Báo cáo nông nghiệp: "NGHIÊN CứU NHÂN GIốNG IN VITRO Và NUÔI TRồNG GIốNG LAN HàI QUý P. hangianum perner Gurss (Hài Hằng) THU THậP ở VIệT NAM"
lượt xem 17
download
Nghiên cứu này được tiến hành trên giống lan Hài P. hangianum perner Gurss (Hài Hằng) thu thập ở Việt Nam. Hạt lấy từ quả 6 - 10 tháng tuổi đem khử trùng bằng cồn 700 và HgCl2 0,1% trong 5 phút rồi gieo trên các nền môi trường MS, ½ MS, RE và V1. Kết quả cho thấy, môi trường RE thích hợp cho hạt nảy mầm (58 - 67%).
Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!
Nội dung Text: Báo cáo nông nghiệp: "NGHIÊN CứU NHÂN GIốNG IN VITRO Và NUÔI TRồNG GIốNG LAN HàI QUý P. hangianum perner Gurss (Hài Hằng) THU THậP ở VIệT NAM"
- Tạp chí Khoa học và Phát triển 2010: Tập 8, số 2: 194 - 201 TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGHI£N CøU NH¢N GIèNG IN VITRO Vμ NU¤I TRåNG GIèNG LAN HμI QUý P. hangianum perner Gurss (Hμi H»ng) THU THËP ë VIÖT NAM Study on In-Vitro Propagation and Culture of Paphiopedilum hangianum Accession Collected in Vietnam Hoàng Thị Giang, Nguyễn Quang Thạch, Mạch Hồng Thắm, Đỗ Thị Thu Hà Viện Sinh học Nông nghiệp, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội Địa chỉ email tác giả liên lạc:cuonggiang18@gmail.com TÓM TẮT Nghiên cứu này được tiến hành trên giống lan Hài P. hangianum perner Gurss (Hài Hằng) thu thập ở Việt Nam. Hạt lấy từ quả 6 - 10 tháng tuổi đem khử trùng bằng cồn 700 và HgCl2 0,1% trong 5 phút rồi gieo trên các nền môi trường MS, ½ MS, RE và V1. Kết quả cho thấy, môi trường RE thích hợp cho hạt nảy mầm (58 - 67%). Tiếp đó nghiên cứu tiến hành các thí nghiệm nhân nhanh protocorm và tạo cây hoàn chỉnh. Môi trường nhân nhanh protocorm là môi trường RE có bổ sung 150 ml nước dừa và 100 g/l chuối cho hệ số nhân cao nhất (4,3 lần). Môi trường này cũng rất có hiệu quả để tạo chồi. Bổ sung 0,4 - 0,6 mg/l α-NAA vào môi trường cho khả năng ra rễ tốt nhất. Các kết quả thí nghiệm ngoài vườn ươm cho thấy: cây đạt tiêu chuẩn ra vườn ươm cao 3 - 4 cm, có từ 3 - 4 lá, 4 - 5 rễ; trồng trên giá thể dớn; chế độ dinh dưỡng NPK (30:10:10) với lượng bón là 1 g/l và chế độ phun 2 lần/tuần. Từ khóa: Lan Hài, lan Hài Hằng, nhân giống in vitro, nhân nhanh protocorm. SUMMARY An experiment was conducted to investigate in vitro propagation and culture of P. hangianum perner Gurss collected in SaPa, Vietnam. Seeds harvested from the 6 - 10 month fruits were sterilized by HgCl2 0.1% for 5 minutes and grown on different media, i.e. MS, ½ MS, RE and V1. It was found that RE medium was most suitable for seed germination; RE medium added with 150 ml coconut water and 100 g/l banana was suitable for protocorm multiplication, and RE medium added with 0.4 - 0.6 mg/l α- NAA was most suitable for rooting. This medium was also effective to produce shoots. The optimum stage for potting out when the plantlets reached a height of 3 - 4 cm, 3 - 4 leaves and 3 - 4 roots. Key words: Hangianum, in vitro propagation, Paphiopedilums RE medium. 1. §ÆT VÊN §Ò Nam ¸. NhiÒu loμi lan Hμi cña ViÖt Nam Lan Hμi thuéc hä lan Orchidaceae lμ kh«ng chØ rÊt hiÕm mμ cßn cã nh÷ng loμi ®Æc mét trong nh÷ng hä lín nhÊt cña thùc vËt cã h÷u hÑp, lμ b¸u vËt quèc gia cã tÇm quan hoa; lμ mét nhãm rÊt kh¸c biÖt bëi cÊu tróc träng quèc tÕ. Lan Hμi H»ng lμ mét trong sè hoa kh¸c th−êng víi mét c¸nh hoa gi÷a (cßn ®ã, ®−îc ph¸t hiÖn ë miÒn B¾c ViÖt Nam, lμ gäi lμ m«i hay c¸nh hoa) h×nh tói s©u tr«ng loμi lan Hμi ®Ñp vμ ®ang cã nguy c¬ bÞ tiªu gièng nh− mét chiÕc hμi n»m ë vÞ trÝ thÊp diÖt. §©y lμ lo¹i lan sèng trªn c¸c kÏ ®¸ phñ nhÊt cña hoa, do ®ã trë thμnh tªn chung cña rªu trªn vïng nói ®¸ v«i, hoa në b«ng kh¸ to, nhãm lan nμy. cã mμu vμng nh¹t vμ mïi th¬m ngät ngμo ViÖt Nam lμ mét trung t©m ®a d¹ng (§Æng XuyÕn Nh−, 2006). vμ ®Æc h÷u lan rÊt quan träng ë vïng §«ng 194
- Nghiên cứu nhân giống in vitro và nuôi trồng giống lan hài quý P. hangianum perner Gurss (Hài Hằng)... NhiÒu n¨m qua, lan Hμi H»ng bÞ khai - CT2: 1/2 MS + 20 g/l saccarose +150 th¸c vμ bu«n b¸n tr¸i phÐp ra n−íc ngoμi víi ml/l n−íc dõa + 7,5 g/l agar. sè l−îng lín, hÇu nh− ®· bÞ tuyÖt chñng - CT3: RE + 20 g/l saccarose +150 ml/l ngoμi tù nhiªn. ViÖc nh©n gièng loμi lan Hμi n−íc dõa + 7,5 g/l agar + 2 g/l than ho¹t tÝnh. quý rÊt khã. Nh©n gièng b»ng h¹t th−êng - CT4: V1 + 30 g/l dÞch chiÕt chuèi + 40 kh«ng hiÖu qu¶ v× tØ lÖ c©y con thu ®−îc qu¸ g/l cμ chua + 250 mg/l than ho¹t tÝnh. Ýt kh«ng ®¸p øng ®−îc nhu cÇu cña thÞ Nhãm nh©n nhanh protocorm ®−îc tiÕn tr−êng. Nh©n gièng v« tÝnh b»ng c©y con hμnh trªn 2 thÝ nghiÖm chÝnh. còng kh«ng hiÖu qu¶ v× sè l−îng c©y con t¹o • ThÝ nghiÖm ¶nh h−ëng cña nÒn m«i ra rÊt Ýt (D−¬ng TÊn Nhùt, 2007). HiÖn nay, nhiÒu nhμ khoa häc ®ang ¸p tr−êng nu«i cÊy: dông nh÷ng kü thuËt nu«i cÊy m« víi môc - CT1: MS + 20 g/l saccarose +150 ml/l ®Ých nh©n nhanh vμ hiÖu qu¶ nhiÒu gièng lan n−íc dõa + 7,5 g/l agar. Hμi. D−¬ng TÊn Nhùt (2005) ®· nh©n thμnh - CT2: 1/2 MS + 20 g/l saccarose +150 c«ng gièng lan Hμi P.delenatii (Hμi Hång) ml/l n−íc dõa + 7,5 g/l agar. b»ng ph−¬ng ph¸p g©y vÕt th−¬ng vμ ph−¬ng - CT3: RE + 20 g/l saccarose +150 ml/l ph¸p kÐo dμi ®èt th©n. Th«ng qua c¸c ph−¬ng n−íc dõa + 7,5 g/l agar + 2 g/l than ho¹t tÝnh. ph¸p nμy, hÖ sè nh©n cña lan Hμi ®· t¨ng lªn - CT4: V1 + 30 g/l dÞch chiÕt chuèi + 40 mét c¸ch ®¸ng kÓ. Nghiªn cøu nμy ®−îc tiÕn g/l cμ chua + 250 mg/l than ho¹t tÝnh. hμnh nh»m gãp phÇn b¶o tån quü gen lan Hμi nãi riªng, b¶o tån thiªn nhiªn vμ b¶o tån ®a • ThÝ nghiÖm ¶nh h−ëng cña c¸c dÞch d¹ng sinh häc c¸c nguån gen thùc vËt quý chiÕt tù nhiªn ®Õn hÖ sè nh©n lan Hμi: hiÕm ë ViÖt Nam nãi chung. - CT1: RE + 20 g/l saccarose +150 ml/l n−íc dõa + 7,5 g/l agar + 2 g/l than ho¹t tÝnh 2. VËT LIÖU Vμ PH¦¥NG PH¸P + 0 g/l dÞch chiÕt chuèi (§C). NGHI£N CøU - CT2: §C + 50 g/l dÞch chiÕt chuèi. - CT3: §C +100 g/l dÞch chiÕt chuèi. 2.1. VËt liÖu - CT4: §C + 120 g/l dÞch chiÕt chuèi. Sö dông nguån vËt liÖu tõ qu¶ lan Hμi cña gièng lan Hμi H»ng thu thËp tõ Sapa. - CT5: §C + 150 g/l dÞch chiÕt chuèi. Nhãm thÝ nghiÖm t¹o chåi in vitro vμ t¹o 2.2. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu c©y hoμn chØnh ®−îc tiÕn hμnh víi hai thÝ 2.2.1. Ph−¬ng ph¸p nu«i cÊy m« tÕ bμo thùc nghiÖm: vËt • ThÝ nghiÖm ¶nh h−ëng cña c¸c dÞch Sau khi thu thËp c¸c qu¶ lan Hμi (6 - 10 chiÕt tù nhiªn ®Õn kh¶ n¨ng t¹o chåi: th¸ng tuæi, cã mμu h¬i ng¶ vμng), tiÕn hμnh khö trïng h¹t b»ng cån 700 vμ HgCl2 0,1% - CT1: RE + 20 g/l saccarose +150 ml/l trong 5 phót. Sau ®ã gieo h¹t trªn c¸c nÒn n−íc dõa + 7,5 g/l agar + 2 g/l than ho¹t tÝnh m«i tr−êng kh¸c nhau (MS, MS, RE, V)1 cã + 0 g/l dÞch chiÕt chuèi (§C). bæ sung n−íc dõa trong c¸c b×nh tam gi¸c vμ - CT2: §C + 50 g/l dÞch chiÕt chuèi. ®Æt trong c¸c ®iÒu kiÖn tèi −u ®Ó t¹o - CT3: §C +100 g/l dÞch chiÕt chuèi. protocorm: - CT4: §C + 120 g/l dÞch chiÕt chuèi. - CT1: MS + 20 g/l saccarose +150 ml/l - CT5: §C + 150 g/l dÞch chiÕt chuèi. n−íc dõa + 7,5 g/l agar. 195
- Hoàng Thị Giang, Nguyễn Quang Thạch, Mạch Hồng Thắm, Đỗ Thị Thu Hà • ThÝ nghiÖm ¶nh h−ëng cña α-NAA tíi B¶ng 1. ¶nh h−ëng cña c¸c m«i tr−êng kh¶ n¨ng ra rÔ cña lan Hμi: kh¸c nhau ®Õn tû lÖ n¶y mÇm cña h¹t - CT1: RE + 7 g/l agar + 20 g/l saccarose Hμi H»ng (sau 8 tuÇn theo dâi) + 150 ml/l n−íc dõa + 2 g/l than ho¹t tÝnh + Nền môi trường MS ½ MS RE V1 0 ppm α- NAA (§C). Tỷ lệ nảy mầm (%) 38 45 67 47 - CT2: §C + 0,2 ppm α- NAA. - CT3: §C + 0,4 ppm α- NAA. Trong 4 m«i tr−êng thÝ nghiÖm, m«i - CT4: §C + 0,6 ppm α- NAA. tr−êng RE cho tû lÖ h¹t lan Hμi H»ng n¶y - CT5: §C + 1 ppm α- NAA. mÇm cao nhÊt ®¹t 67%. Nh− vËy, viÖc sö M«i tr−êng nu«i cÊy ®−îc ®iÒu chØnh dông m«i tr−êng kho¸ng RE ®Ó gieo h¹t cho pH tõ 5,8 - 6,0 vμ ®−îc khö trïng ë 121oC; lan Hμi H»ng lμ thÝch hîp nhÊt. 1,0 atm, trong thêi gian 20 phót. MÉu ®−îc nu«i cÊy ë nhiÖt ®é 22 - 25oC, c−êng ®é chiÕu 3.2. KÕt qu¶ thÝ nghiÖm nh©n nhanh protocorm s¸ng 16 h/ngμy. 3.2.1. KÕt qu¶ nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña 2.2.2. Ph−¬ng ph¸p trång vμ ch¨m sãc c©y c¸c m«i tr−êng kh¸c nhau ®Õn hÖ sè ngoμi v−ên −¬m nh©n cña lan Hμi Khi c©y ®¹t tiªu chuÈn (c©y 3 - 4 l¸, cao 3 - 4 cm vμ cã tõ 3 - 4 rÔ), ®−a ra ngoμi v−ên ViÖc x¸c ®Þnh ®−îc m«i tr−êng tèi −u ®Ó −¬m; sö dông c¸c lo¹i gi¸ thÓ dín, x¬ dõa; nu«i cÊy nh©n nhanh c¸c protocorm, lμm dïng lo¹i ph©n bãn NPK ®−îc phèi trén víi t¨ng hÖ sè nh©n, ®ång thêi c¸c protocorm c¸c tû lÖ kh¸c nhau (20-20-20; 30-10-10; 14- ph¶i ®¹t chÊt l−îng tèt nhÊt (®ång ®Òu mμu 2-10); c¸c chÕ ®é Èm, ¸nh s¸ng vμ nhiÖt ®é xanh bãng, kh«ng bÞ xèp, kh«ng bÞ mäng tu©n thñ theo tiªu chuÈn ngoμi v−ên −¬m. n−íc, chåi ph¸t triÓn m¹nh kh«ng bÞ biÕn dÞ) tr−íc khi chuyÓn sang m«i tr−êng t¹o c©y 2.2.3. Ph−¬ng ph¸p bè trÝ thÝ nghiÖm hoμn chØnh lμ mét yªu cÇu kh«ng thÓ thiÕu C¸c c«ng thøc thÝ nghiÖm trong phßng trong nh©n gièng in vitro lan Hμi. ThÝ nu«i cÊy m« ®−îc bè trÝ ngÉu nhiªn, mçi c«ng nghiÖm nμy ®· sö dông protocorm cña gièng thøc (CT) ®−îc bè trÝ 5 lÇn nh¾c l¹i, mçi lÇn Hμi H»ng, t¸ch protcorm ®−a vμo c¸c m«i nh¾c l¹i 10 mÉu, mçi CT lμm 50 mÉu. tr−êng kh¸c nhau, sau 4 tuÇn nu«i cÊy kÕt ThÝ nghiÖm ®−îc bè trÝ ngÉu nhiªn, mçi qu¶ thu ®−îc ë b¶ng 2. c«ng thøc lÆp l¹i 3 lÇn, mçi chËu trång 3 c©y. C¸c c«ng thøc kh¸c nhau cã ¶nh h−ëng §Þnh k× theo dâi: 7 ngμy/1 lÇn, tiÕn hμnh ®o rÊt kh¸c nhau ®Õn tû lÖ mÉu t¹o protocorm, chiÒu cao c©y, rÔ, l¸, sè nh¸nh trong mçi lÇn hÖ sè nh©n vμ c¶ chÊt l−îng protocorm. ®o ®Þnh k×. Trong ®ã CT2 cho c¶ tû lÖ mÉu t¹o protocrom 2.3. §Þa ®iÓm vμ hÖ sè nh©n nhá nhÊt, CT3 cho 100% tû lÖ mÉu t¹o protocorm. Quan s¸t h×nh th¸i cho ThÝ nghiÖm tiÕn hμnh t¹i ViÖn Sinh häc thÊy, protocorm thu ®−îc ë CT1 vμ CT2 ®Òu N«ng nghiÖp (Tr−êng §¹i häc N«ng nghiÖp rÊt nhá, yÕu vμ vμng nh¹t; cßn protocorm Hμ Néi). thu ®−îc tõ CT3, CT4 xanh vμ mËp h¬n c¶. MÆt kh¸c, CT3 còng cho hÖ sè nh©n 3. KÕT QU¶ Vμ TH¶O LUËN protocorm cao nhÊt (3,18 protocorm/mÉu) 3.1. KÕt qu¶ thÝ nghiÖm t¹o vËt liÖu trong 4 MT nghiªn cøu. Nh− vËy, m«i khëi ®Çu tr−êng RE + 150 ml/l n−íc dõa lμ m«i tr−êng M«i tr−êng kh¸c nhau cã ¶nh h−ëng râ rÖt hiÖu qu¶ nhÊt trong nu«i cÊy nh©n nhanh ®Õn tû lÖ n¶y mÇm cña h¹t Hμi H»ng (B¶ng 1). protocorm cña gièng Hμi H»ng. 196
- Nghiên cứu nhân giống in vitro và nuôi trồng giống lan hài quý P. hangianum perner Gurss (Hài Hằng)... B¶ng 2. ¶nh h−ëng cña c¸c m«i tr−êng kh¸c nhau tíi sù nh©n nhanh protocorm cña Hμi H»ng (sau 4 tuÇn theo dâi) Tỉ lệ mẫu tạo protocorm Hệ số nhân Công thức Chất lượng protocorm (%) (protocorm/mẫu) CT1 60 0,30 + CT2 66 0,20 + CT3 100 3,18 +++ CT4 98 2,44 ++ LSD (%) - 0,677 Ghi chú: + + + chất lượng tốt ++ chất lượng trung bình + chất lượng kém CT1: MS + 20 g/l saccarose +150 ml/l nước dừa + 7,5 g/l agar. CT2: ½ MS + 20 g/l saccarose +150 ml/l nước dừa + 7,5 g/l agar. CT3: RE + 20 g/l saccarose +150 ml/l nước dừa + 7,5 g/l agar + 2 g/l than hoạt tính. CT4: V1 + 30 g/l dịch chiết chuối + 40 g/l cà chua + 250 mg/l than hoạt tính. B¶ng 3. ¶nh h−ëng cña m«i tr−êng cã bæ sung dÞch chiÕt chuèi ®Õn hÖ sè nh©n protocorm cña Hμi H»ng (sau 4 tuÇn theo dâi) Tỷ lệ mẫu tạo protocorm Hệ số nhân Công thức Chất lượng protocorm (%) (protocorm/ mẫu) CT1: ĐC 100 3,18 +++ CT2:ĐC+50 g/l dịch chuối 50 3,56 +++ CT3: ĐC+100 g/l dịch chuối 100 4,3 +++ CT4:ĐC+120 g/l dịch chuối 70 2,7 ++ CT5:ĐC+150 g/l dịch chuối 54 2,2 ++ LSD (%) - 0,12 Ghi chú: + + + chất lượng tốt + + chất lượng trung bình + chất lượng kém CTĐC: RE + 20 g/l saccarose +150 ml/l nước dừa + 7,5 g/l agar + 2 g/l than hoạt tính. 3.2.2. KÕt qu¶ nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña KÕt qu¶ nghiªn cøu cho thÊy, viÖc bæ m«i tr−êng cã bæ sung dÞch chiÕt sung dÞch chiÕt chuèi vμo m«i tr−êng nh©n chuèi ®Õn hÖ sè nh©n cña Hμi H»ng nhanh cã t¸c dông lμm t¨ng hÖ sè nh©n protocorm so víi ®èi chøng kh«ng bæ sung. ë Nghiªn cøu cña Benrt (1975) cho r»ng, CT3 khi bæ sung 100 g/l dÞch chiÕt chuèi vμo bæ sung dÞch chiÕt chuèi cã t¸c dông kÝch m«i tr−êng nu«i cÊy ®· cho hÖ sè nh©n t¨ng thÝch ®èi víi kh¶ n¨ng t¹o protocorm vμ sinh 4,3 lÇn so víi ®èi chøng lμ 3,18 lÇn. Tuy tr−ëng chåi. C¸c kÕt qu¶ nghiªn cøu vÒ ¶nh nhiªn, khi bæ sung t¨ng dÇn dÞch chiÕt chuèi h−ëng cña viÖc bæ sung dÞch chuèi ®−îc tr×nh th× hÖ sè nh©n gi¶m dÇn. Sè liÖu b¶ng 3 cho bμy ë b¶ng 3. 197
- Hoàng Thị Giang, Nguyễn Quang Thạch, Mạch Hồng Thắm, Đỗ Thị Thu Hà 3.3.2. KÕt qu¶ nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña thÊy, m«i tr−êng RE + 100 g/l dÞch chiÕt α-NAA tíi kh¶ n¨ng ra rÔ cña lan chuèi lμ m«i tr−êng thÝch hîp nhÊt ®Ó nh©n Hμi H»ng nhanh protocorm cña Hμi H»ng. Nång ®é α-NAA cã ¶nh h−ëng kh¸ râ 3.3. KÕt qu¶ thÝ nghiÖm t¹o c©y hoμn chØnh ®Õn sù t¨ng tr−ëng sè rÔ cña lan Hμi H»ng 3.3.1. KÕt qu¶ nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña (B¶ng 5). ë CT1 cã sù t¨ng tr−ëng sè rÔ thÊp dÞch chiÕt chuèi tíi kh¶ n¨ng t¹o c©y nhÊt, sù t¨ng tr−ëng sè l¸ vμ sù t¨ng tr−ëng hoμn chØnh cña lan Hμi chiÒu cao c©y còng thÊp nhÊt trong 4 CT. Gièng lan Hμi H»ng ë CT2 víi nång ®é 0,4 §©y lμ giai ®o¹n cuèi cña qu¸ tr×nh ppm α-NAA cho sù t¨ng tr−ëng sè rÔ (2,03), nh©n gièng in vitro. Giai ®o¹n nμy ph¶i ®¶m sù t¨ng tr−ëng sè l¸ (0,31), sù t¨ng tr−ëng b¶o c©y kháe m¹nh, cã bé rÔ tèt ®Ó sinh chiÒu cao cña c©y (0,46) cao nhÊt trong c¶ 4 tr−ëng vμ ph¸t triÓn khi ®−a c©y ra ngoμi CT thÝ nghiÖm. Khi nång ®é α-NAA t¨ng lªn v−ên −¬m. ë CT3, CT4 th× sù sinh tr−ëng ph¸t triÓn cña Nång ®é dÞch chiÕt chuèi cã ¶nh h−ëng c©y gi¶m (sù t¨ng tr−ëng sè rÔ, sù t¨ng kh¸ râ rμng tíi kh¶ n¨ng t¹o chåi cña Lan tr−ëng sè l¸, sù t¨ng tr−ëng chiÒu cao c©y Hμi (B¶ng 4). ë CT1 (kh«ng cã dÞch chiÕt ®Òu gi¶m xuèng). Nh− vËy nång ®é α-NAA cã chuèi) tû lÖ mÉu chÕt lμ 4,80% vμ tû lÖ t¹o ¶nh h−ëng nhÊt ®Þnh ®Õn sù ra rÔ cña lan chåi lμ 66,67%; khi t¨ng dÇn nång ®é dÞch Hμi. M«i tr−êng RE + 0,4 ppm α-NAA thÝch chiÕt chuèi tõ 0 - 100 g/l (CT2 vμ CT3) th× hîp nhÊt cho sù ra rÔ cña gièng Hμi H»ng. kh«ng cã mÉu chÕt, tû lÖ t¹o chåi t¨ng dÇn, 3.4. KÕt qu¶ thÝ nghiÖm ngoμi v−ên −¬m nh−ng khi nång ®é dÞch chiÕt lín h¬n 100 g/l th× tû lÖ t¹o chåi gi¶m vμ tû lÖ mÉu chÕt t¨ng 3.4.1. ¶nh h−ëng cña c¸c nÒn gi¸ thÓ kh¸c nhau ®Õn sinh tr−ëng ph¸t triÓn dÇn. ë CT5 tû lÖ chÕt lμ 9,52 % vμ tû lÖ t¹o cña c©y lan Hμi chåi 61,90% øng víi bæ sung 150 g/l dÞch chiÕt chuèi. Cã thÓ nhËn thÊy, CT3 cho tû lÖ Sè liÖu b¶ng 6 cho thÊy, tû lÖ sèng cña t¹o chåi cao nhÊt ®¹t 85,70% vμ tû lÖ mÉu lan Hμi H»ng trªn nÒn gi¸ thÓ dín lμ cao chÕt lμ b»ng 0%. Trong thÝ nghiÖm nμy, m«i nhÊt, ®¹t 80%. Do thêi gian tiÕn hμnh theo tr−êng RE + 100 g/l dÞch chiÕt chuèi lμ m«i dâi thÝ nghiÖm t−¬ng ®èi ng¾n (6 tuÇn) nªn tr−êng thÝch hîp nhÊt cho t¹o chåi cña lan sù t¨ng tr−ëng vÒ chiÒu cao c©y, sè l¸/c©y, sè Hμi H»ng. rÔ/c©y thu ®−îc chØ ®¹t ë ng−ìng nhÊt ®Þnh. B¶ng 4. ¶nh h−ëng cña m«i tr−êng cã bæ sung dÞch chiÕt chuèi tíi kh¶ n¨ng t¹o chåi cña Hμi H»ng (sau 4 tuÇn theo dâi) Công thức Tỷ lệ chết (%) Tỷ lệ tạo chồi (%) Chất lượng chồi CT1: ĐC 4,80 66,67 ++ CT2: ĐC+ 50 g/l dịch chuối 0,00 80,95 +++ CT3: ĐC+ 100 g/l dịch chuối 0,00 85,70 +++ CT4: ĐC+ 120 g/l dịch chuối 4,80 66,67 +++ CT5: ĐC+ 150 g/l dịch chuối 9,52 61,90 ++ LSD (%) - 0,125 Ghi chú: + + + chất lượng tốt ++ chất lượng trung bình + chất lượng kém CTĐC: RE + 20 g/l saccarose +150 ml/l nước dừa + 7,5 g/l agar + 2 g/l than hoạt tính. 198
- Nghiên cứu nhân giống in vitro và nuôi trồng giống lan hài quý P. hangianum perner Gurss (Hài Hằng)... B¶ng 5. ¶nh h−ëng cña α-NAA tíi kh¶ n¨ng ra rÔ cña lan Hμi H»ng Chiều cao cây Số lá Số rễ Công thức (cm) (lá/cây) (rễ/cây) CT1: ĐC 0,38 0,22 1,50 CT2: ĐC+ 0,4 ppm α-NAA 0,46 0,31 2,03 CT3: ĐC+ 0,6 ppm α-NAA 0,44 0,30 1,96 CT4: ĐC+ 0,8 ppm α-NAA 0,43 0,27 1,88 LSD (%) 0,14 0,116 0,358 Ghi chú: CTĐC: RE + 20 g/l saccarose +150 ml/l nước dừa + 7,5 g/l agar + 2 g/l than hoạt tính+100g/l dịch chiết chuối. B¶ng 6. ¶nh h−ëng cña c¸c nÒn gi¸ thÓ kh¸c nhau ®Õn sinh tr−ëng ph¸t triÓn cña lan Hμi H»ng (sau 6 tuÇn theo dâi) Chiều cao cây Số lá Số rễ T ỷ lệ Công thức (cm) (lá/cây) (rễ/cây) sống (%) CT1 0,27 0,130 0,37 80,00 CT2 0,07 0,052 0,10 33,33 CT3 0,12 0,091 0,15 53,33 LSD (%) 0,207 0,994 0,278 - B¶ng 7. ¶nh h−ëng cña c¸c chÕ ®é ph©n bãn kh¸c nhau ®Õn sù ph¸t triÓn cña lan Hμi (sau 4 tuÇn theo dâi) Chiều cao cây Số lá Số rễ Công thức (cm) (lá/cây) (rễ/cây) CT1 0,40 0,30 0,75 CT2 0,21 0,17 0,50 CT3 0,32 0,12 0,39 Ghi chú: CT1: Phân NPK được phối trộn với tỷ lệ: 20-20-20 CT2: Phân NPK được phối trộn với tỷ lệ: 30-10-10 CT3: Phân NPK được phối trộn với tỷ lệ: 14:2:10 Tuy nhiªn, khi quan s¸t h×nh th¸i bªn H»ng (B¶ng 7). Cã thÓ thÊy r»ng, ë CT1 ngoμi cã thÓ nhËn thÊy, còng trªn nÒn gi¸ (30:10:10) cho kÕt qu¶ tèt h¬n ë hÇu hÕt c¸c thÓ dín c©y cøng c¸p vμ mËp h¬n so víi c¸c chØ tiªu theo dâi nh− chiÒu cao c©y, sè l¸. ë gi¸ thÓ cßn l¹i. Nh− vËy trong 3 nÒn gi¸ thÓ CT2 (20:10:10) vμ CT3 (14:2:10) cho thÊy râ thÝ nghiÖm th× nÒn gi¸ thÓ dín lμ thÝch hîp sù sinh tr−ëng vμ ph¸t triÓn cña c©y kÐm nhÊt cho c©y sù ph¸t triÓn cña lan Hμi H»ng. h¬n CT1. Tuy nhiªn, khi quan s¸t h×nh th¸i cho thÊy, ë CT2 c©y cøng c¸p vμ xanh tèt 3.4.2. ¶nh h−ëng cña chÕ ®é ph©n bãn kh¸c t−¬ng tù nh− víi CT1. nhau ®Õn sù ph¸t triÓn cña lan Hμi ë giai ®o¹n c©y non míi ®em trång ë Tû lÖ phèi trén c¸c lo¹i ph©n bãn cã ¶nh v−ên −¬m rÊt cÇn hμm l−îng N cao v× ®©y lμ h−ëng râ rÖt ®Õn sù sinh tr−ëng cña lan Hμi 199
- Hoàng Thị Giang, Nguyễn Quang Thạch, Mạch Hồng Thắm, Đỗ Thị Thu Hà giai ®o¹n c©y ®ang t¨ng tr−ëng m¹nh vÒ Lêi c¶m ¬n chiÒu cao. Nh− vËy, trong thÝ nghiÖm nμy T¸c gi¶ c«ng tr×nh xin ch©n thμnh c¶m cho thÊy, ph©n NPK theo tû lÖ 30:10:10 t¹o ¬n quü häc bæng Odon Valell (Céng hoμ ®iÒu kiÖn tèt nhÊt cho sinh tr−ëng vμ ph¸t Ph¸p) vμ GS. Kim Ngäc - TrÇn Thanh V©n triÓn cña c©y lan Hμi. ®· hç trî vÒ vËt chÊt còng nh− tinh thÇn cho HiÖn nay nh÷ng nghiªn cøu vÒ nh©n qu¸ tr×nh thùc hiÖn ®Ò tμi. gièng vμ nu«i trång lan Hμi nãi chung vμ lan Hμi H»ng nãi riªng lμ kh«ng nhiÒu. ViÖc nh©n gièng b»ng con ®−êng v« tÝnh lμ TμI LIÖU THAM KH¶O ph−¬ng ph¸p tèt nhÊt ®Ó ®¶m b¶o duy tr× §Æng XuyÕn Nh− (2006). Nghiªn cøu kü tÝnh tr¹ng ban ®Çu cña c¸c gièng lan Hμi. thuËt nh©n gièng vμ nu«i trång c©y gièng Tuy nhiªn, thùc tÕ nghiªn cøu cho thÊy nh©n cña hai loμi Lan Hμi ViÖt Nam. gièng b»ng con ®−êng v« tÝnh chØ cã thÓ t¹o ra mét sè l−îng rÊt Ýt c©y con, khã ®¶m b¶o D−¬ng TÊn Nhùt (2005). Mét sè kü thuËt cho yªu cÇu b¶o tån vμ duy tr× gièng. HiÖn míi trong nh©n gièng v« tÝnh c©y lan Hμi. nay kü thuËt nu«i cÊy m« lμ ph−¬ng ph¸p B¸o c¸o khoa häc Héi th¶o øng dông c¸c nh©n gièng hiÖu qu¶ ®· ®−îc c¸c nhμ nghiªn kü thuËt míi trong nh©n gièng vμ nu«i cøu lùa chän vμ ¸p dông trong viÖc nh©n trång hoa Lan t¹i thμnh phè Hå ChÝ Minh, nhanh gièng. Ph−¬ng ph¸p nμy kh«ng chØ tr.13. t¹o ra sè l−îng lín c©y con, ®¶m b¶o cho yªu Hoμng ThÞ Nga (2000). Nghiªn cøu øng dông cÇu b¶o tån duy tr× gièng, ®ång thêi cßn gi÷ ph−¬ng ph¸p nu«i cÊy c¾t l¸t máng tÕ bμo nguyªn c¸c ®Æc tÝnh cña gièng gèc ban ®Çu. trong nh©n nhanh mét sè gièng hoa lan, Trong tù nhiªn, lan Hμi qua qu¸ tr×nh sinh LuËn v¨n th¹c sÜ: 13, 18-21. s¶n ®· dÇn trë thμnh gièng thuÇn, do ®ã khi NguyÔn Quang Th¹ch (2005). Lan Hå §iÖp - qu¶ lan Hμi ®−îc ®em vμo lμm vËt liÖu khëi kü thuËt chän t¹o, nh©n gièng vμ nu«i ®Çu cho nh©n nhanh th× tÇn suÊt xuÊt hiÖn trång, NXB. N«ng nghiÖp, Hμ Néi. c¸c biÕn dÞ lμ kh«ng ®¸ng kÓ. NguyÔn Quang Th¹ch, NguyÔn ThÞ Lý Anh, Hoμng ThÞ Nga, §inh Tr−êng S¬n (2003). 4. KÕT LUËN Nghiªn cøu x©y dùng quy tr×nh nh©n vμ nu«i trång phong lan Phalaenopsis. B¸o M«i tr−êng thÝch hîp nhÊt ®Ó gieo h¹t gièng lan Hμi H»ng lμ m«i tr−êng RE vμ m«i c¸o t¹i Héi nghÞ sinh häc toμn quèc. tr−êng nh©n nhanh gièng lan Hμi H»ng lμ NguyÔn Quang Th¹ch, Hoμng ThÞ Nga, m«i tr−êng: RE + 100 g/l dÞch chiÕt chuèi NguyÔn ThÞ Lý Anh, Vò ThÞ Hoμi (2004). +150 ml/l n−íc dõa. §ång thêi ®©y còng lμ øng dông ph−¬ng ph¸p nu«i cÊy l¸t máng m«i tr−êng thÝch hîp cho t¹o chåi tõ tÕ bμo trong nh©n nhanh in vitro mét sè protocorm cña lan Hμi H»ng. M«i tr−êng ra gièng ®Þa lan cã gi¸ trÞ, T¹p chÝ KHKT rÔ cho gièng lan Hμi H»ng lμ m«i tr−êng: RE N«ng nghiÖp sè 5 n¨m 2004:1,2. + 100 g/l dÞch chiÕt chuèi + 0.4 ppm α-NAA. Australia centre for international research Gi¸ thÓ thÝch hîp ®èi trång lan Hμi (1996). The cut flower industry 30-61. H»ng lμ gi¸ thÓ dín, trªn gi¸ thÓ nμy c©y cã Chen, J.T; chang, W. C. (2001). Effects of tû lÖ sèng cao (80%) vμ sinh tr−ëng tèt. auxins and cytokinins on direct somatic Ph©n bãn thÝch hîp cho lan Hμi H»ng ë embryogenesis from leaf explants of giai ®o¹n c©y con lμ ph©n NPK phèi trén Oncidium ‘Gower Ramsey’. Plant Growth theo tû lÖ 30:10:10 víi l−îng bãn lμ 1 g/l vμ regul. 34:229-232. chÕ ®é phun 2 lÇn/tuÇn. 200
- Nghiên cứu nhân giống in vitro và nuôi trồng giống lan hài quý P. hangianum perner Gurss (Hài Hằng)... M. Obaidul Isalam (2003), Effect of complex Le B, Tran Thanh Van K, Thorpe T (eds). Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, organic extracts on callus growth and the netherlands, pp.387-425. PLBs regeneration through Ohki S (1994). Scanning Electron microscopy embryogennesis in the Doritaenopsis of shoot differentiation invitro from leaf orchid: 229-230. ecplants of the african violet. Plant Cell Nhut DT, Teixeira da Silava JA, Bui VL, Tiss, Org.cult. 36:157-162. Tran Thanh Van K (2003b). Thin cell M.L.Pierik (1987), Vegetative propagation of layer culture system: regeneration and orchid, Invitro culture higher plants: pages: 159-167. transformation applications. Nhut DT, Van 201
CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD
-
Báo cáo khoa học: Nghiên cứu ảnh h-ởng của chế phẩm hữu cơ vi sinh MT đến
6 p | 296 | 59
-
Báo cáo tốt nghiệp: Nghiên cứu bọ trĩ gây hại trên cây ớt cay (Capsicum frutescens L) và biện pháp phòng trừ chúng tại Củ Chi, thành phố Hồ Chí Minh
38 p | 267 | 54
-
Báo cáo nông nghiệp: "NGHIÊN CứU Kỹ THUậT NHÂN GIốNG Vô TíNH CÂY LÔ HộI BằNG PHƯƠNG PHáP NUÔI CấY IN VITRO"
8 p | 145 | 49
-
Báo cáo khoa học: Nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng đến kết quả ấp
7 p | 203 | 29
-
Báo cáo khoa học : NGHIÊN CỨU MỘT SỐ BIỆN PHÁP KỸ THUẬT TRỒNG BÍ XANH TẠI YÊN CHÂU, SƠN LA
11 p | 229 | 28
-
Báo cáo nông nghiệp: " NGHIÊN CứU TạO Củ IN VITRO ở CÂY HOA LAYƠN GLADIOLUS 'CARTAGO'"
8 p | 148 | 28
-
Báo cáo nông nghiệp: " NGHIÊN CứU TáI SINH IN VITRO Và CHUYểN GEN GREEN FLUORESCENT PROTEIN VàO CÂY HOA LOA KèN (LILIUM LONGGIFLORUM) NHờ VI KHUẩN AGROBACTERIUM"
9 p | 87 | 22
-
Báo cáo nông nghiệp: "NGHIÊN CứU VậN DụNG PHƯƠNG PHáP CHỉ Số TRONG BảO HIểM NÔNG NGHIệP VIệT NAM"
8 p | 102 | 21
-
Báo cáo nông nghiệp: " NGHIÊN CứU ĐặC ĐIểM TàI NGUYÊN ĐấT Và HIệN TRạNG Sử DụNG ĐấT HUYệN M’ĐRĂK – TỉNH ĐĂK LăK"
10 p | 131 | 21
-
Báo cáo nông nghiệp: "NGHIÊN CứU NUÔI CấY IN - VITRO CÂY HOA ĐàO NHậT TÂN (Prunus persica L.)"
7 p | 93 | 15
-
Báo cáo nông nghiệp: "NGHIÊN CứU MộT Số CHỉ TIÊU CHấT LƯợNG THịT CủA Bò LAI SIND, BRAHMAN ì LAI SIND Và CHAROLAIS ì LAI SIND NUÔI TạI ĐĂK LĂK"
7 p | 90 | 14
-
Báo cáo nông nghiệp: "ĐáNH GIá MÔI TRƯờNG ĐầU TƯ VàO LĩNH VựC NÔNG NGHIệP CủA Hà NộI GóC NHìN Từ PHíA CáC ĐƠN Vị SảN XUấT KINH DOANH"
13 p | 102 | 14
-
BÁO CÁO " KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU HOÀN THIỆN QUY TRÌNH SẢN XUẤT HẠT LAI F1 TỔ HỢP LÚA LAI BA DÒNG NHỊ ƯU 718 "
6 p | 152 | 11
-
Báo cáo nông nghiệp: "NGHIÊN CứU ĐặC TíNH NÔNG SINH HọC CủA MộT Số GIốNG KÊ"
10 p | 98 | 6
-
Báo cáo nông nghiệp: "NGHIÊN CứU Sự ổN ĐịNH MùI THƠM, NĂNG SUấT Và CHấT LƯợNG GIốNG LúA HƯƠNG CốM QUA CáC THế Hệ CHọN LọC SIÊU NGUYÊN CHủNG"
8 p | 51 | 6
-
BÁO CÁO " KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU HOÀN THIỆN SẢN XUẤT HẠT LAI F1 TH3-4 "
6 p | 109 | 6
-
Báo cáo nông nghiệp: "NGHIÊN CứU TUYểN CHọN GIốNG Và VậT LIệU CHE PHủ THíCH HợP CHO LạC XUÂN TạI xã Lệ VIễN - huyện SƠN ĐộNG - tỉnh BắC GIANG"
7 p | 54 | 5
Chịu trách nhiệm nội dung:
Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA
LIÊN HỆ
Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM
Hotline: 093 303 0098
Email: support@tailieu.vn