Đề tài nghiên cứu khoa học: Nghiên cứu sơ bộ thành phần hóa học và tác dụng kháng khuẩn Invitro của vị thuốc bạch cập - Học viện Quân Y

Chia sẻ: Minh Van Thuan | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:36

Thêm vào BST

Báo xấu

263
lượt xem 45
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Đề tài: Nghiên cứu sơ bộ thành phần hóa học và tác dụng kháng khuẩn invitro của vị thuốc bạch cập nhằm xác định sơ bộ thành phần hoá học của vị thuốc bạch cập; đánh giá tác dụng kháng khuẩn invitro của dịch chiết nước vị bạch cập.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Đề tài nghiên cứu khoa học: Nghiên cứu sơ bộ thành phần hóa học và tác dụng kháng khuẩn Invitro của vị thuốc bạch cập - Học viện Quân Y

BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y Khóa luận tốt nghiệp NGHIÊN CỨU SƠ BỘ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ TÁC DỤNG KHÁNG KHUẨN INVITRO CỦA VỊ THUỐC BẠCH CẬP Cán bộ hướng dẫn: TS Triệu Duy Điệt
Nội dung của khoá luận gồm 5 phần • Đặt vấn đề • Tổng quan • Nguyên vật liệu và phương pháp nghiên cứu • Kết quả và bàn luận • Kiến nghị
Đặt vấn đề • Vị bạch cập (Rhizoma Bletillae) là thân rễ phơi hay sấy khô của cây bạch cập Bletilla striata (Thunb) Reichb.f, họ Lan (Orchidaceae), được dùng để điều trị một số bệnh theo kinh nghiệm dân gian như chảy máu cam, nôn ra máu, đau mắt đỏ, mụn nhọt sưng tấy và bỏng lửa. • Một số tác giả đã nghiên cứu trong vị bạch cập có chất nhầy (khoảng 55%), một ít tinh dầu và các hoạt chất khác chưa rõ. Tuy nhiên, thành phần hoá học và tác dụng kháng khuẩn của vị thuốc này vẫn chưa có tài liệu nào đề cập một cách cụ thể.
Đặt vấn đề • Với mục đích tìm hiểu sâu hơn về thành phần hoá học cũng như các tác dụng sinh học nói chung và tác dụng kháng khuẩn nói riêng, nhằm phục vụ cho việc sử dụng bạch cập trong công tác điều trị một cách khoa học hơn. • Chúng tôi tiến hành đề tài “Nghiên cứu sơ bộ thành phần hoá học và tác dụng kháng khuẩn invitro của vị thuốc bạch cập” với mục tiêu: – Xác định sơ bộ thành phần hoá học của vị thuốc bạch cập. – Đánh giá tác dụng kháng khuẩn invitro của dịch chiết nước vị bạch cập.
Chương 1: Tổng quan 1.1 Đặc điểm thực vật cây bạch cập (Hình 1.1)
1.3 Thành phần hoá học Bạch cập Chất Tinh Flavonoid Phytosterol nhầy dầu
1.4 Tác dụng và công dụng • Tính vị: Vị đắng, tính bình. • Quy kinh: Phế. • Tác dụng: Bổ phế sinh cơ, hoá ứ, chỉ huyết, sát trùng giải độc. • Chủ trị: Thổ ra máu, máu cam, chữa tà khí vào dạ dày, chứng huyết lỵ, nhiệt sang lâu khỏi. • Liều dùng: 4 – 12g dạng bột hay sắc.
Chương 2: Nguyên vật liệu và phương pháp nghiên cứu 2.1 Nguyên vật liệu • Nguyên liệu: Vị bạch cập nhập từ Trung Quốc (Rhizoma Bletillae). • Dung môi và hoá chất tinh khiết. • Trang thiết bị và dụng cụ: Tủ sấy, tủ hốt, máy soi huỳnh quang, máy đo phổ tử ngoại Cintra 40 (Australia)... • Các chủng vi khuẩn: – Staphylococcus aureus – Pseudomonas aeruginosa – Escherichia coli – Bacillus subtilis
2.2 Phương pháp nghiên cứu • Phương pháp nghiên cứu hoá học: – Phân tích sơ bộ các nhóm hợp chất có trong dược liệu theo phương pháp của trường Đại học Dược khoa Rumani. – Định tính các nhóm hợp chất bằng các phản ứng hoá học. – Định tính các nhóm hợp chất trong dược liệu bằng sắc kí lớp mỏng. – Chiết xuất flavonoid trong vị bạch cập bằng cồn 90°. – Tinh chế flavonoid theo phương pháp sắc kí lớp chế hoá.
– Sơ bộ nhận dạng flavonoid bằng sắc kí lớp mỏng và phổ tử ngoại. – Đánh giá sơ bộ chất nhầy trong vị bạch cập theo phương pháp trương nở (Dược điển Pháp 1972). – Định lượng chất nhầy theo phương pháp cân (Dược điển Việt Nam 2002). – Thủy phân chất nhầy bằng acid sulfuric 2N đun nóng. – Định tính các monosaccharid trong chất nhầy sau thủy phân bằng sắc kí giấy.
2.2 Phương pháp nghiên cứu • Phương pháp nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn: – Xác định tính kháng khuẩn theo phương pháp thạch lỗ. – Xác định nồng độ tối thiểu ức chế vi khuẩn theo phương pháp pha loãng.
2.3 Xử lý số liệu • Theo phương pháp thống kê y học.
Chương 3: Kết quả và bàn luận 3.1 Kết quả nghiên cứu thành phần hoá học 3.1.1 Định tính sơ bộ thành phần hoá học vị bạch cập
Chiết xuất (Hình 3.1) Bét b¹ch cËp DÞch chiÕt ChiÕt b»ng ether ethylic trong dông ether ethylic cô Soxhlet liªn tôc trong 8 giê Bét dîc liÖu ®· bay h¬i ether ethylic DÞch chiÕt ChiÕt b»ng ethanol 900 trong dông ethanol 900 cô Soxhlet liªn tôc trong 8 giê Bét dîc liÖu ®· bay h¬i ethanol 900 DÞch chiÕt níc ChiÕt b»ng dung dÞch HCl 1% B· dîc liÖu bá ®i
Kết quả định tính (Bảng 3.1) Tên nhóm chất Phản ứng định tính Kết quả Kết luận sơ bộ DC ether DC cồn DC nước Antraquinon Với dd KOH 10%   Không có Flavonoid Cyanidin   Có Chất béo Vết dầu béo trên giấy  Không có Alcaloid TT chung của alcaloid    Không có Tinh dầu Cặn có mùi thơm  Có Caroten H2SO4 đậm đặc  Không có Phytosterol Lierbermann   Có Tanin Với dd FeCl3 + Na acetat   Không có Acid hữu cơ Với Na2CO3  Không có Đường khử Fehling A, B   Có Anthocyanozid H2SO4 đậm đặ  Không có NaOH Protid Acid nitric đặc  Không có Chất nhầy Chì acetat  Có
3.1.2 Định tính các hợp chất bằng sắc kí lớp mỏng Định tính flavonoid: • Chất thử: Dịch chiết cồn của bột bạch cập, thu hồi cồn, hoà tan trong nước nóng và lọc. Chiết bằng ethyl acetat, bốc hơi ethyl acetat, hoà tan cắn trong một ít cồn 90° được dịch chấm sắc kí. • Hệ dung môi: Ethyl acetat – acid formic – H2O (8:1:1). • Chiều cao chạy là 12,7 cm. • Thuốc thử hiện màu: dung dịch AlCl3 2% trong methanol.
3.1.2 Định tính các hợp chất bằng sắc kí lớp mỏng Định tính phytosterol: • Chất thử: Dịch chiết ether bột bạch cập, cô cạn, hoà tan cắn bằng cồn 90°. • Hệ dung môi: Cloroform – aceton (8:2). • Chiều cao chạy là 12,2 cm. • Thuốc thử hiện màu: dung dịch H2SO4 20%.
3.1.2 Định tính các hợp chất bằng sắc kí lớp mỏng Định tính tinh dầu: • Chất thử: Dịch chiết ether bột bạch cập. • Hệ dung môi: Ether dầu – ether ethylic (95:5). • Chiều cao chạy là 12,8 cm. • Thuốc thử hiện màu: dung dịch Vanilin – H2SO4 mới pha.
3.1.3 Tinh chế flavonoid (chất F1) • Chiết xuất Bột bạch cập Chiết bằng ethanol trong dụng (Hình 3.5) cụ Soxhlet đun liên tục trong 8 Dịch chiết cồn giờ Thu hồi cồn Cặn Hoà trong 20ml nước nóng Lọc Chiết bằng ethyl acetat Dịch chiết ethyl acetat Thu hồi ethyl acetat Cặn Hoà trong 5ml methanol Dịch chấm sắc kí
Tinh chế F1 bằng phương pháp sắc kí lớp chế hoá • Nhận dạng F1 bằng phản ứng hoá học (Bảng 3.2) Chất thử Phản ứng định tính Màu sắc Kết quả Dịch chiết F1 Cyanidin Đỏ thẫm ++ Dịch chiết F1 Diazoni Vàng cam ++ Dịch chiết F1 FeCl3 Xanh ++ Dịch chiết F1 NaOH Vàng cam ++ Dịch chiết F1 H2SO4 đặc Đỏ cam ++