Đề tài "Sơ đồ chiết tách và phân lập một số Flavonoid từ cây Lá móng tay ở quy mô PTN"

Chia sẻ: Pham Khanh Dung | Ngày: | Loại File: DOC | Số trang:12

Thêm vào BST

Báo xấu

359
lượt xem 108
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Từ nhiều thế kỷ nay, thực vật được con người sử dụng vào rất nhiều lĩnh vực trong cuộc sống, từ nông nghiệp, công nghiệp đến sử dụng để chữa bệnh. Ở nhiều nước châu Á nói chung và Việt Nam nói riêng, việc sử dụng các loại dược liệu để phòng và chữa bệnh đã được biết từ lâu. Ngày nay, việc nghiên cứu và bào chế dược phẩm từ các nguồn nguyên liệu tự nhiên đang là một hướng mới bởi tính ưu việt, tính đa dạng của nó và đặc biệt là khả năng không gây những phản...

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Đề tài "Sơ đồ chiết tách và phân lập một số Flavonoid từ cây Lá móng tay ở quy mô PTN"

---------- Đề Tài: Sơ đồ chiết tách và phân lập một số Flavonoid từ cây Lá móng tay ở quy mô PTN
MỤC LỤC MỞ ĐẦU ............................................................................................................................... 2 I. Giới thiệu về cây Lá móng tay .......................................................................................... 3 I.1. Mô tả cây:.................................................................................................................... 4 I.2. Phân bố, sinh thái: ...................................................................................................... 4 I.3. Bộ phận dùng:............................................................................................................. 4 I.4. Công dụng và tác dụng dược lý của cây Lá móng tay ................................................. 4 II. Tổng quan về lớp chất Flavonoid.................................................................................... 5 II.1. Giới thiệu chung ........................................................................................................ 5 II.2.. Tác dụng sinh học và ứng dụng của Flavonoid........................................................ 6 II.2.1. Tác dụng làm bền thành mạch .............................................................................. 6 II.2.2. Tác dụng chống oxy hóa ....................................................................................... 6 II.2.3. Tác dụng của Flavonoid đối với enzyme ............................................................... 7 II.2.4. Tác dụng kháng sinh của Flavonoid ..................................................................... 7 II.2.5. Tác dụng chống ung thư ....................................................................................... 8 II.2.6. Một số ứng dụng của Bioflavonoid trong Y học .................................................... 8 III. Các công trình nghiên cứu được công bố về cây Lá móng tay ................................. 9 IV. Chiết phân đoạn và phân lập các hợp chất ..............................................................11 TÀI LIỆU THAM KHẢO ...................................................................................................14 MỞ ĐẦU Từ nhiều thế kỷ nay, thực vật được con người sử dụng vào rất nhiều lĩnh vực trong cuộc sống, từ nông nghiệp, công nghiệp đến sử dụng để chữa bệnh. Ở nhiều n ước châu Á nói chung và Việt Nam nói riêng, việc sử dụng các loại dược liệu để phòng và chữa bệnh đã được biết từ lâu. Ngày nay, việc nghiên cứu và bào chế dược phẩm từ các nguồn nguyên liệu tự nhiên đang là một hướng mới bởi tính ưu việt, tính đa dạng của nó và đặc biệt là khả năng không gây những phản ứng phụ có hại cho cơ thể con người. Đây chính là một
hướng nghiên cứu cũng là một nhiệm vụ đòi hỏi sự cộng tác của các ngành: Hóa học các hợp chất thiên nhiên, Công nghệ sinh học, Dược học và Y học. Nội dung tiểu luận này trình bày về sơ đồ chiết tách và phân lập một số Flavonoid từ cây Lá móng tay ở quy mô PTN dựa trên những công trình nghiên cứu đã được công bố. Tiểu luận gồm 4 phần: Tổng quan về cây Lá móng tay - Tìm hiểu về hợp chất Flavonoid - Một số công trình nghiên cứu về cây Lá móng tay - Sơ đồ chiết tách, phân lập một số Flavonoid từ cây Lá móng tay - I. Giới thiệu về cây Lá móng tay Tên khoa học: Lawsonia inermis L. (tên đồng nghĩa – Lawsonia alba Lamk) - Tên Việt Nam: Lá móng - Ngoài ra cây còn có tên: cây Lá móng tay, cây thuốc mọi, lựu mọi, thuốc mọi lá - lựu, chỉ giáp hoa, phương tiên hoa, tán mạt hoa, khau thiên (Tày), khoa thiên (Lào). Họ: Tử vi (Lythraceae) -
Hình 1.1: Cây Lá móng tay hoa trắng và đỏ I.1. Mô tả cây: Cây nhỏ, cao 2-6 m. Thân nhẵn, phân cành nhiều, đôi khi có gai ở đầu cành. Lá mọc đối, hình bầu dục hoặc hình trứng, gốc thuôn, đầu nhọn, dài 2-3 cm, rộng 1cm, cuống ngắn, mép nguyên, lá kèm rất nhỏ, màu trắng nhạt. Cụm hoa mọc thành chùm phân nhánh ở ngọn, hoa màu trắng, vàng hoặc đỏ, mùi thơm mạnh, đài 4 răng có 2 hạch ở gốc, tràng 4 cánh rời, mọc xen kẽ với lá đài. Quả nang, hình cầu to bằng quả hạt tiêu, trong chứa nhiều hạt nhỏ, có góc cạnh. Mùa hoa quả: tháng 9-10. Trước đây ở nước ta, nhân dân thường dùng Lá móng tay để nhuộm đỏ móng tay, móng chân trong dịp tết Đoan Ngọ (mùng 5 tháng 5). I.2. Phân bố, sinh thái: Lá móng tay có nguồn gốc ở vùng Bắc Mỹ hoặc Tây Nam Á, được trồng rải rác ở vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới thuộc Tây Nam Á, Ấn Độ, Bắc Phi để làm cảnh, lấy lá làm thuốc nhuộm và thuốc chữa bệnh. Ở Việt Nam Lá móng tay được trồng rải rác quanh bờ rào, nơi có nhiều ánh sáng, đất ẩm. Cây sinh trưởng mạnh vào mùa xuân- hè, rụng lá vào mùa đông, cây ra hoa quả hàng năm và có khả năng tái sinh vô tính mạnh. Về mùa đông, người ta thường cắt bớt cành để cây ra nhiều chồi nhánh. I.3. Bộ phận dùng: Lá dùng tươi hay phơi khô. Thân, rễ và hoa cũng được dùng nhưng ít hơn. I.4. Công dụng và tác dụng dược lý của cây Lá móng tay Lá móng tay chữa vấp ngã tổn thương, chảy máu, ứ máu, phụ nữ kinh nguyệt không đều, bụng to, da vàng, phù thũng, phong thấp, nhức mỏi, tê bại, mụn nhọt, ghẻ
lở. Dùng ngoài, Lá móng tay tươi giã nát, trộn với giấm thanh đắp chữa ghẻ lở, nhọt độc lên mủ, hắc lào, rắn cắn, sâu bọ độc cắn. Ở Campuchia, Lá móng tay dùng làm thuốc lợi niệu, chữa ho và viêm phế quản. Ở Ấn Độ, Lá móng tay dùng điều trị bệnh về da, thiếu máu, nhiễm khuẩn, trĩ, rò hậu môn. Ở Angieri, Lá móng tay đựơc dùng trong y học dân gian trị loét và rối loạn chức năng gan. Ở Ả Rập Xêút, Lá móng tay được dùng trị đau, sốt, thấp khớp. Ở Nigiêria, nhân dân dùng Lá móng tay ngâm trong nước lạnh trong 3 hoặc 4 ngày, sau đó chắt lấy dịch ngâm và uống ngày 3 lần trong thời kỳ chờ đợi có kinh nguyệt để điều trị kinh nguyệt không đều. Nhân dân vài vùng khác dùng Lá móng tay để gây sẩy thai. Ngoài tác dụng chữa bệnh, Lá móng tay còn giúp chăm sóc, làm đẹp tóc và giúp tóc chắc khoẻ. Đặc biệt nó còn giúp ngăn ngừa gàu, giúp mọc tóc, mang lại sức sống cho mái tóc mỏng manh, dễ gãy và tạo màu cho tóc.Với tóc nhờn, Lá móng tay còn giúp loại bỏ các bã nhờn, giúp tóc sạch và khô. II. Tổng quan về lớp chất Flavonoid II.1. Giới thiệu chung Flavonoid là một nhóm hợp chất tự nhiên lớn thường gặp trong thực vật, có ở phần lớn các bộ phận của các loại thực vật bậc cao, đặc biệt l à ở hoa (màu vàng trong hoa hòe...). Flavonoid có khung cơ bản là C6-C3-C6 gồm 2 vòng benzen A và B nối với nhau qua một mạch 3 cacbon, cấu trúc có thể là vòng kín hoặc mở. B A Trong đa số trường hợp thì mạch 3 cacbon đóng vòng với vòng A và tạo nên 1 dị vòng có oxy (vòng C). Tuỳ theo vị trí gắn của vòng bezen B vào dị vòng ở C2 hoặc C3, ta có các hợp chất Flavonoid có nhân Flavan hay Isoflavan. Tại các vòng có đính một hoặc nhiều nhóm hydroxyl tự do hoặc đ ã thay thế một phần, vì vậy về bản chất chúng là các polyphenol có tính axit. Trong thực vật, Flavonoid tồn tại chủ yếu ở hai dạng: dạng tự do (aglycol) và dạng liên kết với glucid (glycozit). Trong đó, dạng aglycol thường tan trong các dung
môi hữu cơ như ete, aceton, cồn nhưng hầu như không tan trong nước, còn dạng glycozit thì tan trong nước nhưng không tan trong các dung môi không phân c ực như aceton, benzen, chloroform. II.2.. Tác dụng sinh học và ứng dụng của Flavonoid II.2.1. Tác dụng làm bền thành mạch Trong y học, Vit.P có tác dụng làm bền thành mạch. Người ta đã phát hiện ra rằng Vit.P là tập hợp của nhiều loại sắc tố thực vật gốc Flavonoid. Đại diện điển hình là Catechin và Leucoanthoxyan rồi đến Flavonol, Flavanon và một số Chalcon… Những Flavonoid trên có tác dụng làm tăng sức bền và tính đàn hồi của thành mao mạch chủ yếu do khả năng điều hòa, làm giảm sức thấm vào mao mạch, ngăn cản không cho protit của máu thẩm dịch qua các mô khác, có tác dụng dự phòng vỡ mao mạch, gây xuất huyết, phù thũng. Flavonoid thường song song tồn tại cùng Vit.C trong tự nhiên. Trong cơ thể người và động vật, hai chất này có tác dụng hỗ trợ lẫn nhau nên thường được phối hợp trong điều trị dự phòng và chữa các bệnh chảy máu cấp, các bệnh gây tổn thương sức bền của mao mạch (ban xuất huyết, xung huyết võng mạc, huyết áp cao, thương hàn…), các bệnh gây tăng sự thẩm thấu của mao mạch (phù nề, thủy thũng…), chữa các bệnh hoại huyết. II.2.2. Tác dụng chống oxy hóa Trong cơ thể bình thuờng, các gốc superoxide O2- được sinh ra trong quá trình hô hấp tế bào chuyển thành nước theo phản ứng với xúc tác là enzym superoxide dismutaza, catalaza hay glutathione peroxydaza. Từ gốc superoxide ban đầu sẽ sinh ra hàng loạt gốc: 1O2, OH-, ...và các gốc tự do khác. Các gốc này được gọi là các dạng oxy hoạt động, chúng kém bền và có khả năng phản ứng rất lớn. Phản ứng của gốc tự do là nguyên nhân sinh ra quá trình peroxy hóa các chất hữu cơ. Các gốc OH và oxy đơn bội 1O2 thường là tác nhân khơi mào phản ứng. Tiếp đó các gốc thứ cấp phản ứng với các phân tử mới khác tạo ra phản ứng dây chuyền, cứ thế nhân mãi cho tới khi tiêu tốn hết cơ chất (không có enzym tham gia nữa). Quá trình này gây nên sự phá hoại nghiêm trọng các tổ chức trong cơ thể, gây nên những biến đổi như ung thư, hoại tử, rối loạn tiêu hóa… Đến giai đoạn dập tắt mạch, các gốc phản ứng với nhau tạo ra những sản phẩm bền, không gốc. Hậu quả của quá trình là sự polymer hóa. Ở người già các tổ chức bị xơ chai hóa, không mềm mại vì phản ứng gốc tự do đã làm cho các gốc liên hợp lại với nhau.
Như vậy các phân tử sinh học đã bị biến đổi mạnh, những protein bất thường xuất hiện trong cơ thể. Sự tăng số lượng các gốc tự do hoạt động l à nguyên nhân phát sinh nhiều bệnh nguy hiểm và sự lão hóa cơ thể. Ngoài các gốc tự do phát sinh trong quá trình sinh lý bình thường, cơ thể còn bị ảnh hưởng bởi các yếu tố bên ngoài: tia phóng xạ, tia cực tím, thuốc trừ sâu, các chất nitro hữu cơ, hydrocacbon đa vòng, … Như vậy các gốc tự do hoạt động, kém bền vững luôn đ ược sinh ra tong tế bào hủy hoại dần cơ thể sống. Để chống lại tác hại đó, mỗi cơ thể cần có những hệ thống các chất chống oxy hóa nội sinh, ngoài ra còn có những chất Antioxidant khác được đưa vào cơ thể theo con đường thức ăn nước uống. Ngày nay, người ta cho rằng Flavonoid là chất Antioxidant lý tưởng đối với con người. II.2.3. Tác dụng của Flavonoid đối với enzyme Các công trình nghiên cứu ảnh hưởng của Flavonoid đối với các enzym động vật cho biết chúng có tác dụng ức chế nhiều enzyme như: protein tyrosin kinaza, protein kinaza, hualuromidaza, kìm hãm không đặc hiệu peroxydaza, lipooxygenaza, oxydoreductaza… Bên cạnh tác dụng kìm hãm, nhiều Flavonoid có khả năng làm tăng hoạt tính enzyme prolin hydroxydaza, là một enzym quan trọng trong quá trình làm lành vết thương và tạo sẹo. Bản thân các chất Flavonoid khi ở trong cơ thể động vật có thể tồn tại ở dạng oxy hóa hoặc khử và chịu nhiều biến đổi phức tạp khác nhau cho n ên có thể trong các điều kiện khác nhau nó sẽ thể hiện hoạt tính sinh học khác nhau: kìm hãm hoặc kích thích hoạt động của enzyme, hoặc kích thích có mức độ có điều kiện. Tác dụng Flavonoid lên các enzym sinh học là cơ sở sinh hóa để định h ướng cho việc sử dụng các chất Flavonoid thiên nhiên vào lĩnh vực sinh y học, phục vụ sức khỏe và đời sống con người. II.2.4. Tác dụng kháng sinh của Flavonoid Tác dụng chống viêm nhiễm và kháng khuẩn của Flavonoid đã được nhiều công trình nghiên cứu trên thế giới chứng minh. 24 anthoxyanin, leucoanthoxyanin và axit phenolic có tác dụng kìm hãm Salmonella. Hầu hết các chất này đều có khả năng kìm hãm sự hô hấp hay phân chia của vi khuẩn khi có mặt glucoza. Tác dụng chống giun của Flavonoid đã được thống kê với 16 chalcon và những chất tương tự. Chalcon nói chung có hiệu quả này đặc biệt là các Chalcon có vài nhóm thế OH.
Tác dụng kháng virus của Flavonoid cũng đã được khẳng định. Khả năng ức chế virus HIV ở các tế bào H9 của 35 Flavonoid chiết xuất từ thực vật và tổng hợp đã thấy rằng các hợp chất có nối đôi ở vị trí C-2,C-3 và chứa nhóm OH ở C-5, C-7 thể hiện hoạt tính cao hơn. Sự có mặt của các nhóm thế hydroxyl hoặc halogen ở vòng B thường làm giảm hoạt tính. Khi thêm quercetin vào virut gây bệnh ở người, virus sẽ bị kìm hãm nếu nó có vỏ bọc và chết nếu không có vỏ bọc. Cơ chế tác dụng kháng sinh của Flavonoid có thể theo một số giả thuyết: - Flavonoid ức chế enzyme transpeptidaza làm cho mucopeptid - yếu tố đảm bảo cho thành tế bào vi khuẩn vững chắc không tổng hợp được. - Gắn lên màng bào tương của vi khuẩn, làm thay đổi tính thẩm chọn lọc của màng tương. Vì vậy làm một số chất cần thiết cho đời sống vi khuẩn nh ư nucleotit, pyrimidin, purin lọt qua màng bào tương ra ngoài. - Tác động lên quá trình tổng hợp protein của vi khuẩn theo 2 kiểu: phong bế mạch peptit của vi khuẩn bằng cách phong bế enzyme transferaza chuyển axit amin từ ARN vào mạch làm mạch không kéo dài thêm được hoặc tạo ra protein bất thường vô dụng đối với đời sống của vi khuẩn làm chúng không sử dụng được. Ức chế tổng hợp axit nucleic - Flavonoid có thể tác động vào ADN khuôn, ức chế tổng hợp ARN của vi khuẩn - II.2.5. Tác dụng chống ung thư Một số Flavonoid hoặc Polyphenol có tác dụng kìm hãm sự phát triển của khối u. Trong số 55 Flavonoid được nghiên cứu thì 15 chất trong số đó có tác dụng gây độc thế bào với tối thiểu là 1 trong 5 dòng ung thư nghiên cứu. Các hợp chất 2’-benzyloxy- 5methoxyflavon, 2’-benzyloxy-5,7-dimethoxyflavon…thể hiện tính gây độc tế bào với dòng tế bào LI210 và HL-60. Các Flavonoid có oxy ở vị trí 7,8 và 4’, 2’ thể hiện tác dụng chống khối u. II.2.6. Một số ứng dụng của Bioflavonoid trong Y học Củng cố và làm giảm tính thấm thành mạch máu và tế bào nên được sử dụng trong những trường hợp chảy máu và nguy cơ chảy máu như cao huyết áp, bảo vệ mao mạch khỏi bị histamin làm tổn thương, làm tăng sự hồi phục các mao mạch đã bị tia tử ngoại làm tổn thương. Có khả năng chống viêm loét do các nguyên nhân nội sinh hoặc ngoại sinh, kháng nhiều loại vi khuẩn và nấm khó tiêu diệt, chống dị ứng.
Tác dụng tốt trong các bệnh gan mật: ngăn chặn các quá trình hủy hoại cấu trúc và chức năng gan trong nhiều trạng thái bệnh lý, làm tăng nhanh quá trình tái sinh và hồi phục chức năng của tế bào gan. Điều hòa hàm lượng cholesterol trong máu, tránh nguy cơ xơ vữa mạch, phục hồi trương lực cơ tim, điều hòa nhịp tim và huyết áp, điều hòa chuyển hóa canxi. Ảnh hưởng lên hệ thống nội tiết nên có vai trò đáng kể trong việc điều hòa cân bằng sinh học cơ thể. Về phương diện miễn dịch học, có nhiều Bioflavonoid có khả năng kích thích limpho bào sản xuất interferon, ức chế hiện t ượng degramilation, ức chế sự nhân lên của virus. Giảm đau do tác dụng chống co thắt. Một số Flavonoid có tác dụng chống khối u lành và ác tính. Tính chất này phụ thuộc vào sự có mặt của hệ nối đôi liên hợp trong phân tử và vị trí các nhóm thế. Làm tăng tạo máu do làm tăng tổng hợp axit folic của vi khuẩn đường ruột, tăng số lượng hồng cầu và tỷ lệ hemoglobin. Loại trừ rối loạn thần kinh cơ do thiếu Vit.C III. Các công trình nghiên cứu được công bố về cây Lá móng tay Các nghiên cứu đã công bố cho thấy thành phần hóa học chính của Lá móng tay là các hợp chất Xanthon, Napthoquinon, Terpenoid, và Phenol glycosit. Năm 1976, nhóm nghiên cứu của tác giả Bhardwaj D. K. công bố sự có mặt của các hợp chất Lawson và Lacoumarin trong cây Lá móng tay. Năm 1977, nhóm nghiên cứu này công bố sự phân lập và xác định cấu trúc của hai hợp chất Xanthon mới là Laxathone I và Laxathone II. Năm 1978, nhóm nghiên cứu này công bố thêm một hợp chất Xanthon mới nữa từ cây Lá móng tay và đặt tên là Laxathone III. Laxathone I Lawson Laxathone II Laxathone III
Đến năm 1982, nhóm nghiên cứu của tác giả Chakrabartty T công bố sự phân lập và xác định cấu trúc của hai hợp chất Tritecpen là Hennadiol và 20(S)-3,30- dihydroxylupane 20(S)-3 ,30-dihydroxylupane Hennadiol Gần đây nhất, hai dẫn xuất dioxin mới là 12-[2'-(1',4'-dioxin-5',6'-dione)-8''E- undecenyl - dodecanoate và 5 - [1'-(docosa - 2'E, 5'E -dienyl)]-1,4-dioxin-2,3-dione, được phân lập và xác định cấu trúc vào năm 2009. 12-[2'-(1',4'-dioxin-5',6'-dione)-8''E-undecenyl-dodecanoate 5-[1'-(docosa-2'E,5'E-dienyl)]-1,4-dioxin-2,3-dione Ở Việt Nam, hiện chưa có nhiều công trình nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học cây Lá móng tay. Một số công trình công bố của các nhà khoa học Viện Dược liệu và Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên đã công bố sự phân lập và xác định cấu trúc của một hợp chất Napthoquninon glycozit là Rubinaphthin B, hai hợp chất Flavonoid là Catechin và 3-O--L-rhamnopyranosyl 5,7,4'-trihydroxyflavone, hai Tritecpenoid là axit augustic, axit 1 ,2,3,19-tetrahydroxy-12-ursen-28-oic và một Tritecpen glycozit là Suavissimoside R1. Cấu trúc hóa học của chúng được xác định bằng các phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân (một chiều và hai chiều) và phổ khối lượng. Dưới đây là cấu trúc hóa học của các hợp chất đã được các nhà khoa học Việt Nam phân lập được:
Catechin 3-O--L-rhamnopyranosyl 5,7,4'-trihydroxyflavone 29 30 19 21 18 22 11 28 25 26 17 O 1 HO 14 OH 10 8 15 3 5 27 6 HO 24 23 Axit 1,2,3,19-tetrahydroxy-12-ursen-28-oic Axit augustic Suavissimoside R1 Rubinaphthin B IV. Chiết phân đoạn và phân lập các hợp chất Sơ đồ chiết phân đoạn và phân lập các hợp chất từ cây Lá móng tay
Bột khô lá cây Lá mó ng tay (Lawsonia inermis L.) Chiết trong MeOH Cặn chiết MeOH Bổ sung 3 lit nước Bổ sung n-Hexan Lớp nước Chiết n-Hexan/nước: 1/1 Bổ sung CHCl3 LIH: Cặn n-Hexan Chiết CHCl3/nước: 1/1 Lớp nước Bổ sung EtOAc LIC: Cặn clorofoc Chiết EtOAc/nước:1/1 Lớp nước LIE: Cặn EtOAc Silicagel CC, Gradien hệ dung môi LIW: Lớp nước clorofooc/MeOH: 50/1-1/1 LIE5 LIE6 LIE7 LIE2 LIE3 LIE4 LIE1 Silicagel CC, hệ dung môi Silicagel CC, hệ dung môi clorofooc/MeOH/H2O: 3/1/0,1 clorofooc/axeton: 7/1 YMC RP-18 CC, hệ dung môi Silicagel CC, hệ dung môi MeOH/H2O: 2/1 clorofooc/MeOH: 15/1 3 5 2 4 1
Mẫu Lá móng tay được rửa sạch, phơi khô trong bóng râm. Sau đó sấy bằng tủ sấy ở nhiệt độ 50oC, sau cùng đem nghiền nhỏ thành bột, thu được bột khô. Số bột lá khô này được ngâm chiết với metanol 3 lần, mỗi lần 1 giờ ở nhiệt độ 40-50oC bằng thiết bị chiết siêu âm. Sau đó gộp các dịch chiết metanol lại, cất loại dung môi, thu được cặn dịch cô metanol. Bổ sung nước cất vào cặn metanol, lắc đều cho tan hết vào nước rồi chiết phân pha lần l ượt bằng n-hexan, clorofooc và etyl axetat (mỗi dung môi 3 lần). Sau đó cất loại dung môi dưới áp suất giảm thu được cặn chiết n-hexan (LIH), cặn chiết cloroform (LIC) và cặn chiết etyl axetat (LIE). Cặn chiết etyl axetat được tiến hành phân tách thô trên sắc ký cột silicagel pha thường sử dụng dung môi rửa giải gradient CHCl3-MeOH (từ 30/1 đến 1/1) thu được 7 phân đoạn nhỏ hơn, ký hiệu là LIE1 đến LIE7. Phân đoạn LIE3 được tiếp tục phân tách bằng sắc ký cột silicagel pha thường sử dụng hệ dung môi rửa giải CHCl3-axeton (7/1) sau đó tinh chế bằng sắc ký cột silicagel pha thường với hệ dung môi rửa giải CHCl3- MeOH (15/1) thu được các hợp chất sạch 2, 3, và 5. Hợp chất 1 và 4 được tinh chế từ phân đoạn LIE5 bằng sắc ký cột silicagel pha thường sử dụng hệ dung môi rửa giải CHCl3-MeOH-H2O (3/1/0,1) kết hợp với sắc ký cột silicagel pha đảo RP-18 rửa giải bằng MeOH- H2O (2/1). Các hợp chất phân lập được từ cây Lá móng tay (Lawsonia inermis L). OCH3 OH 3' 1' HO O 5' OCH3 8 2 9 7 10 6 3 5 4 OH O 1: Isoscutellarin 2: Tricin OH 3' OH 1' 8 HO O 2 5' 9 10 6 4 OR OH O 4: Isoquercitrin, R =  -D-glucosit 5: Quercetin, R = H 3: Kaempferin
TÀI LIỆU THAM KHẢO Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, 1. Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập và Trần Toàn (2004), Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật Hà Nội, tập II, tr. 130- 133. NXB Khoa học và kỹ thuật (2006), Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt 2. Nam tập 1, Hà Nội, tr.130-133. Nguyễn Thị Bình, Phạm Thanh Kỳ, Trần Thị Oanh, Phan Văn Kiệm (2008), 3- 3. O--L-rhamnopyranosyl 5,7,4’-trihydroxyflavon phân lập từ lá cây Lá móng (Lawsonia inermis L.), Tạp chí Dược học, 48(9), tr.20-21. Nguyễn Thị Bình, Phạm Thanh Kỳ, Trần Thị Oanh, Nguyễn Phương Thảo, 4. Phan Văn Kiệm (2008), Catechin và rubinaphthin B phân lập từ rễ cây Lá móng (Lawsonia inermis L.), Tạp chí Dược học, 48(8), 22-24. 5. Nguyen Xuan Cuong, Nguyen Phuong Thao, Nguyen Hoai Nam, Nguyen Tien Dat, Hoang Le Tuan Anh, Le Mai Huong, Bui Thi Hong, Tran Thu Huong, Phan Van Kiem(2010), Flavonoid constituents from Lawsonia inermis, Journal of science & Technology, No.78A, pp. 22 - 26. 6. Bhardwaj D. K., Murari R., Seshadri T. R., Singh R. (1976), Lacoumarin from Lawsonia inermis. Phytochemistry, 15(11), pp.1789. 7. Bhardwaj D. K. (1977), Seshadri T. R., Singh R., Xanthones from Lawsonia inermis. Phytochemistry, 16, pp.1616-1617. 8. Bhardwaj D. K., Jain R. K., Jain B. C., Mehta C. K. (1978), 1-Hydroxy-3,7- dimethoxy-6-acetoxyxanthone, a new xanthone from Lawsonia inermis. Phytochemistry, 17, pp. 1440-1441. 9. Siddiqui B. S., Uddin N., Begum S. (2009), Two new dioxin derivatives from the aerial parts of Lawsonia alba, Natural Product Research, 23(18), pp.1740 – 1745.