zunia.vn

Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z

zunia.vn

» Luận Văn - Báo Cáo

» Báo cáo khoa học

BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC KỸ THUẬT: NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY DỨA CAYENNE (Ananas comosus L.) BẰNG NUÔI CẤY TẾ BÀO LỚP MỎNG

Chia sẻ: Linh Ha | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:3

Báo xấu

167
lượt xem 28
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Thí nghiệm được thực hiện tại Trung tâm Công nghệ Sinh học trường ĐH Nông Lâm TP.HCM từ tháng 8 đến tháng 12/2002. Các mẫu cấy dùng trong thí nghiệm là chồi dứa in vitro được nhân lên từ chồi ngọn giống dứa Cayenne nhập nội lấy tại Nông trường Thọ Vực – Đồng Nai, sử dụng tế bào lớp mỏng của phần thân dày 0,3 - 0,5mm, đường kính 3-5mm.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC KỸ THUẬT: NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY DỨA CAYENNE (Ananas comosus L.) BẰNG NUÔI CẤY TẾ BÀO LỚP MỎNG

NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 33 NHAÂN GIOÁNG IN VITRO CAÂY DÖÙA CAYENNE (Ananas comosus L.) BAÈNG NUOÂI CAÁY TEÁ BAØO LÔÙP MOÛNG IN VITRO PROPAGATION OF PINEAPPLE (ANANAS COMOSUS L.) THROUGH THIN CELL LAYER CULTURE. Nguyeãn Thò Thu Haèng, Mai Minh Trí, Traàn Thò Dung Trung taâm Coâng ngheä Sinh hoïc Ñaïi hoïc Noâng Laâm Tp.HCM Tel: 8961712, Email: ttdung@hcmuaf.edu.vn SUMMARY VAÄT LIEÄU VAØ PHÖÔNG PHAÙP Pineapple micropropagation by using thin cell Thí nghieäm ñöôïc thöïc hieän taïi Trung taâm Coâng layer technique was studied. Traverse thin cell ngheä Sinh hoïc tröôøng ÑH Noâng Laâm TP.HCM töø layer explants excised from the stem of in vitro thaùng 8 ñeán thaùng 12/2002. plants (var. Smooth Cayenne) were cultured on a modified solid MS medium supplemented with 2,4- Caùc maãu caáy duøng trong thí nghieäm laø choài döùa D and Kinetin. Maximum regeneration was in vitro ñöôïc nhaân leân töø choài ngoïn gioáng döùa obtained with 0.1 mg.l-1 2,4-D and 0.1 mg.l-1 Kinetin Cayenne nhaäp noäi laáy taïi Noâng tröôøng Thoï Vöïc – as early as within 9 days. The best rooting occurred Ñoàng Nai, söû duïng teá baøo lôùp moûng cuûa phaàn thaân at 2 mg.l -1 I BA. Plantlets were successfully daøy 0,3 - 0,5mm, ñöôøng kính 3-5mm. Moâi tröôøng transferred in the greenhouse. nuoâi caáy theo MS (Murashige vaø Skoog, 1962) vôùi caùc chaát kích thích sinh tröôûng thay ñoåi theo töøng MÔÛ ÑAÀU thí nghieäm. Caây Döùa (Ananas comosus L.) laø moät trong caùc Caùc thí nghieäm ñöôïc boá trí theo kieåu hoaøn toaøn loaïi caây aên quaû chuû ñaïo cuûa ngaønh rau quaû Vieät ngaãu nhieân ñôn yeáu toá, 3 laàn laëp laïi. Thí nghieäm Nam. ÔÛ nöôùc ta, döùa troàng chuû yeáu ñeå aên töôi, coâ veà khaû naêng taùi sinh choài döùa goàm 4 nghieäm thöùc ñaëc vaø laøm nöôùc eùp ñoùng hoäp xuaát khaåu. Gioáng keát hôïp 2.4D vaø Kinetin (mg.l-1) laø: 0-0 (ñoái chöùng); döùa Cayenne (chieám > 80% dieän tích döùa toaøn theá 0,05-0,05; 0,1-0,1 vaø 0,5-0,5 (toång soá maãu caáy laø giôùi) raát phuø hôïp cho vieäc cheá bieán ñoà hoäp, nhöng 180). Thí nghieäm veà khaû naêng ra reã cuûa choài döùa nhöôïc ñieåm chuû yeáu cuûa gioáng naøy laø heä soá nhaân goàm 5 nghieäm thöùc IBA (mg.l-1) laø: 0 (ñoái chöùng); choài thaáp. Ñeå cung caáp cho 1 ha döùa caàn 50.000 – 1; 1,5; 2 vaø 2,5 (toång soá maãu caáy laø 90). 60.000 choài gioáng thì caùc phöông phaùp nhaân gioáng coå truyeàn khoù coù theå taïo ra moät soá löôïng lôùn choài KEÁT QUAÛ VAØ THAÛO LUAÄN ñoàng ñeàu cuøng luùc. Vì leõ ñoù, aùp duïng kyõ thuaät nhaân AÛnh höôûng cuûa noàng ñoä 2,4D vaø Kinetin ñeán gioáng in vitro laø ñieàu caàn thieát ñeå ñaùp öùng ñöôïc khaû naêng taùi sinh choài in vitro töø teá baøo lôùp yeâu caàu naøy. moûng caây döùa Cayenne Teá baøo lôùp moûng (TCLS - Thin cell layers) laø moät phaàn coù kích thöôùc nhoû laáy töø caùc moâ thöïc Caùc cytokinin ñoùng vai troø raát quan troïng trong vaät, ñöôïc caét theo chieàu doïc hay chieàu ngang cuûa nuoâi caáy moâ thöïc vaät, chuùng kích thích söï phaân nhöõng cô quan khaùc nhau nhö thaân, laù, reã, caên chia teá baøo, giuùp cho söï sinh taïo cô quan vaø phaân haønh, caùc boä phaän cuûa hoa…. Phöông phaùp nuoâi hoùa choài ñöôïc deã daøng. Theâm vaøo ñoù, söï coù maët caáy teá baøo lôùp moûng ñaõ ñöôïc aùp duïng vaøo vieäc cuûa auxin ñaõ thuùc ñaåy vieäc phaân chia teá baøo. nghieân cöùu söï phaùt sinh hình thaùi vaø söï phaân hoùa Veà thôøi gian xuaát hieän choài: ÔÛ noàng ñoä 0,1 - 0,5 phoâi sinh döôõng ôû nhieàu loaïi caây vôùi öu ñieåm laø ruùt ngaén thôøi gian taùi sinh choài, toác ñoä nhaân gioáng mg.l-1 2,4D vaø 0,1 - 0,5 mg.l-1 Kinetin, thôøi gian nhanh, coù theå nhaân gioáng moät soá loaïi caây khoù nuoâi naûy choài laø sôùm nhaát (8,6 ngaøy vaø 9,3 ngaøy), giöõa caáy trong oáng nghieäm. chuùng coù söï khaùc bieät khoâng coù yù nghóa veà maët thoáng keâ nhöng laïi khaùc bieät raát coù nghóa khi so Muïc tieâu cuûa ñeà taøi laø xaùc ñònh aûnh höôûng cuûa vôùi ñoái chöùng vaø noàng ñoä coøn laïi. caùc chaát kích thích sinh tröôûng ñeán khaû naêng taùi sinh, nhaân choài vaø ra reã cuûa caây döùa Cayenne in Veà tyû leä maãu taùi sinh (baûng 1): ÔÛ noàng ñoä vitro qua nuoâi caáy teá baøo lôùp moûng, nhaèm nhaân 0,1mg.l-1 2,4D vaø 0,1mg.l-1 Kinetin, soá maãu teá baøo nhanh gioáng döùa phuïc vuï cho vieäc môû roäng caùc lôùp moûng taùi sinh cao nhaát (89%) vaø thaáp nhaát laø vuøng nguyeân lieäu döùa trong nöôùc. nghieäm thöùc ñoái chöùng (58%). Ñaïi hoïc Noâng Laâm TP. HCM Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 2/2003
NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 34 Baûng 1. AÛnh höôûng cuûa noàng ñoä 2,4D vaø Kinetin ñeán khaû naêng taùi sinh choài in vitro töø teá baøo lôùp moûng caây döùa Cayenne Noàng ñoä((mg.l-1) Thôøi gian naûy choài Nghieäm thöùc Tyû leä maãu taùi sinh (%) (ngaøy) 2,4D Kinetin 10,7 a 1(ÑC) 0 0 58 9,7b 2 0,05 0,05 60 8,6c 3 0,1 0,1 89 9,3bc 4 0,5 0,5 82 CV (%) 2,30 6,54 Caùc giaù trò trung bình treân cuøng 1 coät theo sau khoâng cuøng kyù töï thì coù söï khaùc bieät raát coù yù nghóa veà maët thoáng keâ ôû möùc ñoä 0,01 döïa treân traéc nghieäm phaân haïng LSD. Baûng 2. AÛnh höôûng cuûa noàng ñoä 2,4D vaø Kinetin ñeán heä soá nhaân choài töø teá baøo lôùp moûng caây döùa Cayenne in vitro Noàng ñoä((mg.l-1) Heä soá nhaân Nghieäm thöùc 2,4D Kinetin 10 ngaøy 20 ngaøy 30 ngaøy 1,21b 1,22d 2,00c 1 (ÑC) 0 0 1,34b 1,71c 2,39c 2 0,05 0,05 b a 4,08a 3 0,1 0,1 2,34 3,09 b b 3,37b 4 0,5 0,5 1,28 2,56 CV (%) 4,79 7,34 6,09 Baûng 3. AÛnh höôûng cuûa noàng ñoä IBA ñeán thôøi gian ra reã, soá reã vaø chieàu daøi reã cuûa choài taùi sinh töø teá baøo lôùp moûng caây döùa Cayenne in vitro Noàng ñoä IBA Chæ tieâu (mg.l-1) Thôøi gian ra reã (NSC) Chieàu daøi reã (cm) Soá reã (reã) 6,8ab 3,18b 3,45c 0 5,8bc 4,26a 4,84b 1 c 4,37a 4,84b 1,5 5,5 c 4,49a 5,89a 2 5,2 7,3a 2,40c 5,84a 2,5 CV (%) 6,66 7,38 7,00 AÛnh höôûng cuûa noàng ñoä IBA ñeán söï taïo reã Veà heä soá nhaân choài (baûng 2): ÔÛ noàng ñoä 0,1 mg.l- cuûa choài taùi sinh töø lôùp teá baøo moûng caây döùa 2,4 D vaø 0,1 mg.l-1 Kinetin, heä soá nhaân choài cao 1 Cayenne in vitro (Baûng 3) nhaát ôû taát caû caùc laàn theo doõi (ñaït 4,08 choài/maãu sau 30 ngaøy nuoâi caáy), coù söï khaùc bieät raát coù yù nghóa veà maët thoáng keâ so vôùi ñoái chöùng vaø caùc noàng ñoä Trong söï hình thaønh reã ñaëc bieät laø reã baát ñònh, coøn laïi. auxin coù taùc duïng raát ñaëc tröng, söû duïng IBA thuoäc nhoùm auxin ñeå kích thích ra reã nhaèm cho caây ra reã Nhö vaäy, thöïc hieän nuoâi caáy teá baøo lôùp moûng sôùm, soá reã nhieàu töø ñoù ruùt ngaén ñöôïc thôøi gian taïo reã trong moâi tröôøng coù boå sung noàng ñoä 2,4 D vaø trong oáng nghieäm tröôùc khi ñem ra ngoaøi vöôøn öôm. Kinetin thích hôïp ñaõ xuùc tieán quaù trình taùi sinh Veà thôøi gian ra reã: Noàng ñoä IBA = 2 mg.l-1 cho thôøi choài ruùt ngaén thôøi gian taïo vaät lieäu ban ñaàu ñoàng thôøi taêng heä soá nhaân choài. Noàng ñoä 0,1mg.l-1 2,4D gian xuaát hieän reã sôùm nhaát (5,2 ngaøy), coù söï khaùc bieät raát vaø 0,1mg.l-1 Kinetin cho thôøi gian xuaát hieän choài coù yù nghóa veà maët thoáng keâ so vôùi ñoái chöùng nhöng söï sôùm nhaát, tæ leä maãu taùi sinh cao nhaát vaø heä soá khaùc bieät khoâng coù yù nghóa khi so vôùi noàng ñoä IBA=1,5 nhaân cao nhaát. mg.l-1 vaø IBA = 1 mg.l-1. Noàng ñoä IBA = 2,5 mg.l-1 cho thôøi gian ra reã chaäm nhaát (7,3 ngaøy). Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 2/2003 Ñaïi hoïc Noâng Laâm TP. HCM
NGHIEÂN CÖÙU KHOA HOÏC KYÕ THUAÄT 35 Baûng 4. AÛnh höôûng cuûa caùc phöông phaùp caáy ñeán thôøi gian xuaát hieän choài vaø heä soá nhaân choài caây döùa Cayenne in vitro Thôøi gian Heä soá Toång soá Moâi tröôøng Phöông phaùp nuoâi caáy xuaát hieän choài nhaân choài choài/choài thích hôïp (ngaøy) (choài/maãu caáy) ñôn MS+BA (2mg.l-1) Choài ñôn coù huûy ñænh 13,7 11,00 11,00 (*) -1 Choài ñôn khoâng huûy ñænh MS+BA (3mg.l ) 20,8 3,78 3,78 (*) MS+2,4D(0,1mg.l-1) Teá baøo lôùp moûng 8,6 4,08 20,40 (**) +Kinetin(0,1mg.l-1) (*). sau 60 ngaøy nuoâi caáy (**). sau 30 ngaøy nuoâi caáy Veà chieàu daøi reã: Noàng ñoä IBA = 1,5-2 mg.l-1 cho ñöôïc cao hôn. Ñieàu ñoù cho thaáy raèng, söû duïng phöông chieàu daøi reã daøi nhaát (4,26- 4,49cm), söï khaùc bieät phaùp nuoâi caáy teá baøo lôùp moûng thì thu ñöôïc heä soá naøy khoâng coù yù nghóa veà maët thoáng keâ nhöng raát nhaân choài cao hôn nuoâi caáy choài ñôn vaø cuõng ruùt ngaén coù yù nghóa khi so saùnh vôùi ñoái chöùng. Noàng ñoä IBA ñöôïc thôøi gian taïo choài töø ñoù taêng soá laàn caáy chuyeàn = 2,5 mg.l-1 cho chieàu daøi reã ngaén nhaát (2,40 cm). vaø taïo ra ñöôïc soá löôïng lôùn caây ñoàng ñeàu cuøng luùc. Veà soá reã: Noàng ñoä IBA = 2-2,5 mg.l-1 cho soá reã Söï xuaát hieän choài ôû phöông phaùp nuoâi caáy teá baøo nhieàu nhaát (5,84 -5,87 reã), söï khaùc bieät naøy khoâng lôùp moûng sôùm hôn khi so saùnh vôùi phöông phaùp nuoâi coù yù nghóa veà maët thoáng keâ nhöng raát coù yù nghóa caáy choài ñôn Maëc duø soá choài/lôùp teá baøo moûng thaáp khi so saùnh vôùi ñoái chöùng. hôn soá choài/choài ñôn coù huûy ñænh nhöng toång soá choài töø 5 lôùp teá baøo moûng cuûa 1choài ñôn thì cao hôn. Ñieàu AÛnh höôûng cuûa noàng ñoä IBA raát khaùc nhau ñeán thôøi ñoù cho thaáy raèng, söû duïng phöông phaùp nuoâi caáy teá gian xuaát hieän reã, chieàu daøi reã, soá reã cuûa choài döùa taùi sinh baøo lôùp moûng thì thu ñöôïc heä soá nhaân choài cao hôn töø lôùp teá baøo lôùp moûng. Khi noàng ñoä IBA taêng 0-2mg.l-1 nuoâi caáy choài ñôn vaø cuõng ruùt ngaén ñöôïc thôøi gian taïo thì soá reã taêng, chieàu daøi reã taêng nhöng khi noàng ñoä IBA choài töø ñoù taêng soá laàn caáy chuyeàn vaø taïo ra ñöôïc soá vöôït quaù 2 mg.l-1 thì soá reã taêng nhöng chieàu daøi reã giaûm löôïng lôùn caây ñoàng ñeàu cuøng luùc. ñaùng keå vaø thôøi gian ra reã cuõng keùo daøi hôn. KEÁT LUAÄN Caây döùa in vitro ngoaøi vöôøn öôm Nuoâi caáy teá baøo lôùp moûng ñaõ xuùc tieán khaû naêng Sau khi taïo caây döùa Cayenne in vitro hoaøn chænh nhaân choài, ruùt ngaén thôøi gian taïo choài caây döùa (caây ñaït chieàu cao 4-5 cm, 5-6 laù vaø caây coù 4-5 reã), Cayenne trong oáng nghieäm. Moâi tröôøng thích hôïp chuùng toâi tieán haønh chuyeån caây ra vöôøn öôm troàng nhaát cho vieäc nuoâi caáy teá baøo lôùp moûng caây döùa thöû nghieäm. Ñieàu kieän töï nhieân ngoaøi nhaø löôùi hoaøn Cayenne laø moâi tröôøng MS coù boå sung 0,1 mg.l-1 toaøn khaùc haún vôùi ñieàu kieän trong nuoâi caáy in vitro 2,4D vaø 0,1mg.l-1 Kinetin trong nhaân choài vaø IBA nhö nhieät ñoä cao, aùnh saùng maïnh, aåm ñoä thaáp, vaø = 2 mg.l-1 trong taïo reã, giuùp taïo ra ñöôïc soá löôïng dinh döôõng thaáp neân caây con deã bò maát nöôùc vaø mau lôùn caây ñoàng ñeàu trong thôøi gian ngaén. bò heùo. Caây döùa Cayenne in vitro ñaõ ñöôïc troàng trong TAØI LIEÄU THAM KHAÛO baàu ñaát (1/3 ñaát +1/3xô döøa +1/3 phaân chuoàng hoai), ñaët vaøo nhaø löôùi trong ñieàu kieän coù che maùt 50% vaø BUI VAN LE, DUONG TAN NHUT, 2000. Thin cell töôùi phun söông thöôøng xuyeân. Sau 30 ngaøy ra baàu layer morphogenesis in ornamental species . ñaát, tæ leä caây soáng ñaït 70%, trung bình chieàu cao ñaït 9,5 cm vaø soá laù ñaït 11 laù/caây Biotechnology in Horticultural and Plantation Crops. So saùnh phöông phaùp nuoâi caáy choài ñôn vaø NGUYEN QUANG THACH et al., 2001. Improving teá baøo lôùp moûng caây döùa Cayenne (Baûng 4) micropropagation technology on pineapple by using thin cell layers, apical dominance breaking and hydroponic method. International workshop on Söï xuaát hieän choài ôû phöông phaùp nuoâi caáy teá baøo lôùp moûng sôùm hôn khi so saùnh vôùi phöông phaùp nuoâi Biology. HaNoi-VietNam, 391-395.. caáy choài ñôn cuøng ñöôïc thöïc hieän trong moâi tröôøng MIGUEL PEDRO GUERRA et al., 2000. Improving nuoâi caáy thích hôïp cuûa töøng loaïi maãu caáy. Maëc duø soá pineapple micropropagation protocol through choài/lôùp teá baøo moûng thaáp hôn soá choài/choài ñôn coù huûy ñænh nhöng ñoaïn thaân caây döùa Cayenne in vitro explant size and medium composition manipulation. seõ caét ñöôïc 5 lôùp teá baøo moûng neân toång soá choài ñaït Fruits 56 (143-154). CIRAD, EDP Sciences. Ñaïi hoïc Noâng Laâm TP. HCM Taïp chí KHKT Noâng Laâm nghieäp, soá 2/2003

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

LV.15: Bộ Đồ Án Tốt Nghiệp Chuyên Ngành Cơ Khí

65 tài liệu

2428 lượt tải

THÔNG TIN

TRỢ GIÚP

HỖ TRỢ KHÁCH HÀNG

Theo dõi chúng tôi

Chịu trách nhiệm nội dung:

Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA

LIÊN HỆ

Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM

Hotline: 093 303 0098

Email: support@tailieu.vn

Giấy phép Mạng Xã Hội số: 670/GP-BTTTT cấp ngày 30/11/2015 Copyright © 2022-2032 TaiLieu.VN. All rights reserved.