intTypePromotion=1
zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn
ADSENSE

Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR để chọn mẫu dịch não tuỷ cho phân lập virut do muỗi truyền từ bệnh nhân có hội chứng não cấp ở miền Bắc Việt Nam

Chia sẻ: Sunshine_3 Sunshine_3 | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:6

66
lượt xem
5
download
 
  Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Trong những năm gần đây , có rất nhiều truyền của những virut đã biết [8, 9, 10]. căn nguyên virut gây HCNC mới được phát Trong thực tế vật liệu di truyền của nhiều virut hiện, hoặc mới thấy xuất hiện ở những vùng nh- là một túi cóp nhặt (grap-bags), nó có trước đây chưa có sự lưu hành của những được một số gen từ vật chủ của nó cũng như virut này ví dụ như virut Hendra, virut viêm có được một số gen từ những virut khác. Do não Nhật bản (VNNB) ở Australia,...

Chủ đề:
Lưu

Nội dung Text: Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR để chọn mẫu dịch não tuỷ cho phân lập virut do muỗi truyền từ bệnh nhân có hội chứng não cấp ở miền Bắc Việt Nam

  1. TCNCYH 30 (4) - 2004 øng dông kü thuËt RT-PCR ®Ó chän mÉu dÞch n·o tuû cho ph©n lËp virut do muçi truyÒn tõ bÖnh nh©n cã héi chøng n·o cÊp ë miÒn b¾c viÖt nam Phan ThÞ Ngµ, Mary B. Crabtree* ViÖn VÖ sinh dÞch tÔ trung -¬ng (VSDTT¦), Hµ Néi *Trung t©m kiÓm so¸t bÖnh tËt, Fort Collins, Colorado B»ng kü thuËt RT-PCR, sö dông måi ®ét biÕn cña 3 nhãm virut ®Ó chän mÉu dÞch n·o tuû (DNT) ph©n lËp virut g©y héi chøng n·o cÊp (HCNC) do muçi truyÒn. XÐt nghiÖm 53 mÉu DNT cña bÖnh nh©n HCNC b»ng kü thuËt RT-PCR, x¸c ®Þnh cã 16 tr-êng hîp d-¬ng tÝnh víi tØ lÖ nh- sau: 8/53 (15,09 %) mÉu d-¬ng tÝnh víi måi cña nhãm virut do muçi truyÒn, 7/53 (12,96 %) mÉu d-¬ng tÝnh víi måi cña nhãm virut tiÒm tµng, 1/53 (1,88 %) mÉu d-¬ng tÝnh víi måi cña nhãm virut l©y truyÒn qua ®-êng tiªu ho¸. KÕt qu¶ d-¬ng tÝnh b»ng kü thuËt RT-PCR kh«ng thÓ thay thÕ kÕt qu¶ ph©n lËp, nh-ng nã ®Þnh h-íng cho viÖc chän mÉu thÝch hîp ®Ó ph©n lËp virut. Sö dông tÕ bµo muçi Aedes Albopictus dßng C6/36 ®Ó ph©n lËp virut do muçi truyÒn. Tõ 7 mÉu DNT x¸c ®Þnh d-¬ng tÝnh b»ng kü thuËt RT-PCR víi cÆp måi cña nhãm virut do muçi truyÒn, ph©n lËp ®-îc 7 chñng virut, trong sè nµy cã 5 chñng lµ virut VNNB, 1 chñng lµ virut thuéc nhãm virut Arbo míi ®-îc ph¸t hiÖn ë ViÖt nam 2002, cßn 1 chñng ch-a ®Þnh lo¹i ®-îc. I. §Æt vÊn ®Ò virut, kü thuËt nµy nh¹y nh-ng chØ cã thÓ øng dông ®Ó ®Þnh lo¹i sù hiÖn diÖn vËt liÖu di Trong nh÷ng n¨m gÇn ®©y, cã rÊt nhiÒu truyÒn cña nh÷ng virut ®· biÕt [8, 9, 10]. c¨n nguyªn virut g©y HCNC míi ®-îc ph¸t Trong thùc tÕ vËt liÖu di truyÒn cña nhiÒu virut hiÖn, hoÆc míi thÊy xuÊt hiÖn ë nh÷ng vïng nh- lµ mét tói cãp nhÆt (grap-bags), nã cã tr-íc ®©y ch-a cã sù l-u hµnh cña nh÷ng ®-îc mét sè gen tõ vËt chñ cña nã còng nh- virut nµy vÝ dô nh- virut Hendra, virut viªm cã ®-îc mét sè gen tõ nh÷ng virut kh¸c. Do n·o NhËt b¶n (VNNB) ë Australia, virut Nipah vËy vËt liÖu di truyÒn cña nhiÒu virut trong c¸c ë Malaysia, virut West Nile ë Mü [6, 8]. ë ViÖt hä kh¸c nhau trong phÇn lín c¸c tr-êng hîp Nam theo sè liÖu thèng kª, hµng n¨m cã rÊt kh¸c nhau, nh-ng trong mét sè tr-êng kho¶ng 2000 - 3000 tr-êng hîp bÞ HCNC, hîp l¹i t-¬ng tù nh- nhau vÒ tr×nh tù cña vËt nh-ng cho ®Õn nay míi x¸c ®Þnh ®-îc virut liÖu di truyÒn [3, 5]. Nªn cã gi¶ thiÕt r»ng: kÕt VNNB, virut ®-êng ruét lµ c¨n nguyªn, sè qu¶ x¸c ®Þnh d-¬ng tÝnh tõ mÉu bÖnh phÈm cßn l¹i cã thÓ do nhiÔm virut kh¸c [2, 4]. chØ ®ång nghÜa víi nhËn ®Þnh cã vËt liÖu di §Ó ph¸t hiÖn mét t¸c nh©n virut míi g©y truyÒn cña virut trong mÉu; nh-ng nÕu ph©n bÖnh, ph©n lËp virut cã ý nghÜa quan träng lËp virut tõ nh÷ng mÉu bÖnh phÈm nµy, hiÖu cho viÖc x¸c ®Þnh t¸c nh©n, tuy nhiªn ph©n qu¶ ph©n lËp ®-îc virut rÊt cao. lËp virut th-êng Ýt ®¹t kÕt qu¶ do bÞ ¶nh h-ëng Do vËy trong nghiªn cøu nµy cÆp måi cña cña nhiÒu yÕu tè nh- thêi gian lÊy mÉu, b¶o 3 nhãm virut lµ nh÷ng nhãm virut ®· ®-îc x¸c qu¶n vµ vËn chuyÓn mÉu lµm gi¶m hiÖu gi¸ ®Þnh hoÆc gi¶ ®Þnh cã thÓ lµ t¸c nh©n g©y virut trong mÉu, mÆt kh¸c thêi gian cã kÕt qu¶ HCNC [4, 9, 10] ®-îc sö dông sµng läc mÉu chËm. Ng-îc l¹i kü thuËt PCR cho phÐp DNT ®Ó ph©n lËp virut g©y HCNC do muçi khuÕch ®¹i nhiÒu lÇn theo cÊp sè nh©n nh÷ng truyÒn ë miÒn b¾c ViÖt Nam trong n¨m 2003. ®o¹n ADN phiªn m· tõ vËt liÖu di truyÒn cña 15
  2. TCNCYH 30 (4) - 2004 II. VËt liÖu vµ ph-¬ng ph¸p TÕ bµo muçi Aedes Albopictus dßng C6/36, m«i tr-êng nu«i tÕ bµo Eagle Minimun 2.1. VËt liÖu: Essential Medium (EMEM) cã 10 % huyÕt MÉu bÖnh phÈm: 53 mÉu DNT cña bÖnh thanh bª bµo thai. nh©n HCNC ®-îc lÊy ë ViÖn Nhi trung -¬ng M¸y PCR, c¸c trang thiÕt bÞ, sinh phÈm trong th¸ng 4 vµ th¸ng 5 n¨m 2003, c¸c mÉu ho¸ chÊt vµ vËt liÖu cÇn thiÕt kh¸c. DNT ®-îc x¸c ®Þnh kh«ng cã kh¸ng thÓ IgM kh¸ng VNNB. 2.2. Ph-¬ng ph¸p: Sö dông måi ®ét biÕn mét sè nucleotit T¸ch chiÕt ARN cña virut tõ DNT b»ng bé (denegenate primer) ®Ó t¨ng ®é nhËy cña kü sinh phÈm QIAamp theo h-íng dÉn cña bé thuËt RT-PCR: Víi nhãm virut do muçi truyÒn sinh phÈm. sö dông cÆp måi cña virut nhãm Alpha, Flavi, Kü thuËt RT-PCR thùc hiÖn theo h-íng Bunya. Víi nhãm virut tiÒm tµng sö dông cÆp dÉn cña sinh phÈm. måi cña nhãm virut Herpes. Víi nhãm virut Ph¸t hiÖn vËt liÖu di truyÒn cña virut trong l©y truyÒn qua ®-êng tiªu ho¸, tiÕp xóc, sö mÉu DNT víi måi ®ét biÕn (denegenate dông cÆp måi cña nhãm virut Entero, Adeno primer). vµ Nipah. C¸c mÉu chøng d-¬ng cho kü thuËt RT-PCR do Trung t©m kiÓm so¸t bÖnh Ph©n lËp virut b»ng tÕ bµo muçi C6/36 tËt CDC, Mü vµ ViÖn Y häc NhiÖt ®íi theo th-êng quy phßng thÝ nghiÖm Virut viªm Nagasaki cung cÊp. n·o ViÖn VÖ sinh DÞch tÔ Trung -¬ng. CÆp måi ®Æc hiÖu ®Ó ®Þnh lo¹i virut VNNB §Þnh lo¹i s¬ bé virut ph©n lËp b»ng kü (841N, 2670 R), cÆp måi ®Æc hiÖu ®Ó ®Þnh thuËt ELISA-Sandwich víi kh¸ng thÓ kh¸ng lo¹i virut Arbo míi ph¸t hiÖn ë ViÖt Nam (85F, virut VNNB. Nh÷ng mÉu d-¬ng tÝnh ®-îc 475 R). kh¼ng ®Þnh b»ng kü thuËt RT-PCR víi måi ®Æc hiÖu víi virut VNNB, nh÷ng mÉu ©m tÝnh Bé sinh phÈm QIAamp ®Ó t¸ch chiÕt ARN ®-îc kiÓm tra víi måi ®Æc hiÖu cña virut cña QIAGEN, NhËt B¶n. nhãm Alpha, nhãm Bunya, virut Arbo míi [1]. Sinh phÈm cho kü thuËt RT-PCR trùc tiÕp S¶n phÈm PCR tæng hîp ®-îc kiÓm tra cña Roche (Titan one tube RT-PCR System), trªn th¹ch 1% trong Tris-Borat-EDTA cã NhËt B¶n. ethidium bromide ch¹y ®iÖn di 100 mA, 40 Sinh phÈm cho kü thuËt RT-PCR cña phót, ®äc kÕt qu¶ b»ng m¸y ®äc Polaroid Takara Bio Inc, NhËt B¶n. theo nguyªn lý ho¸ ph¸t quang (Chemilluminescence). B¶ng 1. KÕt qu¶ x¸c ®Þnh c¨n nguyªn virut g©y HCNC, 2003 b»ng kü thuËt RT-PCR víi måi cña 3 nhãm virut Måi cña nhãm virut Sè mÉu Sè mÉu % xÐt nghiÖm d-¬ng tÝnh Do muçi truyÒn 53 8 15,09 Virut tiÒm tµng 53 7 12,96 L©y qua ®-êng tiªu ho¸, tiÕp xóc 53 1 1,88 16
  3. TCNCYH 30 (4) - 2004 Trong sè 53 mÉu DNT cña bÖnh nh©n n¨m Cã 8/53 (15,09 %) mÉu d-¬ng tÝnh víi måi 2003 ®-îc x¸c ®Þnh kh«ng cã kh¸ng thÓ IgM cña nhãm virut do muçi truyÒn (nhãm virut kh¸ng virut VNNB, øng dông kü thuËt RT- Bunya), cã 7/53 (12,96 %) mÉu d-¬ng tÝnh víi PCR ®Ó ph¸t hiÖn nhanh vËt liÖu di truyÒn cña måi cña nhãm virut tiÒm tµng (nhãm virut virut. KÕt qu¶ d-¬ng tÝnh ®-îc x¸c ®Þnh víi Herpes), cã 1/53 (1,88 %) mÉu d-¬ng tÝnh víi måi cña 3 nhãm virut víi tØ lÖ x¸c ®Þnh d-¬ng måi cña nhãm virut l©y truyÒn qua ®-êng tiªu tÝnh víi cÆp måi cña tõng nhãm virut nh- sau: ho¸, tiÕp xóc (nhãm virut Entero). B¶ng 2. KÕt qu¶ ph©n lËp virut tõ c¸c mÉu DNT x¸c ®Þnh d-¬ng tÝnh b»ng kü thuËt RT-PCR víi cÆp måi cña nhãm virut do muçi truyÒn Ký hiÖu Ký hiÖu KÕt qu¶ (+) víi KÕt qu¶ KÕt qu¶ mÉu chñng måi cña nhãm virut ph©n lËp ®Þnh lo¹i DNT virut do muçi truyÒn virut virut 03CSF13 // + (Weak band) HÕt mÉu // 03CSF14 03VN76 + ( Strong band) D-¬ng tÝnh Arbo míi 03CSF17 03VN79 + (Weak band) D-¬ng tÝnh VNNB 03CSF23 03VN81 + (Weak band) D-¬ng tÝnh VNNB 03CSF25 03VN82 + (Weak band) D-¬ng tÝnh VNNB 03CSF62 03VN89 + (Weak band) D-¬ng tÝnh VNNB 03CSF78 03VN99 + (Weak band) D-¬ng tÝnh Ch-a x¸c ®Þnh 03CSF85 03VN105 + (Weak band) D-¬ng tÝnh VNNB VN105 VN89 VN82 VN81 VN79 Neg. Pos. 1 Kb H×nh 1: KÕt qu¶ ®Þnh lo¹i virut ph©n lËp ®-îc víi cÆp måi ®Æc hiÖu víi virut VNNB 17
  4. TCNCYH 30 (4) - 2004 Thö nghiÖm ph©n lËp virut b»ng tÕ bµo muçi víi måi ®Æc hiÖu víi virut VNNB, nh÷ng mÉu C6/36 tõ c¸c mÉu DNT ®-îc x¸c ®Þnh d-¬ng ©m tÝnh ®-îc kiÓm tra víi måi ®Æc hiÖu cña tÝnh b»ng kü thuËt RT-PCR víi cÆp måi cña virut nhãm Alpha, virut nhãm Bunya vµ virut nhãm virut do muçi truyÒn, kÕt qu¶ ph©n lËp Arbo míi ph¸t hiÖn ë ViÖt Nam 2002. KÕt qu¶ ®-îc 7 chñng virut tõ 7 mÉu DNT. Virut VNNB x¸c ®Þnh cã 5 chñng lµ virut VNNB, cã 1 trong n-íc næi tÕ bµo g©y nhiÔm ®-îc ph¸t chñng lµ thuéc nhãm genotyp cña virut Arbo hiÖn b»ng kü thuËt ELISA-Sandwich víi míi ph©n lËp ë ViÖt Nam n¨m 2002, cßn 1 kh¸ng thÓ ®Æc hiÖu kh¸ng virut VNNB, x¸c chñng virut ch-a ®Þnh lo¹i ®-îc, kh«ng cã ®Þnh 5 mÉu d-¬ng tÝnh, 2 mÉu ©m tÝnh b»ng mÉu nµo d-¬ng tÝnh víi måi cña virut nhãm kü thuËt nµy. Nh÷ng mÉu d-¬ng tÝnh ®-îc Alpha vµ virut nhãm Bunya. kiÓm tra vµ x¸c dÞnh b»ng kü thuËt RT-PCR 1 Kp Pos. VN 76 VN 99 Neg. 100 bp H×nh 2: KÕt qu¶ ®Þnh lo¹i vi rut ph©n lËp ®-îc víi cÆp måi ®Æc hiÖu cña vi rut Arbo míi IV. Bµn luËn phßng bÖnh [9, 10]. Tuy nhiªn kÕt qu¶ ©m tÝnh víi måi cña nh÷ng virut kh¸c chØ cã nghÜa ViÖc ph¸t hiÖn nhanh vËt liÖu di truyÒn cña r»ng tr×nh tù phÇn khuÕch ®¹i cña mÉu kh«ng virut b»ng kü thuËt RT-PCR, kÕt qu¶ cã thÓ ®-îc ph¸t hiÖn [10]. VÝ dô nh- trong nghiªn nhËn ®-îc ngay trong ngµy nhËn mÉu cã ý cøu nµy kh«ng cã mÉu nµo ®-îc ph¸t hiÖn nghÜa quan träng ®Ó ®Þnh h-íng cho viÖc 18
  5. TCNCYH 30 (4) - 2004 d-¬ng tÝnh víi måi cña virut nhãm Flavi, d-¬ng tÝnh víi måi cña nhãm virut tiÒm tµng, mÆc dï virut VNNB lµ mét virut thuéc nhãm cã 1/53 (1,88 %) mÉu d-¬ng tÝnh vi måi cña Flavi g©y HCNC ë ViÖt Nam [4]. KÕt qu¶ nµy nhãm virut l©y truyÒn qua ®-êng tiªu ho¸. còng phï hîp víi nghiªn cøu ®· c«ng bè Sö dông tÕ bµo muçi Aedes Albopictus tr-íc ®©y viÖc ph¸t hiÖn gen«m cña virut dßng C6/36 ®Ó ph©n lËp virut tõ 7 mÉu DNT VNNB trong dÞch n·o tuû th-êng Ýt ®¹t kÕt ®-îc x¸c ®Þnh d-¬ng tÝnh b»ng måi cña nhãm qu¶, ng-îc l¹i ®èi víi virut West Nile, mét virut do muçi truyÒn, kÕt qu¶ ph©n lËp ®-îc 7/ virut thuéc nhãm Flavi, viÖc ph¸t hiÖn gen«m 7 chñng virut, trong sè nµy 5 chñng ®-îc x¸c cña virut nµy trong dÞch n·o tuû cã hiÖu suÊt ®Þnh lµ virut VNNB, 1 chñng ®-îc x¸c ®Þnh cao h¬n [7]. thuéc nhãm virut Arbo míi ®-îc ph¸t hiÖn ë MÆt kh¸c kü thuËt PCR còng cã nh÷ng ViÖt Nam n¨m 2002, 1 chñng ch-a ®Þnh lo¹i giíi h¹n nhÊt ®Þnh v× nã kh«ng ®Þnh lo¹i ®-îc ®-îc. toµn bé thµnh phÇn virut, nªn kÕt qu¶ x¸c ®Þnh d-¬ng tÝnh b»ng kü thuËt RT-PCR Lêi c¶m ¬n: kh«ng thÓ thay thÕ ®-îc kÕt qu¶ ph©n lËp §Ò tµi thùc hiÖn t¹i CDC Fort Collins, virut. Colorado vµ ViÖn VÖ Sinh DÞch TÔ Trung Víi gi¶ thiÕt kÕt qu¶ x¸c ®Þnh d-¬ng tÝnh ¦¬ng. b»ng kü thuËt PCR tõ mÉu bÖnh phÈm lµ TËp thÓ t¸c gi¶ xin tr©n träng c¶m ¬n: ®ång nghÜa víi nhËn ®Þnh cã vËt liÖu di truyÒn - Sù hç trî cña nhãm Pathogen Discovery cña virut trong mÉu; nh-ng nÕu ph©n lËp virut Group, CDC Atlanta vÒ viÖc trî gióp kü thuËt tõ nh÷ng mÉu bÖnh phÈm nµy, kh¶ n¨ng vµ sinh phÈm ®Ó ph¸t hiÖn vËt liÖu di truyÒn ph©n lËp ®-îc virut rÊt cao. KÕt qu¶ ph©n lËp cña virut nhãm Herpes, Adeno vµ Entero. ®-îc 7 chñng virut tõ 7 mÉu DNT ®-îc x¸c ®Þnh d-¬ng tÝnh b»ng kü thuËt RT-PCR trong - GS. Kouichi Morita vÒ viÖc cung cÊp sinh nghiªn cøu nµy lµ mét minh chøng cho nhËn phÈm cho kü thuËt RT-PCR ®Ó ph¸t hiÖn vËt ®Þnh trªn. MÆc dï 7 mÉu DNT ®-îc x¸c ®Þnh liÖu di truyÒn cña virut Nipah, virut VNNB, d-¬ng tÝnh b»ng kü thuËt RT-PCR víi måi virut Arbo míi. cña virut nhãm Bunya, nh-ng 7 chñng virut TµI liÖu tham kh¶o ®-îc ph©n lËp tõ c¸c mÉu dÞch n·o tuû nµy kh«ng cã mÉu nµo d-¬ng tÝnh víi måi cña 1. Phan ThÞ Ngµ, Kouichi Morita. 2004. virut nhãm Bunya, kÕt qu¶ nµy cho thÊy viÖc Ph¸t hiÖn virut viªm n·o míi tõ dÞch n·o tuû sö dông måi ®ét biÕn ®Ó ph¸t hiÖn vËt liÖu di cña bÖnh nh©n cã héi chøng n·o cÊp ë miÒn truyÒn tõ mÉu DNT lµm t¨ng ®é nh¹y cña kü B¾c ViÖt Nam. T¹p chÝ nghiªn cøu Y häc, tËp thuËt RT-PCR, nh-ng cã thÓ cã d-¬ng tÝnh 29, sè 3: gi¶ [3]. 2. NguyÔn ThÞ HiÒn Thanh. 2003. B-íc V. kÕt luËn ®Çu t×m hiÓu c¨n nguyªn g©y viªm mµng n·o ë trÎ em do mét sè virut ®-êng ruét. T¹p chÝ Y øng dông kü thuËt RT-PCR ®Ó xÐt nghiÖm häc dù phßng, tËp XIII, sè 4 (61): 5 12. 53 mÉu DNT cña bÖnh nh©n cã HCNC víi cÆp måi cña 3 nhãm virut, x¸c ®Þnh: Cã 8/53 3. Fields B. N., Knipe D. M., Howley P. M. (15,09 %) mÉu d-¬ng tÝnh víi måi cña nhãm et al. 1996. Virology 3th Edition: 15 57. virut do muçi truyÒn, cã 7/53 (12,96 %) mÉu 4. Ha D. Q., Calisher C. H., Tien P. H., 19
  6. TCNCYH 30 (4) - 2004 Isolation of a newly recognized Alphavirus Waqar M. A. 1994. Detection of West Nile from mosquitoes in Vietnam and evidence for and Japanese Encephalitis viral genome human infection and disease. Am. J. Trop. sequences in cerebrospinal fluid from acute Med. Hyg. 53(1): 100 -104. encphalitis cases in Karachi, Pakistan. Microbiol Immmunol, Vol. 38: 827 -830. 5. Hazelton P. R., Gelderblom H. R. 2003. Electron Microscopy for rapid diagnosis of 8. Parida M., Posadas G., Inoue S., infection agents in Emergent situation. Hasebe F. and Morita K. 2004. Real-Time Emerging Infectious Diseases. Vol. 9, No. 3: Reverse Transcription Loop-Mediated 294 303. Isothermal Amplification for Rapid Detection of West Nile virus. Journal of clinical 6. Mackenzie J.S., Johansen C.A., Microbiology, Vol. 42 No. 1: 257 263. Ritchie S.A., Van den Hurk A.F & Hall R.A. 2002. Japanese encephalitis as an emerging 9. Read S. J., Jeffery K. J. M. anh virus: The emergence and spread of Bangham C. R. M. 1997. Aseptic Meningitis Japanese encephalitis virus in Australia. In and Encephalitis: The Role of PCR in the Current topics in microbiology and diagnostic laboratory. Journal of Clinical Immunology: Japanese encephalitis and Microbiology : 691 696. West Nile virus infections, Vol. 267: 49-73. 10. Weidmann M., Rudaz V., Nunes M. R. Edited by J.S. mackenzie, A.D. Barret & V. T., Vasconcelos P. F. C. and Hufert F. T. Deubel. Berlin: Springer-Verlag. 2003. Rapid detection of human pathogenic 7. Igarashi A., Tanaka M., Morita K., Orthobunyaviruses. Journal of Clinical Ahmed Akhtar, Ahmed Arsalam, Akram D. S., Microbiology: 3299 3305. Summary Application RT-PCR for the selection of CSF samples for the isolation of virus transmiss by mosquitoes from acute encephalitis syndrome patients in the North Vietnam, 2003 RT-PCR technique with denegenate primers of three viral groups were used to selection samples for the isolation of mosquito borne viruses which cause acute encephalitis (AES) syndrome. The results showed that 16 out of 53 positive cases were confirmed by RT-PCR with proportion as following: 8/53 (15.09 %) were confirmed positive by primers of mosquito borne viruses, 7/53 (12.96 %) by primers of latent viruses and 1/53 (1.88 %) by viral group of hand-food-mouth diseases. The confirmed positive results by RT-PCR can not replace results of the isolation of virus, but it orients for the selection of relevant CSF samples for the isolation of virus . The Aedes Albopictus clone C6/36 cells were used to isolate virus which is transmitted by mosquitoes. From 7 CSF samples which were confirmed positive by RT-PCR, the isolation of virus were carried out yielding 7 virus strains. Among them, 5 strains were confirmed Japanese encephalitis virus, 1 strain belongs to group of new type Arbovirus and 1 strain was unknown. 20
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

 

Đồng bộ tài khoản
2=>2