Enzyme cắt giới hạn

Trong bài báo này, đưa ra quy trình sản xuất thang chuẩn SY-60 gồm 7 băng, băng nhỏ nhất có kích thước 60 bp, hỗ trợ cho các thang chuẩn thương mại 50 bp. Đoạn DNA 60 bp có vị trí nhận biết của EcoRI ở hai đầu 5’ và 3’ được tổng hợp nhân tạo bằng PCR, tự nối với nhau nhờ T4 DNA ligase và được tách dòng tạo plasmid pSY-60. Cắt không hoàn toàn pSY-60 với enzyme giới hạn EcoRI tạo nên thang chuẩn SY60 gồm 7 băng, băng nhỏ nhất 60 bp, bước nhảy giữa 2 băng là 60 bp.

7p spiritedaway36 25-11-2021 39 2   Download

Nghiên cứu này nhằm mục đích xác định SNP rs1801320, rs1801321 trên gen Rad51 và nguy cơ mắc ung thư vú ở phụ nữ Việt Nam. 184 bệnh nhân nữ mắc ung thư vú và 196 phụ nữ khỏe mạnh được lựa chọn vào nghiên cứu. Kỹ thuật cắt enzym giới hạn (PCR - RFLP) được sử dụng để phân tích SNPs gen Rad51.

8p vijersey2711 10-03-2021 26 1   Download

Một số đa hình đơn nucleotide của gen XRCC3, trong đó có rs1799794, ảnh hưởng đến quá trình sửa chữa DNA và do đó ảnh hưởng đến nguy cơ mắc ung thư ở người. Nghiên cứu này có mục tiêu xác định sự phân bố của SNP rs1799794, đồng thời đánh giá mối liên quan giữa SNP này với nguy cơ mắc ung thư vú. Bài viết được tiến hành trên 208 bệnh nhân ung thư vú và 208 phụ nữ khỏe mạnh có độ tuổi tương ứng. Kỹ thuật enzyme cắt giới hạn (PCRRFLP) được áp dụng để xác định đa hình gen.

5p kequaidan10 03-03-2021 14 0   Download

Để phân tích đa hình này ở quần thể người Việt Nam, nghiên cứu có mục tiêu tối ưu phương pháp khuếch đại gen - Đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn (Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism - PCR - RFLP) với các cặp mồi, chu trình nhiệt, enzyme giới hạn được lựa chọn, thử nghiệm để xác định điều kiện tối ưu.

7p viamman2711 07-08-2020 20 2   Download

Hệ thống giới-hạn sửa đổi R-M II tồn tại ở thế giới vi khuẩn gồm có hai chức năng quan trọng là cắt giới hạn và methyltransferase. Enzym giới hạn II đã có vai trò thiết yếu cho sự thúc đẩy của sinh học phân tử. Tiếp theo là các methyltransferase đã trở thành enzym mà các nhà khoa học quan tâm đến, vì có thể có vai trò quan trọng trong quá trình điều hòa gen.

6p vivientiane2711 01-07-2020 27 2   Download

hIGF-1 (human Insulin-like Growth Factor 1) là nhân tố tăng trưởng do gan tiết ra dưới sự kích thích của hormone tăng trưởng GH. hIGF-1 được chỉ định để điều trị bệnh lùn ở trẻ do thiếu hụt hIGF-1 và được sử dụng để kích thích sự phát triển khối lượng cơ ở các vận động viên thể dục thể thao. Nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng, hIGF-1 có khả năng kiểm soát lượng glucose trong máu ở bệnh nhân đái tháo đường type 1 và type 2, có tác động tích cực đến một số bệnh thần kinh như bệnh alzheimer, một số bệnh tim mạch và nhiều nghiên cứu ứng dụng chức năng của hIGF-1 vẫn đang được tiến hành.

6p trinhthamhodang 24-10-2019 79 1   Download

Trên trình tự gen này không có vị trí cắt của các enzyme giới hạn là HindIII, BamHI, NdeI, XhoI...., do đó chúng tôi đã thiết kế thêm trình tự nhận biết của hai enzyme NdeI vào đầu 5' và HindIII vào đầu 3' của gen mã hóa luciferase để phục vụ cho mục đích biểu hiện và sản xuất enzyme này bằng phương pháp tái tổ hợp.

7p thithizone 16-07-2019 76 1   Download

Mục đích của nghiên cứu này là ứng dụng phương pháp đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn để phân tích đa hình gen APOA5 rs662799 ở quần thể người Việt Nam. Nghiên cứu này đã tối ưu hóa phương pháp phân tích đa hình APOA5 rs662799 với enzyme MseI và xác định được sự phân bố tỉ lệ kiểu gen và alen ở 405 trẻ em tiểu học nam tại Hà Nội.

7p viuzumaki2711 08-05-2019 44 1   Download

Tách chiết DNA theo quy trình chuẩn của Bộ môn Hóa sinh và Sinh học phân tử, Trường Đại học Y khoa Phạm Ngọc Thạch, Thành phố Hồ Chí Minh từ máu người đạt kết quả tốt. Tối ưu hóa thành công phản ứng PCR khuếch đại trình tự gene HFE với độ chính xác 5 ng/µl. Xác định điểm đột biến C282Y tại vị trí nucleotide 845 trên trình tự gene HFE bằng kỹ thuật RFLP với enzyme cắt giới hạn RsaI.

8p vi4mua 01-03-2019 59 3   Download

Nghiên cứu này được tiến hành với mục tiêu xác định tính đa hình đơn A17893G tại intron 5 của gen XRCC3 ở nhóm bệnh nhân mắc ung thư buồng trứng so với nhóm đối chứng. 102 bệnh nhân mắc ung thư buồng trứng và 102 người không mắc ung thư buồng trứng đã được lựa chọn vào nghiên cứu. Sử dụng kỹ thuật enzym cắt giới hạn (RCR - RFLP) để phân tích kiểu gen của XRCC3, sau đó xác định tỉ lệ phân bố và khả năng mắc bệnh của các kiểu gen.

8p trangcham1896 12-12-2018 48 1   Download

Bài viết thiết kế được hai vector pCambia2300/Ubiquitin/IbOr/Nos và pCambia2300/Glo1/IbOr/Nos. Các vector này được chuyển vào chủng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens C58. Chủng A. tumefaciens C58 mang vector chuyển gen được khẳng định qua kiểm tra bằng phản ứng colony PCR và cắt bằng các enzyme giới hạn phù hợp. Những kết quả thu được sẽ cung cấp nguồn nguyên liệu cho nghiên cứu chuyển gen liên quan đến thể hiện gen IbOr và tạo cây ngô chuyển gen giầu carotenoid.

7p nguyenhong1235 28-11-2018 81 2   Download

Bài giảng "Chương 1: Các Enzyme chủ yếu" cung cấp cho người học các kiến thức: Enzyme cắt giới hạn, Enzyme terminal transferase, phản ứng cắt bằng RE, DNA polymerase ở Prokaryote, DNA polymerase bền nhiệt, DNA polymerase bền nhiệt có hoạt tính sửa sai,... Mời các bạn cùng tham khảo.

37p doinhugiobay_12 15-01-2016 167 24   Download

Bài giảng "Công nghệ di truyền - Chương 1: Các enzyme chủ yếu" cung cấp cho người học các kiến thức: Enzyme cắt giới hạn, Methyl hóa, Enzyme terminal transferase, phản ứng cắt bằng RE, DNA polymerase, DNA polymerase ở Prokaryote,... Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.

37p doinhugiobay_10 12-01-2016 148 13   Download

Kỹ thuật RFLP là kỹ thuật nghiên cứu tính đa hình chiều dài của các phân đoạn DNA dựa trên điểm cắt các enzim giới hạn (Restriction Enzyme, RE). Mời các bạn cùng tham khảo tài liệu sau đây để nắm rõ hơn nội dung kiến thức cần thiết.

13p nguyenvanlieu09 16-12-2014 187 47   Download

Báo cáo thực hành Kỹ thuật di truyền và Sinh học phân tử gồm các báo cáo về: Bài 1 Tách chiết DNa tổng số từ E.Coli, Xác định nồng độ DNA bằng quang phổ kế, Bài 3 Điện di trong Gel Agrose, bài 4 Kĩ thuật PCR, Bài 5 Tinh sạch sản phẩm PCR, Bài 6 Cắt DNA bằng Enzyme giới hạn.

20p haokhitihon 12-03-2014 1392 187   Download

Rectriction Enzyme loại II bao gồm những enzyme có trình tự nhận biết chuỗi nucleotide đặc hiệu. Khi nhận biết được trình tự đó, chúng cắt ngay tại vị trí nhận biết. 1- Trình tự nhận biết của RE: Có thể nói các RE này là những công cụ thực thụ để cắt các DNA. Sự cắt này xảy ra ở một vùng đặc biệt được nhận biết bởi enzyme.

5p butmaulam 23-09-2013 105 9   Download

Vi-rút gây bệnh đốm trắng (WSSV) là một trong những vi-rút gây nguy hiểm cho tôm sú (Penaeus monodon). Mục tiêu của nghiên cứu nhằm tạo tái tổ hợp ADN của gen VP28 ở WSSV để sử dụng làm kháng nguyên cho việc phát triển kháng thể. Đoạn ADN của VP28 được khuếch đại từ vi-rút gây bệnh đốm trắng trên tôm sú thông qua biểu hiện vạch sáng đặc hiệu 516bp. Tiến hành phân cắt sản phẩm PCR bằng enzyme giới hạn BamHI và PstI, gắn kết với plasmid pUC18 bằng enzyme T4 DNA ligase. Tổ hợp VP28-pUC18 được biến nạp vào vi khuẩn Escherichia...

7p sunshine_7 19-07-2013 115 11   Download

Mười sáu dòng vi khuẩn có khả năng cố định đạm được phân lập từ đất vùng rễ lúa được trồng tại bốn huyện thuộc Tỉnh Đồng Tháp là Lai Vung, Thanh Bình, Tam Nông và Tháp Mười (với 4 dòng ở mỗi Huyện) được phân tích vùng 16S rDNA bằng cặp mồi tổng 27F và 1495R, sản phẩm PCR được phân cắt bởi 4 enzyme cắt giới hạn (RE) là MspI, SmaI, EcoRI, HinfI. Kết quả enzyme MspI có mức đa hình cao nhất với chỉ số PIC là 0,9238, EcoRI có tỷ lệ đa hình thấp nhất với chỉ số PIC là 0,6104....

9p sunshine_7 19-07-2013 121 11   Download

Các enzym giới hạn cắt ADN kép ở các vị trí đặc hiệu ngoài hoặc trong trình tự nucleotid đ-ợc nhận ra và để lại 3 dạng các đầu tận cùng: phẳng; chéo có ADN đơn 3’ thừa, chéo có ADN đơn 5’ thừa. Nghiên cứu này dùng một ph-ơng pháp cho phép xác định kiểu cắt của các enzym giới hạn. Ph-ơng pháp gi.i trình tự Sanger đ-ợc sử dụng để phân tích ADN ở xung quanh vị trí cắt nh-ng dùng chất không phóng xạ. Song song các đoạn ADN tổng hợp kéo dài đ-ợc cắt bằng enzym...

4p sunshine_6 02-07-2013 102 12   Download

Bệnh Hemophilia A liên quan đến các đột biến trên gen mã hóa cho yếu tố đông máu số VIII. Vent ADN polymerase có khả năng xúc tác tổng hợp ADN mới chính xác hơn so với Taq ADN polymerase. Mục tiêu: Xác định qui trình phát hiện đột biến ở intron 18 và 19 của gen mã hóa cho yếu tố đông máu số VIII sử dụng Vent ADN polymerase trong kỹ thuật PCR - RFLP. Phương pháp: Phản ứng chuỗi PCR và cắt enzyme giới hạn RFLP. Kết quả: Phát hiện được 16 trên 29 mẫu bệnh nhân Hemophilia A có đột...

5p sunshine_3 28-06-2013 91 15   Download