Báo cáo khoa học : Nghiên cứu qui trình nhân nhanh in vitro cây đu đủ (Carica papaya)

Chia sẻ: Nguyễn Phi Nhung Nhung | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:8

Thêm vào BST

Báo xấu

111
lượt xem 20
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Đu đủ (Carica papaya L.) là cây ăn quả nhiệt đới có giá trị dinh d-ỡng cao, đặc biệt là vitamin A (cao gấp 10 lần so với chuối dứa và gần gấp đôi xoài). Đây là một trong những loại cây ăn quả nhanh cho thu hoạch và có sản l-ợng cao, năng suất có thể đạt 40-80 tấn quả/ha sau 8-10 tháng (Trần Thế Tục, Đoàn Thế L-; 2002). Ngoài sản phẩm chính là quả, một số n-ớc còn trồng đu đủ để lấy nhựa chiết suất papain sử dụng trong y d-ợc và công nghệ chế biến thực phẩm (Vũ Công Hậu;1996)....

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Báo cáo khoa học : Nghiên cứu qui trình nhân nhanh in vitro cây đu đủ (Carica papaya)

Báo cáo khoa học Nghiên cứu qui trình nhân nhanh in vitro cây đu đủ (Carica papaya L)
T¹p chÝ KHKT N«ng nghiÖp, TËp 2, sè 3/2004 Nghiªn cøu qui tr×nh nh©n nhanh in vitro c©y ®u ®ñ (Carica papaya L) Use of in-vitro culture for rapid propagation of papaya (Carica papaya L.) NguyÔn ThÞ NhÉn1 Summary For rapid propagation of Carica papaya L, in-vitro culture method was tried using young shoot-tips as explants. The explants were surface sterilized using 15% Ca(0Cl)2 for 15 minutes and 0. 1% HgCl2 for 3 minutes (double sterilization). The young shoot-tips were cultured on the MS medium supplemented with αNAA (0.2ppm), BA (0.5ppm) and kinetin (0.5ppm) for multiple shoot induction. After 3-4 weeks, the shoot-tips developed and formed multishoot clumps, which were then sub-cultured. The 1/2 diluted nutrients of MS medium containing 0.5g/l charcoal was used for plantlet regeneration. It was found that medium MS + αNAA (0.2ppm) + BA (0.5ppm) + coconut juice (5%) was optimal for multiplication of shoots. It was also shown that combination of soil and burnt rice husk at a ratio of 1:1 was a suitable substrate for transferring the plantlets to the greenhouse. Keywords: Papaya, in vitro, culture, modified MS medium. 1. §Æt vÊn ®Ò1 ph¶i nhËp tõ §µi Loan hoÆc Trung Quèc (víi gi¸ thµnh 2500- 3000®/1 c©y con). Ngoµi ra, §u ®ñ (Carica papaya L.) lµ c©y ¨n qu¶ mét khã kh¨n ®èi víi ng−êi s¶n xuÊt lµ sau nhiÖt ®íi cã gi¸ trÞ dinh d−ìng cao, ®Æc biÖt lµ khi trång 7-8 th¸ng míi cã thÓ x¸c ®Þnh c©y vitamin A (cao gÊp 10 lÇn so víi chuèi døa vµ ®u ®ñ lµ c©y ®ùc hoÆc c¸i hoÆc l−ìng tÝnh. V× gÇn gÊp ®«i xoµi). §©y lµ mét trong nh÷ng thÕ n¨ng suÊt vµ diÖn tÝch trång ®u ®ñ trªn c¶ lo¹i c©y ¨n qu¶ nhanh cho thu ho¹ch vµ cã s¶n n−íc hiÖn nay ®Òu kh«ng t¨ng, thËm chÝ cßn l−îng cao, n¨ng suÊt cã thÓ ®¹t 40-80 tÊn cã xu h−íng gi¶m. Nghiªn cøu nµy ®−îc tiÕn qu¶/ha sau 8-10 th¸ng (TrÇn ThÕ Tôc, §oµn hµnh nh»m gãp phÇn kh¾c phôc nh÷ng nh−îc ThÕ L−; 2002). Ngoµi s¶n phÈm chÝnh lµ qu¶, ®iÓm ®· nªu trªn. mét sè n−íc cßn trång ®u ®ñ ®Ó lÊy nhùa chiÕt suÊt papain sö dông trong y d−îc vµ c«ng 2. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu nghÖ chÕ biÕn thùc phÈm (Vò C«ng §èi t−îng nghiªn cøu lµ gièng ®u ®ñ §µi HËu;1996) Loan ®−îc nhËp qua trung t©m VAC, Tr−êng ë n−íc ta, ®u ®ñ ®−îc trång ë tÊt c¶ c¸c §¹i häc N«ng nghiÖp I (§HNNI). Nguyªn tØnh. Tuy nhiªn, c©y ®u ®ñ th−êng bÞ nhiÔm liÖu sö dông trong nh©n gièng lµ c¸c chåi ngän bÖnh virus (tû lÖ c©y bÞ nhiÔm cã khi lªn tíi trªn c©y con cã 3-4 tuÇn tuæi vµ ®Ønh sinh 90%) lµm cho s¶n l−îng ®u ®ñ bÞ thÊt thu tr−ëng cña c¸c chåi nh¸nh trªn c©y ®u ®ñ ®ang nhiÒu; gièng ®u ®ñ dÔ bÞ lÉn t¹p do ®ã khã cã cho thu qu¶. C¸c chåi ®−îc thu vÒ, röa s¹ch, thÓ t×m ®−îc gièng ®u ®ñ thuÇn, h¹t ®u ®ñ lai khö trïng b»ng hypocloric canxi (Ca(OCl)2) 5% vµ clorua thuû ng©n (HgCl2) 0,1%, sau ®ã 1 ®−a vµo nu«i cÊy trªn m«i tr−êng MS Khoa N«ng häc, Tr−êng §HNNI 174
Nghiªn cøu qui tr×nh nh©n nhanh in vitro c©y ®u ®ñ (Murashige – Skoog). C¸c ph−¬ng thøc khö b»ng hypocloric canxi (Ca(OCl)2) 5% vµ trïng nh− sau: clorua thuû ng©n (HgCl2) 0,1%. KÕt qu¶ ®−îc C«ng thøc1: §èi chøng (röa b»ng n−íc v« tr×nh bµy ë h×nh 1. trïng); C«ng thøc 2: Hypocloric canxi 5% trong 78 thêi gian 15 phót; 80 C«ng thøc 3: Clorua thuû ng©n 0,1% trong 70 60 Tû lÖ mÉu s¹ch (%) 3 phót; 60 C«ng thøc 4: Khö trïng kÐp (khö trïng 50 Ca(OCl)2 tr−íc, sau ®ã khö trïng tiÕp b»ng 40 HgCl2). 30 C¸c chÊt ®iÒu tiÕt sinh tr−ëng (§TST) 20 20 10 ®−îc sö dông trong thÝ nghÖm lµ benzin 11 10 adenin (BA), kinetin (K) thuéc nhãm 2 0 0 xytokinin vµ αNAA (naphtyl axetic axit) 0 Ca(0Cl)2 + HgCl2 Ca(0Cl)2 §/C thuéc nhãm auxin, nång ®é dao ®éng tõ HgCl2 Ph−¬ng thøc KT 0,2-1ppm tuú theo tõng thÝ nghiÖm. Ngoµi MÉu tõ v−ên −¬m MÉu tõ v−ên s¶n xuÊt ra cßn bæ sung thªm n−íc dõa vµo m«i H×nh 1. HiÖu qu¶ cña c¸c ph−¬ng thøc khö trïng tr−êng nu«i cÊy. ThÝ nghiÖm ®−îc tiÕn hµnh t¹i bé m«n Sinh lý Thùc vËt khoa N«ng häc §HNNI KÕt qu¶ trªn h×nh 1 cho thÊy: chåi ®u ®ñ b¾t buéc ph¶i khö trïng mÉu tr−íc khi ®−a vµo 3. KÕt qu¶ vµ th¶o luËn nu«i cÊy. Ph−¬ng thøc khö trïng cã hiÖu qu¶ 3.1. Kü thuËt t¹o chåi tõ mÉu cÊy ban ®Çu nhÊt lµ khö trïng kÐp (c«ng thøc 4), tû lÖ mÉu s¹ch ®¹t 60% ®èi víi mÉu lÊy tõ v−ên s¶n Khö trïng mÉu xuÊt vµ 78% khi c¸c mÉu cÊy ®−îc lÊy tõ §Ó lµm s¹ch mÉu tr−íc khi ®−a vµo nu«i v−ên −¬m (sau 12 ngµy nu«i cÊy). ë 2 c«ng cÊy trong ®iÒu kiÖn v« trïng, ng−êi ta cã thÓ thøc khö trïng ®¬n, tû lÖ mÉu s¹ch chØ ®¹t 11- sö dông nhiÒu chÊt khö trïng kh¸c nhau nh−: 20% (mÉu lÊy tõ v−ên −¬m) vµ 2-10% (mÉu hypocloric canxi, H2O2, clorua thuû ng©n... lÊy tõ v−ên s¶n xuÊt). §èi víi c©y ®u ®ñ, chóng t«i ®· khö trïng B¶ng 1. ¶nh h−ëng cña chÊt ®iÒu tiÕt sinh tr−ëng ®Õn kh¶ n¨ng bËt mÇm tõ mÉu cÊy H×nh thøc t¹o ChiÒu C«ng Sè chåi ChÊt §TST (ppm) Tû lÖ t¹o chåi cao thøc tb/mÉu chåi (%) chåi αNAA Kinetin (CT) cÊy BA Chåi Cal-chåi (cm) 1(®c) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 - - 2 0,2 0,0 0,0 40 60 100 1,0 1,3 3 0,2 0,5 0,0 60 40 100 2,2 1,4 4 0,2 1,0 0,0 65 35 100 2,8 1,5 5 0,2 0,0 0,5 60 40 100 2,5 1,5 6 0,2 0,0 1,0 70 30 100 3,2 1,6 7 0,2 0,5 0,5 70 30 100 3,5 1,6 175
NguyÔn ThÞ NhÉn MS cã 0,2ppm αNAA vµ 0,5ppm BA ¶nh h−ëng cña chÊt ®iÒu tiÕt sinh tr−ëng trong qu¸ tr×nh t¹o chåi tõ mÉu cÊy ban ®Çu ¶nh h−ëng n−íc dõa (ND) trong m«i tr−êng Mét trong nh÷ng vai trß quan träng cña nh©n nhanh xytokinin lµ kÝch thÝch sù ph©n ho¸ cña m« Do cã hµm l−îng dinh d−ìng cao vµ giµu cÊy theo h−íng t¹o chåi. Trªn c¬ së ®ã, chóng xytokinin nªn n−íc dõa th−êng ®−îc bæ sung t«i ®· bæ sung vµo m«i tr−êng nu«i cÊy vµo m«i tr−êng vµ tá ra rÊt cã hiÖu qu¶ víi kinetin, benzin adenin (BA) víi nång ®é tõ 0,5 – nhiÒu ®èi t−îng nu«i cÊy kh¸c nhau. Trong thÝ 1,0ppm vµ cã sù kÕt hîp víi αNAA ë nång ®é nghiÖm nµy, n−íc dõa ®−îc sö dông ë nång ®é 0,2ppm. KÕt qu¶ ®−îc tr×nh bµy trªn b¶ng 1 5% trªn m«i tr−êng cã chÊt §TST (0,2αNAA + cho thÊy: ®èi víi c©y ®u ®ñ, chÊt ®iÒu tiÕt sinh 0,5BA) vµ kh«ng cã chÊt §TST. KÕt qu¶ thÝ tr−ëng (§TST) rÊt cÇn cho sù t¹o chåi tõ m« nghiÖm cho thÊy: trªn m«i tr−êng cã n−íc dõa cÊy ban ®Çu. TÊt c¶ c¸c c«ng thøc cã bæ sung kh«ng chØ t¨ng hÖ sè nh©n chåi mµ cßn t¨ng chÊt §TST (trõ CT1) ®Òu cho tû lÖ t¸i sinh kh¶ n¨ng sinh tr−ëng, ph¸t triÓn cña chåi. chåi 100%, riªng c¸c c«ng thøc cã bæ sung Trªn m«i tr−êng ®Æc, hÖ sè nh©n t¨ng tõ 2,8 kinetin vµ BA sè chåi trung b×nh/mÉu cÊy dao lªn 3,3 lÇn khi kh«ng cã chÊt §TST vµ tõ 3,6 ®éng tõ 2,2 – 3,5. C¶ 2 lo¹i xytokinin víi lªn 4,6 lÇn khi cã chÊt §TST. §èi víi m«i nång ®é 1 ppm ®Òu cho sè chåi nhiÒu h¬n tr−êng láng, hÖ sè nh©n còng cã diÔn biÕn nång ®é 0,5ppm. Còng lµ nång ®é 1ppm, t−¬ng tù. nh−ng khi sö dông phèi hîp 0,5K víi 0,5BA, sè chåi/ mÉu cÊy ®¹t cao nhÊt (CT7). 3.2. Kü thuËt nh©n nhanh côm chåi 6 2 ¶nh h−ëng cña kinetin vµ BA ®Õn hÖ sè 1.8 HSN (sè lÇn/th¸ng) 1.7 1.8 nh©n chåi 1.7 5 1.5 1.6 Tõ kÕt qu¶ trªn, chóng t«i ®· chän 1.4 ChiÒu cao chåi(cm) 1.4 kinetin vµ BA trªn nÒn MS cã nång ®é 4 1.3 0,2ppm αNAA ®Ó tiÕp tôc nh©n c¸c côm chåi 1.2 thu ®−îc. KÕt qu¶ m« t¶ ë h×nh 2 cho thÊy: 3 1 4.9 trong giai ®o¹n nh©n nhanh, nång ®é 0.8 4.5 4.2 4.2 2 4.1 xytokinin thÝch hîp cho sù h×nh thµnh c¸c 0.6 3 chåi míi tõ c¸c côm chåi cÊy chuyÓn chØ lµ 0.4 1 0,5ppm. ë nång ®é nµy, hÖ sè nh©n (HSN) 0.2 ®· ®¹t 4,9 víi K vµ 4,5 lÇn víi BA sau 4 0 0 tuÇn nu«i cÊy. §èi víi BA, tuy HSN cã thÊp 5K 0K A 5K BA BA 5B h¬n chót Ýt nh−ng chåi mËp vµ ph¸t triÓn 0. 1. 0 .5 0. 1. +0 ChÊt §TST(ppm) c©n ®èi h¬n nªn chóng t«i ®· chän m«i 0. tr−êng nh©n nhanh chåi ®u ®ñ lµ : HÖ sè nh©n chåi(lÇn) ChiÒu cao côm chåi H×nh 2. ¶nh h−ëng cña K vµ BA ®Õn hÖ sè nh©n chåi 176
Nghiªn cøu qui tr×nh nh©n nhanh in vitro c©y ®u ®ñ B¶ng 2. ¶nh h−ëng cña n−íc dõa ®Õn HSN vµ sù sinh tr−ëng cña chåi sau 4 tuÇn cÊy chuyÓn M«i tr−êng ®Æc (cã agar) M«i tr−êng láng (kh«ng agar) T¨ng chiÒu T¨ng khèi T¨ng khèi C«ng thøc HSN HSN T¨ng chiÒu cao cao côm l−îng côm l−îng côm (lÇn) (lÇn) côm chåi (cm) chåi (cm) chåi (g) chåi (g) 1. MS(®/c) 2,8 0,7 1,98 2,7 1,4 2,10 2.MS+ND 3,3 1,1 2,78 3,2 2,1 3,49 3.MS+§TST 3,6 1,2 2,97 3,1 2,6 3,12 4.MS+§TST+ND 4,6 1,2 3,44 4,4 3,3 3,69 cÇn t¨ng nhanh sù sinh tr−ëng cña chåi. Khi so s¸nh hiÖu qu¶ cña 2 tr¹ng th¸i m«i 3.3. Giai ®o¹n ra rÔ cña chåi ®u ®ñ in vitro tr−êng kh¸c nhau chóng t«i nhËn thÊy chåi ®u ¶nh h−ëng cña nång ®é αNAA ®Õn qu¸ tr×nh ra ®ñ h×nh thµnh thuËn lîi h¬n trªn m«i tr−êng rÔ cña chåi ®u ®ñ trong èng nghiÖm cã agar. ë m«i tr−êng nµy HSN lu«n cao h¬n Vai trß ®Æc tr−ng nhÊt cña αNAA còng m«i tr−êng láng ë tÊt c¶ c¸c c«ng thøc thÝ nghiÖm. Ng−îc l¹i, kh¶ n¨ng sinh tr−ëng cña nh− c¸c auxin nãi chung lµ kÝch thÝch sù ra rÔ. c¸c côm chåi l¹i m¹nh h¬n trªn m«i tr−êng ë nång ®é tõ 0,025 – 0,1ppm trong m«i tr−êng nu«i cÊy, αNAA ®· cã ¶nh h−ëng râ láng (h×nh 3). Nh− vËy ®Ó nh©n nhanh chåi ®u ®ñ, chóng ta tíi sù ra rÔ cña chåi ®u ®ñ (b¶ng3). cã thÓ sö dông m«i tr−êng lµ: KÕt qu¶ b¶ng 3 cho thÊy: Sù ra rÔ cña MS+0,2ppm αNAA + 0,5ppm BA + n−íc dõa (5%) chåi ®u ®ñ trong èng nghiÖm thuËn lîi nhÊt trªn m«i tr−êng cã αNAA rÊt thÊp cã agar khi cÇn t¨ng HSN vµ kh«ng cã agar khi 5 4 3.69 3.49 3.44 4.5 3.5 3.12 2.97 4 2.78 3 HÖ sè nh©n chåi (lÇn) T¨ng khèi l−îng(g) 3.5 2.5 2.1 3 4.6 1.98 4.4 2 2.5 3.6 3.3 2.8 3.1 2 1.5 3.2 2.7 1.5 1 1 0.5 0.5 0 0 1 2 3 4 1 2 3 4 C«ng thøc thÝ nghiÖm C«ng thøc thÝ nghiÖm M«i tr−êng ®Æc M«i tr−êng láng M«i tr−êng ®Æc M«i tr−êng láng H×nh 3. So s¸nh hiÖu qu¶ cña m«i tr−êng ®Æc vµ m«i tr−êng láng trong giai ®o¹n nh©n chåi 177
NguyÔn ThÞ NhÉn (0,025ppm). Tû lÖ chåi ra rÔ trªn m«i tr−êng d−ìng chuÈn trªn nÒn m«i tr−êng cã hoÆc nµy ®¹t cao nhÊt trong sè 4 c«ng thøc thÝ kh«ng cã than ho¹t tÝnh. KÕt qu¶ ®−îc tr×nh ghiÖm (95%). Nång ®é αNAA cao h¬n kh«ng bµy ë b¶ng 4. chØ øc chÕ sù ra rÔ mµ cßn lµm gi¶m chÊt Nh− vËy, chåi ®u ®ñ ®Òu ra rÔ víi tû lÖ l−îng bé rÔ. §Æc biÖt ë nång ®é 0,1ppm tû lÖ cao trªn c¶ 6 c«ng thøc thÝ nghiÖm. Tuy chåi ra rÔ kh«ng chØ gi¶m nhiÒu so víi c«ng nhiªn, khi gi¶m hµm l−îng dinh d−ìng thøc tèi −u vµ thÊp h¬n c¶ ®èi chøng. xuèng 1/2 so víi nång ®é chuÈn sù ph©n ho¸ mÇm rÔ nhanh h¬n. NÕu cã bæ sung than ho¹t tÝnh, 100% sè chåi ra rÔ sau 4 tuÇn. VÒ 3.4. ¶nh h−ëng cña than ho¹t tÝnh vµ hµm chÊt l−îng bé rÔ còng ®−îc ®¸nh gi¸ tèt h¬n l−îng dinh d−ìng ®Õn qu¸ tr×nh ra rÔ ë 2 c«ng thøc cã hµm l−îng dinh d−ìng Khi nghiªn cøu ¶nh h−ëng cña hµm l−îng gi¶m xuèng 50%. Còng trªn m«i tr−êng nµy, dinh d−ìng chóng t«i ®· bè trÝ thÝ nghiÖm hiÖu qu¶ cña than ho¹t tÝnh thÓ hiÖn râ h¬n, víi 3 c«ng thøc lÇn l−ît tõ MS chuÈn ®Õn gi¶ tû lÖ chåi ra rÔ t¨ng nhanh vµ sè rÔ/ c©y còng xuèng cßn 1/2 vµ 1/4 hµm l−îng dinh t¨ng tõ 3,5 lªn 4,2 rÔ. B¶ng 3. ¶nh h−ëng cña αNAA ®Õn qu¸ tr×nh ra rÔ cña chåi ®u ®ñ trong èng nghiÖm RÔ/c©y( rÔ sau αNAA Tû lÖ chåi ra rÔsau khi cÊy (%) Dµi tb rÔ ChÊt l−îng CT 30 ngµy) (cm) bé rÔ (ppm) 10 ngµy 20 ngµy 30 ngµy 1(®/c) 0,000 27 38 71 2,9 ± 0.5 2,6 ± 0,7 TB 2 0,025 40 78 95 4,1 ± 0.4 3,1 ± 0,3 Tèt 3 0,050 19 40 66 3,2 ± 0,3 2,5 ± 0,6 TB 4 0,100 11 24 40 2,3 ± 0,6 2,7 ± 0,5 TB B¶ng 4. ¶nh h−ëng cña hµm l−îng dinh d−ìng vµ than ho¹t tÝnh ®Õn qu¸ tr×nh ra rÔ cña chåi ®u ®ñ in vitro TG ra rÔ Tû lÖ chåi ra rÔ(%) ChÊt l−îng bé rÔ CT M«i tr−êng (ngµy) 1 tuÇn 2 tuÇn 3 tuÇn 4 tuÇn 5 tuÇn rÔ/c©y Dµi(cm) 1 MS 8 6,7 26,7 42,3 76,7 93,3 1,4 1,4 2 MS+THT 8 10,2 28,0 45,1 91,3 92.7 2,5 1,6 3 1/2MS 5 16,7 36,7 54,0 96,7 100,0 3,5 2,4 4 1/2MS+THT 4 20,4 42,3 60,8 100 - 4.2 2,2 3 1/4MS 6 13,3 40,0 71,7 90,0 100,0 1,7 3,7 5 1/4MS+THT 7 12,8 43,6 72,5 93,3 100 2,2 2,9 178
Nghiªn cøu qui tr×nh nh©n nhanh in vitro c©y ®u ®ñ B¶ng 5. Tû lÖ sèng vµ kh¶ n¨ng sinh tr−ëng, ph¸t triÓn cña c©y ®u ®ñ in vitro trªn c¸c gi¸ thÓ kh¸c nhau (%) Tû lÖ sèng (%) ChiÒu cao(cm) L¸/c©y(l¸) CT Lo¹i gi¸ thÓ 15 15 5 ngµy 15 ngµy Ban ®Çu Ban ®Çu ngµy ngµy 1 §Êt − í t ( ® / c ) 91,7 73,3 2,0 3,2 4,0 6,2 2 TrÊu + C¸t (1:1) 91,7 66,7 2,1 3,2 4,3 6,0 3 TrÊu + §Êt (1:1) 93,3 80,0 2,1 3,5 4,2 6,7 4 C¸t + §Êt (1:1) 90,0 73,3 2,0 3,2 4,2 6,3 Tõ kÕt qu¶ cña 2 thÝ nghiÖm trªn, chóng t«i ®· chän m«i tr−êng ra rÔ lµ MS/2 cã than ho¹t tÝnh (0,5g/lÝt) 3.5. Kh¶ n¨ng thÝch øng ban ®Çu cña c©y khi chuyÓn tõ èng nghiÖm ra v−ên −¬m KÕt thóc giai ®o¹n nh©n trong èng nghiÖm, chóng t«i ®· ®−a c©y ra v−ên −¬m vµ trång trªn 4 nÒn gi¸ thÓ kh¸c nhau. Tû lÖ sèng còng nh− kh¶ n¨ng sinh tr−ëng, ph¸t triÓn cña c©y sau 15 ngµy ®−îc ghi l¹i ë b¶ng 5. Nh− vËy, gi¸ thÓ trång cã ¶nh h−ëng ®Õn tû lÖ sèng cña c©y ®u ®ñ khi ®−a tõ trong èng nghiÖm ra v−ên −¬m. Tû lÖ rÔ ®¹t cao nhÊt trªn nÒn ®Êt trén víi than trÊu tû lÖ 1:1(80% ë C©y 2 th¸ng tuæi C©y 8 th¸ng tuæi thêi ®iÓm 15 ngµy sau khi trång). Ba lo¹i gi¸ thÓ cßn l¹i H×nh 4. Mét sè h×nh ¶nh vÒ nh©n gièng in vitro c©y ®u ®ñ cã sù sai kh¸c kh«ng nhiÒu vÒ tû lÖ ra rÔ, tuy nhiªn lo¹i gi¸ thÓ Ýt gi÷ Èm (trÊu+c¸t) ®· cho tû lÖ sèng tèt nhÊt ®èi víi c©y ®u ®ñ lµ kÕt hîp cña c©y thÊp nhÊt. §èi víi chiÒu cao, sè l¸ hypocloric canxi (Ca(OCl)2) 0,15% víi clorua sù sai kh¸c gi÷a c¸c nÒn gi¸ thÓ kh«ng râ thuû ng©n (HgCl2) 0,1%, sau ®ã ®−a vµo nu«i rÖt. cÊy trªn m«i tr−êng MS cã 1ppm BA hoÆc 0,5ppm BA vµ 0,5ppm kinetin. 4. KÕt luËn Khi nh©n côm chåi, m«i tr−êng thÝch hîp §Ó cã tû lÖ mÉu s¹ch cao, kh¶ n¨ng bËt lµ MS cã 0,2ppm αNAA kÕt hîp víi 0,5ppm mÇm cña mÉu cÊy tèt, ph−¬ng thøc khö trïng 179
NguyÔn ThÞ NhÉn BA vµ cã bæ sung 5% n−íc dõa (HSN lµ 4,5 than häat tÝnh. vµ chÊt l−îng chåi tèt). C©y ®u ®ñ in vitro khi chuyÓn ra v−ên −¬m Trong qu¸ tr×nh nh©n côm chåi cã thÓ sö cã tû lÖ sèng cao trªn nÒn ®Êt trén víi than dông m«i tr−êng cã agar khi cÇn t¨ng nhanh trÊu tû lÖ 1:1. tèc ®é ®Î chåi (HSN cao). Ng−îc l¹i, khi cÇn t¨ng nhanh tèc ®é sinh tr−ëng cña chåi nªn Tµi liÖu tham kh¶o nu«i cÊy trªn m«i tr−êng kh«ng cã agar (t¨ng chiÒu cao vµ t¨ng khèi l−îng). Vò C«ng HËu (1996). C©y ¨n qu¶ ë ViÖt Nam. Tû lÖ chåi ra rÔ cao vµ chÊt l−îng bé rÔ tèt Nxb N«ng nghiÖp. trªn m«i tr−êng gi¶m mét nöa hµm l−îng dinh TrÇn ThÕ Tôc, §oµn ThÕ L− (2002). C©y ®u ®ñ vµ d−ìng cña m«i tr−êng MS chuÈn cã thªm 0,5g kü thuËt trång. Nxb Lao ®éng. 180