Ảnh hưởng của ánh sáng lên sự tăng trưởng và sinh tổng hợp Anthocyanin trong nuôi cấy tế bào dâu tây

Tạp chí Đại học Thủ Dầu Một, số 2 - 2011<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> AÛNH HÖÔÛNG CUÛA AÙNH SAÙNG LEÂN SÖÏ TAÊNG TRÖÔÛNG<br /> VAØ SINH TOÅNG HÔÏP ANTHOCYANIN TRONG NUOÂI CAÁY<br /> TEÁ BAØO DAÂU TAÂY<br /> <br /> Phaïm Thò Myõ Traâm(1), Leâ Thò Thuyû Tieân(2)<br /> (1) Tröôøng Ñaïi hoïc Thuû Daàu Moät<br /> (2) Tröôøng Ñaïi hoïc Baùch Khoa - Ñaïi hoïc Quoác gia TP.HCM<br /> <br /> TOÙM TAÉT<br /> Moâ seïo coù nguoàn goác töø laù vaø cuoáng laù daâu taây (Fragaria ananassa L.) in vitro ñöôïc<br /> nuoâi caáy treân moâi tröôøng MS (Murashige vaø Skoog, 1962) boå sung ñöôøng 30 g/l, 2,4-D<br /> 1,0 mg/l vaø kinetin 0,3 mg/l. Trong ñoù, moâ seïo phaùt sinh töø laù vaø ñaët trong ñieàu kieän<br /> toái hình thaønh sôùm cuõng nhö cho seïo coù daïng bôû. Huyeàn phuø teá baøo taêng sinh ôû trong toái<br /> toát hôn ngoaøi saùng. Haøm löôïng anthocyanin trong teá baøo huyeàn phuø ñaït giaù trò cao nhaát<br /> (7,52.10-3% FW) ôû ñieàu kieän chieáu saùng 4000 lux.<br /> Töø khoaù: anthocyanin, daâu taây, Fragaria ananassa L.,<br /> huyeàn phuø teá baøo, moâ seïo<br /> *<br /> 1. Giôùi thieäu khoaûng 1% toång haøm löôïng caùc chaát coù<br /> Anthocyanin laø hôïp chaát maøu höõu cô trong noù; trong khi vieäc nuoâi caáy teá baøo coù<br /> thieân nhieân, thuoäc nhoùm flavonoid, coù maøu theå gia taêng haøm löôïng caùc chaát flavonoid<br /> ñoû, ñoû tía, xanh, hieän dieän trong moät soá rau leân tôùi 20 ‟ 30 % toång theå tích [7]. Vì vaäy,<br /> quaû nhö ngoâ, taùo, daâu, nho, baép caûi... [8], ñöôïc hieän nay vieäc nghieân cöùu vaø tìm ra ñieàu<br /> söû duïng laøm chaát maøu trong thöïc phaåm thay kieän moâi tröôøng thích hôïp ñeå gia taêng sinh<br /> cho caùc chaát maøu toång hôïp hoùa hoïc nhôø vaøo khoái teá baøo, qua ñoù seõ taïo ra löôïng lôùn hôïp<br /> söï giaûm ñoäc toá cuûa chuùng. Ngoaøi ra, chaát anthocyanin ñang ñöôïc caùc nhaø khoa<br /> anthocyanin coøn coù nhöõng hoaït tính sinh hoïc hoïc quan taâm.<br /> toát ñoái vôùi con ngöôøi nhö coù khaû naêng giuùp cô Phöông phaùp nuoâi caáy teá baøo thöïc<br /> theå choáng vaø chöõa moät soá beänh nhö: taêng vaätcoù nhieàu tieàm năng ñeå thu nhaän<br /> huyeát aùp, oxi hoaù, toån thöông gan, ngaên chaën anthocyanin vôùi saûn löôïng cao. Nhieàu<br /> söï phaùt trieån cuûa caùc teá baøo ung thö...[9]. coâng trình ñaõ coâng boá veà söï saûn xuaát<br /> Maëc duø vaäy, löôïng anthocyanin do thöïc anthocyanin baèng nuoâi caáy moâ hay nuoâi<br /> vaät toång hôïp khoâng ñaùp öùng ñuû nhu caàu cho caáy teá baøo huyeàn phuø ôû caùc loaøi thöïc vaät<br /> khaùc nhau (nhö Catharanthus roseus [2],<br /> con ngöôøi, hôn nöõa quaù trình taùch chieát<br /> Vitis sp [3], Fragaria ananassa [12]).<br /> cuõng khaù phöùc taïp. Theo nghieân cöùu cuûa<br /> Kandil F. vaø coäng söï (2000), haøm löôïng cuûa ÔÛ baøi baùo naøy, chuùng toâi boå sung theâm<br /> flavonoid cuûa moät traùi caây coù theå chæ chieám keát quaû khaûo saùt aûnh höôûng cuûa aùnh saùng<br /> <br /> 51<br /> Journal of Thu Dau Mot university, No2 – 2011<br /> <br /> <br /> leân söï taïo seïo, huyeàn phuø teá baøo vaø sinh 2.3. Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa ñieàu<br /> toång hôïp anthocyanin cuûa teá baøo huyeàn phuø kieän chieáu saùng leân söï taêng tröôûng cuûa<br /> daâu taây Fragaria ananassa L. huyeàn phuø teá baøo daâu taây<br /> 2. Vaät lieäu, phöông phaùp Huyeàn phuø teá baøo daâu taây caáy chuyeàn<br /> 2.1. Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa ñieàu vaøo moâi tröôøng MS loûng ñöôïc ñaët ôû ngoaøi<br /> kieän chieáu saùng leân söï hình thaønh vaø saùng vôùi cöôøng ñoä chieáu saùng 2800 + 200<br /> taêng tröôûng moâ seïo töø laù vaø cuoáng laù lux, thôøi gian chieáu saùng 16 giôø/ngaøy vaø ôû<br /> cuûa caây daâu taây in vitro trong toái.<br /> Vaät lieäu duøng ñeå taïo moâ seïo laø caùc Söï thay ñoåi theå tích teá baøo laéng (SCV)<br /> maûnh laù non (5 x 5 mm) vaø cuoáng laù (0,8 ‟ cuûa huyeàn phuø teá baøo ñöôïc xaùc ñònh sau 3<br /> 1,0 cm) cuûa caây daâu taây Fragaria ananassa tuaàn nuoâi caáy.<br /> L. in vitro 6 tuaàn tuoåi. Moâi tröôøng taïo seïo laø<br /> 2.4. Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa ñieàu<br /> moâi tröôøng MS boå sung inositol 100 mg/l,<br /> kieän chieáu saùng leân söï sinh toång hôïp<br /> ñöôøng (saccharose) 30 g/l, agar 7,5 g/l, 2,4-D<br /> anthocyanin cuûa huyeàn phuø teá baøo<br /> 1,0 mg/l vaø kinetin 0,3 mg/l. Quaù trình taïo<br /> daâu taây<br /> seïo ñöôïc tieán haønh ôû hai ñieàu kieän:<br /> Huyeàn phuø teá baøo daâu taây caáy chuyeàn<br /> - Ñieàu kieän saùng: Cöôøng ñoä chieáu saùng:<br /> vaøo moâi tröôøng MS loûng ñöôïc caûm öùng vôùi<br /> 2800 + 200 lux; Nhieät ñoä: 25 + 20C; AÅm ñoä:<br /> aùnh saùng coù cöôøng ñoä:<br /> 70 + 2%; Thôøi gian chieáu saùng: 16 giôø/ngaøy<br />  0 lux (toái hoaøn toaøn)<br /> - Ñieàu kieän toái: Nhieät ñoä: 25 + 20C; AÅm<br /> ñoä: 70 + 2%.  2800 + 200 lux<br /> <br /> Ghi nhaän keát quaû trong 4 tuaàn nuoâi caáy  4000 + 200 lux<br /> vôùi caùc chæ tieâu theo doõi: hình thaùi moâ seïo Haøm löôïng anthocyanin thoâ (% troïng<br /> (chaéc hay bôû), ngaøy hình thaønh moâ seïo, maøu löôïng teá baøo töôi: %FW) trong huyeàn phuø teá<br /> saéc moâ seïo vaø tæ leä taïo seïo. baøo ñöôïc ño baèng phöông phaùp pH vi sai sau<br /> 2.2. Söï taïo huyeàn phuø teá baøo daâu taây 3 tuaàn nuoâi caáy.<br /> 2 g moâ seïo daâu taây qua 2 laàn caáy chuyeàn 2.5. Phöông phaùp xöû lí soá lieäu<br /> (8 tuaàn tuoåi) ñöôïc caáy vaøo 20 ml moâi tröôøng<br /> Caùc thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 3 laàn. Soá lieäu<br /> MS loûng coù thaønh phaàn töông töï nhö thaønh<br /> ñöôïc xöû lí baèng phaàn meàm Microsoft Excel.<br /> phaàn trong moâi tröôøng taïo seïo. Heä thoáng teá<br /> 3. Keát quaû vaø thaûo luaän<br /> baøo ñöôïc nuoâi treân maùy laéc voøng vôùi toác ñoä<br /> 100 voøng/phuùt trong ñieàu kieän toái vôùi nhieät 3.1 AÛnh höôûng cuûa ñieàu kieän chieáu<br /> ñoä 25 + 20C, ñoä aåm 70 + 2%. saùng leân söï hình thaønh vaø taêng tröôûng<br /> Huyeàn phuø teá baøo ñöôïc nuoâi trong 4 tuaàn moâ seïo töø laù vaø cuoáng laù cuûa caây daâu<br /> sau ñoù seõ chuyeån sang moâi tröôøng môùi. Huyeàn taây in vitro<br /> phuø teá baøo ñöôïc caáy chuyeàn sau moãi 2 tuaàn. Keát quaû thí nghieäm khaûo saùt vai troø cuûa<br /> Hình thaùi teá baøo daâu taây ñöôïc quan saùt aùnh saùng taùc ñoäng leân söï hình thaønh moâ<br /> döôùi kính hieån vi quang hoïc. seïo ñöôïc trình baøy trong baûng 3.1.<br /> <br /> 52<br />  Tạp chí Đại học Thủ Dầu Một, số 2 - 2011<br /> <br /> <br /> Baûng 3.1: AÛnh höôûng cuûa aùnh saùng ñeán thôøi gian taïo seïo<br /> vaø hình thaùi moâ seïo<br /> Điều kiện chiếu Ngày bắt đầu Hình thái Tỉ lệ tạo sẹo sau<br /> sáng Mẫu cấy hình thành sẹo mô sẹo 4 tuần nuôi cấy<br /> <br /> Lá 13 - 14 Chắc 64%<br /> Sáng Cuống lá 15 - 16 Chắc 59%<br /> Lá 10 - 11 Bở 93%<br /> Tối Cuống lá 10 – 11 Chắc 94%<br /> Moâ seïo baét ñaàu hình thaønh ôû caùc vò trí veát thöông sau ngaøy thöù 10 ‟ 11 ôû caùc maãu laù<br /> vaø cuoáng laù ñaët trong toái, ngaøy thöù 13 ‟ 14 ôû caùc maãu laù vaø ngaøy thöù 15 ‟ 16 ôû caùc maãu<br /> cuoáng laù ñaët ngoaøi saùng.<br /> AÛnh 3.1. Moâ seïo töø laù vaø cuoáng laù sau 4 tuaàn nuoâi caáy<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> a) Moâ seïo töø cuoáng laù ôû ñieàu kieän saùng b) Moâ seïo töø cuoáng laù ôû ñieàu kieän toái<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> c) Moâ seïo töø laù ôû ñieàu kieän saùng d) Moâ seïo töø laù ôû ñieàu kieän toái<br /> <br /> Ñaàu tieân, moâ seïo xuaát hieän ôû vò trí veát Seïo phaùt sinh töø cuoáng laù nhoû, chaéc vaø coù<br /> thöông, sau ñoù lan ra khaép beà maët maãu maøu vaøng nhaït. Moät soá cuoáng laù khoâng<br /> caáy. Moâ seïo töø laù ñöôïc ñaët ôû ñieàu kieän hình thaønh seïo vaø bò ñen (aûnh 3.1.a). Ñoái<br /> saùng hình thaønh chaäm, coù maøu vaøng nhaït vôùi caùc maãu laù hoaëc cuoáng laù ñaët ôû ñieàu<br /> vaø chaéc. Sau 4 tuaàn nuoâi caáy, laù vaãn coøn kieän toái thì thôøi gian hình thaønh seïo ngaén<br /> maøu xanh vaø moâ seïo chöa phuû heát maãu vaø tæ leä taïo seïo cao (93 ‟ 94%). Seïo hình<br /> caáy (aûnh 3.1.c). Töông töï, cuoáng laù ñaët thaønh töø cuoáng laù coù maøu traéng hoaëc vaøng<br /> ngoaøi saùng cuõng hình thaønh seïo chaäm. nhaït, coù daïng chaéc (aûnh 3.1.b). Seïo hình<br /> <br /> 53<br /> Journal of Thu Dau Mot university, No2 – 2011<br /> <br /> <br /> thaønh töø laù ñaët trong toái coù maøu vaøng Theo keát quaû baùo caùo cuûa Giang vaø coäng<br /> caùnh giaùn. Sau 4 tuaàn, seïo phaùt trieån söï (2009) veà aûnh höôûng cuûa moät soá yeáu toá<br /> khaép beà maët laù, kích thöôùc lôùn vaø coù daïng leân söï saûn xuaát anthocyanin cuûa moâ seïo vaø<br /> bôû (aûnh 3.1.d). Sau laàn caáy chuyeàn ñaàu huyeàn phuø teá baøo daâu taây Laâm Ñoàng, moâ<br /> tieân, caùc teá baøo cuûa moâ seïo hình thaønh töø seïo daâu taây phaùt sinh töø laù hình thaønh<br /> laù vaø ñaët trong toái taùch rôøi nhau, moâ seïo trong khoaûng ngaøy thöù 8 ‟ 9 cuûa quaù trình<br /> trôû neân xoáp, raát thích hôïp cho vieäc taïo nuoâi caáy [5].<br /> huyeàn phuø teá baøo (aûnh 3.2). Mori vaø coäng söï (1993) cuõng ghi nhaän<br /> laø moâ seïo coù nguoàn goác töø laù daâu taây phaùt<br /> trieån toát hôn vaø haøm löôïng anthocyanin<br /> cao hôn caùc boä phaän khaùc cuûa caây [13].<br /> 3.2. Söï taïo huyeàn phuø teá baøo daâu<br /> taây<br /> Moâ seïo ñöôïc ñaët vaøo moâi tröôøng MS<br /> loûng treân maùy laéc voøng. Sau 14 ngaøy nuoâi<br /> AÛnh 3.2: Moâ seïo töø laù ñaët trong toái sau caáy, huyeàn phuø teá baøo hình thaønh bao<br /> laàn caáy chuyeàn ñaàu tieân goàm caùc teá baøo ñôn, cuïm teá baøo nhoû, maøu<br /> vaøng ñaäm ñeán naâu nhaït (aûnh 3.3).<br /> <br /> AÛnh 3.3: Teá baøo huyeàn phuø daâu taây Fragaria ananassa L. sau 14 ngaøy<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> a) Huyeàn phuø teá baøo (quan saùt baèng maét b) Huyeàn phuø teá baøo döôùi kính hieån vi<br /> thöôøng) quang hoïc ôû vaät kính 40<br /> 3.3 AÛnh höôûng cuûa ñieàu kieän chieáu saùng leân söï taêng tröôûng cuûa huyeàn phuø<br /> teá baøo daâu taây<br /> Keát quaû khaûo saùt söï taêng tröôûng cuûa huyeàn phuø teá baøo trong hai ñieàu kieän saùng vaø<br /> toái ñöôïc trình baøy trong baûng 3.2.<br /> Baûng 3.2. Söï gia taêng SCV cuûa huyeàn phuø teá baøo ôû ngoaøi saùng vaø trong toái<br /> Điều kiện chiếu sáng Sự gia tăng SCV (ml)<br /> Ngoài sáng 0,18 ± 0,03<br /> Trong tối 0,33 ± 0,03<br /> <br /> 54<br />  Tạp chí Đại học Thủ Dầu Một, số 2 - 2011<br /> <br /> <br /> Huyeàn phuø teá baøo taêng sinh ôû trong löôïng anthocyanin ñaït 6,01.10-3% FW ôû<br /> toái maïnh hôn ngoaøi saùng. Huyeàn phuø teá cöôøng ñoä aùnh saùng 2800 lux vaø thaáp nhaát<br /> baøo trong ñieàu kieän toái phoùng thích nhieàu khi maãu ñöôïc ñaët trong ñieàu kieän toái hoaøn<br /> teá baøo nhoû, moâi tröôøng nuoâi caáy coù maøu toaøn vôùi haøm löôïng anthocyanin ñaït<br /> vaøng. Trong khi ñoù, huyeàn phuø teá baøo ôû 5,06.10-3% FW (baûng 3.3).<br /> ñieàu kieän chieáu saùng ít coù söï phoùng thích Baûng 3.3: Haøm löôïng anthocyanin tích<br /> teá baøo. Söï gia taêng SCV cuûa huyeàn phuø trong luyõ trong teá baøo huyeàn phuø<br /> toái ôû tuaàn thöù 3 ñaït 0,33 ml trong khi ôû ngoaøi<br /> ôû caùc ñieàu kieän chieáu saùng khaùc nhau<br /> saùng chæ ñaït 0,18 ml (baûng 3.2).<br /> Hàm lượng<br /> Ñoái vôùi nhieàu loaøi thöïc vaät, ngoaøi taùc Cường độ ánh sáng<br /> anthocyanin<br /> ñoäng leân söï hình thaønh vaø taêng sinh cuûa (lux)<br /> moâ seïo trong quaù trình nuoâi caáy, aùnh saùng (% FW x 10-3)<br /> coøn aûnh höôûng ñeán söï sinh toång hôïp caùc 0 (tối hoàn toàn) 5,06 + 0,63<br /> hôïp chaát thöù caáp trong teá baøo do lieân 2800 6,01 + 0,63<br /> quan ñeán söï hoaït ñoäng cuûa moät soá enzyme<br /> 4000 7,52 + 1,44<br /> noäi baøo [4].<br /> Thaønh phaàn moâi tröôøng vaø caùc yeáu toá<br /> Theo nghieân cöùu cuûa Tieân vaø ñoàng taùc<br /> vaät lí coù aûnh höôûng raát lôùn ñeán söï taêng<br /> giaû (2010), söï taêng tröôûng cuûa moâ seïo vaø<br /> tröôûng, phaùt trieån cuûa teá baøo vaø con<br /> huyeàn phuø teá baøo töø thaân non caây thoâng<br /> ñöôøng saûn xuaát caùc hôïp chaát thöù caáp.<br /> ñoû Laâm Ñoàng bò caûn maïnh khi ñaët ôû<br /> Trong ñoù, aùnh saùng laø moät yeáu toá raát quan<br /> ngoaøi saùng nhöng hoaït tính cuûa taxol laïi<br /> troïng coù theå kích thích saûn xuaát caùc saûn<br /> cao hôn so vôùi trong toái [1].<br /> phaåm baäc 2 keå caû anthocyanin trong<br /> Töông töï, Sato vaø coäng söï (1996) ñaõ khaûo nhieàu loaøi thöïc vaät [10]. Döôùi ñieàu kieän<br /> saùt moät soá yeáu toá aûnh höôûng ñeán söï taêng chieáu saùng, anthocyanin ñöôïc toång hôïp<br /> tröôûng cuûa huyeàn phuø teá baøo daâu taây bao goàm trong teá baøo thöïc vaät ñeå giaûm möùc ñoä aûnh<br /> cöôøng ñoä chieáu saùng. Theo caùc taùc giaû, söï höôûng nghieâm troïng cuûa böùc xaï aùnh saùng,<br /> taêng tröôûng cuûa huyeàn phuø teá baøo khoâng phuï cuõng nhö thuùc ñaåy nhanh choùng söï phuïc<br /> thuoäc vaøo cöôøng ñoä chieáu saùng [14]. hoài hoaït ñoäng quang hôïp [6]. Nhö vaäy,<br /> 3.4 AÛnh höôûng cuûa ñieàu kieän chieáu vieäc taêng cöôøng ñoä aùnh saùng seõ kích thích<br /> saùng leân söï sinh toång hôïp anthocyanin söï saûn sinh anthocyanin trong teá baøo<br /> trong huyeàn phuø teá baøo daâu taây maïnh hôn.<br /> <br /> Theo keát quaû ghi nhaän ôû baûng 3.3, Keát quaû ôû thí nghieäm naøy töông töï vôùi<br /> haøm löôïng anthocyanin ñöôïc toång hôïp keát quaû nghieân cöùu cuûa Sato vaø coäng söï<br /> trong teá baøo taêng leân khi taêng cöôøng ñoä (1996) treân teá baøo daâu taây Fragaria<br /> aùnh saùng. Haøm löôïng anthocyanin cao ananassa. Söï sinh toång hôïp anthocyanin ôû<br /> nhaát trong nghieäm thöùc coù cöôøng ñoä aùnh huyeàn phuø teá baøo daâu taây chæ xaûy ra khi<br /> saùng 4000 lux laø 7,52.10-3% FW, haøm cöôøng ñoä chieáu saùng treân 0,8 klux. Haøm<br /> <br /> 55<br /> Journal of Thu Dau Mot university, No2 – 2011<br /> <br /> <br /> löôïng anthocyanin cuûa huyeàn phuø teá baøo xuaát anthocyanin. AÙnh saùng coù theå aûnh<br /> nuoâi caáy ôû cöôøng ñoä chieáu saùng 2,5 vaø höôûng ñeán hoaït ñoäng cuûa enzyme saûn xuaát<br /> 8,0 klux töông öùng laø 0,04 vaø 0,19 mg/g anthocyanin. Matsumoto vaø coäng söï (1973)<br /> FW. Vì theá, theo caùc taùc giaû thì haøm cho raèng hoaït ñoäng cuûa phenylalanine<br /> löôïng anthocyanin taêng theo cöôøng ñoä ammonia lyase (PAL) ‟ moät enzyme quan<br /> aùnh saùng. Khi quan saùt döôùi kính hieån vi, caùc troïng trong con ñöôøng sinh toång hôïp<br /> taùc giaû nhaän thaáy khoâng phaûi taát caû caùc teá anthocyanin, ñöôïc taêng cöôøng khi caùc teá<br /> baøo ñeàu saûn xuaát anthocyanin, caùc teá baøo baøo tieáp xuùc vôùi böùc xaï cao [11].<br /> chöùa saéc toá vaø khoâng chöùa saéc toá cuøng toàn taïi 4. Keát luaän<br /> trong cuøng moät heä thoáng nuoâi caáy. Saûn löôïng<br /> Trong nghieân cöùu naøy, chuùng toâi ñaõ<br /> anthocyanin phuï thuoäc vaøo khaû naêng sinh<br /> xaùc ñònh ñöôïc moät soá yeáu toá thích hôïp cho<br /> toång hôïp cuûa teá baøo vaø thaønh phaàn<br /> söï taêng sinh cuûa teá baøo daâu taây Ñaø Laït<br /> anthocyanin. Khi cöôøng ñoä aùnh saùng taêng thì<br /> Fragaria ananassa L. Ñieàu kieän toái thích<br /> saûn löôïng anthocyanin trong teá baøo huyeàn<br /> hôïp cho söï hình thaønh vaø taêng tröôûng cuûa<br /> phuø daâu taây cuõng taêng leân. Tuy nhieân chæ<br /> moâ seïo cuõng nhö huyeàn phuø teá baøo. Haøm<br /> taêng haøm löôïng anthocyanin maø khoâng aûnh<br /> löôïng anthocyanin ñaït giaù trò toái ña<br /> höôûng ñeán söï phaùt trieån cuûa teá baøo vaø tæ leä<br /> (7,52.10-3% FW) ôû cöôøng ñoä aùnh saùng<br /> phaàn traêm cuûa caùc teá baøo chöùa saéc toá [12].<br /> 4000 lux sau 3 tuaàn nuoâi caáy huyeàn phuø teá<br /> AÙnh saùng coù choïn loïc coù theå aûnh baøo daâu taây.<br /> höôûng ñeán caùc teá baøo trong giai ñoaïn saûn<br /> *<br /> EFFECT OF LIGHT ON CELL GROWTH AND ANTHOCYANIN BIOSYNTHESIS<br /> IN STRAWBERRY CELL CULTURES<br /> Pham Thi My Tram(1), Le Thi Thuy Tien(2)<br /> (1) Thu Dau Mot University, (2) University of Technology, VNU-HCM<br /> ABSTRACT<br /> Callus tisssues derived from the leaf and petiole of the strawberry (Fragaria ananassa<br /> L.) in vitro were cultured on MS medium (Murashige and Skoog, 1962) added sugars 30<br /> g/l, 2,4-D 1.0 mg/l and kinetin 0.3 mg/l. The calli derived from the leaves in dark<br /> condition were early induced and friable. Suspension cells grew better in dark than in<br /> light. Anthocyanin content in the suspension cells reached the highest value (7.52.10-3%<br /> FW) at 4000 lux.Key words: anthocyanin, callus, cell suspension, Fragaria ananassa L.,<br /> strawberry<br /> Keywords: anthocyanin, callus, cell suspension,<br /> Fragaria ananassa L., strawberry<br /> TAØI LIEÄU THAM KHAÛO<br /> [1]. Leâ Thò Thuyû Tieân, Buøi Trang Vieät, Nguyeãn Ñöùc Löôïng, Khaûo saùt vaøi yeáu toá aûnh höôûng<br /> ñeán söï sinh toång hôïp taxol cuûa caùc heä thoáng teá baøo Taxus wallichiana Zucc. In vitro,<br /> Taïp chí Phaùt trieån Khoa hoïc vaø Coâng ngheä, taäp 13, 2010.<br /> <br /> 56<br />  Tạp chí Đại học Thủ Dầu Một, số 2 - 2011<br /> <br /> <br /> [2]. Carew DP and Krueger RJ., Anthocyanidins of Catharanthus roseus callus cultures,<br /> Phytochemistry 15, 1976, p. 442.<br /> [3]. Do CB, Cormier F., Accumulation of anthocyanins enhanced by a high osmotic potential<br /> in grape (Vitis vinifera L.) cell suspensions, Plant Cell Rep 9, 1990, p. 143-146.<br /> [4]. Fett-Neto, A.G., Pennington, J.J. and DiCosmo, F., Effect of white light on taxol and<br /> baccatin III accumulation in cell cultures of Taxus cuspidata Sieb and Zucc, J. Plant<br /> Physiol, 146, 1995, p. 584 ‟ 590.<br /> [5]. Giang, P.T.H., Quynh, P.T. and Tien, L.T.T, Effects of some factors on anthocyanin<br /> production in calli and cell suspension cultures of Lam Dong strawberry, Proceeding of<br /> the 11th conference on Science and Technology. Biotechnology, VNU ‟ HCM, 2009.<br /> [6]. Gould, K.S., Nature's Swiss army knife: the diverse protective roles of anthocyanins in<br /> leaves, Journal of Biomedicine and Biotechnology, 2004, p. 314 ‟ 320.<br /> [7]. Kandil, F., Song, L., Pezzuto, J., Seigler, D. and Smith, M.A., Isolation of oligomeric<br /> proanthocyanidins from flavonoid - producing cell cultures, In Vitro Cell Dev Biol Plant<br /> Biol Plant, 36, 2000, p. 492 ‟ 500.<br /> [8]. Konczak ‟ Islam, I. and Zhang, W., Anthocyanins – More than nature’s colours, Journal<br /> of Biomedicine and Biotechnology, 5, 2004, p. 239 ‟ 241.<br /> [9]. Kong, J., Chia, L., Goh, N. and Brouillard, R., Analysis and biological activities of<br /> anthocyanins, Photochemistry, 64, 2003, p. 923 ‟ 933.<br /> [10]. Matsumoto, H., Tanida, Y. and Ishizuka, K., Porphyrin intermediate involved in<br /> herbicidal action of a aminolevulinic acid on duckweed (Lemna paucicostata Hegelm),<br /> Journal of Pesticide Biochemistry and Physiology, 48, 1994, p. 214 ‟ 221.<br /> [11]. Matsumoto, T., Nishida, K., Noguchi, M. and Tamaki, E., Some factors affecting the<br /> anthocyanin formation by Popuius cells in suspension culture, Agric, Biol. Chem, 37,<br /> 1973, p. 561 ‟ 567.<br /> [12]. Mori, T. and Sakurai, M., Effects of riboflavin and increased sucrose on anthocyanin<br /> production in suspended strawberry cell cultures, Plant Science, 113, 1996, 91 ‟ 98.<br /> [13]. Mori, T., Sakurai, M., Shigeta, J., Yoshida, K. and Kondo, T., Formation of<br /> anthocyanins from cells cultured from different parts of strawberry phants, J. Sci. Food<br /> Agric., 58, 1993, p 788 ‟ 792.<br /> [14]. Sato, K., Nakayama, M. and Shigeta, J., Culturing conditions affecting the production<br /> of anthocyanin in suspended cell cultures of strawberry, Plant Sci, 113, 1996, p. 91 ‟<br /> 98.<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 57<br />