Bài thuyết trình môn Vi sinh vật kỹ thuật môi trường: Cách xác định số lượng vi sinh vật trực tiếp bằng buồng đếm

Chia sẻ: Lương Ngọc Hoa Xuân | Ngày: | Loại File: PPTX | Số trang:39

Thêm vào BST

Báo xấu

186
lượt xem 22
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bài thuyết trình môn Vi sinh vật kỹ thuật môi trường: Cách xác định số lượng vi sinh vật trực tiếp bằng buồng đếm giới thiệu cơ sở lí thuyết của phương pháp xác định số lượng vi sinh vật trực tiếp bằng buồng đếm, cách tiến hành phương pháp, ưu nhược điểm của từng phương pháp. Đây là tài liệu tham khảo dành cho sinh viên ngành Môi trường.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Bài thuyết trình môn Vi sinh vật kỹ thuật môi trường: Cách xác định số lượng vi sinh vật trực tiếp bằng buồng đếm

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐH CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM Khoa: CNSH & KTMT MÔN: VI SINH VẬT KỸ THUẬT MÔI TRƯỜNG ĐỀ TÀI: CÁCH ĐẾM SỐ LƯỢNG VI SINH VẬT TRỰC TIẾP BẰNG BUỒNG ĐẾM GVHD:Nguyễn Duy Thanh NHÓM: 6
MỤC LỤC
Mở đầu v Trong bất kỳ một loại mẫu vật nào, muốn biết số lượng chung của các nhóm vi sinh vật cũng như số lượng riêng của mỗi nhóm thành phần, đều cần phải đếm số lượng tế bào của chúng. v Để xác định số lượng vi sinh vật trong đất, nước, không khí và dịch nuôi cấy … người ta
Mở đầu Trong đó có 2 phương pháp dưới đây được dùng nhiều hơn cả: • Phương pháp xác định trực tiếp số lượng tế bào bằng phiến kính có khung đếm Goriaep (phòng đếm hồng cầu). • Phương pháp xác định gián tiếp số lượng tế bào bằng cách đếm số lượng khuẩn lạc mọc trên môi trường thạch.
Phương pháp đếm trực tiếp bằng buồng đếm
Cơ sở lý thuyết ü Phương pháp đếm trực tiếp cho phép ta đếm số lượng vi sinh vật có kích thước lớn như nấm men, tảo, bào tử vi nấm, không dùng để đếm vi khuẩn ü Đếm số lượng tế bào trực tiếp trên kính hiển vi, nhờ buồng đếm hồng cầu
Buồng đếm Hemocytometer
Cấu tạo của buồng đếm
Nguyên tắc cấu tạo của phòng đếm: đó là một phiến kính dày hình chữ nhật, chia thành 3 khoảng, khoảng giữa chia thành 2 khoảng nhỏ. Trên mỗi khoảng này có kẻ một lưới đếm, gồm rất nhiều ô vuông . Mỗi ô vuông lại được chia ra thành 16 ô vuông nhỏ , mỗi ô nhỏ có diện tích là 1/400 mm2, và chiều dày là 1/10 mm, như vậy thể tích 1 ô vuông nhỏ là 1/4000 mm3 hay 1/4000.000 ml. Phòng đếm có 1 lá kính dày để đậy.
Cách tiến hành • Pha loãng mẫu đảm bảo không lớn hơn 10 tế bào và không nhỏ hơn 2,5 tế bào • Lắc đều ống nghiệm pha loãng mẫu. • Nhỏ 1 giọt dung dịch mẫu vào giữa phòng đếm và đậy lại bằng lá kính, chú ý không để tạo bọt khí. • Di chuyển nhẹ nhàng phòng đếm để dung dịch mẫu tràn đầy các khoang. • Đặt phòng đếm lên bàn kính hiển vi, để yên 3 – 5 phút, sau đó tiến hành
Sau khi cho lên kính hiển vi
Cách đếm số lượng vi sinh vật
• Cách đếm số tế bào trong mỗi ô lớn như sau: mỗi ô nhỏ có 4 cạnh giới hạn, đếm số lượng tế bào nằm trọn trong ô và những tế bào nằm trên 2 cạnh liên tiếp cùng chiều, • ví dụ: đếm cạnh bên dưới và cạnh bên phải. Đếm các ô từ trái sang phải, từ hàng trên xuống hàng dưới rồi đổi chiều. Cứ đếm như vậy cho đến ô cuối cùng của 16 ô con.
Cách tính toán • Gọi A là số lượng tế bào đếm được trong 80 ô nhỏ • Số lượng tế bào trong 1mm3 được tính theo công thức sau: số tế bào trong 1mm3 • Trong đó: 4000 = 400*10 (1/400 mm2 : diện tích một ô nhỏ ; 1/10 mm: chiều cao từ mặt buồng đếm tới lammelle) APL : độ pha loãng
Ưu và nhược điểm của phương pháp Nhược điểm: • Ưu điểm : quá trình này • không phân biệt được tế cho phép xác định nhanh bào sống và tế bào chết. chóng mật độ vsv chứa • dễ nhầm lẫn tế bào vi sinh vật với các vật thể trong mẫu. khác trong mẫu. • khó đạt được độ chính xác cao. • Không thích hợp với huyền phù vi sinh vật có mật độ thấp.
• Cho xem đoạn clip https://www.youtube.com/watch? v=pP0xERLUhyc
The end
Xác định số lượng vi sinh vật gián tiếp bằng phương pháp đếm khuẩn lạc
Nguyên tắc của phương pháp Ø Đếm số lượng vi sinh vật hiếu khí xuất hiện trong mẫu Ø Cấy một thể tích mẫu nhất định lên một môi trường đã tạo lập sẵn( hộp petri), thuận lợi cho việc phát triển của vi sinh vật Ø Sau một thời gian nhất định thì mỗi khuẩn lạc được tạo thành tương ứng với số lượng tế bào phát triển lên Ø Ta đếm số khuẩn lạc sau đó tính toán số lượng vi sinh vật