zunia.vn

Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z

zunia.vn

» Khoa Học Tự Nhiên

Bài giảng Các sự cố thường gặp trong phân tích HPLC - ThS. Phan Hiền Lương

Chia sẻ: Nguyễn Thị Hiền Phúc | Ngày: | Loại File: PPT | Số trang:20

Báo xấu

211
lượt xem 16
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bài giảng cung cấp cho người học các kiến thức: Các sự cố thường gặp trong phân tích HPLC, bảo trì hệ thống, bảo trì Pump,... Hi vọng đây sẽ là một tài liệu hữu ích dành cho các bạn sinh viên đang theo học môn dùng làm tài liệu học tập và nghiên cứu. Mời các bạn cùng tham khảo chi tiết nội dung tài liệu.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Bài giảng Các sự cố thường gặp trong phân tích HPLC - ThS. Phan Hiền Lương

CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG PHÂN TÍCH HPLC ThS. Phan Hiền Lương
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Pump nguyên nhân Cách sử lý 1 – Áp suất pump Do đường dung môi Kiểm tra độ kín không kín của đường dung môi không lên hoặc có bọt khí nhỏ vào. trong các đường dung Đuổi dung môi cho môi đến khi hết bọt Tắc nghẽn check Tháo Check vane in vane in và check vane rửa,siêu âm bằng acid out do kết tủa ,bẩn HNO3 10>15% Sau rửa lại nhiều lần bằng nước cất đã lọc qua 0.45 m
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Pump nguyên nhân Cách sử lý 1 – Áp suất pump Đường dẫn dung Kiểm tra đường dẫn không lên môi đến cột không dung môi sau pump kín đến cột . Hết dung môi ,pha Thay dung môi động Hỏng đầu dò áp Thay đầu dò áp suất suất 2 Áp suất không ổn Dung môi pha động Kiểm tra dung môi định còn bọt khí pha động ,Degare hoặc đường dẫn và đường dẫn dung môi đến column không kín
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Pump nguyên nhân Cách sử lý Vane chia dung môi Kiểm tra vane chia không kín dung môi (nghe tiếng và dòng dung môi) 3 Bơm không hoạt Cài đặt thông số áp Kiểm tra lại các thông động suất max,min. số trong Column tắc nghẽn method,pump,column Vượt quá áp suất . 4 Đường nền không ổn Dung môi còn bọt khí Đuổi lại khí cho dung Vane chia dung môi môi,Degass không kín Kiểm tra vane chia mẫu (có thể có bọt khí trong vane làm cho vane đóng không kín)
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Pump nguyên nhân Cách sử lý 5 Bơm rửa hoạt động Hết nước rửa sau piton Kiểm tra thường liên tục pump cao áp. xuyên và bổ sung đầy đủ nước rửa (rất quan trọng) Hở, tuột hoặc rách đường dẫn của pump Kiểm tra chắc chắn nhu động kín và thay thế nếu cần thiết khi bị rách Hỏng cảm ứng Nhờ Kỹ thuật của háng kiểm tra thay thế
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Nguyên nhân Cách sử lý Autosample 1 Diện tích mẫu Syring bơm mẫu còn bọt Đuổi bọt xilanh tiêm không lặp Vòng chắn kim tiêm không Thay vòng chắn kim tiêm lại kín Thay đầu piston của xy Piston trong xylanh tiêm lanh quá mòn , không kín Kiểm tra dung môi rửa Hết dung môi rửa kim tiêm kim tiêm mẫu (MeOH) mẫu và vòng loop. Vòng loop không sạch Rửa lại vòng loop cho Nồng độ mẫu quá cao nên sạch rửa sau bơm không sạch Pha lại mẫu để giảm nồng hết độ hoặc tiêm thể tích nhỏ hơn. 2 Autosample Không có mẫu ở vị trí Kiểm tra vị trí để dung không chạy trong rack . môi trong rack có đúng với trong bảng sample không
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Nguyên nhân Cách sử lý Autosample 3 Autosample Rack bị kênh chưa vào Kiểm tra lại các rack cho không khởi động đúng khớp đúng vị trí và khớp được Khai báo loại Rack trong Khai báo đúng cấu hình cấu hình chưa đúng. của loại Rack 4 Autosample Không có mẫu tại vị trí Đặt mẫu đầy đủ và đúng không lấy được tiêm mẫu vị trí của khay chứa mẫu mẫu. Treo phần Các lọ đựng mẫu không sử dụng lọ và nắp đúng mềm đúng qui cách, nắp đậy qui định mẫu không đúng Lệch hẳn các vị trí của Phải calibration (hiệu toàn khay đựng mẫu chỉnh) lại vị trí của kim tiêm và khay đựng mẫu (thường là kỹ thuật viên của hãng thực hiện)
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Detector Nguyên nhân Cách sử lý 1- Lỗi quá giới hạn -Bước sóng quá thấp - Điều chỉnh lại bước hấp thu làm treo phần và hệ pha động có độ sóng đo. mềm điều khiển hấp thu cao . -Thay hệ pha động có (monitor) -VD pha động acid độ hấp thu nhỏ hơn. acetic . - Đèn hết năng lượng - Thay các đèn hết (D2 và W) năng lượng tương ứng. 2- Treo toàn hệ - Tắc nghẽn đường -Phải rửa kỹ các thống, áp suất vượt ống tại Detector đường dẫn theo đúng qui định (Nguy hiểm) qui trình rửa sau mỗi lần phân tích.
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Detector Nguyên nhân Cách sử lý 2- Treo toàn hệ - Tắc nghẽn đường -Phải làm các phản thống, áp suất vượt ống tại Detector ứng thử nghiệm sau qui định cột bên ngoài trước (nguy hiểm) khi thực hiện bằng chương trình tự động của Autosample (xem có bị đục, tủa không) - Phải kiểm tra từng đoạn xem khả năng tắc ở đoạn nào để khắc phục. Lưu ý đặc biệt: Luôn phải kiểm tra khi mới bật pump xem pha động có đi ra ngoài đường dung môi thải hay không? Nếu không có phải kiểm tra ngay Toàn hệ thống đường dẫn tránh tình trạng tắc nghẽn ống dẫn sau Detector Có thể gây ra vỡ Flowcell .
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Phần mềm Nguyên nhân Cách sử lý 1- Lỗi làm treo phần -Lỗi khai báo phần cứng - Khai báo lại phần mềm điều khiển không đúng . cứng cho đúng (monitor) -Lỗi trên phương pháp -Khai báo phương phân tích (khai báo pháp phân tích đúng không đúng các điều kiện theo các điều kiện đã mà phần mềm có thể có . chấp nhận được.) -Khai báo Detector không -Khai lại thông số đèn đúng (vd đèn,bước đúng bước sóng,khai sóng)và các cấu hình cấu hình đúng khác - Đèn hết năng lượng (D2 - Thay các đèn hết và W) năng lượng tương ứng.
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố Phần mềm Nguyên nhân Cách sử lý 1- Lỗi làm treo phần -Autosample tiêm mẫu -Kiểm tra lại vị trí mẫu mềm điều khiển nhưng trong không có -kiểm tra các bộ phận (monitor) mẫu trong autosample. -Bộ kim tiêm bị kẹt trong quá trình di chuyển. - Pump có áp suất nằm - Kiểm tra các đường ngoài khoảng qui định . dung môi, độ kín của các đường dẫn, column sử dụng, áp suất cài đặt trong phương pháp.
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Sự cố column Nguyên nhân Cách sử lý 1-Áp suất column -Cột bị tắc nghẽn -Rửa , hoạt hoá lại lên quá cao column,theo SOP hướng dẫn sử dụng column sắc ký -Pha động không phù - Thay đổi pha động, hợp với column ( Tỷ lệ điều kiện phân tích pha động, Tốc độ dòng Flow/phút) phù hợp. 2- Column chảy -Lắp column chưa kỹ -Lắp lại Column dung môi -vòng đệm không cân -Thay vòng đệm bằng xứng dụng cụ chuyên dùng
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Các thông số peak Nguyên nhân Cách sử lý 1 Peak không đối xứng Column không tương Thay đổi column nếu 2 Các Peak không tách ứng cần thiết trong điều giống như bình thường kiện có thể (vd 3 Peak bị chẻ ,gãy Hệ pha động chưa đạt R188CN..) thành 02 peak yêu cầu. Thay đổi tỷ lệ hệ pha động(ACN,MeOH, đệm.........) Điều chỉnh pH pha động. Tạo cặp Ion trong pha động Column bị nhớp do Rửa lại column hay rửa không sạch,còn hoạt hoá lại column nhiều tạp chất chứa Thay column mới trong column
CÁC SỰ CỐ THƯỜNG GẶP TRONG HPLC Các thông số peak Nguyên nhân Cách sử lý 1 Peak không đối xứng Nồng độ phân tích quá Giảm nồng độ phân 2 Các Peak không tách cao (gây bão hòa cột) tích giống như bình thường Thể tích tiêm mẫu Giảm thể tích tiêm 3 Peak bị chẻ ,gãy quá lớn (nhưng nồng mẫu thành 02 peak độ nhỏ) (thường khoảng 1020 µl)
BẢO TRÌ HỆ THỐNG HPLC
BẢO TRÌ HỆ THỐNG HPLC YÊU CẦU CHUNG: Để hệ thống HPLC luôn được hoạt động tốt, ổn định cần phải đáp ứng các yêu cầu: 1 Vị trí lắp đặt hệ thống trong điều kiện môi trường tốt : Nhiệt độ, độ ẩm, môi trường sạch bụi, đặc biệt là độ rung. 2 Điều kiện điện áp ổn định, có bộ lưu điện online, đủ dung lượng hoạt động ít nhất 30 phút khi có sự cố mất điện 3 Người vận hành phải được đào tạo vận hành và có kiến thức về HPLC. 4 Mẫu phải chuẩn bị đúng qui định, lọc qua fill lọc phù hợp với column sử dụng. Sử dụng đúng dung môi và hóa chất tinh khiết cho HPLC 5 Hệ thống HPLC phải được bảo trì và hiệu chuẩn theo đúng qui định để đẩm bảo hệ thống hoạt động tốt và cho kết quả chính xác, có độ tin cậy cao. Hệ thống phải được sử dụng thường xuyên.
BẢO TRÌ HỆ THỐNG HPLC BẢO TRÌ HỆ THỐNG HPLC: Việc bảo trì hệ thông HPLC rất quan trọng để thiết bị luôn trong tình trạng hoạt động tốt và sử dụng được lâu dài theo thời gian . I BẢO TRÌ PUMP 1 Vệ sinh bên ngoài pump hàng tháng. Bên trong pump ít nhất 2 năm/ lần (thông thường nhờ kỹ thuật viên bảo trì của hãng) để đảm bảo các bản mạch của, bộ phận giải nhiệt luôn sạch sẽ không bám bụi bẩn quá nhiều. 2 Các đường dẫn dung môi, các bình đựng hệ đệm, nước rửa phải chắc chắn luôn sạch không đóng cặn, mốc. (trong trường hợp bị bẩn phải vệ sinh ngay bằng cách gỡ đường ống và đem lắc siêu âm với dung môi chứa bên trong thích hợp) 3 Không bao giờ được để dung dịch rửa piton pump hết dung môi rửa cũng như dung dịch đóng cặn
BẢO TRÌ HỆ THỐNG HPLC II BẢO AUTOSAMPLER 1 Vệ sinh bên ngoài Autosampler hàng tháng. Bên trong ít nhất 2 năm/ lần (thông thường nhờ kỹ thuật viên bảo trì của hãng) để đảm bảo các bản mạch của, bộ phận giải nhiệt luôn sạch sẽ không bám bụi bẩn quá nhiều. 2 Phải tra dầu máy hoặc vaseline vào các trục cách tay tiêm mẫu của kim tiêm mẫu, syringe tiêm để máy chạy nhẹ nhàng và êm. Thường 3 tháng 01 lần. 3 Dùng vải không sơ lau nhẹ nhàng kim tiêm và vòng bên ngoài vòng đệm kim tiêm cho sạch (Trong trường hợp cần thiết có thể gỡ vòng đệm kim tiêm ra để siêu âm cho sạch, sau đó lắp lại) 4 Lau toàn bộ khoang, khay chứa mẫu. 5 Không bao giờ được để dung dịch rửa syringe, loop hết dung môi rửa cũng như dung dịch đóng cặn.
BẢO TRÌ HỆ THỐNG HPLC III BẢO TRÌ AUVENCOLUMN 1 Vệ sinh bên ngoài Auvencolumn hàng tháng. Bên trong ít nhất 2 năm/ lần (thông thường nhờ kỹ thuật viên bảo trì của hãng) để đảm bảo các bản mạch của, bộ phận giải nhiệt luôn sạch sẽ không bám bụi bẩn quá nhiều. 2 Lau toàn bộ khoang chứa cột, cảm ứng rò rỉ sạch. IV BẢO TRÌ DETECTOR Thường Detector chỉ cần vệ sinh sạch sẽ và kiểm tra các đường ống nối đầu ra của hệ sắc kí. Lưu ý : Không mở các nắp đậy của đèn, đường kết nối vào, ra của detector khi không có chỉ dẫn.

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

THÔNG TIN

TRỢ GIÚP

HỖ TRỢ KHÁCH HÀNG

Theo dõi chúng tôi

Chịu trách nhiệm nội dung:

Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA

LIÊN HỆ

Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM

Hotline: 093 303 0098

Email: support@tailieu.vn

Giấy phép Mạng Xã Hội số: 670/GP-BTTTT cấp ngày 30/11/2015 Copyright © 2022-2032 TaiLieu.VN. All rights reserved.