Phân lập được vi tảo biển dị dưỡng Schizochytrium giàu DHA ở vùng biển huyện đảo Phú Quốc

30(2): 50-55 T¹p chÝ Sinh häc 6-2008<br /> <br /> <br /> <br /> PH¢N LËP ®−îc VI T¶O BIÓN DÞ D¦ìNG SCHIZOCHYTRIUM<br /> GIµU DHA ë VïNG BIÓN HUYÖN §¶O PHó QUèC<br /> <br /> §Æng DiÔm Hång, Hoµng Lan Anh, ng« thÞ hoµi thu<br /> <br /> ViÖn C«ng nghÖ sinh häc<br /> <br /> Trong sè c¸c lo¹i vi t¶o biÓn dÞ d−ìng s¶n chiÕm gÇn 38 - 41% TLK tÕ bµo vµ DHA chiÕm<br /> sinh ra c¸c axÝt bÐo kh«ng b·o hoµ ®a nèi ®«i 38 - 45% lipit tæng sè.<br /> (polyunsaturated fatty acids - PUFAs) ω-3 cao,<br /> gåm cã Thraustochytrium aureum, Schizochytrium I. PH¦¥NG PH¸P NGHI£N CøU<br /> spp., Crypthecodinium cohnii, Ulkenia spp.,<br /> Amphidinium carterae vµ Labyrinthula spp.... th× vi 1. VËt liÖu<br /> t¶o Schizochytrium cã thÓ cho s¶n l−îng DHA - MÉu vËt: lµ nh÷ng l¸ c©y ®−íc (Rhizophora<br /> (docosahexaenoic acid, C22: 6n-3) cao nhÊt, ®¹t apiculata Blume, thuéc hä §−íc -<br /> ®Õn 138 mg/l/h [9]. V× vËy, Schizochytrium hiÖn Rhizophoraceae) ®ang trong giai ®o¹n ph©n hñy vµ<br /> ®ang ®−îc quan t©m nghiªn cøu, sö dông ®Ó s¶n tr«i d¹t ë ven b×a rõng ngËp mÆn thuéc vïng biÓn<br /> xuÊt th−¬ng m¹i DHA, lµm thøc ¨n bæ sung cho huyÖn ®¶o Phó Quèc (gåm An Thíi, Hµm Ninh,<br /> ng−êi vµ ®éng vËt nu«i. Theo kho¸ ph©n lo¹i cña Gµnh DÇu), tØnh Kiªn Giang vµo th¸ng 7/2006.<br /> Porter (1990), Schizochytrium thuéc hä<br /> Thraustochytriidae (Thraustochytrids), líp - M«i tr−êng ph©n lËp: m«i tr−êng c¬ b¶n ®Ó<br /> Labyrinthulea, ngµnh Heterokontophyta [8]. C¸c ph©n lËp vi t¶o Schizochytrium ®−îc ký hiÖu lµ<br /> tÕ bµo Schizochytrium cã d¹ng h×nh cÇu, cã m¹ng GPYc. M«i tr−êng cã chøa glucoza (2 g/l),<br /> l−íi ngo¹i chÊt xuÊt ph¸t tõ bÒ mÆt tÕ bµo [3, 4, 7]. polypepton (1 g/l), cao nÊm men (0,5 g/l), th¹ch<br /> (15 g/l), 50% pure salt-ASW (17,5 g/l) - n−íc biÓn<br /> Cho ®Õn nay, vi t¶o Schizochytrium ®· vµ nh©n t¹o cã nång ®é t−¬ng ®−¬ng 1,5% NaCl<br /> ®ang ®−îc s¶n xuÊt c«ng nghiÖp ë mét sè n−íc (Tropic Marine Aquarientechnik, Wartenberg,<br /> trªn thÕ giíi. Mét quy tr×nh c«ng nghÖ nu«i Germany) vµ chloramphenicol (50 mg/l).<br /> trång Schizochytrium ®· ®−îc c«ng ty Martek<br /> Biocience (Mü) thiÕt lËp víi hiÖu xuÊt 20g sinh - M«i tr−êng nu«i láng: sau khi ph©n lËp,<br /> khèi t¶o kh«/l sau 48 giê nu«i cÊy vµ hµm l−îng Schizochytrium ®−îc nu«i cÊy trªn m«i tr−êng<br /> c¬ b¶n M1, cã thµnh phÇn nh− sau: glucoza (30<br /> PUFAs ω-3 chiÕm 10% sinh khèi tÕ bµo. ë<br /> g/l), cao nÊm men (10 g/l), ASW (17,5 g/l) trong<br /> NhËt B¶n, hiÖu xuÊt lªn men cña chñng<br /> b×nh tam gi¸c 250 ml ë 28oC vµ l¾c 200<br /> Schizochytrium limacinum SR21 ®¹t 48,1 g<br /> vßng/phót, trong tèi.<br /> träng l−îng kh« (TLK)/l vµ 13,3 g DHA/l sau 4<br /> ngµy nu«i cÊy [11]. - C¸c thiÕt bÞ ®−îc sö dông trong nghiªn cøu<br /> gåm cã: kÝnh hiÓn vi quang häc Olympus CH02<br /> Sau Labyrinthula [5], Schizochytrium lµ chi (NhËt B¶n), buång ®Õm sè l−îng tÕ bµo Burker -<br /> vi t¶o biÓn dÞ d−ìng thø hai thuéc hä turk (§øc), c©n ph©n tÝch Precisa XT2200A (Thôy<br /> Thraustochytriidae ®−îc ph¸t hiÖn vµ ph©n lËp ë §iÓn), tñ nu«i cÊy ë nhiÖt ®é 28oC, m¸y l¾c IKA<br /> ViÖt Nam, t¹i phßng C«ng nghÖ t¶o, ViÖn C«ng KS260 basic (§øc), m¸y soxhlet, m¸y s¾c ký khÝ -<br /> nghÖ sinh häc. Tõ c¸c mÉu l¸ c©y tr«i d¹t ®−îc láng GC - MS - HP - 6890, ghÐp nèi víi Mass<br /> thu tõ vïng biÓn huyÖn ®¶o Phó Quèc, chóng t«i Selective Detector Aglient 5973; cét HP - 5MS<br /> ®· ph¸t hiÖn, ph©n lËp vµ nu«i cÊy æn ®Þnh trong<br /> (0,25 cm × 30 m × 0,25 mm); khÝ mang He; th−<br /> ®iÒu kiÖn phßng thÝ nghiÖm 2 chñng vi t¶o<br /> viÖn phæ khèi WILEY275.L vµ NIST 98.L.<br /> Schizochytrium cã hµm l−îng lipit tæng sè<br /> <br /> C«ng tr×nh ®−îc hç trî vÒ kinh phÝ cña Ch−¬ng tr×nh nghiªn cøu c¬ b¶n.<br /> 50<br /> 2. Ph−¬ng ph¸p tr−êng M1.<br /> - Quy tr×nh ph©n lËp: vi t¶o Schizochytrium - Ph©n tÝch hµm l−îng lipit tæng sè b»ng<br /> ®−îc ph©n lËp theo ph−¬ng ph¸p cña Yokochi vµ m¸y soxhlet theo NguyÔn V¨n Mïi [6].<br /> cs. (1998) [11] cã sö dông phÊn th«ng (pine- - Ph©n tÝch thµnh phÇn vµ hµm l−îng PUFAs<br /> pollen). Sau khi thu thËp, c¸c mÉu l¸ ®−íc ®−îc b»ng ph−¬ng ph¸p s¾c ký khÝ láng (t¹i ViÖn Ho¸<br /> röa s¹ch b»ng n−íc biÓn, c¾t ba m¶nh víi kÝch häc c¸c hîp chÊt tù nhiªn) theo Hoµng Lan Anh<br /> th−íc 0,5 cm × 0,5 cm cho vµo c¸c èng nghiÖm vµ cs., 2005 [5].<br /> cã chøa 5ml n−íc biÓn nh©n t¹o ®· khö trïng vµ<br /> bæ xung phÊn th«ng. Sau ®ã, c¸c èng nghiÖm II. KÕT QU¶ Vµ TH¶O LUËN<br /> ®−îc gi÷ ë 28oC trong tèi. Sau 24 giê, dïng que<br /> cÊy platin thu lÊy phÊn th«ng næi trªn bÒ mÆt 1. Ph©n lËp vi t¶o Schizochytrium<br /> n−íc vµ ria cÊy trªn ®Üa petri chøa m«i tr−êng Víi 17 mÉu l¸ c©y ®−íc cã sèng l¸ thu t¹i<br /> GPYc. C¸c ®Üa nµy ®−îc ®Æt ë 28oC, trong tèi. vïng rõng ngËp mÆn ven biÓn cña huyÖn ®¶o<br /> Sau 3-5 ngµy, c¸c ®Üa nµy ®−îc quan s¸t d−íi Phó Quèc, chóng t«i ®· ph¸t hiÖn, ph©n lËp vµ<br /> kÝnh hiÓn vi quang häc Olympus CH02 (NhËt nu«i cÊy æn ®Þnh trong ®iÒu kiÖn phßng thÝ<br /> B¶n) víi ®é phãng ®¹i 100 lÇn. Quan s¸t d−íi nghiÖm ®−îc 2 chñng vi t¶o Schizochytrium sp.<br /> kÝnh hiÓn vi, c¸c tÕ bµo Schizochytrium cã d¹ng PQ6 vµ PQ7. H×nh 1 minh häa h×nh d¹ng khuÈn<br /> h×nh trßn, tËp trung thµnh tõng côm bao quanh l¹c cña hai chñng vi t¶o Schizochytrium nµy<br /> h¹t phÊn th«ng. ViÖc cÊy chuyÓn trªn m«i (chôp trªn kÝnh hiÓn vi quang häc Olympus<br /> tr−êng GPYc nhiÒu lÇn cho phÐp thu ®−îc c¸c CH02 ë ®é phãng ®¹i 1200 lÇn). H×nh 1 cho<br /> khuÈn l¹c Schizochytrium s¹ch vi khuÈn vµ nÊm. thÊy, c¸c tÕ bµo Schizochytrium b¸m xung<br /> - X¸c ®Þnh tèc ®é sinh tr−ëng b»ng ph−¬ng quanh h¹t phÊn th«ng vµ cho phÐp nhËn diÖn vµ<br /> ph¸p ®Õm sè l−îng tÕ bµo b»ng buång ®Õm ph©n lËp Schizochytrium mét c¸ch dÔ dµng h¬n.<br /> Burker Turk vµ c©n TLK (sÊy ë 105oC, 2 giê) ë 2 chñng Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7 cã tÕ<br /> c¸c thêi ®iÓm nu«i cÊy kh¸c nhau, trªn m«i bµo d¹ng h×nh cÇu ®−îc tr×nh bµy ë h×nh 2.<br /> <br /> Pine pollen Pine pollen<br /> Schizochytrium Schizochytrium<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> PQ6 PQ7<br /> <br /> H×nh 1. H×nh d¹ng khuÈn l¹c cña hai chñng vi t¶o Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7<br /> sau 3 ngµy nu«i cÊy trªn m«i tr−êng GPYc<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> PQ6 50µm PQ7 50µm<br /> <br /> H×nh 2. H×nh d¹ng tÕ bµo cña hai chñng vi t¶o Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7<br /> sau 7 ngµy nu«i cÊy trªn m«i tr−êng M1<br /> 51<br /> 2. Tèc ®é sinh tr−ëng cña hai chñng vi t¶o nu«i trång trªn m«i tr−êng M1 lµ 35,35 triÖu tÕ<br /> Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7 trªn m«i bµo/ml vµ 11,13 g TLK/l, t−¬ng øng. Cßn víi<br /> tr−êng M1 chñng PQ7, mËt ®é vµ TLK ®¹t cao nhÊt sau 8<br /> ngµy nu«i cÊy víi c¸c gi¸ trÞ lµ 43,6 triÖu tÕ<br /> Tèc ®é sinh tr−ëng cña hai chñng vi t¶o bµo/ml vµ 11,28 g TLK/l, t−¬ng øng. TLK thu<br /> Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7 ®−îc nu«i cÊy ®−îc cña hai chñng nªu trªn kh¸c nhau kh«ng<br /> trªn m«i tr−êng M1, ®−îc chØ ra ë b¶ng 1 vµ nhiÒu, song hµm l−îng lipit l¹i t−¬ng ®èi kh¸c<br /> h×nh 3. nhau. Sau 5 ngµy nu«i cÊy, chñng PQ6 cã hµm<br /> KÕt qu¶ ë b¶ng 1 cho thÊy, hai chñng PQ6 vµ l−îng lipit ®¹t 4,01 g/l, chiÕm 38,67% TLK. Cßn<br /> PQ7 cã tèc ®é ph¸t triÓn kh¸c nhau. Chñng PQ6 víi chñng PQ7, sau 7 ngµy nu«i cÊy, c¸c gi¸ trÞ<br /> cã mËt ®é tÕ bµo, TLK ®¹t cao nhÊt sau 5 ngµy trªn ®¹t 4,31 g/l vµ 40,59% TLK, t−¬ng øng.<br /> B¶ng 1<br /> MËt ®é tÕ bµo, träng l−îng kh« (TLK) vµ hµm l−îng lipit<br /> cña hai chñng vi t¶o Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7 trªn m«i tr−êng M1<br /> Chñng Ngµy MËt ®é × TLK, Hµm l−îng lipit, Hµm l−îng lipit (%),<br /> vi t¶o nu«i 106 tb/ml (g/l) g/l g/gTLK<br /> 0 0,24 0,05 - -<br /> 2 14,79 5,52 0,86 15,51<br /> 4 23,60 10,21 2,25 21,99<br /> 5 35,35 11,13 4,01 38,67<br /> PQ6<br /> 7 26,50 10,72 3,72 33,36<br /> 8 21,34 9,61 2.97 30,91<br /> 9 19,42 8,21 2.31 28,14<br /> 10 15,23 6,12 1.69 27,61<br /> 0 0,22 0,05 - -<br /> 2 13,92 4,49 0,68 15,11<br /> 4 21,40 8,59 1,74 20,23<br /> PQ7 5 31,85 9,39 2,43 27,67<br /> 7 33,65 10,63 4,31 40,59<br /> 8 43,60 11,28 4,135 36,64<br /> 9 21,47 9,05 2,29 25,31<br /> 10 14,92 7,72 1,69 21,88<br /> Ghi chó: (-). kh«ng x¸c ®Þnh ®−îc do mËt ®é tÕ bµo vµ sinh khèi ban ®Çu thÝ nghiÖm qu¸ thÊp.<br /> TLK, g/l<br /> 12<br /> PQ6<br /> 10 PQ7<br /> <br /> 8<br /> <br /> 6<br /> <br /> 4<br /> <br /> 2<br /> Ngày<br /> 0<br /> 0 2 4 6 8 10<br /> <br /> H×nh 3. Tèc ®é sinh tr−ëng cña hai chñng vi t¶o Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7<br /> trªn m«i tr−êng M1<br /> 52<br />  Trong thµnh phÇn lipit cña vi t¶o vµ chñng PQ7 (sau 7 ngµy nu«i cÊy) ®· ®−îc<br /> Schizochytrium, chóng t«i quan t©m ®Õn hµm ph©n tÝch. KÕt qu¶ ph©n tÝch hµm l−îng axit bÐo<br /> l−îng PUFA, ®Æc biÖt lµ DHA. Do vËy, thµnh ë hai chñng PQ6 vµ PQ7 ®−îc chØ ra ë b¶ng 2,<br /> phÇn axit bÐo b·o hoµ vµ kh«ng b·o hoµ h×nh 4 vµ 5.<br /> (PUFAs) cña chñng PQ6 (sau 5 ngµy nu«i cÊy)<br /> B¶ng 2<br /> KÕt qu¶ ph©n tÝch thµnh phÇn axit bÐo b·o hoµ vµ kh«ng b·o hoµ (PUFAs)<br /> cña hai chñng vi t¶o Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7<br /> PQ6 PQ7<br /> Thêi<br /> Tªn th−êng Thêi Hµm Hµm<br /> STT Ký hiÖu Tªn khoa häc gian<br /> gäi gian l−u l−îng l−îng<br /> l−u<br /> (Rt) (%) (%)<br /> (Rt)<br /> 1 C14:0 Tetradecanoic axÝt Myristic 8,54 2,5 8,52 3,48<br /> 2 C15:0 Pentadecanoic axÝt 9,57 8,41 9,55 7,39<br /> 3 C16:1(n-7) 9-Hexadecenoic axÝt Palmitoleic 10,37 0,25 10,35 0,58<br /> 4 C16:0 Hexadecenoic axÝt Palmitic 10,61 37,71 10,57 36,95<br /> 5 C17:0 Heptadecanoic axÝt Margric 11,53 1,84 11,51 1,80<br /> 6 C18:2(n-6) 9,12-Octadecadienoic axÝt Linolelaidic 12,17 0,33<br /> 7 C18:1(n-9) Cis 9-Octadecenoic axÝt Oleic 12,29 0,69 12,22 2,40<br /> 8 C18:0 Octadecenoic axÝt Stearic 12,46 1,27 12,46 1,72<br /> 9 C20:4(n-6) 5,8,11,14-Eicosatetraenoic Arachidonic 13,66 0,92<br /> axÝt AA<br /> 10 C20:5(n-3) 5,8,11,14,17- EPA 13,74 0,75<br /> Eicosapentaenoic axÝt<br /> 11 C20:0 Eicosanoic axÝt Arachidic 14,25 0,28 14,24 0,46<br /> 12 C22:6(n-3) 4,7,10,13,16,19- DHA 15,74 43,52 15,74 38,07<br /> Docosahexaenoic axÝt<br /> 13 C¸c lo¹i kh¸c 1,41 6,82<br /> Tæng c¸c axÝt bÐo b·o hoµ 52,46 51,8<br /> Tæng c¸c axÝt bÐo kh«ng b·o hoµ 46,13 41,38<br /> Tæng sè axÝt bÐo chiÕm trªn 90% lipit tæng sè<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Palmitic<br /> <br /> <br /> <br /> DHA<br /> <br /> <br /> <br /> EPA<br /> <br /> <br /> <br /> Thêi gian l−u, phót<br /> <br /> <br /> H×nh 4. Phæ axÝt bÐo cña chñng vi t¶o Schizochytrium sp. PQ6<br /> sau 5 ngµy nu«i cÊy trªn m«i tr−êng M1<br /> 53<br />  Palmitic<br /> <br /> <br /> <br /> DHA<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Thêi gian l−u, phót<br /> <br /> H×nh 5. Phæ axÝt bÐo cña chñng vi t¶o Schizochytrium sp. PQ7<br /> sau 7 ngµy nu«i cÊy trªn m«i tr−êng M1<br /> KÕt qu¶ thu ®−îc vÒ thµnh phÇn axÝt bÐo cña thá nh»m kiÓm chøng tÝnh an toµn còng nh− t¸c<br /> hai chñng PQ6 vµ PQ7 ®−îc chØ ra ë b¶ng 2 ®· dông cña lo¹i vi t¶o biÓn nµy tr−íc khi con<br /> cho thÊy axit docosahexaenoic (DHA) vµ ng−êi sö dông [1, 2].<br /> palmitic lµ nh÷ng thµnh phÇn chÝnh trong tæng Tõ kÕt qu¶ chØ ra ë hai b¶ng 1 vµ 2, chóng<br /> sè axit bÐo. Hµm l−îng DHA cña c¶ hai chñng t«i tÝnh to¸n ®−îc hµm l−îng DHA ®èi víi hai<br /> PQ6 vµ PQ7 ®¹t rÊt cao, chiÕm ®Õn 43,52 vµ chñng PQ6 vµ PQ7 lµ 1,57 vµ 1,48 g/l, t−¬ng<br /> 38,07% trªn tæng sè hµm l−îng axit bÐo, t−¬ng øng. So víi lo¹i vi t¶o biÓn míi Labyrinthula<br /> øng. Hµm l−îng axit palmitic ®¹t gi¸ trÞ 37,71% cña ViÖt Nam võa ®−îc c«ng bè, c¸c chñng vi<br /> vµ 36,95% trªn tæng sè axit bÐo ®èi víi c¸c t¶o Schizochytrium ®−îc ph©n lËp t¹i huyÖn ®¶o<br /> chñng PQ6 vµ PQ7, t−¬ng øng. Tæng sè hµm Phó Quèc cã kh¶ n¨ng sinh tæng hîp DHA víi<br /> l−îng axit bÐo b·o hoµ vµ kh«ng b·o hoµ cña hµm l−îng cao gÊp kho¶ng 10 lÇn. Nh− vËy, c¸c<br /> hai chñng PQ6 vµ PQ7 chiÕm 52,46 vµ 46,13%; chñng vi t¶o biÓn dÞ d−ìng thuéc chi<br /> 51,80 vµ 41,38% trªn hµm l−îng tæng sè axit Schizochytrium lµ nh÷ng ®èi t−îng tiÒm n¨ng cã<br /> bÐo, t−¬ng øng. Trong ®ã, ë c¶ hai chñng PQ6 kh¶ n¨ng sinh tæng hîp DHA rÊt cao so víi tÊt<br /> vµ PQ7 ®Òu cã hµm l−îng axit bÐo tæng sè c¶ c¸c c¬ thÓ vi t¶o vµ vi sinh vËt hiÖn nay ë<br /> chiÕm trªn 90% tæng sè lipit. §Æc biÖt ë chñng ViÖt Nam [5].<br /> PQ6, bªn c¹nh DHA, cßn ph¸t hiÖn thÊy sù cã<br /> mÆt cña EPA vµ AA, mÆc dï, gi¸ trÞ phÇn tr¨m NÕu so víi chñng Schizochytrium limacinum<br /> cña chóng trªn tæng sè axit bÐo thÊp h¬n rÊt SR21 cña NhËt B¶n [10, 11] - mét chñng ®·<br /> nhiÒu so víi hµm l−îng cña DHA (b¶ng 2). §©y ®−îc chän nu«i trång ®Ó th−¬ng m¹i hãa s¶n<br /> chÝnh lµ nh÷ng ®Æc ®iÓm −u viÖt cña chñng PQ6 phÈm DHA hiÖn nay, khi ®−îc nu«i trong c¸c<br /> vÒ thµnh phÇn axÝt bÐo kh«ng b·o hoµ (PUFAs), b×nh tam gi¸c (t−¬ng tù nh− thÝ nghiÖm cña<br /> cung cÊp nh÷ng dÉn liÖu khoa häc quan träng chóng t«i) l¹i cã TLK vµ hµm l−îng DHA cao<br /> cho viÖc lùa chän chñng PQ6 ®Ó tiÕn hµnh c¸c h¬n 3 vµ 2,7 lÇn (tÝnh trªn 1 lÝt), so víi c¸c<br /> nghiªn cøu s©u h¬n vÒ con ®−êng sinh tæng hîp chñng PQ6 vµ PQ7, t−¬ng øng. Tuy nhiªn, nÕu<br /> PUFAs lµ DHA, EPA ë ®èi t−îng nµy, còng nh− tÝnh hµm l−îng DHA trªn gi¸ trÞ TLK (gr) thu<br /> nu«i trång chñng nµy víi quy m« lín ®Ó thu ®−îc cña 2 chñng PQ6 vµ PQ7 l¹i ®¹t 14,11% vµ<br /> sinh khèi giÇu c¸c axit bÐo kh«ng b·o hoµ ®a 13,12% TLK, t−¬ng øng, cã gi¸ trÞ cao h¬n so<br /> nèi ®«i nªu trªn lµm thøc ¨n t−¬i sèng vµ nh©n víi chñng Schizochytrium limacinum SR21 nãi<br /> t¹o cho nu«i trång thuû s¶n vµ lµm thùc phÈm trªn (11,67%).<br /> chøc n¨ng cho ng−êi vµ ®éng vËt nu«i. Trªn thÕ C¸c sè liÖu ®−îc tr×nh bµy trªn ®©y míi chØ lµ<br /> giíi, c¸c nghiªn cøu vÒ ®éc tÝnh tr−êng diÔn vµ nh÷ng kÕt qu¶ nghiªn cøu b−íc ®Çu vÒ hµm<br /> b¸n tr−êng diÔn cña vi t¶o giµu DHA l−îng DHA cña 2 chñng vi t¶o biÓn<br /> Schizochytrium ®· ®−îc tiÕn hµnh trªn chuét vµ Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7 míi ®−îc ph©n<br /> 54<br /> lËp t¹i huyÖn ®¶o Phó Quèc trªn m«i tr−êng c¬ TµI LIÖU THAM KH¶O<br /> b¶n M1 vµ lµ 2 chñng míi ®èi víi ViÖt Nam.<br /> Ngoµi ra, nh÷ng kÕt qu¶ s¬ bé thu ®−îc khi nu«i 1. Hammond B. G. et al., 2001: Regulatory<br /> cÊy chñng PQ6 trªn hÖ thèng lªn men 5 lÝt ®· cho Toxicology and Pharmacology, 33: 192-204,<br /> thÊy hµm l−îng lipit tæng sè vµ DHA cña chñng 205-217, 356-362.<br /> nµy ®· t¨ng lªn 2,3 vµ 3 lÇn, t−¬ng øng, so víi 2. Hammond B. G. et al., 2002: Regulatory<br /> c¸c sè liÖu thu ®−îc khi tiÕn hµnh thÝ nghiÖm trªn Toxicology and Pharmacology, 35: 255-265.<br /> c¸c b×nh tam gi¸c 250 ml võa ®−îc nªu ë trªn. 3. Honda D. et al., 1998: Mycol. Res., 102(4):<br /> 439 - 448.<br /> III. KÕT LUËN<br /> 4. Honda D. et al., 1999: J. Eukaryot<br /> Tõ c¸c kÕt qu¶ thu ®−îc ë trªn, chóng t«i rót Microbiol., 46(6): 637-647.<br /> ra mét sè kÕt luËn sau: 5. Hoµng Lan Anh vµ cs., 2005: T¹p chÝ C«ng<br /> 1. Víi quy tr×nh ph©n lËp cã c¶i tiÕn cho phï nghÖ sinh häc, 3(3): 1-7.<br /> hîp víi ®iÒu kiÖn cñaViÖt Nam, lÇn ®Çu tiªn,<br /> 6. NguyÔn V¨n Mïi, 2001: Thùc hµnh hãa sinh<br /> chóng t«i ®· ph©n lËp ®−îc ë ViÖt Nam lo¹i vi<br /> häc. Nxb. §¹i häc Quèc gia Hµ Néi, 63-66.<br /> t¶o biÓn dÞ d−ìng Schizochytrium giµu DHA tõ<br /> l¸ c©y ®−íc tr«i d¹t ë vïng rõng ngËp mÆn ven 7. Porter D., 1990: Handbook of protoctista:<br /> biÓn cña huyÖn ®¶o Phó Quèc, tØnh Kiªn Giang. 388 - 398. John and Bartlett, Boston.<br /> 2. Víi hµm l−îng DHA cao thu ®−îc tõ hai 8. Raghukumar S., 2002: Europ. J. Protistol.,<br /> chñng Schizochytrium sp. PQ6 vµ PQ7 ®· ph©n 38: 127-145.<br /> lËp lµ 1,57 vµ 1,48 g/l, t−¬ng øng, trªn m«i 9. Sijtsma L. and de Swaaf M. E., 2004: Appl.<br /> tr−êng M1, ®· cho thÊy c¸c chñng vi t¶o biÓn dÞ Microbiol. Biotechnol., 64: 146-153.<br /> d−ìng Schizochytrium nµy lµ ®èi t−îng tiÒm 10. Xiao Qiu., 2003: Prostaglandins,<br /> n¨ng cÇn ®−îc tiÕp tôc nghiªn cøu ®Ó nu«i trång, Leukotrienes and Essential Fatty Acids., 68:<br /> thu sinh khèi giµu c¸c PUFAs nh− DHA lµm 181-186.<br /> thùc phÈm chøc n¨ng cho ng−êi, lµm thøc ¨n<br /> t−¬i sèng vµ nh©n t¹o cho ®éng vËt nu«i vµ trong 11. Yokochi T. et al., 1998: Appl. Microbiol.<br /> nu«i trång thñy s¶n ë ViÖt Nam. Biotechnol., 49: 72-79.<br /> <br /> SUCCESSFUL ISOLATION OF SCHIZOCHYTRIUM - A NEW HETEROTROPHIC<br /> MARINE MICROALGA CONTAINING HIGH POLYUNSATURATED FATTY<br /> ACID - DHA FROM PHUQUOC DISTRICT COASTS<br /> Dang Diem Hong, Hoang Lan Anh, ngo thi hoai thu<br /> <br /> SUMMARY<br /> Polyunsaturated fatty acids - PUFAs have known such as essential components of the cell membranes of<br /> various tissues and as precursors of the eicosanoids that are special importance in the brain and blood vessels,<br /> and are considered essential for pre - and post - natal brain and retinal development. In PUFAs ω-3,<br /> docosahexaenoic acid (DHA) is absolutely necessary for normal development of the fetus and baby. DHA has<br /> some positive effects on human diseases such as hypertension, arthritis, arteriosclerosis, depression and<br /> thrombosis…. Therefore, DHA has contributed to many kind of worth product such as milk for pregnant<br /> woman and baby, drugs and functional food for human and animals. In this paper, for the first time, we<br /> succeeded in isolating of Schizochytrium sp. PQ6 and PQ7 - a new heterotrophic marine microalga, from Phu<br /> Quoc district coasts. The growth rate, dry weight, concentration of total lipid and the component of PUFAs in<br /> M1 media were analyzed in both strains. The DHA content of strains Schizochytrium sp. PQ6 and PQ7 are<br /> about 1.57 and 1.48 g/l, respectively. In comparison with other current marine microalgae in Vietnam,<br /> Schizochytrium sp. PQ6 and PQ7 have the highest concentration of PUFAs, especially content of DHA. That<br /> gives us new prospect for using these Schizochytrium as animal feed (e.g. for rotifer, krills, shrimp’s larvae,<br /> etc.) and functional food for human.<br /> Ngµy nhËn bµi: 4-1-2007<br /> 55<br />