Nối tiếp phần 1, phần 2 của tập bài giảng Thực hành Ký sinh trùng gồm 4 bài cuối, tiếp tục cung cấp cho sinh viên những nội dung, kiến thức về: kỹ thuật xét nghiệm phân tìm ký sinh trùng; hình thể giun - hình dạng sán; hình thể đơn bào đường ruột; hình ảnh vi nấm;... Mời các bạn cùng tham khảo chi tiết nội dung bài giảng!
AMBIENT/
Chủ đề:
Nội dung Text: Bài giảng Thực hành Ký sinh trùng: Phần 2 - Trường ĐH Võ Trường Toản
- Bài. 5
KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM PHÂN TÌM KÝ SINH TRÙNG
Mục tiêu
Mô tả được quy trình xét nghiệm phân
Làm được tiêu bản phân bằng phương pháp trực tiếp
Phát hiện được những sai lầm trong thao tác xét nghiệm phân trực tiếp
1. Khái quát
Trong phòng xét nghiệm, khi nhận được bệnh phẩm, nếu là phân tươi không có
chất bảo quản, chúng ta cần quan sát bằng mắt (đại thể) trước để có những nhận xét sơ
bộ về mẫu phân, ghi nhận những đặc tính của mẫu phân, phân loại bệnh phẩm xét
nghiệm: mẫu phân lỏng, có chất nhày, máu phải xét nghiệm ngay
Không nên để phân ngoài trời, không có nắp đậy; không nên để lọ phân trên
phiếu xét nghiệm hoặc để dồn mẫu vào cuối buổi mới xét nghiệm
Đối với phân được bảo quản trong dung dịch cố định thì quan sát đại thể
không thực hiện được
Để phát hiện được KST chúng ta cần phải dùng kính hiển vi để quan sát (vi thể)
1.1. Quan sát đại thể
Quan sát đại thể (bằng mắt hoặc kính lúp) để ghi nhận trạng thái, màu sắc các
chất lạ, tìm kiếm và xác định các loại giun, sán được thải ra theo phân
1.1.1. Trạng thái phân
Phân có thể ở các trạng thái:
Cứng rắn (khó đâm thủng)
Cứng (đâm thủng được)
Mềm (cắt được)
Nhão (có thể bị biến dạng)
Lỏng
Lỏng như nước
1.1.2. Màu sắc
Thay đổi từ đen, nâu đậm, nâu, nâu nhạt, vàng, xanh, màu đất sét hay đôi khi
đỏ, trắng
44
- 1.1.3. Các chất lạ
Chất nhày: thường đục, có thể kết thành sợi, hình dáng giống như ký sinh tùng.
Chất này được xem xét cẩn thận để tìm các đơn bào, các trứng Schistosoma.
Mô liên kết: màu trắng như xà cừ. Xem dưới kính hiển vi sau khi làm trong với
acid acetic sẽ thấy những sợi dài
Máu: chỉ cần ghi nhận sự hiện diện máu tươi hoặc đã được tiêu hóa làm phân
có màu đen đều
Mũ: gồm có nhiều bạch cầu đã biến dạng
Các cặn bã thực vật chưa tiêu hóa, thường dưới hình thức sợi
1.2. Quan sát vi thể
Quan sát vi thể có thể được thực hiện với kỹ thuật xét nghiệm phân trực tiếp,
tập trung KST trong phân, kỹ thuật chuyên biệt, cấy và nhuộm cố định
2. Kỹ thuật xét nghiệm phân trực tiếp
Kỹ thuật xét nghiệm phân trực tiếp sử dụng phân hòa tan trong nước muối cho
phép phát hiện sự di động của thể hoạt đơn đơn bào, trứng giun, sán, ấu trùng giun và
các vật thể bất thường trong phân (hồng cầu, bạch cầu,…)
Ưu điểm:
Đơn giản
Cho kết quả nhanh chóng và chính xác
Không đòi hỏi dụng cụ, hóa chất đắt tiền
Nhược điểm:
Độ nhạy thấp
2.1. Dụng cụ
Kính hiển vi
Lam kính, lá kính
Viết chì sáp
Khăn vải
Bình đựng dung dịch sát trùng
Kẹp
2.2. Hóa chất
NaCl 0.85%
Lugol 1%
45
- Dung dịch sát trùng
2.3. Quy trình làm tiêu bản phân
Lấy một tấm lam kính sạch, khô. Dùng viết chì chia lam kính ra làm 3 phần.
Ghi tên bệnh nhân vào ô nhỏ ở đầu lam kính
Nhỏ lên lam kính 1 giọt NaCl 0.85% vào ô giữa, 1 giọt Lugol ở ô cuối
Dùng que gỗ lấy một ít phân bằng đầu que diêm, hòa tan phân vào giọt NaCl
0.85%
Lấy phân lần thứ hai rồi hòa tan phân vào giọt Lugol
Bỏ que gỗ vào dung dịch sát trùng
Đậy lá kính lên 2 giọt phân
Khảo sát tiêu bản dưới kính hiển vi
46
- 2.4. Tiêu chuẩn của một tiêu bản tốt
Không quá dày: phân nhiều sẽ làm tiêu bản đục tối, che lấp KST, khó phát hiện
Không quá mỏng: ít phân quá sẽ không tìm thấy KST, trừ khi chúng quá nhiều
Tiêu bản có độ dày vừa phải khi thấy được chữ in trên tờ bào đặt dưới tiêu bản
Tiêu bản không có bọt khí, dung dịch phân tràn ra quanh lá kính
2.5. Khảo sát tiêu bản dưới kính hiển vi
Khảo sát tiêu bản phân bằng vật kính x10, khi muốn nhìn rõ chi tiết thì chuyển
sang vật kính x40
Khảo sát mẫu phân theo hình zic zac để không bỏ sót vi trường nào
Lưu ý:
Nên để ánh sáng vừa phải
Mẫu phân được xét nghiệm càng sớm càng tốt, để lâu KST sẽ chết hoặc thay
đổi hình dạng, khó xác định
Mẫu phân tìm trứng giun, sán: không để quá 10 giờ
Mẫu phân tìm đơn bào: không để quá 2 giờ
2.6. Những sai lầm nên tránh
Phết phân không đều, chỗ dày, chỗ mỏng
Nếu phết phân loãng quá hoặc đặc quá, nên bỏ đi, làm lại phết phân khác
Đậy lá kính làm tiêu bản có bọt khí
Dung dịch phân tràn ra xung quanh lá kính
Quên không đặt lá kính kên phết phân thì phết phân sẽ chóng khô, vật kính bị
bẩn và màu nhuộm sẽ nhạt rất nhanh
Dùng nước thường để hòa tan phân thay vì dùng dung dịch NaCl 0.85%, nước
thường sẽ làm biến dạng hay hủy hoại thể hoạt động của đơn bào
Dùng nhiều ánh sáng quá. Nên để tụ kính gần với bàn kính. Giảm ánh sáng
bằng cách đóng bớt màng chắn sáng hay dùng kính lọc màu xanh da trời lấy ánh sáng.
47
- 2.7. Cách trả lời kết quả xét nghiệm phân
Trên phiếu trả lời kết quả xét nghiệm phân, phải ghi các nội dung sau:
Đặc tính của phân: phân cứng, mềm, nhão, có khuôn, lỏng,…
Màu sắc của phân: vàng, xanh, nâu, đen,…
Các yếu tố bắt thường thấy được bằng mắt: chất nhày, máu, đốt sán,…
Kết quả:
Âm tính: tìm không thấy trứng và bào nang của KST đường ruột
Dương tính viết ra các chi tiết sau:
Tên tiếng việt và tên khoa học của KST
Trứng, thể hoạt động, bào nang, ấu trùng
Mật dộ nhiễm trên tiêu bản:
Ít: (+) từ 1 – 2 trứng/tiêu bản
Vừa: (++) từ 3 – 5 trứng/tiêu bản
Nhiều: (+++), (++++) > 6 trứng/tiêu bản
Ví dụ: tìm thấy trứng giun đũa (Ascaris lumbricoides): (+)
2.8. Cách xử lý dụng cụ đã dùng và bệnh phẩm
2.8.1. Bệnh phẩm và que xét nghiệm
Sau khi xét nghiệm xong, cho lọ đựng phân và que xét nghiệm vào dung dịch
sát trùng rồi hấp tiệt trùng trước khi bỏ. Nếu không có lò hấp, có thể nấu sôi 30 phút
hoặc chôn vào hố sâu.
2.8.2. Dụng cụ
Lam kính: cho vào dung dịch sát trùng, hấp khử trùng, rửa nước thường cho
sạch, ngâm xà bông, rửa sạch, ngâm trong dung dịch acid sulfochromic 24 giờ. Rửa lại
bằng nước thường, tráng lại bằng nước cất, sấy khô
Lá kính: rửa tương tự như lam kính nhưng chỉ sấy khô ở 600C
3. Kỹ thuật nhuộm Ziehl-Neelsen cải tiến
3.1. Mô tả
Các trùng bào tử đường ruột (Cryptosporidium, Cyclospora…) khó được xác
định bằng cách soi phân trực tiếp. Vì vậy, người ta dùng phương pháp nhuộm để tạo
sự tương phản giữa màu của KST và nền cặn bã phân.
Kỹ thuật nhuôm Ziehl-Neelsen cải tiến được dùng dựa trên đặc điểm kháng
acid của các KST này. Nguyên tắc của kỹ thuật này là nhuộm tiêu bản phân bằng
48
- carbon fuchsin sau đó tẩy màu và nhuộm nền tiêu bản bằng màu xanh. Do có tính
kháng acid nên các trùng bào tử giữ lại màu hồng của fuschin.
Kỹ thuật nhuộm Ziel-Neelsen cải tiến có thể áp dụng cho phân tươi, hoặc phân
được cố định trong formol, hoặc các loại bệnh phẩm khác như dịch hút tá tràng, mật,
đàm.
3.2. Dụng cụ
Kính hiển vi
Lam kính
Giá đựng lam kính
Que tăm bông
Găng tay
3.3. Hóa chất
Methanol
Carbon-fuchsin
Acid chlorhydric
Cồn ethylic 950
Xanh malachit 1% hoặc xanh methylen 1%
3.3.1. Pha carbon fuchsin
Dung dịch A:
Fuchsin 0.3g
Cồn ethylic 950 10ml
Dung dịch B:
Phenol tinh thể 5g
Nước cất 100ml
Trộn 10ml dung dịch A với 90ml B lại với nhau
Bảo quản được 1 năm ở nhiệt độ phòng
3.3.2. Pha dung dịch xanh malachit
Xanh malachit 1g
Nước cất 100ml
Có thể thay xanh malachit bằng xanh methylen
Bảo quản được 1 năm ở nhiệt độ phòng
3.4. Quy trình nhuộm
49
- Làm phết phân mỏng trên lam kính
Để khô ngoài không khí
Cố định bằng methanol trong 5 phút
Để khô ngoài không khí
Nhuộm với carbon-fuchsin trong 5 phút
Rửa lam kính với nước
Tẩy màu bằng cồn – acid chlorhydric cho tới khi màu không trôi ra nửa
Rửa dưới vòi nước chảy
Nhuộm tiêu bản với 1% xanh malachit trong 30 giây
Rửa tiêu bản dưới vòi nước. Để cho khô
Quan sát tiêu bản với vật kính X40: trứng nang Cryptosporidium có màu hồng
nhạt đến màu đỏ, kích thước 4 - 6μm, bên trong nang có thể thấy 4 thoa trùng
3.5. Các vấn đề thường gặp
Nếu làm phết phân quá dày, thuốc nhuộm có thể không ngắm vào tất cả KST,
có thể làm sai lệch kết quả
Khi tẩy màu, nếu tẩy kỹ quá (thời gian tẩy kéo dài hoặc nồng độ acid đậm) sẽ
làm cho KST không còn bắt màu sau khi nhuộm
Nếu nhiễm nhẹ, có thể không tìm thấy KST. Nên xét nghiệm 3 lần, mỗi lần
cách nhau vài ngày để không bỏ sót ca bệnh
50
- Bài. 6
HÌNH THỂ GIUN
Mục tiêu
Mô tả được các đặc điểm hình thể chung của giun trưởng thành và trứng giun
Nêu được cấu tạo cơ bản của giun trưởng thành và trứng giun
Nhận dạng được các loại giun ký sinh và trứng giun thường gặp ở người
1. Căn cứ định loại
Dựa vào đặc điểm: hình dạng, kích thước, cấu tạo
2. Đặc điểm lớp giun
Giun có hình ống, tròn, dài từ vài mm đến vài chục cm, đối xứng hai bên
Thường có màu trắng đục, có một ống tiêu hóa trọn vẹn
Thân giun được bao bọc bên ngoài bởi lớp vỏ hyaline
Dưới lớp vỏ biểu mô và một lớp cơ dọc. Lớp biểu mô nhô vào phía
trong tạo thành 4 gờ dọc cơ thể: 1 gờ lưng, 1 gờ bụng và 2 gờ bên. Gờ lưng
và bụng mang dây thần kinh, 2 gờ bên mang ống bài tiết
Ở phần đầu có miệng với các bộ phận như móc, răng, bản dao, gai
Xoang miệng có dạng ống và có thể biến đổi thành bộ phận để hút tùy
theo từng loại
Thực quản hình ống, đôi khi phình ở phần cuối, là đặc điểm để định
danh trong vài trường hợp
Ruột là ống dẹp nối thẳng từ thực quản đến hậu môn
Hệ bài tiết gồm 2 ống chạy dọc theo hai bên thân và 1 ống nối ngang ở
phía gần đầu, đổ ra ngoài bằng lỗ bài tiết ở khoảng thực quản
Hệ thần kinh gồm 1 vòng nối các hạch thần kinh quanh thực quản. Từ
vòng này, 6 sợi thần kinh đi phía trước và 6 sợi thần kinh chạy về phía sau
Có 2 giới riêng biệt. Con đực luôn nhỏ hơn con cái, đuôi cuộn lại hay
xòe ra như cái túi hình chuông. Con cái có đuôi thẳng
Cơ quan sinh dục đực nằm ở 1/3 sau của cơ thể, là ống đơn hình chóp
hoặc ống xoắn cuộn gồm tinh hoàn, ống dẫn tinh, túi chứa tinh, ống phóng
tinh, tận cùng bằng cơ quan giao hợp có dạng cánh hoặc dạng túi
51
- Cơ quan sinh dục cái có thể là cấu trúc đơn hoặc đôi gồm buồng trứng,
ống dẫn trứng, túi nhận tinh, tử cung, âm đạo và âm môn mở ra ngoài bằng lỗ
sinh dục ở nửa thân trên, phía bụng
Giun hình ống không có hệ hô hấp và hệ tuần hoàn
3. Giun đũa – Ascaris lumbricoide
3.1. Giun đũa trưởng thành
Thân hình ống, đều đặn, thon 2 đầu, có vỏ bọc ngoài dày, cứng, có vân
ngang
Có màu trắng hoặc hơi hồng hoặc nâu nhạt
Đầu giun thuôn nhỏ, co 3 môi xếp cân đối (1 môi lưng và 2 môi bụng)
Giun đực dài 15 – 17cm, đường kính 0.3 – 0.4 cm, đuôi cong, lỗ hậu
môn ở mặt bụng, gần cuối thân, có 2 gai giao hợp
52
- Giun cái dài 20 – 25 cm, đường kính trung bình 0.5 – 0.6 cm, đuôi
thẳng, hình nón. Lỗ sinh dục nằm ở khoảng 1/3 trước của thân ở mặt bụng
3.2. Trứng giun đũa
Trứng giun đũa có 3 loại:
a. Trứng thụ tinh (trứng chắc)
Có hình bầu dục hoặc hơi tròn, rất cân đối
Kích thước khoảng 45 - 75μm x 35 - 50μm
Màu vàng
Vỏ dày, gồm 3 lớp đồng tâm:
Ngoài cùng là lớp albumin dày đều, xù xì
Lớp giữa dày, nhẵn và trong suốt được cấu tạo bởi glycogen
Và một lớp vỏ trong cùng là màng dinh dưỡng cấu tạo bởi lipid
Bên trong trứng là phôi bào chắc, gọn thành 1 khối, chưa phân chia khi trứng
mới được đẻ ra
53
- b. Trứng không thụ tinh (trứng lép)
Có hình bầu dục dài và hẹp hơn, hình dạng kỳ dị
Kích thước từ 88 - 94μm x 39 - 44μm
Vỏ chỉ có 2 lớp mỏng, không có lớp màng dinh dưỡng
Bên trong trứng không có phôi, chỉ có những hạt tròn không đều, rất chiết
quang
c. Trứng mất vỏ
Có hình dạng bất thường do lớp albumin bị tróc làm mất lớp ngoài sần sùi, vỏ
trứng trở nên nhẵn. Trứng chỉ có một vỏ dày và nhẵn và các vân đồng tâm
Gặp ở trứng thụ tinh hay không thụ tinh
4. Giun tóc – Trichuris trichiura
4.1. Giun trưởng thành
Thân chia làm 2 phần: phần đầu mảnh như sợi tóc và chiếm gần 2/3
thân, phần còn lại hình ống, to, chứa các cơ quan sinh dục
Giun tóc có màu hồng nhạt
Con đực dài 30 – 40mm, đuôi cong, cuối đuôi có 1 gai sinh dục nằm
trong bao gai
Con cái dài 30 – 50mm, đuôi thẳng và bầu, lỗ sinh dục nằm ở 2/3 thân kể
từ đầu, cơ quan sinh dục gồm có 2 buồng trứng hình ống cuộn lại như lò xo và
tử cung
54
- 4.2. Trứng giun
Hình bầu dục, hơi dài, rất đối xứng, hai đầu có 2 nút nhày
Kích thước: 50 – 65 x 20 - 29μm
Trứng có màu vàng đậm ngả sang nâu
Vỏ dày, nhẵn gồm 3 lớp
Trứng mới được đẻ ra có phôi bào, chưa phân chia
5. Giun móc – Ancylostoma duodenale, Necator americanus
5.1. Giun trưởng thành
Giun màu trắng hoặc hồng, xám như sợi chỉ
Kích thước: 7 – 10mm x 0.4 – 0.5mm
Đầu giun móc có bao miệng, thực quản hình ống:
+ Miệng có 2 đôi răng đều: Ancylostoma đuoenale
55
- + Miệng có đôi dao cắt: Necator americanus
Con đực dài 8 – 11mm, đường kính thân dài 0.5mm, đầu cong, đuôi xòe
ra thành túi, được nâng đỡ bởi những đường gân, có 2 gai giao hợp dài và mảnh
Con cái dài 10 – 13mm, đường kính thân 0.6mm, đầu cong, đuôi thẳng
hình chop
5.2. Ấu trùng
Thường ta chỉ thấy ấu trùng của giun móc trong phân đã được giữ lại
một thời gian trước khi quan sát để trứng có đủ thời gian nở thành ấu trùng
56
- Trong phân ấu trùng không bao giờ đi quá giai đoạn filariform, không
bao giờ đến được giai đoạn trưởng thành
a. Ấu trùng giai đoạn 1 (Rhabditiform)
Kích thước: 250 x 17μm
Miệng mở, bao miệng dài và hẹp
Thực quản phình ra ở phía sau thành hình quả lê
Đuôi thon dài và nhọn
b. Ấu trùng giai đoạn 3 (Filariform)
Kích thước: dài 500 - 600μm
Miệng đóng
Thực quản hình ống
Đuôi thon dài và nhọn
5.3. Trứng giun móc
Khó phân biệt trứng của 2 loại giun này bằng cách quan sát
Hình bầu dục, hơi dài, rất đối xứng
Kích thước: 50 – 70 x 40μm
Vỏ mỏng, nhẵn trong suốt
Trứng mới được đẻ ra có từ 2, 4 hoặc 8 phôi bào
Trứng giun móc ra ngoại cảnh thường sau 24h đã nở thành ấu trùng
57
- 6. Giun xoắn
6.1. Giun trưởng thành
Có kích thước nhỏ, mắt thường khó nhận thấy
Giun đực: dài 1.4 – 1.6 x 0.04 mm, có gai sinh dục ở phía đuôi
Giun cái: dài 3 – 4 x 0.06 mm, âm môn nằm ở 1/5 trước của cơ thể, buồn trứng
nằm ở ½ sau thân, tử cung chứa trứng có kích thước khoảng 20μm
6.2. Ấu trùng
Ấu trùng cuộn thành hình xoắn ốc trong nang ở cơ vân của người và động vật
Nang giun xoắn có hình bầu dục dài 200 - 400μm
Ấu trùng có kích thước 90 - 100μm x 60μm. Khi mới vào cơ thể, ấu trùng có
hình gậy và có màng bao. Sau khi nhiễm 21 – 30 ngày, ấu trùng có màng bao bọc bên
ngoài
7. Giun lươn – Strongyloides stercoralis
7.1. Giun trưởng thành
Hầu thết giun lươn ký sinh là giun cái:
Kích thước 2mm x 50μm
Đường kính không thay đổi, nhỏ như sợi chỉ trắng, gần như trong sốt
Ống thực quản hình ống
Đuôi nhọn
Âm hộ cách đầu một khoảng hơn 1/3 thân
Trứng sắp thành từng dãy trong tử cung
58
- 7.2. Ấu trùng
Ấu trùng thường thấy nhất trong các ấu trùng của giun
Khi cấy phân, có thể thấy ấu trùng giai đoạn 1, giai đoạn 3 và giun trưởng thành
a. Ấu trùng giai đoạn 1
Kích thước: 200 – 238 x 16 - 20μm
Phần sau thực quản phình ra thành hình quả lê
Miệng hở, bao miệng ngắn
Đuôi thon dài và nhọn
b. Ấu trùng giai đoạn 3
Kích thước: 500 – 630 x 16μm
Thực quản hình ống
Đuôi chẻ hai
59
- 7.3. Trứng
Ta không thấy trứng của giun lươn trong phân nhưng có thể thấy trong các
bệnh phẩm hút từ ruột ra
Trứng giun lươn bao giờ cũng có phôi thai, rất giống trứng giun móc, nhưng có
kích thước nhỏ hơn (50 x 30μm)
8. Giun kim – Enterobius vermicularis
8.1. Giun trưởng thành
Màu trắng
Dài khoảng 1cm
Miệng gồm 3 môi, không có bao miệng
Vỏ bọc ngoài dày lên ở phần đầu và dọc 2 bên thân
Phần cuối thực quản nở thành hình tròn
Gin đực dài 2 – 5mm x 0.1 – 0.2mm, đầu thẳng, đuôi cong và gập về phía
bụng.
Cơ quan sinh dục đực gồm có 1 tinh hoàn và 1 ống dẫn tinh. Cuối đuôi có 1 gai
sinh dục nhô ra ngoài
Giun cái dài 9 – 12mm x 0.3 – 0.5mm, đầu nhọn, đuôi dài và nhọn và thẳng,
lỗsinh dục nằm ở 1/3 trước của thân. Cơ quan sinh dục gồm có 2 buồng trứng hình
ống, hai ống dẫn trứng và hai tử cung
60
- 8.2. Trứng
Hình bầu dục, thon dài, không cân đối, lép 1 bên
Kích thước: 50 – 60 x 20 - 30μm
Trứng không có màu, trong suốt
Vỏ mỏng
Trứng chứa ấu trùng ở bên trong
9. Giun chỉ bạch huyết
Ở Việt Nam thường gặp 2 loại giun chỉ ký sinh ở người: Wuchereia
bancrofti, Brugia malayi
9.1. Giun trưởng thành
61
- a. Wuchereria bancrofti
Giun chỉ trưởng thành giống như sợi tơ màu trắng sữa
Giun đực dài khoảng 3cm, chiều ngang 0.1mm
Giun cái dài khoảng 8 – 10cm, chiều ngang 0.25mm
Giun đực và cái thường sống cuộn vào nhau trong hệ bạch huyết
Giun cái đẻ ra ấu trùng, ấu trùng xuất hiện trong máu ngoại vi theo chu
kỳ đêm hoặc tùy theo loại
b. Brugia malayi
Con trưởng thành giống W. bancrofti về hình thái, nhưng mảnh và ngắn
hơn
Giun cái dài 4.3 – 5.5cm
Giun đực dài 1.3 – 2.3cm
9.2. Ấu trùng giun chỉ
a. W. bancrofti
Kích thước: 161 – 305 μm
Thân có những cỗ uốn cong mềm mại và đều
Bao bọc ngoài dài hơn thân nhiều
Nhân dinh dưỡng nhỏ, ít, tách biệt nhau rõ ràng, không đi tới cuối đuôi
Đuôi nhọn, thon đều từ từ, không có nhân
62
- b. Brugia malayi
Kích thước: 180 - 230μm
Thân có những chỗ uốn cong không đều, đuôi xoắn
Bao bọc ngoài dài hơn thân ít
Nhân dinh dưỡng nhỏ, nhiều, sát nhau, không rõ
Đuôi nhọn, có 2 nhân
63
Thêm vào BST
Báo xấu
Download
Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ
