Nghiên cứu tác dụng kháng virus herpes simplex (HSV) của các diterpen lacton từ xuyên tâm liên

NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG VIRUS HERPES SIMPLEX (HSV)CỦA CÁC<br /> DITERPEN LACTON TỪ XUYÊN TÂM LIÊN<br /> <br /> Hứa Thị Như Cẩm∗, Trần Công Luận*, Huỳnh Thị Kim Loan∗∗, Trần Thu Hoa∗∗∗<br /> <br /> TÓM TẮT<br /> Mục tiêu: Khảo sát khả năng kháng HSV của các diterpen lacton chiết xuất từ cây Xuyên tâm liên nhằm tìm kiếm<br /> các loại thuốc mới có nguồn gốc từ thảo dược có khả năng kháng HSV.<br /> Phương pháp: Nhuộm xanh methylen và ño mật ñộ quang ở bước sóng 620 nm ñược dùng ñể xác ñịnh tính ñộc tế<br /> bào của chất thử ñối với tế bào Vero và khảo sát khả năng kháng virus bằng cách so sánh tế bào Vero không nhiễm<br /> virus và tế bào Vero nhiễm virus. Hoạt tính kháng virus biểu hiện theo hệ số chọn lọc SI là giá trị CC50/ IC50, với SI >10<br /> là có ý nghĩa trong trị liệu.<br /> Kết quả và kết luận: Andrographolid, neoandrographolid và dehydroandrographolid ñều có khả năng sử dụng làm<br /> thuốc trị liệu; với hệ số SI ñối với HSV-1 và HSV-2 nằm trong khoảng từ 12,8 ñến 63, ngoại trừ dehydroandrographolid<br /> trên HSV-2.<br /> Từ khoá: Diterpen lacton, andrographolid, neoandrographolid, dehydrographolid, HSV, CPE<br /> ABSTRACT<br /> <br /> STUDY ON ANTI-HERPES SIMPLEX VIRUS ACTIVITY OF DITERPEN LACTONES<br /> ISOLATED FROM ANDROGRAPHIS PANICULATA (BURM.F.) WALL. EX NEES IN VITRO<br /> Hua Thi Nhu Cam, Tran Cong Luan, Huynh Thi Kim Loan, Tran Thu Hoa<br /> Background and aims:In order to study antiherpetic activity of diterpenlacton extracted from Andrographis<br /> paniculata in vitro to replace the currently antiviral agents that cause the adverse side effects associated with longterm therapy as well as and restrict the sources of resistant virus.<br /> Methods:Methylene blue staining method for CPE inhibition assay and for evaluation the effects of samples on<br /> untreated Vero cells or Vero cells infected with HSV-1 or HSV-2. Antiviral activity was finally expressed as a selectivity<br /> index (SI), the value of CC50 divided by 50% inhibitory concentration (EC50).<br /> Results and conclusion:Andrographolid, neoandrographolid and dehydroandrographolid exhibit a potent<br /> antiherpetic activity with the SI of more than 12 to 63, except dehydroandrographolid on HSV-2.<br /> Key words: Diterpen lacton, andrographolid, neoandrographolid, dehydrographolid, HSV, CPE<br /> ĐẶT VẤN ĐỀ<br /> Virus Herpes simplex (HSV) là tác nhân gây bệnh rất thường gặp, gây các bệnh khác nhau từ nhẹ ñến nặng, trong<br /> một số trường hợp chúng có thể gây tử vong, ñặc biệt ở những bệnh nhân tổn thương miễn dịch. Sau nhiễm trùng ban<br /> ñầu, HSV sẽ tồn tại trong ký chủ suốt toàn bộ thời gian sống sau ñó. Các ñồng ñẳng nucleosid như acyclovir,<br /> penciclovir v.v…là các thuốc duy nhất ñược chính thức phê chuẩn cho ñiều trị nhiễm HSV. Các thuốc này thường có<br /> hiệu quả trong ñiều trị nhiễm HSV ban ñầu hoặc là tái nhiễm. Tuy nhiên việc sử dụng tràn lan các thuốc nucleosid ñã<br /> làm nảy sinh các chủng HSV ñề kháng với các thuốc tương ñồng, ñặc biệt là ở các bệnh nhân tổn thương miễn dịch.<br /> Nhiều quốc gia có chương trình tìm kiếm thuốc mới từ nguồn gốc tự nhiên có tác dụng kháng virus mà ít ñộc. Các<br /> nhóm hợp chất tự nhiên có tác dụng trên HSV týp 1 và HSV týp 2 khá ña dạng trong ñó có nhóm diterpen lacton từ<br /> Xuyên tâm liên[8]. Hợp chất diterpen lacton có trong Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata (Burm.f.) Wall. ex Nees)<br /> ñược chứng minh là có rất nhiều tác dụng chữa bệnh như kháng viêm, giảm ñau, hạ huyết áp, bảo vệ gan, ngừa ñái tháo<br /> ñường, kháng virus và chống ung thư,…[1, 3, 7 8]. Nhiều chế phẩm chứa hoạt chất từ Xuyên tâm liên ñã ñược sản xuất<br /> nhằm phục vụ cho người bệnh. Tuy nhiên nghiên cứu về khả năng kháng HSV của Xuyên tâm liên chưa nhiều, chỉ có<br /> một công bố ngắn về khả năng ức chế HSV-1 của các diterpen lacton, bao gồm andrographolid, neoandrographolid,<br /> dehydroandrographolid từ Xuyên tâm liên[5]. Đề tài này ñược tiến hành nhằm góp phần tìm ra những loại thuốc mới có<br /> nguồn gốc từ thảo dược ở Việt Nam có khả năng kháng HSV.<br /> NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU<br /> Nguyên vật liệu<br /> - Cao chiết methanol từ lá Xuyên tâm liên, ñược loại màu (chlorophill) bằng than hoạt tính (Cao loại màu) và 3<br /> diterpen lacton từ Xuyên tâm liên gồm andrographolid (AP), neoandrographolid (NP), dehydroandrographolid (DP)<br /> có ñộ tinh khiết > 98% do Trung tâm Sâm và Dược liệu Tp.HCM cung cấp.<br /> - HSV týp 1 và týp 2 từ bệnh phẩm ñược phân lập, ñịnh danh và lưu trữ tại Viện Pasteur Tp.HCM.<br /> - Nuôi cấy tế bào [2],[6]. Sử dụng dòng tế bào Vero CCL-81 (ATCC). Nuôi cấy tế bào trong môi trường CMRL 5%<br /> huyết thanh bào thai bê. Tế bào ñược nhân ñịnh kỳ trong 7 ngày. Tế bào dùng gây nhiễm virus ñược nhân theo tỷ lệ<br /> 2 x 105 tế bào/ml và tạo thành một lớp sau 2-3 ngày nhân.<br /> <br /> ∗<br /> <br /> Trung tâm Sâm và Dược liệu Tp. HCM<br /> Viện Pasteur Tp. HCM, ∗∗∗ Đại học Y Dược Tp. HCM<br /> Địa chỉ liên hệ: TS. Trần Công Luận<br /> ĐT: 0903671323<br /> <br /> ∗∗<br /> <br /> Email: cong luan53@Gamail.com<br /> <br /> 142<br /> <br /> Tạo nguồn HSV chuẩn[6].<br /> HSV ñược gây nhiễm vào tế bào Vero sau khi nhân 2-3 ngày, ủ tế bào ở 370C, quan sát tế bào mỗi ngày, khi tế bào<br /> có hiện tượng CPE hoàn toàn, ñem ñông tan băng 3 lần, ly tâm lấy nước nổi, bổ sung huyết thanh bào thai bê 20%, phân<br /> chia lượng nhỏ, bảo quản -700C cho ñến khi làm phản ứng.<br /> Xác ñịnh TCID50 (Tissue Culture Infective Dose 50%) của hỗn dịch virus [6].<br /> Dựa vào hiện tượng CPE, Xác ñịnh nồng ñộ virus gây chết 50% tế bào theo công thức Karber.<br /> Chuẩn bị dịch thử.<br /> Cao chiết loại chlorophill (250mg/ml), andrographolid (20mg/ml), dehydroandrographolid (10mg/ml),<br /> neoandrographolid (10mg/ml), acyclovir chuẩn (1000µg). Từ các dung dịch trên pha loãng trong môi trường CMRL 5%<br /> huyết thanh bào thai bê thành nhiều nồng ñộ ñể khảo sát.<br /> Phương pháp nhuộm tế bào bằng xanh methylen [5]<br /> Dựa vào sự bắt màu xanh methylen của màng tế bào cho các giá trị OD xác ñịnh. Sau khi tiếp xúc với virus và dịch<br /> thử, tế bào trong phiến 96 giếng ñược nhuộm bằng xanh methylen và ño mật ñộ tế bào bằng máy ño mật ñộ quang ở<br /> bước sóng 620 nm.<br /> Xác ñịnh tính ñộc tế bào của chất thử ñối với tế bào Vero.<br /> Cho vô mỗi giếng 100 µl chất thử, mỗi nồng ñộ lặp lại ba lần trên phiến 96 giếng có tế bào Vero ñã phủ kín thành<br /> một lớp, ủ ở 370C, 5% CO2 trong 48 giờ, ñổ bỏ chất không hấp phụ, nhuộm màu bằng xanh methylen và ño mật ñộ<br /> quang ở 620nm. Tính nồng ñộ gây ñộc (CC) theo công thức CC = (A – B)/A x 100. Trong ñó A là giá trị OD của chứng<br /> tế bào (tế bào không tiếp xúc với chất thử), B là giá trị OD của tế bào ñã ñược tiếp xúc với chất thử. Xác ñịnh nồng ñộ<br /> chất thử gây ñộc 50% tế bào (CC50) từ phương trình tuyến tính biểu diễn phần trăm gây ñộc tế bào CC theo nồng ñộ<br /> chất thử.<br /> Phương pháp thử nghiệm hoạt tính kháng virus.<br /> Cho chất thử tiếp xúc với virus, sau ñó cho xâm nhiễm vào tế bào [4]. Nồng ñộ virus sử dụng ñể khảo sát HSV-1 là<br /> -2,6<br /> 10 và 10-3,6; HSV-2 là 10-2,7 và 10-3,7. Tính phần trăm ức chế virus của dịch thử theo công thức IC = (C – D)/(A – D) x<br /> 100. Trong ñó C là giá trị OD của tế bào tiếp xúc với virus và dược chất, D là giá trị OD của tế bào chỉ tiếp xúc với<br /> virus (chứng dương virus), A là giá trị OD của tế bào không tiếp xúc với virus và dịch thử (chứng tế bào). Xác ñịnh<br /> nồng ñộ dược liệu ức chế 50% (IC50) sự xâm nhiễm của virus từ phương trình tuyến tính biểu diễn IC ở nồng ñộ virus<br /> ñáp ứng tốt nhất với chất thử. Chỉ số chọn lọc (hay Hệ số trị liệu) ñược tính theo công thức SI = CC50/ IC50[6].<br /> KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN<br /> Xác ñịnh hiệu giá virus theo TCID50<br /> Chỉ số TCID50 của virus ñược khảo sát ñể xác ñịnh liều virus gây nhiễm 50% tế bào nuôi cấy trước khi sử dụng<br /> virus trong thử nghiệm ñánh giá hoạt tính kháng virus. Kết quả Bảng 1 cho thấy trong 0,1 ml huyền dịch virus HSV-1<br /> và HSV-2 ban ñầu chưa pha loãng chứa lần lượt 104,6 và 104,7 liều gây nhiễm 50% tế bào nuôi cấy (TCID50 ñược tính là<br /> 10-4,6 và 10-4,7) hay ñộ pha loãng cho CPE 50% của HSV-1 và HSV-2 là 10-4,6 và 10-4,7. Như vậy có thể tiến hành khảo<br /> sát khả năng ức chế virus của chất thử với nồng ñộ virus từ 10-2 ñến 10-5.<br /> Bảng 1. Kết quả hiệu giá của chủng virus HSV-1 và HSV-2<br /> TCID50= log [ L- d(S- 0,5)]<br /> Virus<br /> L<br /> d<br /> S 10<br /> <br /> 10<br /> <br /> HSV-1 (S6)<br /> -1<br /> 1<br /> <br /> +<br /> <br /> 10<br /> 10<br /> <br /> +<br /> <br /> 10<br /> 10<br /> <br /> +<br /> <br /> 10<br /> 10<br /> <br /> +<br /> <br /> HSV-2(S8)<br /> -1<br /> 1<br /> 1<br /> 10<br /> <br /> = 4 ,1<br /> <br /> 10<br /> 10<br /> <br /> +<br /> <br /> 10<br /> 10<br /> <br /> -4,6<br /> <br /> +<br /> <br /> 10<br /> 10<br /> <br /> +<br /> <br /> 9<br /> 10<br /> <br /> +<br /> <br /> 3<br /> 10<br /> <br /> = 4 ,2<br /> <br /> -4,7<br /> <br /> TCID50<br /> 10 /0,1ml<br /> 10 /0,1ml<br /> Khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 trên tế bào Vero của cao chiết (CLM)<br /> Kết quả thử nghiệm khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 của CLM ñược trình bày trong Bảng 2 và Bảng 3. Hệ số SI<br /> trên HSV-1 và HSV-2 của CLM lần lượt là 2,5 và 5,6, cho thấy CLM thể hiện khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2,<br /> nhưng chưa có khả năng dùng trong ñiều trị.<br /> Bảng 2. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-1 của CLM<br /> Nồng ñộ cao loại màu (µg/ml)<br /> 97,7 195,3 390,6 781,3 1562,5 3125<br /> 0,51 2,4<br /> 5,87 7,81 40,06 96,9<br /> <br /> CC<br /> -3,6<br /> <br /> IC (10 )<br /> PT biểu diễn CC<br /> PT biểu diễn IC<br /> <br /> 5,4 16,6 33,3<br /> y = 0,0323x 7,5539<br /> y = 0,0649x +<br /> 2,8691<br /> <br /> 51,3 -454<br /> 2<br /> R = 0,9782<br /> 2<br /> <br /> R = 0,9612<br /> <br /> 143<br /> <br /> CC50<br /> <br /> 1781,8<br /> <br /> IC50<br /> <br /> 726,2<br /> <br /> Hệ số chọn lọc<br /> 2,5<br /> (SI)<br /> Bảng 3. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-2 của CLM<br /> Nồng ñộ cao loại màu (µg/ml)<br /> 97,7 195,3 390,6 781,3 1562,5<br /> CC<br /> <br /> 0,4<br /> -3,7<br /> <br /> IC (10<br /> <br /> )<br /> <br /> PT biểu diễn CC<br /> PT biểu diễn IC<br /> <br /> 2,4<br /> <br /> 3,9<br /> <br /> 5,3<br /> <br /> 40,1<br /> <br /> 29,3 36,5<br /> <br /> 57,4<br /> <br /> 62,3 -311,1<br /> 2<br /> <br /> CC50<br /> <br /> y = 0,0326x - 8,615 R = 0,9717<br /> 2<br /> y = 0,0977x +<br /> R = 0,993<br /> 18,815<br /> 1798<br /> <br /> IC50<br /> <br /> 319,2<br /> <br /> Hệ số chọn lọc<br /> 5,6<br /> (SI)<br /> Khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 trên tế bào Vero của andrographolid (AP)<br /> Kết quả thử nghiệm khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 của AP lần lượt ñược trình bày trong Bảng 4 và Bảng 5. Hệ<br /> số SI trên HSV-1 và HSV-2 của AP lần lượt là 2,8 và 12,8, chứng tỏ AP có khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2, nhưng<br /> chỉ có thể dùng AP trong trị liệu HSV-2.<br /> Bảng 4. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-1 của AP<br /> Nồng ñộ AP (µg/ml)<br /> 7,81 15,62 31,25 62,5<br /> CC<br /> <br /> 125<br /> <br /> 6,96 5,53 3,42 5,75 22,88<br /> <br /> 250<br /> <br /> 500<br /> <br /> 96,79<br /> <br /> 96,91<br /> <br /> -2,6<br /> <br /> IC (10 )<br /> 12,35 23,23 37,23 52,88 -120,84 -541,96 -542,64<br /> PT biểu diễn y = 0,4426x – 19,652<br /> 2<br /> R = 0,9503<br /> CC<br /> 2<br /> PT biểu diễn IC y = 0,7098x + 10,63<br /> R = 0,9558<br /> CC50<br /> <br /> 157,4<br /> <br /> IC50<br /> <br /> 55,5<br /> Hệ số chọn lọc<br /> 2,8<br /> (SI)<br /> Bảng 5. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-2 của AP<br /> Nồng ñộ AP (µg/ml)<br /> 15,625 31,25 62,5 125 250<br /> CC<br /> 6,18 8,39 9,7 10,11 49,23<br /> -3,7<br /> IC (10 )<br /> 43,6 56,6 71,4 91,1 -141,3<br /> y = 0,3895x –<br /> 2<br /> PT biểu diễn CC<br /> 1,8251<br /> R = 0,9696<br /> y = 0,8281x +<br /> 2<br /> PT biểu diễn IC<br /> 41,395<br /> R = 0,9641<br /> CC50<br /> 133,1<br /> IC50<br /> 10,4<br /> Hệ số chọn lọc<br /> (SI)<br /> 12,8<br /> Khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 trên tế bào Vero của neoandrographolid (NP)<br /> Kết quả thử nghiệm khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 của NP lần lượt ñược trình bày trong Bảng 6 và Bảng 7. Hệ<br /> số SI trên HSV-1 và HSV-2 của AP lần lượt là 22,6 và 63,4 chứng tỏ NP có khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2, có thể<br /> dùng NP trong trị liệu cả hai loại virus này.<br /> Bảng 6. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-1 của NP<br /> <br /> 144<br /> <br /> Nồng ñộ NP (µg/ml)<br /> 15,625 31,25 62,5<br /> 125<br /> 0,7<br /> 1,6<br /> 2,8<br /> 6,7<br /> 62,2<br /> 48,5<br /> 34,2<br /> 12,8<br /> <br /> 250<br /> CC<br /> 14,8<br /> -2,6<br /> IC (10 )<br /> -24,9<br /> PT biểu diễn<br /> 2<br /> y = 0,0681x – 2,408<br /> R = 0,9594<br /> CC<br /> PT biểu diễn<br /> 2<br /> y = -0,4297x + 64,603 R = 0,9689<br /> IC<br /> CC50<br /> 769,6<br /> IC50<br /> 34,0<br /> Hệ số chọn<br /> 22,6<br /> lọc (SI)<br /> Bảng 7. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-2 của NP<br /> Nồng ñộ NP (µg/ml)<br /> 15,625 31,25 62,5 125 250<br /> CC<br /> 16,5 13,8 17,4 19,7 30,2<br /> -3,7<br /> IC (10 )<br /> 55,8 22,2 14,0 - 35,2 - 78,3<br /> 2<br /> PT biểu diễn CC y = 0,0521x + 13,6 R = 0,9638<br /> y = - 0,7536x<br /> 2<br /> PT biểu diễn IC<br /> +58,351<br /> R = 0,9407<br /> CC50<br /> 698,7<br /> IC50<br /> 11,08<br /> Hệ số chọn lọc<br /> (SI)<br /> 63,04<br /> Khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 trên tế bào Vero của dehydroandrographolid (DP)<br /> Kết quả thử nghiệm khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 của DP ñược trình bày trong Bảng 8 và Bảng 9. Hệ số SI trên<br /> HSV-1 và HSV-2 của DP lần lượt là 22,76 và -54,3, chứng tỏ DP chỉ có khả năng ức chế HSV-1 và có thể dùng DP<br /> trong trị liệu virus này.<br /> Bảng 8. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-1 của DP<br /> Nồng ñộ DP (µg/ml)<br /> CC<br /> -2,6<br /> IC (10 )<br /> <br /> 7,81 15,62<br /> 6,43 11,32<br /> 40,2 28,7<br /> <br /> 31,25<br /> 15,16<br /> - 40,1<br /> <br /> 62,5 125<br /> 27,18 96,82<br /> - 94,3 - 562,1<br /> 2<br /> <br /> PT biểu diễn CC y = 0,7599x – 5,4251 R = 0,9386<br /> PT biểu diễn IC<br /> <br /> 2<br /> <br /> y = - 2,5446x +<br /> R = 0,9576<br /> 58,155<br /> 72,94<br /> 3,2<br /> 22,76<br /> <br /> CC50<br /> IC50<br /> Hệ số chọn lọc<br /> (SI)<br /> Bảng 9. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-2 của DP<br /> Nồng ñộ DP (µg/ml)<br /> CC<br /> -3,7<br /> <br /> IC (10<br /> <br /> )<br /> <br /> 7,81 15,62 31,25<br /> <br /> 62,5<br /> <br /> 125<br /> <br /> 4,48 10,54 14,58<br /> <br /> 33,03<br /> <br /> 96,8<br /> <br /> 29,5 18,4<br /> <br /> -17,3 -141,1<br /> <br /> -715,6<br /> <br /> 2<br /> <br /> PT biểu diễn CC y = 0,7816x – 5,968 R = 0,9694<br /> PT biểu diễn IC<br /> y = - 2,035x +<br /> 2<br /> R = 0,9889<br /> 47,315<br /> CC50<br /> 71,6<br /> IC50<br /> -1,3<br /> -54,3<br /> Hệ số chọn lọc<br /> (SI)<br /> Khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 trên tế bào Vero của acyclorvir (ACV)<br /> <br /> 145<br /> <br /> Khảo sát khả năng kháng HSV-1 và HSV-2 của ACV ñể làm ñối chiếu cho khảo sát các mẫu thử. Kết quả thử<br /> nghiệm khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2 của ACV ñược trình bày trong Bảng 10 và Bảng 11. ACV cho hệ số SI trên<br /> HSV-1 và HSV-2 lần lượt là 46,9 và 52,3, phù hợp với hiệu quả ñiều trị HSV-1 và HSV-2 của ACV.<br /> Bảng 10. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-1 của ACV<br /> Nồng ñộ ACV (µg/ml)<br /> 195,3 390,6 781,3 1562,5 3125<br /> 0,46 3,66 3,41<br /> 7,88 8,25<br /> <br /> CC<br /> -3,6<br /> <br /> IC (10<br /> <br /> )<br /> <br /> 62,14 46,46 -1,85<br /> <br /> -3,17 - 49,74<br /> 2<br /> <br /> PT biểu diễn CC y = 0,0033x - 0,4291 R = 0,9677<br /> y = - 0,1113x +<br /> 2<br /> PT biểu diễn IC<br /> 86,295<br /> R = 0,9908<br /> CC50<br /> 15281,5<br /> IC50<br /> <br /> 326,1<br /> <br /> Hệ số chọn lọc<br /> 46,9<br /> (SI)<br /> Bảng 11. Kết quả thể hiện khả năng ức chế HSV-2 của ACV<br /> Nồng ñộ ACV (µg/ml)<br /> 195,3 390,6 781,3 1562,5 3125<br /> CC<br /> <br /> 0,3<br /> -3,7<br /> <br /> IC (10<br /> <br /> )<br /> <br /> 3,6<br /> <br /> 53,31 42<br /> <br /> 7,7<br /> 27,93<br /> <br /> 11,8<br /> <br /> 15,1<br /> <br /> 26,81 -71,36<br /> 2<br /> <br /> PT biểu diễn CC y = 0,0037x + 2,6855 R = 0,976<br /> y = - 0,0423x +<br /> 2<br /> PT biểu diễn IC<br /> R = 0,9839<br /> 60,345<br /> CC50<br /> 12787,7<br /> IC50<br /> <br /> 244,6<br /> <br /> Hệ số chọn lọc<br /> 52,3<br /> (SI)<br /> KẾT LUẬN<br /> Cao Xuyên tâm liên có khả năng ức chế HSV-1 và HSV-2, nhưng không có ý nghĩa trong ñiều trị vì hệ số SI trên<br /> HSV-1 và HSV-2 của cao này lần lượt là 2,5 và 5,6. Andrographolid, neoandrographolid và dehydroandrographolid ñều<br /> có khả năng sử dụng làm thuốc trị liệu; với hệ số SI ñối với HSV-1 và HSV-2 nằm trong khoảng từ 12,8 ñến 63, ngoại<br /> trừ dehydroandrographolid trên HSV-2 .<br /> Chú thích chữ viết tắt: ACV acyclovir, CC50 50% cytotoxic concentration (liều gây chết 50% tế bào nuôi cấy), HSV<br /> Herpes simplex, CPE cytopathic effect (bệnh tích tế bào), HSV herpes simplex virus, HSV-1 herpes simplex virus type<br /> 1, HSV-2 herpes simplex virus type 2, IC50: 50%Inhibitory concentration, PT: phương trình, SI: selectivity index (hệ số<br /> chọn lọc), TCID50: 50% Tissue Culture Infectious Dose (liều gây nhiễm 50% tế bào nuôi cấy).<br /> Lời cảm ơn<br /> Đề tài ñược thực hiện với kinh phí do Bộ Y tế hỗ trợ.<br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO<br /> 1.<br /> 2.<br /> 3.<br /> 4.<br /> 5.<br /> 6.<br /> 7.<br /> 8.<br /> <br /> Calabrese, C., Berman, S.G., Babish, J.G., Ma, X., Shinto, L. M., Door, et al (2000) “A phase I trail of andrographolide in HIV positive<br /> patients and normal volunteer”, Phytother Research 14, pp. 333-338.<br /> Freshney, R.I. (2005), Culture of animal cells: A manual of Basic Technique, Fith Edition, John Wiley & Sons, Inc, pp. 199-216.<br /> Jain, D.C., Gupta, M.M., Saxena, S., Kumar, S. (2000), "LC analysis of hepatoprotective diterpenoids from Andrographis paniculata",<br /> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, pp. 22, 705-709.<br /> Li, Z., Liu, J., Zhao, Y. (2004), “Possible Mechanism Underlying the Antiherpetic Activity of a Proteoglycan Isolated from the Mycella of<br /> Ganoderma lucidum in vitro”, Journal Biochemistry and Molecular Biology, 38 (1), pp. 34- 40.<br /> Piret J., (2002), “Comparative Study of Mechanisms of Herpes Simplex Virus Inactivation by Sodium Lauryl Sulfate and nLauroylsarcosine”, Antimicrob Agents Chemother, 46(9), pp. 2933- 2942.<br /> Viện Dược liệu (2004), Cây thuốc và ñộng vật làm thuốc ở Việt Nam, 3, Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội, tr. 1138-1143.<br /> Wiart, C., Kumar, K., Yusof, M.Y., Hamimah, H., Fauzi Z.M. and Sulaiman, M. (2005), Antiviral Properties of Ent-labdene Diterpenes of<br /> Andrographis paniculata Nees, Inhibitors of Herpes Simplex Virus Type 1. Phytother. Res. pp. 19, 1069–1070.<br /> World Health Organization (2004), Polio Laboratory Manual, Immunization, Vaccines and Biological, 4.<br /> <br /> 146<br /> <br />