Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Xác định sự khuếch đại gen MYCN ở bệnh nhân u nguyên bào thần kinh bằng kĩ thuật lai huỳnh quang tại chỗ

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI<br /> TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN<br /> <br /> <br /> NGUYỄN XUÂN HUY<br /> <br /> XÁCĐỊNH SỰ KHUẾCH ĐẠI GEN MYCN<br /> Ở BỆNH NHÂN U NGUYÊN BÀO THẦN KINH<br /> BẰNG KỸ THUẬT LAI HUỲNH QUANG TẠI CHỖ<br /> <br /> LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC<br /> NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC:<br /> PGS. TS. Nguyễn Thị Hồng Vân<br /> <br /> Hà Nội– Năm 2016<br /> <br /> ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI<br /> TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN<br /> <br /> <br /> NGUYỄN XUÂN HUY<br /> <br /> XÁCĐỊNH SỰ KHUẾCH ĐẠI GEN MYCN<br /> Ở BỆNH NHÂN U NGUYÊN BÀO THẦN KINH<br /> BẰNG KỸ THUẬT LAI HUỲNH QUANG TẠI CHỖ<br /> Chuyên ngành: Di truyền học<br /> Mã số: 60 42 01 21<br /> LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC<br /> NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC:<br /> PGS. TS. Nguyễn Thị Hồng Vân<br /> <br /> Hà Nội– Năm 2016<br /> <br /> Lời cảm ơn<br /> Đề tài luận văn này đƣợc thực hiện tại Khoa Di Truyền và Sinh học phân tử<br /> bệnh viện NHI TW.<br /> Đầu tiên tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành nhất đến PGS.TS. Nguyễn Thị<br /> Hồng Vân, chủ nhiệm bộ môn Di truyền học, khoa Sinh học, trƣờng Đại học Khoa<br /> học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội. Cô đã hết lòng quan tâm, hƣớng dẫn, chỉ<br /> bảo tận tình trong suốt quá trình nghiên cứu vừa qua. Mỗi lúc gặp khó khăn, cô luôn<br /> động viên, giúp đỡ tìm ra những cách giải quyết hợp lý nhất. Sự giúp đỡ và hƣớng<br /> dẫn nhiệt tình của cô đã giúp tôihoàn thành đƣợcluận văn tốt nghiệp này.<br /> Tôi xin đƣợc cảm ơn các đồng nghiệp trong khoa Di Truyền và Sinh học<br /> phân tử – Bệnh viện Nhi TW đã nhiệt tình giúp đỡtrong thời gian tôi thực hiện đề<br /> tài nghiên cứu của mình.<br /> Tôi cũng xin chân thành cảm ơn các thầy cô khoa Sinh học, trƣờng Đại học<br /> khoa học tự nhiên đã giảng dạy và tạo điều kiện tốt nhất để tôi có thể thực hiện tốt<br /> việc nghiên cứu của mình.<br /> Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn tới bố mẹ, gia đình và bạn bè đã luôn giúp<br /> đỡ, ủng hộ tôi trong suốt thời gian qua.<br /> Tôi xin chân thành cảm ơn!<br /> <br /> Hà Nội, ngày …… tháng …… năm 2016<br /> <br /> Học viên<br /> <br /> Nguyễn Xuân Huy<br /> <br /> MỤC LỤC<br /> <br /> DANH MỤC KÍ HIỆU VÀ VIẾT TẮT......................................................................1<br /> DANH MỤC BẢNG ...................................................................................................2<br /> DANH MỤC HÌNH ....................................................................................................3<br /> MỞ ĐẦU .....................................................................................................................4<br /> CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .....................................................................6<br /> 1.1<br /> <br /> Lịch sử nghiên cứu ......................................................................................6<br /> <br /> 1.2<br /> <br /> Bệnh u nguyên bào thần kinh ......................................................................6<br /> <br /> 1.2.1<br /> <br /> Đặc điểm lâm sàng ..................................................................................6<br /> <br /> 1.2.2<br /> <br /> Phân loại u NBTK ..................................................................................8<br /> <br /> 1.2.3<br /> <br /> Phân loại giai đoạn u NBTK ...................................................................9<br /> <br /> 1.2.4<br /> <br /> Một số yếu tố tiên lƣợng của u NBTK ..................................................10<br /> <br /> 1.3<br /> <br /> Các biến đổi di truyền liên quan đến bệnh u nguyên bào thần kinh .........14<br /> <br /> 1.3.1<br /> <br /> Khuếch đại gen MYCN.........................................................................14<br /> <br /> 1.3.2<br /> <br /> Các bất thƣờng nhiễm sắc thể ...............................................................17<br /> <br /> 1.4<br /> <br /> Mô hình di truyền trong u NBTK .............................................................19<br /> <br /> 1.5<br /> <br /> Tính cấp thiết của đề tài ............................................................................20<br /> <br /> CHƢƠNG 2. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ........................21<br /> 2.1<br /> <br /> Đối tƣợng nghiên cứu................................................................................21<br /> <br /> 2.2<br /> <br /> Hóa chất thiết bị ........................................................................................22<br /> <br /> 2.2.1<br /> <br /> Hóa chất ................................................................................................22<br /> <br /> 2.2.2<br /> <br /> Trang thiết bị .........................................................................................22<br /> <br /> 2.3<br /> <br /> Phƣơng pháp nghiên cứu...........................................................................22<br /> <br /> 2.3.1<br /> <br /> Nuôi cấy tế bào mẫu bệnh phẩm tủy xƣơng .........................................22<br /> <br /> 2.3.2<br /> <br /> Phản ứng lai huỳnh quang tại chỗ .........................................................23<br /> <br /> 2.4<br /> <br /> Đạo đức trong nghiên cứu .........................................................................24<br /> <br /> CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN...............................................................26<br /> 3.1<br /> <br /> Xác định khuếch đại gen MYCN trên bệnh nhân u NBTK bằng kỹ thuật lai<br /> <br /> huỳnh quang tại chỗ (FISH) ..................................................................................26<br /> 3.2<br /> <br /> Đánh giá khuếch đại gen MYCN với một số yếu tố tiên lƣợng khác ........31<br /> <br /> 3.2.1<br /> <br /> Tỷ lệ khuếch đại gen MYCN theo tuổi .................................................31<br /> <br /> 3.2.2<br /> <br /> Tỷ lệ khuếch đại gen MYCN theo giới tính..........................................33<br /> <br /> 3.2.3<br /> <br /> Tỷ lệ khuếch đại gen MYCN theo mô bệnh học ..................................34<br /> <br /> KẾT LUẬN ...............................................................................................................39<br /> KIẾN NGHỊ ..............................................................................................................40<br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO .........................................................................................41<br /> <br />