intTypePromotion=1
zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn
ADSENSE
 » 
 » 

BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC KỸ THUẬT: 75 USING IN VITRO PROPAGATION TO PRESERVE Glyptostrobus pensilis (Staunton ex.)

Chia sẻ: Linh Ha | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:7

Thêm vào BST
Báo xấu
47
lượt xem 4
download
 
  Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Thuỷ tùng (Glyptostrobus pensilis (Staunton ex) K. Koch) là loài cây có giá trị cao về mặt khoa học và kinh tế. Ngày nay, theo điều tra nhận thấy Thuỷ tùng chỉ còn phân bố ở...

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC KỸ THUẬT: 75 USING IN VITRO PROPAGATION TO PRESERVE Glyptostrobus pensilis (Staunton ex.)

  1. NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 75 ÖÙNG DUÏNG PHÖÔNG PHAÙP VI NHAÂN GIOÁNG TRONG BAÛO TOÀN GIOÁNG CAÂY THUYÛ TUØNG [Glyptostrobus pensilis (Staunton ex) K.Koch] USING IN VITRO PROPAGATION TO PRESERVE Glyptostrobus pensilis (Staunton ex.) VARIETY Nguyeãn Thanh Sum, Phaïm Ngoïc Tuaân, Nguyeãn Vaên Keát Khoa Noâng Laâm – Tröôøng Ñaïi hoïc Ñaø Laït – Email: ketnv@dlu.edu.vn ABSTRACT Noäi dung Shoots tip of Glyptostrobus pensilis (Staunton - Khaûo saùt thôøi gian vaø noàng ñoä chaát khöû truøng ex.) were cultured on woody plant medium (WPM) maãu Thuyû tuøng supplemented with benzyladenine (BA-0.5mg/l), 8g/l agar and 30g/l succrose being most effective - Khaûo saùt moâi tröôøng khoaùng thích hôïp cho multiplied in vitro. Rooting was induced in WPM söï taêng tröôûng choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro supplemented with 0.5 mg/l indole-3-butyric acid (IBA). By contrast, increasing BA up to 1.5mg/l, - Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa BA ñeán khaû naêng calluss become more large and microcuttings also hình thaønh cuïm choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro showed reduced rooting capacity. - AÛnh höôûng cuûa haøm löôïng ñöôøng vaø agar Key words: Glyptostrobus pensilis, in vitro, BA, IBA leân söï sinh tröôûng, phaùt trieån cuûa choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro ÑAËT VAÁN ÑEÀ - Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa bình nuoâi caáy coù vaø Thuyû tuøng (Glyptostrobus pensilis (Staunton khoâng coù trao ñoåi khí trong giai ñoaïn nhaân nhanh choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro ex) K. Koch) laø loaøi caây coù giaù trò cao veà maët khoa hoïc vaø kinh teá. Ngaøy nay, theo ñieàu tra nhaän thaáy Thuyû tuøng chæ coøn phaân boá ôû moät soá tænh cuûa - Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa IBA vaø NAA ñeán söï sinh tröôûng cuûa caây Thuyû tuøng in vitro Trung Quoác nhö Phuùc Kieán, Vaân Nam vaø Khaêm Muoän (Laøo). Taïi Vieät Nam, Thuyû tuøng ñöôïc phaùt Phöông phaùp nghieân cöùu hieän laàn ñaàu tieân vaøo naêm 1955 ôû buoân Mil, xaõ Eahoà, caùch Buoân Meâ Thuoäc 45km veà phía Ñoâng Baéc. Hieän chæ coøn laïi 32 caây ôû vuøng Traáp Ksor, Caùc choài ngoïn vaø ñoát thaân ñöôïc röûa saïch roài caét Huyeän Kroângnaêng vaø ñaäp Eañra, xaõ Eawy, huyeän thaønh caùc ñoaïn non daøi 2-3 cm sau ñoù tieán haønh EaH’leo. (Nguyeãn Hoaøng Nghóa, 1997). khöû truøng vôùi caùc noàng ñoä khaùc nhau. Loaøi caây naøy bò ñe doaï tuyeät chuûng, khoâng phaûi Sau khi khöû truøng, maãu ñöôïc caét thaønh töøng vì phaân boá heïp vaø soá caù theå coøn laïi quaù ít maø vì quaù maãu nhoû coù chöùa ñænh sinh tröôûng, hoaëc caùc choài trình taùi sinh töï nhieân raát keùm, cuøng vôùi söï gia taêng non, kích thöôùc töø 3 ñeán 5 mm, sau ñoù ñöôïc ñöa veà daân soá neân moâi tröôøng soáng ñang bò xaâm phaïm vaøo bình caáy coù chöùa caùc moâi tröôøng thích hôïp nhö vaø thu heïp.Vieäc nhaân gioáng thaønh coâng caây thuyû MS, WPM…. Sau 2 tuaàn nuoâi caáy caùc maãu tuøng baèng phöông phaùp nuoâi caáy moâ seõ môû ra moät trieån voïng môùi trong trong coâng taùc baûo toàn nguoàn Taát caû caùc thí nghieäm ñöôïc tieán haønh trong tuû gen caây röøng, beân caïnh ñoù vieäc aùp duïng kyõ thuaät caáy voâ truøng. Moâi tröôøng vaø caùc duïng cuï nuoâi caáy coâng ngheä sinh hoïc trong nghieân cöùu seõ ñem laïi cho ñeàu ñöôïc voâ truøng ôû 120oC trong voøng 30 phuùt, ngaønh laâm nghieäp nhöõng höôùng phaùt trieån coù nhieàu bình nuoâi caáy laø caùc bình thuyû tinh ñöôïc ñaäy kín trieån voïng môùi. Nghieân cöùu höôùng tôùi laø xaùc ñònh baèng naép nhöïa vaø ñöôïc bòt kín baèng baêng keo nhaèm ñöôïc moâi tröôøng phuø hôïp cuõng nhö haøm löôïng caùc ngaên caûn söï trao ñoåi khí vôùi moâi tröôøng ngoaøi, vaø Auxin, Cytokynin thích hôïp cho sinh tröôûng vaø phaùt caùc hoäp nhöïa 500ml ñöôïc ñaäy kín, moãi bình nuoâi trieån cuûa caây Thuyû tuøng trong moâi tröôøng in vitro caáy ñöôïc caáy 5 maãu thoâng qua vieäc öùng duïng kyõ thuaät nuoâi caáy moâ. Caùc thí nghieäm ñöôïc boá trí hoaøn toaøn ngaãu nhieân VAÄT LIEÄU VAØ PHÖÔNG PHAÙP (CRD) vôùi 3 laàn laëp laïi, moãi nghieäm thöùc caáy trong 5 bình thuyû tinh (hay hoäp nhöïa 500ml), moãi bình Vaät lieäu ñöôïc caáy 5 maãu. Soá lieäu ñöôïc ño ñeám vaøo ngaøy thöù 60 sau khi nuoâi caáy ôû taát caû caùc thí nghieäm. Soá lieäu Maãu caáy laø choài ngoïn vaø ñoát thaân cuûa caây Thuyû thu ñöôïc ñöôïc xöû lyù thoáng keâ baèng phaàn meàm tuøng. MSTAT-C.. Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp. HCM Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 1&2/2007
  2. NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 76 KEÁT QUAÛ VAØ THAÛO LUAÄN thöùc khaùc (2,1 choài). Caùc nghieäm thöùc coøn laïi cho thaáy caùc nghieäm thöùc coù boå sung BA soá löôïng Khaûo saùt thôøi gian vaø noàng ñoä chaát khöû truøng choài trung bình treân maãu cao hôn so vôùi nghieäm maãu Thuyû tuøng thöùc ñoái chöùng. Trong moâi tröôøng MS, nghieäm thöùc ñoái chöùng coù soá löôïng choài trung bình treân Qua keát quaû thu ñöôïc cho thaáy maãu ñöôïc xöû lyù ôû maãu cao hôn so vôùi caùc nghieäm thöùc coù boå sung noàng ñoä Javel 2% trong 30 phuùt cho keát quaû toát BA (Baûng 1). vôùi tyû leä khoâng nhieãm khaù cao laø 70%, khi taêng noàng ñoä leân 3% ñeán 4% trong thôøi gian 30 phuùt seõ Nhö vaäy, choài Thuyû tuøng ñöôïc nuoâi caáy trong gaây cheát maãu. Thôøi gian xöû lyù maãu töø 10 ñeán 20 moâi tröôøng WPM coù caùc chæ tieâu nghieân cöùu cao phuùt thì tyû leä nhieãm vaãn cao hôn noàng ñoä 2% trong hôn so vôùi moâi tröôøng MS, moät soá chæ tieâu maãu 30 phuùt. Döôùi caùc noàng ñoä vaø thôøi gian treân tyû leä nuoâi caáy treân moâi tröôøng WPM cao gaáp ñoâi so vôùi nhieãm maãu khaù cao (Hình 1). maãu ñöôïc nuoâi caáy treân moâi tröôøng MS. Khaûo saùt moâi tröôøng khoaùng thích hôïp cho Xeùt treân toaøn loâ thí nghieäm coù theå nhaän thaáy söï taêng tröôûng choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro giöõa moâi tröôøng MS vaø WPM coù söï sai khaùc moät caùch coù yù nghóa. Moâi tröôøng WPM laø phuø hôïp trong Trong moâi tröôøng WPM, vôùi chæ tieâu soá löôïng vieäc nuoâi caáy moâ caây Thuyû tuøng. Moâi tröôøng WPM choài trung bình treân maãu, nghieäm thöùc boå sung seõ laø moâi tröôøng ñöôïc choïn loïc söû duïng trong caùc 1,0 mg/l BA cho keát quaû cao hôn so vôùi caùc nghieäm nghieân cöùu tieáp theo. (%) 100 80 60 40 20 0 Thôøi gian(phuùt) 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 1 2 3 4 Noàng ñoä Javel (%) Tæ leä nhieãm Tæ leä khoâng nhieãm Hình 1. Thôøi gian vaø noàng ñoä chaát khöû truøng maãu Thuûy Tuøng Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 1&2/2007 Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp. HCM
  3. NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 77 Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa BA ñeán khaû naêng hình coù keát quaû ñoái nghòch neáu haøm löôïng agar quaù cao thaønh cuïm choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro (Stolz, 1967). Ñieàu naøy cuõng phuø hôïp ôû nghieäm thöùc vôùi noàng ñoä ñöôøng töø 20 ñeán 50 g/l vaø noàng ñoä agar ÔÛ caùc noàng ñoä BA lôùn hôn 1 mg/l haàu nhö coù bieåu 16 g/l thì choài gaàn nhö khoâng taùi sinh (Baûng 3). hieän gaây öùc cheá söï sinh tröôûng cuõng nhö tæ leä soáng Söï phaùt sinh choài cuûa Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro cuûa choài caây giaûm suùt ñaùng keå. Soá löôïng choài trung bình treân maãu döôùi taùc ñoäng cuûa BA toát nhaát laø ôû khoâng coù söï khaùc bieät roõ reät khi haøm löôïng ñöôøng noàng ñoä 1 mg/l. Noùi chung, heä soá nhaân choài döôùi taùc trong moâi tröôøng bieán ñoäng töø 30 ñeán 50 g/l. Haøm ñoäng cuûa BA laø chöa cao, toái ña laø hai choài treân moät löôïng agar boå sung trong moâi tröôøng coù söï khaùc bieät maãu. Nhö vaäy, xeùt chung veà caùc chæ tieâu ñaõ theo ôû caùc nghieäm thöùc khaùc nhau, nhöng nghieäm thöùc boå doõi, nghieäm thöùc 0,5mg/l BA toû ra phuø hôïp nhaát do sung 4g vaø 8g agar khoâng coù söï khaùc bieät roõ reät. coù tyû leä maãu soáng cao (88,8%) (Baûng 2). Nhö vaäy, soá löôïng choài trung bình cuûa caây Thuyû AÛnh höôûng cuûa haøm löôïng ñöôøng vaø agar leân tuøng in vitro trong nghieäm thöùc khaûo saùt noàng ñoä söï sinh tröôûng, phaùt trieån cuûa choài Thuyû tuøng ñöôøng vaø agar theå hieän ôû baûng 3 cho thaáy söï thay ñoåi nuoâi caáy in vitro noàng ñoä ñöôøng töø 30 ñeán 50 g/l vaø noàng ñoä agar bieán ñoäng trong khoaûng 4 ñeán 8 g/l laø nhö nhau. AÛnh höôûng cuûa haøm löôïng ñöôøng vaø agar ñeán phaùt sinh soá choài trung bình maãu Thuyû tuøng nuoâi caáy AÛnh höôûng cuûa haøm löôïng ñöôøng vaø agar leân söï in vitro phaùt trieån chieàu cao trung bình cuûa choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro Moâi tröôøng khoâng chöùa aga vaø ñöôøng, choài Thuyû tuøng in vitro cheát sau 5 tuaàn nuoâi caáy. Agar laø moät Vôùi chæ tieâu chieàu cao trung bình cuûa maãu, polysaccaric vôùi nguyeân töû löôïng cao, noàng ñoä thöôøng nghieäm thöùc boå sung haøm löôïng ñöôøng khaùc nhau duøng trong nuoâi caáy moâ laø 0,6 – 0,8 %. Neáu noàng ñoä ñaõ theå hieän coù söï khaùc bieät roõ reät. Haøm löôïng agar taêng leân noù laøm cho maãu caáy khoù haáp thu chaát ñöôøng 30g/l laø nghieäm thöùc öu theá phaùt trieån veà dinh döôõng trong moâi tröôøng. Söï sinh tröôûng in vitro chieàu cao so vôùi caùc nghieäm thöùc coøn laïi (Baûng 4). Baûng 2. AÛnh höôûng cuûa moâi tröôøng WPM vaø BA ñeán taïo cuïm choài caây Thuyû tuøng in vitro Nghieäm thöùc Chieàu cao Tyû leä maãu Soá löôïng choài Moâi tröôøng BA (mg/l) maãu (cm) soáng (%) treân maãu WPM DC 0,4 d 80,00 ab 1,46 bc 0,5 1,5 a 88,75 a 1,59 b 1,0 1,6 a 76,67 b 2,08 a 2,0 1,6 a 55,00 c 1,30 cd 3,0 1,4 b 60,00 c 1,52 bc 4,0 0,9 c 30,00 d 1,16 d 5,0 1,1 c 31,25 d 1,40 bcd LSD (0,05) 0,1 10,04 0,28 Caùc giaù trò trung bình trong cuøng moät coät coù caùc kyù töï khaùc nhau thì khaùc bieät coù yù nghóa thoáng keâ ôû möùc P≤ 0,005 Baûng 3. AÛnh höôûng cuûa haøm löôïng ñöôøng vaø agar leân söï phaùt sinh soá choài trung bình Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro Ñöôøng(g/l) Agar(g/l) Trung bình 0 20 30 40 50 0 - - - - - 0,00 c 4 - 0,91 0,93 1,28 1,03 0,83 ab 8 - 1,07 1,30 0,97 1,13 0,89 a 16 - 0,95 0,99 1,09 1,02 0,81 b Trung bình 0,00 c 0,73 b 0,80 ab 0,83 a 0,79 ab LSD (0,05) LSD (0,05) 0,08 0,07 Caùc giaù trò trung bình trong cuøng moät coät coù caùc kyù töï khaùc nhau thì khaùc bieät coù yù nghóa thoáng keâ ôû möùc P ≤ 0,005 Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp. HCM Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 1&2/2007
  4. NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 78 Baûng 4. AÛnh höôûng cuûa haøm löôïng ñöôøng vaø agar leân phaùt trieån chieàu cao trung bình cuûa choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro Ñöôøng (g/l) Agar(g/l) Trung bình 0 20 30 40 50 0 - - - - - 0,0 d 4 - 0,8 0,9 1,2 1,2 0,8 b 8 - 0,9 1,8 1,2 0,7 0,9 a 16 - 0,7 0,8 0,6 0,7 0,5 c Trung bình 0,0 d 0,6 c 0,9 a 0,7 b 0,6 c LSD (0,05) LSD (0,05) 0,07 0,06 Caùc giaù trò trung bình trong cuøng moät coät coù caùc kyù töï khaùc nhau thì khaùc bieät coù yù nghóa thoáng keâ ôû möùc P ≤ 0,005 Baûng 5. AÛnh höôûng cuûa haøm löôïng ñöôøng vaø agar ñeán tyû leä thuûy tinh theå (%) cuûa choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro Ñöôøng (g/l) Agar (g/l) Trung bình 0 20 30 40 50 0 - - - - - 0,0 d 4 - 42,0 36,0 28,0 17,0 0,8 b 8 - 0,0 8,0 17,0 10,0 0,9 a 16 - 10,0 10,0 0,0 0,0 0,5 c Trung bình 0,0 d 13,1 ab 13,7 a 11,5 b 6,8 c LSD (0,05) LSD (0,05) 1,91 1,70 Caùc giaù trò trung bình trong cuøng moät coät coù caùc kyù töï khaùc nhau thì khaùc bieät coù yù nghóa thoáng keâ ôû möùc P ≤ 0,005 Vôùi caùc nghieäm thöùc boå sung agar, coù söï khaùc Ñieàu naøy cho ta thaáy neáu boå sung moät löôïng bieät roõ reät giöõa caùc nghieäm thöùc, trong ñoù nghieäm ñöôøng vöøa ñuû (30 g/l) thì caây sinh tröôûng toát nhöng thöùc boå sung 8g/l agar khaùc bieät so vôùi caùc nghieäm vôùi löôïng ñöôøng taêng cao (50 g/l) thì maãu caây Thuyû tuøng in vitro coù chieàu cao phaùt trieån chaäm laïi. Vì thöùc khaùc vaø laø nghieäm thöùc caây Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro phaùt trieån toát nhaát. Nhö vaäy, chieàu vaäy ôû thí nghieäm treân moâi tröôøng nuoâi caáy coù 30g/ cao cuûa maãu Thuûy tuøng nuoâi caáy in vitro ôû nghieäm l ñöôøng vaø 8 g/l agar ñöôïc ñaùnh giaù laø toái öu. thöùc moâi tröôøng nuoâi caáy coù 30 g/l ñöôøng vaø 8 g/l AÛnh höôûng cuûa haøm löôïng ñöôøng vaø agar ñeán tyû leä agar vöôït troäi so vôùi caùc nghieäm thöùc khaùc. thuûy tinh theå cuûa choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro AÛnh höôûng cuûa haøm löôïng ñöôøng vaø agar ñeán tyû leä thuûy tinh theå cuûa choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro qua baûng 5 ñaõ theå hieän coù söï khaùc bieät roõ reät ôû caùc noàng ñoä ñöôøng vaø agar khaùc nhau. Nhö vaäy, ngoaïi tröø ôû moâi tröôøng khoâng chöùa aga vaø ñöôøng, choài Thuyû tuøng cheát sau 5 tuaàn nuoâi caáy, vôùi nghieäm thöùc boå sung ñöôøng, noàng ñoä cho tyû leä thuyû tinh theå thaáp nhaát laø 50 g/l. Vôùi nghieäm thöùc boå sung agar, noàng ñoä 16 g/l laø noàng ñoä cho tyû leä thuyû tinh theå thaáp nhaát ñoái vôùi caây Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro. Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa bình nuoâi caáy coù vaø khoâng coù trao ñoåi khí trong giai ñoaïn nhaân nhanh choài Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro Hình 1. Choài Thuûy tuøng Nuoâi caáy vôùi maøng milipore moät lôùp vaø hai lôùp coù söï khaùc bieät veà soá löôïng choài trung bình/ maãu Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 1&2/2007 Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp. HCM
  5. NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 79 giöõa nuoâi caáy choài ñôn vaø cuïm choài ôû caû hai kieåu coù daïng calus khaùc nhau (theå hieän ôû baûng 7 vaø hình naép ñaäy vaø maøng milipore, theå hieän ôû baûng 6. So 2). Ñoái vôùi caùc loaøi caây thaân goã, vieäc ra reã trong vôùi ñoái chöùng thì vieäc nuoâi caáy thoaùng khí laøm cho moâi tröôøng in vitro raát khoù khaên, chuû yeáu thöïc choài thaáp hôn veà chieàu cao vaø soá löôïng choài trung hieän ôû moâi tröôøng ex vitro. bình/maãu nhöng choài toát hôn vôùi laù xanh ñaäm. Vôùi noàng ñoä IBA töø 0,25 ñeán 0,5 mg/l (nghieäm Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa IBA vaø NAA ñeán thöùc R2 vaø R3) callus ra vôùi hình daïng xoáp, traéng. söï sinh tröôûng cuûa caây Thuyû tuøng in vitro Vôùi IBA noàng ñoä 0,5mg/l (R3) coù xuaát hieän hình Trong 8 tuaàn nuoâi caáy trong moâi tröôøng coù boå daïng cuûa reã, vôùi chieàu daøi khoaûng 0,2 cm. sung auxin, choài Thuyû tuøng phaùt trieån thaønh caùc Baûng 6. AÛnh höôûng kieåu maøng milipore leân khaû naêng sinh tröôûng vaø phaùt trieån cuûa choài Thuyû tuøng in vitro Maøng milipore Kieåu maãu caáy Chieàu cao trung bình choài (cm) Soá löôïng choài TB/maãu Choài ñôn 1,6 b 1,7 c ÑC Cuïm choài 1,7 a 2,8 a Choài ñôn - - 1 lôùp Cuïm choài - - Choài ñôn 0,9 c 1,2 d 2 lôùp Cuïm choài 0,4 d 2,3 b LSD (0,05) 0,04 0,16 Caùc giaù trò trung bình trong cuøng moät coät coù caùc kyù töï khaùc nhau thì khaùc bieät coù yù nghóa thoáng keâ ôû möùc P ≤ 0,005 Baûng 7. Bieåu hieän taïi goác choài caây Thuyû tuøng in vitro sau khi söû duïng caùc noàng ñoä NAA vaø IBA sau 8 tuaàn nuoâi caáy Kí Nghieäm thöùc Bieåu hieän taïi goác choài nuoâi caáy hieäu NAA (mg/l) IBA (mg/l) R1 - - Callus nhoû, xoáp R2 - 0,25 Callus xanh, xoáp R3 - 0,5 Callus traéng, xoáp, coù daáu hieäu ra reã R4 - 0,75 Callus coù maøu ñoû, xoáp R5 - 1,0 Callus coù maøu ñoû, xoáp R6 - 1,5 Callus coù maøu ñoû, xoáp R7 - 2,0 Callus xanh, chai cöùng R8 - 3,0 Callus xanh, chai cöùng R9 - 4,0 Callus xanh, chai cöùng R10 - 5,0 Callus xanh, chai cöùng R11 0,5 - Callus xanh, chai cöùng R12 1,0 - Callus coù maøu ñoû, xoáp R13 2,0 - Callus coù maøu ñoû, xoáp R14 3,0 - Callus coù maøu ñoû, xoáp R15 4,0 - Callus coù maøu ñoû, xoáp R16 5,0 - Callus xanh, chai cöùng R17 0,5 0,5 Callus xanh, xoáp R18 1,0 0,5 Callus xanh, xoáp R19 1,5 0,5 Callus xanh, xoáp R20 2,0 0,5 Callus xanh, xoáp R21 3,0 0,5 Callus coù maøu ñoû, xoáp Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp. HCM Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 1&2/2007
  6. NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 80 R3 R2 R1 R4 R5 R6 Hình 2. Bieåu hieän taïi goác choài caây Thuyû tuøng in vitro khi söû duïng IBA sau 8 tuaàn nuoâi caáy Khi taêng noàng ñoä IBA leân ñeán töø 0,75 ñeán 1,5 mg/ - So vôùi moâi tröôøng MS, moâi tröôøng WPM phuø l (R4 ñeán R6) thì callus xuaát hieän thaønh cuïc to, saàn hôïp trong vieäc nuoâi caáy moâ caây Thuyû tuøng suøi coù maøu ñoû, khi taêng noàng ñoä IBA leân treân 1,5 mg/l (treân R7) thì callus xuaát hieän thaønh töøng khoái - Moâi tröôøng WPM boå sung 0,5 mg/l BA laø lôùn, maøu xanh, chai cöùng. nghieäm thöùc phuø hôïp cho vieäc nhaân nhanh choài caây Thuyû tuøng in vitro. Khi söû duïng NAA trong nuoâi caáy caây Thuyû tuøng in vitro, coù söï hình thaønh callus ôû cuoái goác choài - Moâi tröôøng nuoâi caáy coù 30 g/l ñöôøng vaø 8 g/l nuoâi caáy. Hình daïng callus laø moät khoái lôùn chöùa agar laø moâi tröôøng phuø hôïp cho söï phaùt trieån choài caây Thuyû tuøng nuoâi caáy in vitro. nöôùc vaø coù maøu ngaû ñoû neáu taêng noàng ñoä leân cao, callus laø caùc cuïc coù hình daïng xanh cöùng. Trong - Nuoâi caáy choài caây Thuyû tuøng in vitro vôùi maøng caùc nghieäm thöùc boå sung auxin NAA hoaøn toaøn khoâng thaáy xuaát hieän reã hoaëc caùc daïng callus traéng, milipore 1 lôùp nhieãm hoaøn toaøn sau 1 tuaàn nuoâi xoáp coù khaû naêng phaùt trieån thaønh reã. caáy. Qua qua trình nghieân cöùu, nhaän thaáy IBA vôùi - Moâi tröôøng WPM boå sung 0,5 mg/l IBA sau 8 noàng ñoä 0,5 mg/l cho keát quaû khaû quan nhaát, treân tuaàn nuoâi caáy xuaát hieän callus traéng, hôi xoáp coù noàng ñoä naøy phaàn lôùn callus sinh ra khoâng coù khaû hình daïng cuûa reã. naêng phaùt trieån thaønh reã. Chính vì vaäy nghieäm thöùc tieáp theo laø coá ñònh noàng ñoä IBA ôû möùc 0,5 - Taêng noàng ñoä IBA leân, xuaát hieän callus coù mg/l vaø boá trí NAA ôû caùc möùc töø 0,5 ñeán 3,0 mg/l. hình daïng khaùc nhau, noàng ñoä IBA leân treân 1,5 mg/l thì callus xuaát hieän thaønh töøng cuïc to, maøu Sau 8 tuaàn, caùc maãu nghieân cöùu xuaát hieän caùc xanh, chai cöùng, nhöõng loaïi callus naøy seõ khoâng coù hình daïng callus khaùc nhau trong ñoù nghieäm thöùc khaû naêng phaùt trieån thaønh reã. 0,5 IBA + 0,5 NAA coù nhieàu khaû naêng phaùt trieån TAØI LIEÄU THAM KHAÛO thaønh reã. Caùc noàng ñoä coøn laïi cho ra caùc loaïi callus vôùi caùc daïng khaùc nhau, khoù phaùt sinh thaønh reã. Phaïm Hoaøng Hoä, 2001. Caây coû Vieät Nam. NXB Treû. KEÁT LUAÄN - Maãu Thuyû tuøng xöû lyù ôû noàng ñoä Javel 2% Traàn Hôïp, 2002. Taøi nguyeân caây goã Vieät Nam. NXB trong 30 phuùt cho keát quaû toát vôùi tyû leä khoâng nhieãm noâng nghieäp. khaù cao laø 70%, khi taêng noàng ñoä leân 3% ñeán 4% trong thôøi gian 30 phuùt seõ gaây cheát maãu. Thôøi gian Mai Xuaân Löông, 2003. Giaùo trình Sinh Lyù Thöïc Vaät. xöû lyù maãu töø 10 ñeán 20 phuùt thì tyû leä nhieãm vaãn Khoa Ñaøo taïo Sau ñaïi hoïc, Tröôøng Ñaïi hoïc Ñaø Laït. cao hôn noàng ñoä 2% trong 30 phuùt. Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 1&2/2007 Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp. HCM
  7. NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 81 Traàn Vaên Minh, 2003. Coâng ngheä Sinh hoïc Thöïc IUCN Red List of Threatened Species. http:// Vaät. Giaùo trình cao hoïc - Nghieân cöùu sinh, Tröôøng www.iucnredlist.org/search/details.php/32312/all Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp. HCM. Kozai, 1991. Autotrophic micropropagation, Nguyeãn Hoaøng Nghóa, 1997. Baûo toàn nguoàn gen Biotechnology in Agriculture and Forestry, High- caây röøng. NXB noâng nghieäp. Tech and Micropropagation I, Bajaj YPS (ed) 17:313-343. Nguyeãn Vaên Uyeån vaø coäng söï, 1993. Nuoâi caáy moâ teá baøo phuïc vuï coâng taùc gioáng caây troàng. NXB Noâng Murashige, Skoog, 1962. A resvised medium for nghieäp Haø Noäi. rapid growth and bioassay with tobacco tissue cultures. Physiol. Plant 15: 475 - 497. Farjon, Thomas, Nguyen Duc To Luu, 2005. Glyptostrobus pensilis. In: IUCN 2006. Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp. HCM Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 1&2/2007
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

LV.09: Bộ Luận Văn Tốt Nghiệp Chuyên Ngành Quản Trị Kinh Doanh
81 tài liệu
1643 lượt tải
THÔNG TIN
TRỢ GIÚP
HỖ TRỢ KHÁCH HÀNG
Theo dõi chúng tôi

Chịu trách nhiệm nội dung:

Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA

LIÊN HỆ

Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM

Hotline: 093 303 0098

Email: support@tailieu.vn

Giấy phép Mạng Xã Hội số: 670/GP-BTTTT cấp ngày 30/11/2015 Copyright © 2022-2032 TaiLieu.VN. All rights reserved.

 

Đồng bộ tài khoản
2=>2