Chất lượng tiêu bản giải phẫu bệnh khi nhuộm bằng phương pháp Hematoxylin Eosin, có thay thế dung dịch Clear- Rite 3, cồn bằng dung dịch có thành phần chất hoạt động bề mặt

Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 5 * 2019 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> <br /> CHẤT LƯỢNG TIÊU BẢN GIẢI PHẪU BỆNH KHI NHUỘM<br /> BẰNG PHƯƠNG PHÁP HEMATOXYLIN EOSIN, CÓ THAY THẾ<br /> DUNG DỊCH CLEAR- RITE 3, CỒN BẰNG DUNG DỊCH<br /> CÓ THÀNH PHẦN CHẤT HOẠT ĐỘNG BỀ MẶT<br /> Trần Thị Khuê Nữ*, Nguyễn Văn Thắng**, Nguyễn Ngọc Minh Tâm*<br /> TÓM TẮT<br /> Đặt vấn đề: Nhuộm Hematoxylin - Eosin (HE) là một phương pháp nhuộm thường quy trong xét nghiệm<br /> mô bệnh học. Trong phương pháp (PP) nhuộm HE có bước dùng hóa chất clear-rite 3, cồn để tẩy parafin ra khỏi<br /> mô, có tính quyết định nhiều đến chất lượng nhuộm tiêu bản (TB). Tuy nhiên clear-rite 3 rất độc hại đối với con<br /> người và môi trường. Mong muốn môi trường làm việc ít độc hại và không ảnh hưởng đến chất lượng nhuộm,<br /> chúng tôi tiến hành sử dụng dung dịch tẩy rửa chứa chất hoạt động bề mặt Sodium Linear Alkylbenzene<br /> Sulfonate (LAS) 1,7 % để thay thế hóa chất clear-rite 3 và alcool.<br /> Mục tiêu: So sánh kết quả nhuộm giữa PP nhuộm HE sử dụng hóa chất Clear-rite 3 (PP nhuộm HE<br /> thường quy) với PP nhuộm HE sử dụng dung dịch có thành phần chất hoạt động bề mặt Sodium Linear<br /> Alkylbenzene Sulfonate (PP nhuộm HE cải tiến).<br /> Phương pháp: Nghiên cứu thực nghiệm.<br /> Kết quả: Nhuộm hạt nhân đầy đủ được ghi nhận 99,2% ở nhóm A và 100% ở nhóm B, nhuộm tế bào chất<br /> đầy đủ 99,2% ở nhóm A và 95,1% ở nhóm B, trong rõ 93,4% nhóm A và 97,5% ở nhóm B, đồng nhất 92,6%<br /> nhóm A và 94,3% các tiêu bản nhóm B, nhuộm sắc nét,tương phản 96,7% của nhóm A và 92,6% các tiêu bản<br /> nhóm B, và 100% các tiêu bản nhóm A đủ tiêu chuẩn để chẩn đoán so với 98,4% trong các tiêu bản nhóm B.<br /> Kết luận: Dung dung dịch tẩy rửa chứa chất hoạt động bề mặt Sodium Linear Alkylbenzene Sulfonate<br /> (LAS)1,7% có thể được sử dụng như là một thay thế hiệu quả cho hóa chất Clear-rite 3 và cồn trong quy trình<br /> nhuộm HE thường quy.<br /> Từ khóa: phương pháp nhuộm HE, chất hoạt động bề mặt LAS<br /> ABSTRACT<br /> QUALITY OF PATHOLOGY SPECIMEN DYEING WITH HEMATOXYLIN EOSIN METHOD USING<br /> SURFACTANT COMPOSITION INSTEAD OF CLEAR-RITE 3 AND ALCOHOL<br /> Nguyen Van Thang, Nguyen Ngoc Minh Tam, Tran Thi Khue Nu<br /> * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol. 23 – No. 5 - 2019: 294 – 299<br /> Background: Hematoxylin-Eosin (HE) staining is a standard procedure in histopathological examination.<br /> One step of this procedure is to use Clear-rite 3 and alcohol to clean tissue of paraffin. This step is crucial to the<br /> quality of the staining. However, Clear-rite 3 is hazardous to humans and the environment. In this study, we<br /> experimented with replacing Clear-rite 3 and alcohol with a liquid dishwashing solution containing 1.7% of<br /> Sodium Linear Alkylbenzene Sulfonate (LAS) as a way to improve the safety of working environments while<br /> maintaining high staining quality.<br /> Objectives: Evaluate the efficacy of 1.7% dish washing liquid (LAS) solution as a deparaffinization agent<br /> for hematoxylin (H) and eosin (E) staining in comparison to Clear-rite 3 and alcohol.<br /> *Bệnh viện Bình Dân, Thành phố Hồ Chí Minh<br /> **Bộ môn Xét nghiệm, Đại học Y Dược, Thành phố Hồ Chí Minh<br /> Tác giả liên lạc: ThS. Trần Thị Khuê Nữ ĐT: 0986232315 Email: khuenutt@gmail.com<br /> <br /> <br /> Chuyên Đề Điều Dưỡng Kỹ Thuật Y Học 295<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 5 * 2019<br /> <br /> Methods: Expreimental study.<br /> Results: Adequate nuclear staining was noted in 99,18% in group A and 100% in group B, adequate<br /> cytoplasmic staining in 99,2% in group A and 95,1% in group B, clarity in 93.4% of group A and 97.5% of<br /> group B sections, uniform staining in 92.6% of group A and 94.3% of group B sections, crisp stain in 96.7% of<br /> group A and 92.6% of group B sections, and 100% of group A sections stained adequately for diagnosis in<br /> comparison with 98.4% in group B.<br /> Conclusions: 1.7% DWS was found to be an effective, less hazardous, more economical and aster alternative<br /> deparaffinization agent to clear-rite 3 and alcohol.<br /> Keywords: deparaffinization hematoxylin and eosin, liquid dishwashing solution (LAS)<br /> ĐẶT VẤN ĐỀ chứa chất hoạt động bề mặt Sodium Linear<br /> Alkylbenzene Sulfonate (LAS) 1,7% để thay thế<br /> Nhuộm Hematoxylin- Eosin (HE) là một<br /> hóa chất clear-rite 3 và alcool ở giai đoạn tẩy<br /> phương pháp nhuộm thường quy trong xét<br /> parafin trong quy trình nhuộm Hematoxylin<br /> nghiệm mô bệnh học, được sử dụng rộng rãi<br /> Eosin (Ở nghiên cứu này chúng tôi sử dụng<br /> nhất và là tiêu chuẩn vàng(7) trong chẩn đoán mô<br /> dung dịch chất tẩy rửa Sunlight pha loãng 1,7%).<br /> bệnh học. Trong PP nhuộm HE có bước dùng<br /> hóa chất clear-rite 3 (là hóa chất thay thế Xylen Mục tiêu nghiên cứu<br /> hay Toluen, hiện nay các bệnh viện đang dùng) Khảo sát nhuộm nhân và nhuộm tế bào chất<br /> để tẩy parafin trong mô là bước quan trọng, ở 2 PP nhuộm.<br /> quyết định nhiều đến chất lượng nhuộm tiêu Khảo sát độ trong rõ, tương phản và đồng<br /> bản. Tuy nhiên Xylen, Toluen(9,10) rất độc hại đối nhất ở 2 PP nhuộm.<br /> với con người và môi trường. So sánh hiệu quả giữa PP nhuộm HE dùng<br /> Các chất thay thế có thể là hóa chất dung dịch Clear-rite 3 (HE thường quy) với PP<br /> hydrocacbon béo, hydrocacbon thơm, dầu dừa, nhuộm HE dùng LAS 1,7% (HE cải tiến).<br /> các hóa chất đó có chức năng tương tự như ĐỐITƯỢNG- PHƯƠNG PHÁPNGHIÊNCỨU<br /> Toluen, Xylen: như làm trong sáng mô trong xử<br /> Đối tượng nghiên cứu<br /> lý, khử parafin ở mô trong kỹ thuật nhuộm HE.<br /> 122 khối mô đúc parafin và cắt mỏng tại<br /> Tuy nhiên hầu hết các sản phẩm thay thế Toluen<br /> khoa Giải phẫu bệnh Bệnh viện Bình Dân trong<br /> đắt tiền hơn và không phải là ít nguy hiểm<br /> thời gian từ tháng 12/2018 đến tháng 05/2019 và<br /> hơn(3,10). Theo phân loại của Cơ quan Quản lý An<br /> Bộ môn Xét nghiệm Đại học Y Dược.<br /> Toàn và Sức Khỏe Nghề Nghiệp - Hoa Kỳ<br /> (Occupational Safety and Health Administration Phương pháp nghiên cứu<br /> –OSHA)(5), thành phần hóa chất trong dung dịch Thiết kế nghiên cứu<br /> Clear rite 3(13) hiện đang sử dụng, được phân loại Nghiên cứu thực nghiệm.<br /> lớp 1B nguy cơ gây ung thư, hóa chất dễ cháy<br /> Phương pháp chọn mẫu<br /> lớp 2, cũng có ảnh hưởng đến cơ quan đích là<br /> Lấy mẫu thuận tiện trong thời gian nghiên cứu.<br /> gan và thận khi tiếp xúc hóa chất lâu dài hoặc<br /> thường xuyên, nguy cơ đột biến tế bào mầm và Cỡ mẫu<br /> nguy cơ gây ung thư, có thể gây tổn thương các Có 122 khối mô đúc parafin.<br /> cơ quan do phơi nhiễm kéo dài, hoặc tiếp xúc lập Quy trình tiến hành nghiên cứu<br /> đi lập lại. Có 122 khối parafin trong nghiên cứu sẽ<br /> Mong muốn môi trường làm việc ít độc hại được cắt mảnh 244 tiêu bản với độ dày 3-4µm.<br /> và không ảnh hưởng đến chất lượng nhuộm, 122 TB nhóm A được nhuộm quy trình nhuộm<br /> chúng tôi tiến hành sử dụng dung dịch tẩy rửa HE thường quy sử dụng hóa chất clear-rite 3 và<br /> <br /> <br /> 296 Chuyên Đề Điều Dưỡng Kỹ Thuật Y Học<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 5 * 2019 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> alcool làm chất tẩy parafin. 122 TB nhóm B sử thống kê Stata 14.0.<br /> dụng dung dịch chứa thành phần LAS 1,7% ở KẾT QUẢ<br /> 90°C tẩy parafin. Dung dịch chứa thành phần<br /> Nhuộm nhân đầy đủ đã được ghi nhận ở<br /> LAS 1,7% được điều chế bằng cách hòa tan 25 ml<br /> nhóm A là 99,2% so với 100% của nhóm B (p >0,05).<br /> DWL (Sunlight Dish washing Liquid) trong 1500<br /> ml nước cất. Quy trình nhuộm các nhóm A và B Nhuộm tế bào chất đầy đủ của nhóm A là<br /> được đưa ra trong Bảng 1 và 2. 99,2% so với 95,1% của nhóm B (p >0,05).<br /> Độ trong rõ trên tiêu bản nhóm A là 93,4% so<br /> Bảng 0. Quy trình nhuộm HE thường quy<br /> Các giai đoạn Hóa chất Thời gian sánh với 97,5% của nhóm B (p >0,05).<br /> 1. Clear-rite 3 5 phút Nhuộm màu đồng nhất của nhóm A là<br /> 2. Clear-rite 3 5 phút 94,3% so sánh với nhóm B là 92,62% (p >0,05).<br /> 3. Clear-rite 3 5 phút<br /> 0<br /> Sự tương phản, sắc nét ở nhóm A là 96,7% so<br /> Tẩy parafin 4. Alcool 99,5 1 phút<br /> 0 sánh với nhóm B là 92,62% (Hình 1).<br /> 5. Alcool 95 1 phút<br /> 6. Alcool 90<br /> 0<br /> 1 phút Đủ tiêu chuẩn đủ chẩn đoán ở nhóm A là<br /> 8. Rửa nước 1 phút 100% so với nhóm B là 98,4% (p >0,05) (Hình 2).<br /> 9. Hematoxylin 4-5 phút<br /> Nhuộm nhân<br /> 10. Rửa nước 1 phút<br /> 11. Rửa axit alcool 1% 2 nhúng<br /> Tẩy axit<br /> 12. Rửa trong nước 1-2 phút<br /> 13. Dung dịch Ammonia 1% 1 phút<br /> Kiềm hóa (bluing) 14. Rửa nước 2 phút<br /> 0<br /> 15. Alcool 70 1 phút<br /> Nhuộm tế bào chất 16. Eosin 1-2 phút<br /> 0<br /> 17. Alcool 90 1 phút<br /> 0<br /> Biệt hóa trong 18. Alcool 95 1 phút<br /> 0<br /> alcool, làm trong 19. Alcool 99.5 1 phút<br /> 20. Clear rite 3 1 phút<br /> Lau mô thừa xung quanh, để khô, dán keo<br /> Bảng 2. Bảng quy trình nhuộm HE với dung dịch có<br /> thành phần LAS 1,7%<br /> Thời<br /> Các giai đoạn Hóa chất Nhiệt độ<br /> gian<br /> 0 Hình 1. Tổng hợp các tỉ lệ nhuộm<br /> Tẩy parafin 1. LAS 1,7% I 90 1 phút<br /> 0<br /> 2. LAS 1,7% II 90 1 phút<br /> 0<br /> 3. Nước cất I 90 30 giây<br /> 0<br /> 4. Nước cất II 90 30 giây<br /> 0<br /> 5. Nước máy 45 30 giây<br /> 0<br /> 6 Nước máy T PXN 30 giây<br /> Nhuộm nhân 7.Hematoxylin Harris 0 7 phút<br /> T PXN<br /> 8. Rửa với nước 4 phút<br /> Kiềm hóa (bluing) 9. Dung dịch Thilium 1 phút<br /> 0<br /> carbonate 1% T PXN<br /> 10. Rửa nước 5 phút<br /> 0<br /> Nhuộm tế bào chất 11. Eosin T PXN 1 phút<br /> 0<br /> Rửa nước Rửa nước T PXN 1 phút<br /> 0<br /> Khử nước 12. Sấy khô 60 10 phút<br /> Xử lý và phân tích số liệu<br /> Nhập liệu excel và xử lý bằng phần mềm Hình 2. Tỉ lệ tiêu bản đủ chẩn đoán<br /> <br /> <br /> Chuyên Đề Điều Dưỡng Kỹ Thuật Y Học 297<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 5 * 2019<br /> <br /> cháy 18,3°C/64,9°C, có tác dụng đến cơ quan<br /> đích là gan và thận khi tiếp xúc hóa chất lâu dài<br /> hoặc thường xuyên, phân loại nhóm 1B về nguy<br /> cơ đột biến tế bào mầm và nguy cơ gây ung thư;<br /> nhóm 1 nguy hiểm về đường hô hấp, có thể gây<br /> tổn thương các cơ quan do phơi nhiễm kéo dài<br /> hoặc tiếp xúc lặp đi lặp lại. Do có điểm cháy thấp<br /> Hình 3. Chất lượng nhuộm nhân trên tiêu bản mô 18,3°C tương tự xylen nên chất thải không bỏ<br /> túi mật. A: Nhuộm HE thường quy (40X), trực tiếp xuống hệ thống chất thải thông thường,<br /> B: Nhuộm HE cải tiến (40X) mà được xử lý chất thải hóa chất nguy hại.<br /> Tương tự các nghiên cứu trước chúng tôi sử<br /> dụng dung dịch có thành phần LAS 1,7% thay<br /> thế cho hóa chất clear-rite 3 trong quá trình tẩy<br /> parafin. Dung dịch có thành phần LAS là hỗn<br /> hợp tạo bọt cao của các chất hoạt động bề mặt<br /> không ion, được tạo thành từ<br /> alkylbenzenesulfonates, có tính chất dung môi<br /> giúp hòa tan parafin. Nguyên tắc cơ bản của chất<br /> tẩy rửa là ở nhiệt độ 900C(4) cùng với chất hoạt<br /> động bề mặt sẽ giúp cho việc loại bỏ parafin ra<br /> khỏi tiêu bản bằng cách giảm sức căng bề mặt<br /> của nước, bước đầu tẩy parafin ra khỏi mô, kế<br /> Hình 4. Nhuộm tế bào chất trên tiêu bản mô túi mật. đến ngăn không cho parafin dính lại các mảnh<br /> A, C: Nhuộm HE thường quy (10X, 40X), mô từ đó parafin được loại ra khỏi mảnh cắt,<br /> B, D: Nhhuoojm HE cải tiến (10X, 40X) giúp tẩy parafin hoàn toàn. So với clear-rite 3,<br /> chất tẩy rửa chén kinh tế, an toàn và có sẵn.<br /> Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã sử dụng<br /> chất chứa thành phần LAS 1,7%. Điều này dẫn<br /> đến tác động gián tiếp đến sự an toàn của nhân<br /> viên khi xử dụng và xử lý chất thải các hóa chất<br /> này. Với tác dụng có hại của xylene được biết<br /> đến, nhiều nhà nghiên cứu đã cố gắng sử dụng<br /> các chất thay thế của xylene trong mô bệnh học.<br /> Buesa và Peshkov trong nghiên cứu của họ đã<br /> chứng minh rằng các tiêu bản được tẩy rửa bằng<br /> dung dịch rửa chén 1,7% ở 900C có thể giúp loại<br /> bỏ xylen khỏi quy trình nhuộm(3). Nghiên cứu<br /> của Ankle(1) kết luận rằng nhuộm HE không<br /> Hình 5. Độ trong rõ, tương phản trên tiêu ba3n mô chứa xylen và alcool là phương pháp thay thế tốt<br /> túi mật. A, C: Nhuộm HE thường quy (10X, 40X), hơn so với phương pháp thường quy, có đến<br /> B, D: Nhhuoojm HE cải tiến (10X, 40X) 90% tiêu bản được nhuộm đầy đủ để đưa ra<br /> chẩn đoán trong phương pháp không có xylen<br /> BÀN LUẬN<br /> so với 88,33% trong phương pháp thường quy(1).<br /> Theo phân loại của OSHA(5) và MSDS(13), Ramulu kết luận rằng xà phòng rửa chén dạng<br /> clear-rite 3 thuộc hóa chất dễ cháy loại 2 có điểm<br /> <br /> <br /> 298 Chuyên Đề Điều Dưỡng Kỹ Thuật Y Học<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 5 * 2019 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> lỏng có thể được sử dụng như một chất thay thế này có thể dẫn đến các tiêu bản nhuộm không<br /> hiệu quả cho xylen alcool trong quy trình nhuộm đồng nhất. Một số nghiên cứu đã thêm một bước<br /> HE thường quy, nhuộm nhân đầy đủ và rõ ràng bổ sung 1,7% LDW III ở 900C trong 30 giây trong<br /> hơn so với nhuộm HE thường quy(12). quy trình nhuộm và tìm thấy kết quả tốt hơn.<br /> Pandey cho thấy các tiêu bản nhuộm HE với Nghiên cứu của chúng tôi cho thấy rằng các tiêu<br /> dung dịch tẩy rửa chén 1,7% ghi điểm tốt hơn về bản có chất lượng nhuộm tương phản sắc nét ở<br /> nhuộm tế bào chất và độ tương phản. Tỉ đủ để nhóm A là 96,7% so với nhóm B là 92,6%, tương<br /> chẩn đoán trong 86% trường hợp so với nhuộm tự(12,14) một số các nghiên cứu khác đã báo cáo tỉ<br /> HE dùng xylen là 84%(8). lệ tốt hơn về thông số này ở 2 phương pháp<br /> Trong nghiên cứu hiện tại đã được thực hiện nhuộm(1,8). Trong các điểm số tổng thể, tiêu bản<br /> để xem liệu dung dịch chứa thành phần chất được nhuộm HE dùng LAS 1,7% đủ để chẩn<br /> hoạt động bề mặt LAS 1,7% ít độc hại, rẻ tiền và đoán là 98,2% so sánh với 100% tiêu bản đủ chẩn<br /> sẳn có trên thị trường có thể xem như một giải đoán ở nhóm A, trường hợp này tương tự như<br /> pháp thay thế hiệu quả như một chất tẩy parafin các nghiên cứu khác(12,14). Phân tích thống kê cho<br /> cho phương pháp nhuộm HE. Các tiêu bản được thấy các tiêu bản nhuộm HE với dung dịch chứa<br /> nhuộm bằng cả phương pháp HE thường quy LAS 1,7% có tác dụng tương đương như phương<br /> (nhóm A) và HE cải tiến (nhóm B), được Bác sĩ pháp nhuộm HE thường quy. Giá trị p thu được<br /> Giải phẫu bệnh đánh giá cho các thông số là 0,292 (p >0,05). Tuy nhiên các tiêu bản nhuộm<br /> nhuộm màu nhân, nhuộm tế bào chất, độ trong cải tiến có khuynh hướng nhuộm màu đỏ. Điều<br /> rõ, tính đồng nhất của nhuộm và sự tương phản, này làm các tiêu bản kém độ tương phản giữa<br /> sắc nét của nhuộm. Nhuộm nhân đầy đủ đã nhân và tế bào chất.<br /> được ghi nhận ở nhóm A là 99,2% so với 100% KẾT LUẬN<br /> của nhóm B. Các nghiên cứu khác cũng báo cáo Đạt chất lượng nhuộm nhân: HE cải tiến<br /> số lượng nhóm A thấp hơn nhóm B(1,8,12). Về sự 99,2%, HE thường quy 100%.<br /> nhuộm tế bào chất đầy đủ, nghiên cứu hiện tại Đạt chất lượng nhuộm tế bào chất: HE cải<br /> cho thấy 99,2% ở nhóm A so sánh với 95,1% ở tiến 95,1%, HE thường quy 99,2%.<br /> nhóm B. Kết quả tương tự các nghiên cứu(1,12). Về<br /> Đạt chất lượng của HE cải tiến/ HE thường<br /> vấn độ trong rõ nhuộm màu, nghiên cứu hiện tại<br /> quy: Độ trong 97,5%/93,4%, Độ tương phản<br /> thống kê có 93,4% các tiêu bản cho thấy sự rõ<br /> 92,6%/96,7% và Độ đồng nhất 91,8%/94,3%.<br /> ràng đầy đủ để đánh giá ở nhóm A so sánh<br /> nhóm B là 97,5%, kết quả nghiên cứu này tương Nhuộm HE cải tiến có các ưu điểm nỗi trội:<br /> tự hầu hết các nghiên cứu khác, thỏa đáng so với Ít độc hại - Giá thành thấp - Thời gian nhuộm<br /> các nghiên cứu khác. Vấn đề đồng nhất của nhanh hơn.<br /> nhuộm màu, tất cả các nghiên cứu sử dụng TÀI LIỆU THAM KHẢO<br /> phương pháp dùng chất tẩy rửa chén pha loãng 1. Ankle MR, Joshi PS (2011). "A study to evaluate the efficacy of<br /> xylene-free hematoxylin and eosin staining procedure as<br /> đều cho tỉ lệ không đồng nhất thấp hoặc ngang compared to the conventional hematoxylin and eosin staining:<br /> bằng với dùng xylen. Dung dịch chứa thành An experimental study". J Oral Maxillofac. Pathol, 15(2):161-167.<br /> phần LAS 1,7% được sử dụng phổ biến trong tất 2. Bộ Y Tế (2016). Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành<br /> Giải phẫu bệnh- Tế bào học. NXB Y học, pp.22; 215; 245-247.<br /> cả các nghiên cứu rằng quy trình nhuộm không 3. Buesa René J, Peshkov Maxim V (2009). "Histology without<br /> chứa xylen và chúng rất nhạy cảm với nhiệt độ. xylene". Ann Diagn Pathol, 13(4):246-256.<br /> 4. Gayathri G, Snegha A, Teleflo B (2016). Substitutes for xylene in<br /> LDW hay LAS pha loãng phải được duy trì<br /> histopathology and the role of temperature. J Path Micro, 2(2):55-<br /> nghiêm ngặt ở 900C. Nhiệt độ giảm nhẹ có thể 63.<br /> không tẩy parafin hoàn toàn. Điều này dẫn đến 5. Hazard Communication (2016). "Hazard Classification<br /> Guidance for Manufacturers, Importers, and Employers".<br /> lượng parafin dư còn lại trên các tiêu bản. Điều Department of Labor, pp.221, 300-304.<br /> <br /> <br /> <br /> Chuyên Đề Điều Dưỡng Kỹ Thuật Y Học 299<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 5 * 2019<br /> <br /> 6. Kandyala R, Raghavendra SP, et al (2010). "Xylene: An overview 11. Ramaswamy AS, et al (2017). "A Study of Xylene Free<br /> of its health hazards and preventive measures". Journal of Oral Hematoxylin and Eosin Staining Procedure". AAMS, 1:A16-A21.<br /> and Maxillofacial Pathology, doi: 10.4103/0973-029X.64299. 12. Ramulu S, Koneru A, Ravikumar S, et al (2012). "Liquid dish<br /> 7. Kumar GL, Kiernan JA, Dako AS (2010). "Education Guide- washing soap: An excellent substitute for xylene and alcohol in<br /> Special Stains and H & E: Pathology". Dako North America, hematoxylin and eosin staining procedure". J Orofac Sci, 4(1):37.<br /> pp.29-36, 118-129, 177-183. 13. Scientific Thermo Fisher (2015). "Clear rite 3 safety data sheet -<br /> 8. Pandey P, Dixit A, Tanwar A, et al (2014). "A comparative study Mercedes Medical". URL: https://www.msdsexplorer.com/.<br /> to evaluate liquid dish washing soap as an alternative to xylene 14. Sravya T, Rao GV, Kumari MG, et al (2018). "Evaluation of<br /> and alcohol in deparaffinization and hematoxylin and eosin biosafe alternatives as xylene substitutes in hematoxylin and<br /> staining". Journal of Laboratory Physicians, 6(2):84. eosin staining procedure: A comparative pilot study". J Oral<br /> 9. Phạm Minh Khiêm, Nguyễn Thị Kim Oanh, Nguyễn Văn Lực Maxillofac Pathol, 22(1):148.<br /> (2010). Toluen & ảnh hưởng môi trường con người. Bài tiểu<br /> luận Đại học Sư Phạm Đà Nẵng.<br /> Ngày nhận bài báo: 31/07/2019<br /> 10. Rai R, Yadav R, Bhardwaj A (2016). "Biosafe sunstitutes to<br /> xylene: A review". International Journal of Information Research and Ngày phản biện nhận xét bài báo: 30/08/2019<br /> Review, 3(6):2529-2532. Ngày bài báo được đăng: 10/10/2019<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 300 Chuyên Đề Điều Dưỡng Kỹ Thuật Y Học<br />