> lµm cho t«m chÕt hµng lo¹t. Tr−íc ®©y, ng−êi ta<br /> th−êng sö dông c¸c ho¸ chÊt ®Ó xö lý n−íc nu«i I. PH¦¥NG PH¸P NGHI£N CøU<br /> t«m vµ bïn ®¸y ao. C¸c ho¸ chÊt trªn ®· lµm cho<br /> hµng lo¹t thùc vËt thuû sinh bÞ chÕt ®· lµm cho 1. Nguyªn liÖu<br /> líp bïn ®¸y ao dµy h¬n, t¹o ®iÒu kiÖn thuËn lîi<br /> cho vi sinh vËt g©y bÖnh ph¸t triÓn [3, 5]. ViÖc - C¸c mÉu bïn lÊy tõ c¸c ®Çm nu«i t«m cao<br /> sö dông c¸c chÕ phÈm sinh häc lµm s¹ch ao ®µm s¶n t¹i §å S¬n - H¶i Phßng vµ c¸c tØnh phÝa<br /> nu«i t«m lµ mét trong nh÷ng gi¶i ph¸p cã hiÖu Nam.<br /> qu¶ vµ an toµn cao ®ang ®−îc nh÷ng n−íc nu«i - Cao thÞt, cao nÊm, men pepton, glucoza,<br /> t«m hµng ®Çu thÕ giíi nh− Trung Quèc, Th¸i sacaroza, tinh bét tan, gelatin, cazein cña H·ng<br /> Lan… sö dông réng r·i. ë ViÖt Nam phÇn lín Merck.<br /> c¸c chÕ phÈm sinh häc sö dông trong xö lý n−íc M«i tr−êng nghiªn cøu [1]:<br /> <br /> M«i tr−êng nu«i vi khuÈn sinh tæng hîp M«i tr−êngnu«i vi khuÈn sinh tæng hîp<br /> proteinaza (CA) (g/l) amilaza (AA) (g/l)<br /> K2HPO4 1,5 Tinh bét 10<br /> KH2PO4 0,5 Pepton 7<br /> Cazein 2 N−íc biÓn 1000 ml<br /> Dextrin 0,05 Th¹ch 20<br /> Cao thÞt 2 NaCl 50<br /> Th¹ch 20<br /> NaCl 50<br /> PH = 6,8 PH = 6,8<br /> 66<br /> 2. Ph−¬ng ph¸p dïng thuèc thö Lugol ®Ó tiÕn hµnh kiÓm tra<br /> vßng ph©n gi¶i t¹o thµnh trªn m«i tr−êng tinh<br /> - Ph©n lËp vµ tuyÓn chän c¸c chñng vi bét vµ cazein. Chñng vi khuÈn nµo t¹o vßng<br /> khuÈn ph©n gi¶i c¸c hîp chÊt h÷u c¬ [1, 2] ph©n gi¶i lín sÏ ®−îc gi÷ gièng ®Ó tiÕp tôc<br /> Chóng t«i tiÕn hµnh lÊy mÉu bïn ë ao nu«i nghiªn cøu.<br /> t«m cao s¶n t¹i §å S¬n - H¶i Phßng vµ c¸c tØnh<br /> phÝa nam ®Ó ph©n lËp c¸c nhãm vi khuÈn. C¸c II. KÕT QU¶ Vµ TH¶O LUËN<br /> mÉu bïn ®−îc pha lo·ng b»ng n−íc muèi sinh<br /> lý 0,9% NaCl trong ®iÒu kiÖn v« trïng. Nång ®é 1. TuyÓn chän c¸c chñng vi khuÈn −a mÆn<br /> pha lo·ng theo c¬ sè mò 10: 10-1, 10-2,... 10-7. sinh amilaza vµ proteinaza ngo¹i bµo tõ<br /> Nhá 100 µl dung dÞch pha lo·ng ë trªn vµo c¸c ao nu«i t«m<br /> c¸c ®Üa th¹ch chøa m«i tr−êng tinh bét tan + 5% Chóng t«i tiÕn hµnh lÊy c¸c mÉu bïn ë 5 ®Þa<br /> NaCl vµ cazein + 5% NaCl. G¹t ®Òu cho kh« ®iÓm cña vïng nu«i t«m §å S¬n - H¶i Phßng vµ<br /> mÆt th¹ch, sau ®ã ñ ë 28 - 30oC trong 48 giê. 7 mÉu bïn cña mét sè tØnh phÝa Nam ®Ó ph©n<br /> LÊy ra quan s¸t, t¸ch c¸c khuÈn l¹c riªng rÏ cÊy lËp c¸c chñng vi khuÈn cã kh¶ n¨ng ph©n gi¶i<br /> vµo c¸c èng th¹ch nghiªng cã chøa m«i tr−êng tinh bét vµ cazein. Tõ c¸c mÉu bïn trªn chóng<br /> t−¬ng øng (tinh bét tan, cazein). Sau ®ã c¸c t«i ®· ph©n lËp ®−îc 20 chñng vi khuÈn cã kh¶<br /> chñng vi sinh vËt ®· ph©n lËp ®−îc cÊy trªn m«i n¨ng ph©n huû tinh bét vµ cazein ®Ó nghiªn cøu<br /> tr−êng th¹ch víi m«i tr−êng chän läc cã chøa kÕt qu¶ ®−îc tr×nh bµy ë b¶ng 1 vµ h×nh 1.<br /> tinh bét tan hoÆc cazein. Sau 48 giê nu«i cÊy,<br /> B¶ng 1<br /> Ho¹t ®é enzim ph©n gi¶i tinh bét vµ cazein cña c¸c chñng vi khuÈn ®· ph©n lËp<br /> §−êng kÝnh vßng ph©n gi¶i §−êng kÝnh vßng ph©n gi¶i<br /> Ký hiÖu chñng (D-d), mm Ký hiÖu chñng (D-d), mm<br /> Tinh bét Cazein Tinh bét Cazein<br /> HP-1 20 12 NB-11 22,5 16<br /> HP-2 22 14 NB-12 18,5 10<br /> NB-3 24 18 CHP-13 15 12,5<br /> NB-4 22 24 CHP-14 17 14<br /> CHP-5 25 18 CHP-15 12 13<br /> CHP-6 28 27 CHP-16 20 14,5<br /> NB-7 19 10 HP-17 11 21,5<br /> NB-8 20 11,5 HP-18 19 12<br /> NB-9 22 12 HP-19 17 14<br /> NB-10 21 15 HP-20 14 12<br /> <br /> 1A 1B<br /> CHP-5 CHP-6<br /> <br /> NB-4<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> NB-3 NB-4 CHP-6 CHP-5<br /> <br /> <br /> H×nh 1. Ho¹t ®é amilaza vµ proteinaza ngo¹i bµo cña c¸c chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän<br /> 1A. Ph©n gi¶i tinh bét; 1B. Ph©n gi¶i cazein<br /> 67<br />  Tõ kÕt qu¶ ë b¶ng 1 vµ h×nh 1, chóng t«i vßng/phót trong 48 giê ë 30oC, kÕt qu¶ ®−îc<br /> chän 2 chñng vi khuÈn cã kh¶ n¨ng ph©n gi¶i tr×nh bµy ë b¶ng 2.<br /> m¹nh tinh bét vµ cazein, chóng ®−îc ký hiÖu lµ: KÕt qu¶ x¸c ®Þnh enzim sau 48 h nu«i cÊy, ë<br /> NB-4 vµ CHP-6 ®Ó nghiªn cøu tiÕp. 30oC trong b¶ng 2 cho thÊy nång ®é NaCl cã<br /> 2. ¶nh h−ëng cña nång ®é muèi ®Õn ho¹t ®é ¶nh h−ëng lín ®Õn kh¶ n¨ng sinh enzim ngo¹i<br /> amilaza vµ proteinaza ngo¹i bµo bµo cña hai chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän. Hai<br /> chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän sinh proteinaza<br /> §Ó nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña nång ®é muèi ngo¹i bµo cao nhÊt trong m«i tr−êng cã 2%<br /> lªn sinh tæng hîp enzim, chóng t«i sö dông m«i NaCl vµ sinh amilaza ngo¹i bµo cao nhÊt trong<br /> tr−êng tinh bét vµ cazein láng cã bæ sung NaCl m«i tr−êng cã 5% NaCl.<br /> víi c¸c nång ®é kh¸c nhau, nu«i l¾c 200<br /> B¶ng 2<br /> ¶nh h−ëng cña nång ®é NaCl lªn sinh enzim ngo¹i bµo cña 2 chñng vi khuÈn tuyÓn chän<br /> Chñng §−êng kÝnh vßng ph©n gi¶i c¬ chÊt (D-d, mm)<br /> Lo¹i Enzym<br /> vi khuÈn 0% NaCl 2% NaCl 5% NaCl 7% NaCl 10% NaCl<br /> NB-4 8,0 16,5 18 14 12<br /> Amylaza<br /> CHP-6 7,0 18 22 17 14<br /> NB-4 6,0 15,0 13,0 9,5 8,0<br /> Proteinaza<br /> CHP-6 7,0 20 14,5 13,5 8,5<br /> <br /> 3. ¶nh h−ëng cña nhiÖt ®é nu«i cÊy ®Õn tiÕn hµnh nu«i l¾c hai chñng nµy trong c¸c b×nh<br /> ho¹t ®é amilaza vµ proteinaza ngo¹i tam gi¸c 250 ml cã chøa 50 ml m«i tr−êng tinh<br /> bµocña hai chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän bét + 5% NaCl hoÆc m«i tr−êng cazein + 2%<br /> NaCl, trªn m¸y l¾c trßn 200 vßng/phót trong 48<br /> §Ó nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña nhiÖt ®é ®Õn giê, ë c¸c thang nhiÖt ®é kh¸c nhau, kÕt qu¶<br /> kh¶ n¨ng sinh tæng hîp amilaza vµ proteinaza ®−îc tr×nh bµy ë b¶ng 3 vµ b¶ng 4.<br /> cña chñng vi khuÈn NB-4 vµ CHP-6 chóng t«i<br /> B¶ng 3<br /> ¶nh h−ëng cña nhiÖt ®é nu«i cÊy ®Õn ho¹t ®é ph©n gi¶i tinh bét<br /> cña 2 chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän<br /> Chñng §−êng kÝnh vßng ph©n gi¶i tinh bét (D-d, mm), sau 48 giê nu«i cÊy<br /> nghiªn cøu 20oC 25oC 30oC 35oC 40oC 45oC<br /> NB4 10 18 23 22 13 4<br /> CHP-6 11 20 28 25 14 5<br /> B¶ng 4<br /> ¶nh h−ëng cña nhiÖt ®é nu«i cÊy ®Õn ho¹t ®é ph©n gi¶i cazein<br /> cña 2 chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän<br /> Chñng §−êng kÝnh vßng ph©n gi¶i cazein (D-d, mm), sau 48 giê nu«i cÊy<br /> nghiªn cøu 20oC 25oC 30oC 35oC 40oC 45oC<br /> NB4 8 17,5 25 22 11 0<br /> CHP-6 9,5 19,5 27 24 12,5 0<br /> <br /> Tõ kÕt qu¶ ë b¶ng 3 vµ b¶ng 4 cho thÊy, hai inh tæng hîp amilaza lµ tõ 30 - 35oC. Cßn khi<br /> chñng vi khuÈn cã thÓ sinh amilaza vµ nhiÖt ®é thÊp h¬n 20oC hoÆc cao h¬n 40oC th×<br /> proteinaza ngo¹i bµo trong d¶i nhiÖt ®é tõ 20oC chóng sinh c¸c enzim nµy rÊt yÕu.<br /> ®Õn 40oC, nh−ng nhiÖt ®é thÝch hîp nhÊt cho<br /> 68<br /> 4. ¶nh h−ëng cña nguån cacbon trong m«i hoÆc do träng l−îng ph©n tö lín nªn kh«ng thÓ<br /> tr−êng nu«i hai chñng vi khuÈn ®· tuyÓn th©m nhËp ®−îc vµo tÕ bµo vi sinh vËt<br /> chän ®Õn ho¹t ®é enzim ngo¹i bµo chóng (xenluloza, tinh bét, pectin, protein,…). Muèn<br /> hÊp thô ®−îc c¸c chÊt nµy vi sinh vËt ph¶i tiÕt ra<br /> Dinh d−ìng vi sinh vËt lµ qu¸ tr×nh chuyÓn c¸c enzim ®Ó thuû ph©n chóng thµnh nh÷ng<br /> ho¸ c¸c nguån cacbon thµnh nh÷ng phÇn h÷u c¬ phÇn nhá h¬n. Mçi lo¹i vi sinh vËt th−êng ph¸t<br /> cña tÕ bµo vi sinh vËt. Gi¸ trÞ dinh d−ìng vµ kh¶ triÓn tèt trªn mét sè nguån cacbon nhÊt ®Þnh.<br /> n¨ng hÊp thô c¸c nguån cacbon phô thuéc vµo KÕt qu¶ nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña nguån<br /> thµnh phÇn ho¸ häc, cÊu tróc ph©n tö cña cacbon cacbon ®Õn ho¹t ®é amilaza vµ protenaza ®−îc<br /> vµ ®Æc ®iÓm sinh lý cña c¸c chñng vi sinh vËt. tr×nh bµy ë b¶ng 5.<br /> NhiÒu chÊt h÷u c¬ hoÆc kh«ng tan trong n−íc<br /> B¶ng 5<br /> ¶nh h−ëng cña nguån cacbon ®Õn ho¹t ®é amilaza vµ proteinaza<br /> cña 2 chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän<br /> §−êng kÝnh vßng ph©n gi¶i tinh bét §−êng kÝnh vßng ph©n gi¶i cazein<br /> Chñng<br /> (D-d, mm) (D-d, mm)<br /> vi khuÈn<br /> Glucoza Sacaroza Lactoza Tinh bét Glucoza Sacaroza Lactoza Tinh bét<br /> NB-4 9,0 13,0 7,5 16,0 15,5 13,5 7,5 11,0<br /> CHP-6 12,0 16,5 7,9 17,0 17,0 15,0 8,2 12,5<br /> <br /> KÕt qu¶ ë b¶ng 5 cho thÊy c¸c chñng vi vµ imin. Cã quan niÖm cho r»ng, mét sè vi<br /> khuÈn ®· tuyÓn chän sinh amilaza ngo¹i bµo khuÈn kh«ng cã kh¶ n¨ng ®ång ho¸ muèi amon.<br /> m¹nh nhÊt trong m«i tr−êng nu«i cÊy cã nguån Quan niÖm nµy kh«ng ®óng, v× tÊt c¶ c¸c vi sinh<br /> cacbon lµ tinh bét. Cßn trong m«i tr−êng cã vËt ®Òu cã thÓ sö dông muèi amon. NÕu vi sinh<br /> nguån cacbon lµ glucoza th× chóng l¹i sinh vËt kh«ng ph¸t triÓn ®−îc trong m«i tr−êng chøa<br /> proteinaza ngo¹i bµo m¹nh nhÊt. muèi amon th× nguyªn nh©n lµ do ®é chua sinh<br /> lÝ cña c¸c muèi nµy: bëi v×, sau khi ®ång ho¸<br /> 5. ¶nh h−ëng cña nguån nit¬ trong m«i nhãm NH4+, trong m«i tr−êng sÏ cßn l¹i c¸c<br /> tr−êng nu«i ®Õn ho¹t ®é enzim ngo¹i bµo anion v« c¬ (SO4-2, Cl-, HPO4-2) v× thÕ mµ pH cña<br /> cña c¸c chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän m«i tr−êng h¹ xuèng rÊt m¹nh, lµm øc chÕ sù<br /> C¸c nguån nit¬ cung cÊp cho vi sinh vËt ph¸t triÓn cña vi sinh vËt. Ngoµi ra, nÕu vi sinh<br /> nguyªn liÖu ®Ó h×nh thµnh nhãm amin (-NH3) vµ vËt kh«ng thÓ ph¸t triÓn ®−îc trong m«i tr−êng<br /> imin (-NH-) trong ph©n tö c¸c aminoaxit, cã muèi amon v« c¬ lµ nguån nit¬ duy nhÊt,<br /> nucleotit, c¸c baz¬ dÞ vßng vµ c¸c hîp chÊt ho¸ th−êng cßn do c¸c vi sinh vËt nµy ®ßi hái mét sè<br /> häc kh¸c cã mÆt trong nguyªn sinh chÊt. Nguån axit amin cã s½n trong m«i tr−êng. KÕt qu¶<br /> nit¬ vi sinh vËt dÔ hÊp thu nhÊt lµ NH4+ vµ NH3. nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña nguån nit¬ ®Õn ho¹t<br /> Chóng dÔ dµng th©m nhËp vµo tÕ bµo vi sinh vËt ®é amilaza vµ proteinaza cña 2 chñng vi khuÈn<br /> vµ t¹o nªn mét c¸ch kh¸ dÔ dµng c¸c nhãm amin tuyÓn chän ®−îc tr×nh bµy ë b¶ng 6.<br /> <br /> B¶ng 6<br /> ¶nh h−ëng cña nguån nit¬ trong m«i tr−êng nu«i<br /> ®Õn ho¹t ®é amilaza vµ proteinaza ngo¹i bµo cña c¸c chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän<br /> §−êng kÝnh vßng ph©n gi¶i (D-d, mm), sau 48 giê nu«i cÊy, ë 30oC<br /> Lo¹i Chñng<br /> Enzym vi khuÈn Cao nÊm Bét ®Ëu<br /> Pepton Cao thÞt KNO3 (NH4)2SO4<br /> men t−¬ng<br /> NB-4 17,5 18,0 17,0 18,0 13 0<br /> Amilaza<br /> CHP-6 15,5 17,5 16,5 17,5 12 0<br /> NB-4 14,5 11,0 13,0 19,5 14 0<br /> Proteinaza<br /> CHP-6 16,0 10,0 12,5 21,5 14,5 0<br /> 69<br />  KÕt qu¶ ë b¶ng 6 cho thÊy c¸c chñng vi tr−êng cã c¸c nguån nit¬ h÷u c¬. Trong m«i<br /> khuÈn ®· tuyÓn chän sinh amilaza ngo¹i bµo cao tr−êng cã c¸c muèi nit¬ v« c¬ chóng sinh tæng<br /> trong m«i tr−êng cã nguån nit¬ h÷u c¬, chóng hîp c¸c enzim nµy yÕu, nhÊt lµ trong m«i tr−êng<br /> sinh amilaza ngo¹i bµo yÕu trong m«i tr−êng cã cã nguån nit¬ lµ muèi (NH4)2SO4 th× hÇu nh−<br /> bæ sung muèi v« c¬ KNO3. Chóng hÇu nh− chóng kh«ng sinh tæng hîp ®−îc c¸c enzim trªn.<br /> kh«ng ph¸t triÓn vµ kh«ng sinh amilaza vµ Hai chñng vi khuÈn tuyÓn chän sinh tæng hîp<br /> proteinaza ngo¹i bµo trong m«i tr−êng cã muèi proteinaza ngo¹i bµo tèt nhÊt trong m«i tr−êng<br /> (NH4)2SO4. Chóng sinh proteinaza ngo¹i bµo tèt cã bæ sung bét ®Ëu t−¬ng hoÆc pepton.<br /> nhÊt trong m«i tr−êng cã bét ®Ëu t−¬ng hoÆc<br /> pepton, ®iÒu nµy cho thÊy proteinaza cña 2 TµI LIÖU THAM KH¶O<br /> chñng vi khuÈn trªn lµ enzim c¶m øng v× c¸c<br /> ph©n tö protein trong bét ®Ëu t−¬ng ch−a ®−îc 1. NguyÔn L©n Dòng, §oµn Xu©n M−îu,<br /> thuû ph©n, cßn trong pepton protein còng ch−a Phïng §øc TiÕn, §Æng §øc Tr¹ch, Ph¹m<br /> bÞ thuû ph©n hoµn toµn thµnh c¸c axit amin. Do V¨n Ty, 1976: Mét sè ph−¬ng ph¸p nghiªn<br /> vËy, ®· kÝch thÝch qu¸ tr×nh sinh tæng hîp cøu vi sinh vËt häc tËp II, Nxb. Khoa häc vµ<br /> proteinaza cña chóng. Kü thuËt.<br /> 2. Egorov N. X., 1983: Thùc tËp vi sinh vËt<br /> III. KÕT LUËN<br /> häc. Nxb. “MIR” Maxc¬va, Nxb. §¹i häc<br /> 1. Hai chñng vi khuÈn NB-4 vµ CHP-6 ®−îc vµ Trung häc chuyªn nghiÖp, Hµ Néi.<br /> ph©n lËp tõ c¸c mÉu bïn nu«i t«m cã kh¶ n¨ng 3. TrÇn Xu©n Du, 2003: Gi¶i ph¸p m«i tr−êng<br /> sinh enzim amilaza vµ proteinaza ngo¹i bµo n−íc nu«i trong chu tr×nh nu«i t«m s¹ch,<br /> trong c¸c m«i tr−êng cã nång ®é NaCl tõ 0%- B¸o c¸o Héi th¶o m«i tr−êng nu«i trång<br /> 10%. Nång ®é NaCl cã ¶nh h−ëng rÊt lín ®Õn thñy s¶n biÓn ViÖt nam, Nha Trang.<br /> kh¶ n¨ng sinh enzim ngo¹i bµo cña hai chñng vi 4. Vâ ThÞ Thø, La ThÞ Nga, Tr−¬ng B¸<br /> khuÈn ®· tuyÓn chän, chóng sinh tæng hîp Hïng, 2003: Nghiªn cøu t¹o chÕ phÈm<br /> proteinaza ngo¹i bµo cao nhÊt trong m«i tr−êng Bioche vµ ®¸nh gi¸ t¸c dông cña chÕ phÈm<br /> cã 2% NaCl, nh−ng l¹i sinh tæng hîp amilaza ®Õn m«i tr−êng n−íc nu«i t«m, c¸: 119-121.<br /> ngo¹i bµo cao nhÊt trong m«i tr−êng cã 5%<br /> Héi nghÞ C«ng nghÖ sinh häc toµn quèc,<br /> NaCl.<br /> Nxb. Khoa häc vµ Kü thuËt.<br /> 2. Hai chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän cã thÓ<br /> 5. Phan ViÕt Tïng, 2003: Sö dông chÕ phÈm<br /> sinh tæng hîp amilaza vµ proteinaza ngo¹i bµo<br /> vi sinh (probiotic) trong nu«i t«m só th−¬ng<br /> trong d¶i nhiÖt ®é ph¸t triÓn tõ 20oC ®Õn 40oC,<br /> phÈm, B¸o c¸o Héi th¶o M«i tr−êng nu«i<br /> nh−ng nhiÖt ®é thÝch hîp nhÊt lµ tõ 30 - 35oC.<br /> trång thñy s¶n ven biÓn ViÖt Nam, Nha<br /> 3. Hai chñng vi khuÈn tuyÓn chän sinh tæng Trang.<br /> hîp amilaza ngo¹i bµo m¹nh nhÊt trong m«i<br /> 6. Kalkani, 2003: Probiotic: Their role in<br /> tr−êng nu«i cÊy cã nguån cacbon lµ tinh bét vµ<br /> sinh tæng hîp proteinaza ngo¹i bµo m¹nh nhÊt aquaculture, American standard products,<br /> trong m«i tr−êng cã nguån cacbon lµ glucoza. Inc, Jan 10.<br /> 4. C¸c chñng vi khuÈn ®· tuyÓn chän sinh 7. Sambasivam S., Chandran R., Khan S.<br /> tæng hîp amilaza ngo¹i bµo cao trong m«i A., 2003.: Journal Environment Biology, 15.<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 70<br />  BIOSYNTHESIS AMYLASE AND PROTEINASE OF SOME HALOPHILIC<br /> BACTERIAL STRAIN FROM SHRIMP culture PONDS<br /> <br /> Phan Thi Tuyet Minh, Tang Thi Chinh<br /> <br /> <br /> SUMMARY<br /> <br /> By the screening sediements of shrimp culture pond, we selected two bacterial strains NB4 and CHP6,<br /> these bacterial strains could biosynthesize enzymes amylase and proteinase. They could grow and produced<br /> amylase and proteinase in the media with NaCl concentration ranged from 0% to 10%. The optimum sodium<br /> concentration of the media for their production of amylase was 5% NaCl and for their production of proteinase<br /> was 2% NaCL. These bacterial strains were halophilic microorganisms. These bacterial could grow and<br /> biosynthesize amylase and proteinase in the media with a range of incubation temperature from 20oC to 40oC,<br /> but most suitable temperature for their production of these enzymes were 30oC - 35oC. The optimum pH for<br /> biosyntheses amylase and proteinase were 6.5 - 8.5.<br /> The highest biosynthesis of amylase occurred in media used starch as carbon source and beef extract as<br /> nitrogen source. The highest biosynthesis of proteinase in media contained glucose and soybean powder. The<br /> media containing organic nitrogen sources were suitable for the biosyntheses of mentioned above enzymes.<br /> The media containing inorganic nitrogen likes nitrogen source were very fragile for their production of<br /> amylase and proteinase. These strains could not grown and produced amylase and proteinase in the media<br /> containing ammonium sulfate as nitrogen source.<br /> <br /> Ngày nhận bài:13-4-2006<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 71<br />