ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
---------------------
TRẦN THỊ HỒNG
XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI DƢ LƢỢNG
KHÁNG SINH NHÓM NITROFURAN TRONG
MỘT SỐ LOẠI THỰC PHẨM TƢƠI SỐNG TRÊN
ĐỊA BÀN HÀ NỘI BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ
LỎNG KHỐI PHỔ LC/MS/MS
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
Hà Nội – 2012
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
---------------------
TRẦN THỊ HỒNG
XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI DƢ LƢỢNG
KHÁNG SINH NHÓM NITROFURAN TRONG MỘT
SỐ LOẠI THỰC PHẨM TƢƠI SỐNG TRÊN ĐỊA BÀN
HÀ NỘI BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG
KHỐI PHỔ LC/MS/MS
Chuyên ngành: Hóa phân tích
Mã số: 60 44 29
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS. LÊ THỊ HỒNG HẢO
Hà Nội – 2012
MỤC LỤC
MỞ ĐẦU ..................................................................................................................... 1
CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN ....................................................................................... 3
1.1. Giới thiệu về kháng sinh nhóm nitrofuran ....................................................... 3
1.1.1. Nhóm nitrofuran là gì? ...................................................................................... 3
1.1.2. Các chất nhóm nitrofuran ................................................................................. 3
1.2. Tác dụng ca các chất kháng sinh nhóm nitrofuran…………………………….6
1.3. Dƣ lƣợng khang sinh nhom nitrofuran trong thực phẩm ..................................... 6
1.4.1. Phƣơng pháp sắc ký lỏng với detector UV ....................................................... 6
1.4.2. Phƣơng pháp phân tích vi sinh (enzyme-linked immunosorbent assay-
ELISA) ........................................................................................................................ 7
1.4.3. Phƣơng pháp sắc ký lỏng khối phổ LC/MS/MS .............................................. 8
CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ....................... 11
2.1. Đối tƣợng, mục tiêu và nội dung nghiên cứu ..................................................... 11
2.1.1. Đối tƣợng, mục tiêu nghiên cứu ...................................................................... 11
2.1.2. Nội dung nghiên cứu ....................................................................................... 11
2.2. Phƣơng pháp nghiên cứu .................................................................................... 12
2.2.1. Phƣơng pháp sắc ký lỏng khối phổ ................................................................. 12
2.2.2. Phƣơng pháp xử lý mẫu .................................................................................. 18
2.3. Hóa chất và dụng cụ nghiên cứu ........................................................................ 23
2.3.1. Dụng cụ, thiết bị .............................................................................................. 23
2.3.2 Hóa chất, chất chuẩn ........................................................................................ 24
2.3.3 Pha chế chất chuẩn ........................................................................................... 25
CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ............................................................ 27
3.1. Khảo sát điều kiện xác định các chất nhóm nitrofuran bằng LC/MS/MS ......... 27
3.1.1. Khảo sát các điều kiện khối phổ ..................................................................... 27
3.1.2. Lựa chọn cột tách ............................................................................................ 29
3.1.3. Khảo sát chƣơng trình gradient ....................................................................... 30
3.1.4. Khảo sát quy trình chiết mẫu .......................................................................... 33
3.2. Thâm đi
nh phƣơng phap .................................................................................... 38
3.2.1 Tính đc hiệu .................................................................................................... 38
3.2.1. Khảo sát lập đƣờng chuẩn ............................................................................... 38
3.2.2. Giới hạn phát hiện và giới hạn định lƣợng ca phƣơng pháp ......................... 43
3.2.3. Độ lp lại và độ thu hồi ................................................................................... 46
KẾT LUẬN ............................................................................................................... 55
TÀI LIỆU THAM KHẢO ......................................................................................... 56
DANH MỤC CA
C BẢNG
STT
Nội dung
Trang
Bảng 1.1
Câu truc hoa ho
c cua mô
t sô chât nhom nitrofuran
đƣơc xac đi
nh trong đê tai
4
Bảng 3.1
Điều kiện chạy nguồn ion hóa ESI
27
Bảng 3.2
Kết quả bắn phá các ion mẹ
28
Bảng 3.3
Năng lƣợng bắn phá và các ion con ca các chất
chuyển hóa nitrofuran
29
Bảng 3.4
Độ thu hồi mẫu thịt lợn thêm chuẩn 20 ng/g sử dụng
chiết lỏng – lỏng
35
Bảng 3.5
Độ thu hồi mẫu thịt lợn thêm chuẩn 20 ng/g sử dụng
chiết pha rắn
37
Bảng 3.6
So sanh độ thu hồi ca 2 quá trình chiết
37
Bảng 3.7
Phƣơng trình hồi quy 4 nitrofuran sử dụng nội chuẩn
41
Bảng 3.8
Phƣơng trình hồi quy 4 nitrofuran không sử dụng nội
chuẩn
43
Bảng 3.9
Giới hạn phát hiện ca AOZ trên nền mẫu thịt
44
Bảng 3.10
Giới hạn phát hiện ca AMOZ trên nền mẫu thịt
45
Bảng 3.11
Giới hạn phát hiện ca AHD trên nền mẫu thịt
45
Bảng 3.12
Giới hạn phát hiện ca SEM trên nền mẫu thịt
46
Bảng 3.13
Độ lp lại và độ thu hồi ca các nitrofuran trên nền
mẫu thịt lợn tại 1 ppb
47
Bảng 3.14
Độ lp lại và độ thu hồi ca các nitrofuran trên nền
mẫu thịt lợn tại 1,5 ppb
48
Bảng 3.15
Độ lp lại và độ thu hồi ca các nitrofuran trên nền
mẫu thịt lợn tại 2 ppb
49