Bài giảng chứng chỉ sinh học phân tử: Hóa mô miễn dịch - PGS.TS. Hứa Thị Ngọc Hà

Chia sẻ: Nguyễn VĂN TÈO | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:108

Thêm vào BST

Báo xấu

280
lượt xem 41
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bài giảng chứng chỉ sinh học phân tử: Hóa mô miễn dịch nhằm giúp người học biết được hóa mô miễn dịch là gì, biết được các ứng dụng trong chẩn đoán, biết được các ứng dụng trong tiên lượng một số bệnh ung thư, biết được các ứng dụng trong điều trị một số bệnh ung thư, biết được các điều kiện đánh giá kết quả nhuộm và các hạn chế của phương pháp.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Bài giảng chứng chỉ sinh học phân tử: Hóa mô miễn dịch - PGS.TS. Hứa Thị Ngọc Hà

Bài giảng chứng chỉ sinh học phân tử Đối tượng: NCS, CKII, CH, CKI, BSNT HOÙA MOÂ MIEÃN DÒCH PGS. TS. HÖÙA THÒ NGOÏC HAØ
Mục tiêu • Biết được hóa mô miễn dịch là gì. • Biết được các ứng dụng trong chẩn đoán • Biết được các ứng dụng trong tiên lượng một số bệnh ung thư • Biết được các ứng dụng trong điều trị một số bệnh ung thư • Biết được các điều kiện đánh giá kết quả nhuộm và các hạn chế của phương pháp
HOÙA MOÂ MIEÃN DÒCH (IMMUNOHISTOCHEMISTRY ‟ IHC) LAØ GÌ? • Laø phöông phaùp xaùc ñònh vò trí khaùng nguyeân ñaëc hieäu hieän dieän trong moâ hoaëc teá baøo (baøo töông, maøng teá baøo, nhaân) döïa treân phaûn öùng mieãn dòch (khaùng nguyeân – khaùng theå) keát hôïp vôùi hoùa chaát.
1. ÑAÏI CÖÔNG
HOÙA MOÂ MIEÃN DÒCH ‟ LÒCH SÖÛ PHAÙT TRIEÅN  1940s: Coons (mieãn dòch huøynh quang) Chaát phaùt huyønh quang Khaùng theå Khaùng nguyeân - moâ ñoâng laïnh, - Keát quaû khoâng löu tröõ - caàn trang bò kính hieån vi huøynh quang ñöôïc laâu
HOÙA MOÂ MIEÃN DÒCH ‟ LÒCH SÖÛ PHAÙT TRIEÅN  1974: Taylor et al: xaùc ñònh moät soá khaùng nguyeân trong teá baøo ôû moâ ñaõ ñöôïc xöû lyù thöôøng quy taïi caùc phoøng xeùt nghieäm GPB. - keát quaû löu tröõ ñöôïc laâu - coù theå söû duïng treân caùc khoái neán löu tröõ töø tröôùc - Khoâng caàn KHV huøynh quang  1990s: aùp duïng roäng raõi treân toaøn theá giôùi.  Hieän nay: xeùt nghieäm thöôøng quy ôû caùc phoøng XN GPB
Khaùng nguyeân Antigens  töø ngoaøi cô theå: protein hay polysaccharide cuûa vi khuaån, ñoäc toá, virus, flagella, ...
Khaùng Nguyeân • töø trong cô theå: KN goàm: - caùc sôïi trung gian (intermediate filaments), • - thuï theå hormon (ER, PR, AR...), • - caùc protein laø saûn phaåm cuûa ñoät bieán gen: c-kit, p53, Her2, EGFR ...
Antigen - Epitope: Laø moät phaàn nhoû cuûa khaùng nguyeân, nôi tieáp xuùc vôùi khaùng theå. Moät khaùng nguyeân coù theå coù vaøi epitope. Moãi epitope ñöôïc nhaän bieát bôûi moät khaùng theå rieâng bieät. Caàn boäc loä epitope tröôùc khi cho tieáp xuùc vôùi khaùng theå (trong quy trình nhuoäm HMMD).
Khaùng theå: Antibodies  Laø caùc protein nhaän bieát vaø keát noái vôùi khaùng nguyeân ñaëc hieäu.  Ñöôïc saûn xuaát töø söï ñaùp öùng vôùi bieåu hieän cuûa khaùng nguyeân.  Moãi khaùng theå coù ít nhaát hai vò trí keát noái khaùng nguyeân.
Caáu truùc cuûa khaùng theå Moät phaân töû hình chöõ Y vôùi 4 chuoãi protein: 2 chuoãi nheï 2 chuoãi naëng  Vuøng thay ñoåi (Fab): hai phaàn ñaàu cuûa nhaùnh chöõ Y, chöùa vò trí keát noái khaùng nguyeân. Vuøng oån ñònh (vuøng Fc): phaàn goác cuûa chöõ Y, quan troïng vì coù theå keát noái vôùi boå theå hay caùc teá baøo.
Cấu trúc của kháng thể
Khaùng Theå (KT) „ Khaùng theå ña doøng: gaây mieãn dòch ôû ñoäng vaät vôùi khaùng nguyeân ñaëc hieäu. „baát lôïi: (1) chöùa caùc KT khoâng ñaëc hieäu „ (2) coù khuynh höôùng nhuoäm neàn cao. „ Khaùng theå ñôn doøng: saûn xuaát baèng kyõ thuaät lai „ raát tinh khieát chæ phaûn öùng vôùi moät khaùng nguyeân.
Nguyeân taéc cuûa kyõ thuaät hoùa moâ mieãn dòch Heä thoáng phaùt hieän
Heä thoáng phaùt hieän „ Men + Chaát maøu (DAB : maøu vaøng naâu) „ (EAC : maøu ñoû)
CAÙC KYÕ THUAÄT MIEÃN DÒCH MEN • 1. Mieãn dòch men tröïc tieáp: „Khaùng nguyeân (moâ) + khaùng theå thöù nhaát men + men „ ñôn giaûn, nhanh, coù tính Khaùng theå I ñaëc hieäu . ít nhaïy caûm do thieáu heä thoáng phoùng ñaïi daáu hieäu nhaän bieát. Khaùng nguyeân (moâ)
CAÙC KYÕ THUAÄT MIEÃN DÒCH MEN • 2. Mieãn dòch men giaùn tieáp men Khaùng theå II „Khaùng nguyeân (moâ) + khaùng theå thöù nhaát + khaùng theå thöù hai coù gaén men ñoàng thôøi khaùng Ig loaøi cuûa khaùng theå thöù nhaát. Khaùng theå I Khaùng nguîeân (moâ)