Giá trị của đột biến gen BRAF T1799A trong chẩn đoán ung thư tuyến giáp thể nhú

Nghiên cứu Y học <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 3 * 2013<br /> <br /> GIÁ TRỊ CỦA ĐỘT BIẾN GEN BRAF T1799A  <br /> TRONG CHẨN ĐOÁN UNG THƯ TUYẾN GIÁP THỂ NHÚ  <br /> Hoàng Quốc Trường*, Ngô Minh Hạnh**, Lê Hữu Song* <br /> <br /> TÓM TẮT <br /> Đặt vấn đề: Chọc hút tế bào bằng kim nhỏ (FNAC) là xét nghiệm thường quy trong chẩn đoán trước phẫu <br /> thuật đối với các u tuyến giáp. Tuy nhiên, có khoảng 15% các trường hợp không kết luận được. Đột biến gen <br /> braf T1799A là một trong các dấu ấn phân tử gần đây được cho là có giá trị trong hỗ trợ chẩn đoán ung thư <br /> tuyến giáp thể nhú (UTTGTN). <br /> Mục  tiêu:  So  sánh  độ  nhạy  (Se),  độ  đặc  hiệu  (Sp)  của  kỹ  thuật  ASB  RealTime  PCR  phát  hiện  đột  biến <br /> T1799A với FNAC trong chẩn đoán UTTGTN. <br /> Đối tượng và phương pháp: 45 mẫu nhân giáp được đưa vào nghiên cứu. Chẩn đoán cuối cùng dựa vào <br /> kết quả mô bệnh học sau phẫu thuật. Đột biến T1799A được xác định bằng kỹ thuật ASB RealTime PCR. Độ <br /> nhạy, đặc hiệu, chính xác của ASB RealTime PCR được xác định trên các mẫu FNAC có kết quả chẩn đoán mô <br /> bệnh học. <br /> Kết quả: Độ nhạy, đặc hiệu, chính xác của kỹ thuật ASB RealTime PCR so với FNAC được xác định tương <br /> ứng là 92,3%; 83,3%; 91,1% so với 90,5%; 33,3% và 88,8%. <br /> Kết  luận: Xét nghiệm phát hiện đột biến gen braf T1799A kết hợp với FNAC sẽ làm tăng tính chính xác <br /> của kỹ thuật này trong chẩn đoán ung thư tuyến giáp thể nhú. <br /> Từ khóa: ung thư tuyến giáp thể nhú, FNAC, BRAF <br /> <br /> ABSTRACT <br /> THE VALUE OF BRAF T1799A MUTATION ANALYSIS  <br /> IN THE DIAGNOSIS OF PAPILLARY THYROID CARCINOMA <br /> Hoang Quoc Truong, Ngo Minh Hanh, Le Huu Song <br /> * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 ‐ Supplement of No 3 ‐ 2013: 63 ‐ 67 <br /> Background: Fine‐needle aspiration cytology is routinely used before surgery of thyroid nodules. However, <br /> 15% of FNAC are diagnosed as suspicious for malignancy and undetermined, so that the proportion of patients <br /> with inconclusive results in diagnosis. Recently, BRAF T1799A mutation is one of a valuable molecular markers <br /> in Papillary thyroid carcinoma. <br /> Aims: To compare sensitivity, specificity and accuracy of ASB RealTime PCR detecting T1799A mutation <br /> assay with that of FNAC in the diagnosis of papillary thyroid carcinoma. <br /> Patients  and  Methods:  A  total  of  45  thyroid  nodules  from  patients  were  prospectively  analyzed  for <br /> cytology. A final diagnosis was confirmed by histology after surgery. BRAF T1799A mutation was analysed by <br /> ASB RealTime PCR. A sensitivity, specificity and accuracy of ASB RealTime PCR assay were determined based <br /> on the results of histopathology. <br /> Results: Sensitivity, specificity and accuracy of ASB RealTime PCR assay was 92.3%; 83.3% and 91.1% <br /> compared with 90.5%; 33.3% and 88.8% which was determined by FNAC. <br /> Conclusions:  BRAF  T1799A  mutation  analysis  when  combined  with  FNAC  can  significantly  improve <br /> *Bệnh viện Trung Ương Quân đội 108 <br /> **Viện nghiên cứu Y Dược Lâm sàng 108 <br /> Tác giả liên lạc: TS. Hoàng Quốc Trường  ĐT: 0988709667 <br /> Email: hqtruong2002@yahoo.com <br /> <br /> 62<br /> <br /> Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh  <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 3 * 2013 <br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> FNAC diagnostic accuracy in the diagnosis of thyroid papillary carcinoma. <br /> Key words: papillary Thyroid carcinoma, FNAC, BRAF <br /> 69%(3,10)  nhưng  chưa  có  một  công  trình  công  bố <br /> ĐẶT VẤN ĐỀ <br /> nào cho thấy có sự xuất hiện của đột biến này ở <br /> Kỹ  thuật  chọc  hút  tế  bào  bằng  kim  nhỏ <br /> các  tế  bào  tuyến  giáp  lành  tính(4).  Các  kết  quả <br /> (FNAC)  là  xét  nghiệm  tế  bào  học  thường  quy <br /> công bố  trên thế giới đã khẳng định  giá  trị  của <br /> trong chẩn đoán trước phẫu thuật ung thư tuyến <br /> đột biến này khi kết hợp với FNAC sẽ làm tăng <br /> giáp  thể  nhú  (UTTGTN)  với  độ  nhạy,  độ  đặc <br /> độ  nhạy,  độ  đặc  hiệu  và  tính  chính  xác  của  kỹ <br /> hiệu  kỹ  thuật  tương  ứng  đạt  70−98%  và <br /> thuật chẩn đoán này(8,16). Từ kết quả nghiên cứu <br /> 55−100%(5).  Đây  là  kỹ  thuật  đầu  tay  trong  thực <br /> của  đề  tài  tiềm  năng  mã  số  KC.10.TN.14/11‐15, <br /> hành  lâm  sàng,  tuy  nhiên,  có  tới  15−20%  số <br /> chúng  tôi  đã  xây  dựng  thành  công  kỹ  thuật <br /> trường hợp không xác định được chẩn đoán và <br /> khuếch  đại  gen  đặc  hiệu  alen  kết  hợp  Blocker <br /> có  khoảng  10–40%  số  mẫu  bệnh  phẩm  được <br /> (ASB RealTime PCR) phát hiện đột biến gen braf <br /> chẩn  đoán  nghi  ngờ  hoặc  không  đủ  tiêu  chuẩn <br /> T1799A  trong  UTTGTN(9).  Trong  nghiên  cứu <br /> xét  nghiệm(2,15).  Gần  đây  kết  quả  FNAC  không <br /> này, chúng tôi đánh giá độ nhạy, đặc hiệu, tính <br /> xác  định  được  đề  xuất  chia  thành  3  nhóm:  (1) <br /> chính  xác  của  kỹ  thuật  ASB  RealTime  PCR  xác <br /> Tổn  thương  tế  bào  nang  tuyến  giáp  không  xác <br /> định  đột  biến  T1799A  và  so  sánh  với  kỹ  thuật <br /> định  (follicular  lesion  of  undetermined <br /> FNAC trong chẩn đoán UTTGTN. <br /> significance,  FLUS);  (2)  Tế  bào  Hurthle;  và  (3) <br /> ĐỐI TƯỢNG ‐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU <br /> Nghi  ngờ  ác  tính  (suspicious  for  malignancy), <br /> với tỉ lệ dự đoán ung thư tương ứng 5–10%, 20–<br /> Đối tượng nghiên cứu <br /> 30%, và 50–75%(17). Việc phân loại  trên  với  mục <br /> Mẫu chứng dương và chứng âm của nghiên cứu <br /> đích trả lời kết quả xét nghiệm tế bào học chính <br /> Dòng  tế  bào  HT‐29  mang  đột  biến  gen  braf <br /> xác  nhất.  Tuy  nhiên,  trong  số  các  trường  hợp <br /> T1799A (ATCC, Mỹ). <br /> phẫu  thuật  loại  bỏ  nhân  giáp  thì  chỉ  có  8–56% <br /> Dòng tế bào HCT‐116 mang gen BRAF kiểu <br /> phát hiện có tế bào ác tính(1), do đó có rất nhiều <br /> dại (ATCC, Mỹ). <br /> bệnh nhân phải chịu cuộc phẫu thuật không cần <br /> thiết dẫn đến nguy cơ mắc thêm bệnh và thêm <br /> kinh phí điều trị(11). Những bệnh nhân có kết quả <br /> chẩn  đoán  FNAC  không  xác  định  thường  trải <br /> qua một cuộc phẫu thuật hạn chế, cắt một phần <br /> tuyến giáp. Sau khi xác định là ung thư bằng kết <br /> quả giải phẫu bệnh, các bệnh nhân này sẽ phải <br /> chịu cuộc mổ thứ hai để cắt toàn bộ tuyến giáp <br /> nên chi phí điều trị là rất tốn kém. Hơn nữa, có <br /> 1–3% số trường hợp chẩn đoán FNAC là âm tính <br /> giả nên bệnh nhân mất cơ hội được điều trị(14). Vì <br /> những  lí  do  trên,  việc  phát  triển  các  phương <br /> pháp chẩn đoán có độ nhạy, độ đặc hiệu cao hỗ <br /> trợ cho kỹ thuật FNAC chính xác hơn là vô cùng <br /> cấp thiết. <br /> Qua nghiên cứu người ta thấy đột biến gen <br /> braf T1799A là dấu ấn phân tử rất có giá trị trong <br /> chẩn đoán UTTGTN. Đột biến T1799A xuất hiện <br /> trong  UTTGTN  với  tần  suất  giao  động  từ  29–<br /> <br /> Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh <br /> <br /> 45 bệnh nhân được khám và chẩn đoán bệnh <br /> tại phòng xét nghiệm tế bào ‐ Bệnh viện Nội tiết <br /> Trung  Ương  và  Khoa  Giải  phẫu  bệnh  lý,  Bệnh <br /> viện  TƯQĐ  108.  Tất  cả  các  bệnh  nhân  này  vừa <br /> có kết quả tế bào học, vừa có kết quả  mô  bệnh <br /> học sau phẫu thuật. <br /> <br /> Cách lấy bệnh phẩm làm xét nghiệm xác định <br /> đột biến gen braf T1799A <br /> Mỗi  mẫu  bệnh  phẩm  chọc  hút  được  chia <br /> thành  2  phần:  1/2  được  trải  ra  lam  để  chẩn <br /> đoán tế bào, 1/2 được chia sang ống eppendorf <br /> vô  trùng  để  làm  xét  nghiệm  phát  hiện  đột <br /> biến. Trong các trường hợp chọc hút tế bào mà <br /> lượng  mẫu  bệnh  phẩm  lấy  ít  sẽ  loại  khỏi <br /> nghiên cứu này. <br /> <br /> 63<br /> <br /> Nghiên cứu Y học <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 3 * 2013<br /> <br /> Phương pháp nghiên cứu <br /> Phương  pháp  tách  chiết  ADN  tổng  số  từ  các <br /> mẫu FNA <br /> Các  mẫu  chọc  hút  tế  bào  được  rửa  trong <br /> nước muối sinh lý 0,9% và được tiến hành tách <br /> chiết  ADN  tổng  số  theo  quy  trình  của  Hoàng <br /> Quốc Trường và cộng sự(6,7). <br /> Phương  pháp  phát  hiện  đột  biến  gen  BRAF <br /> T1799A  bằng  kỹ  thuật  khuếch  đại  gen  đặc <br /> hiệu alen kết hợp Blocker <br /> Trình  tự  primer  và  Blocker  đặc  hiệu  phát <br /> hiện đột biến gen braf T1799A được thiết kế dựa <br /> trên  các  công  trình  đã  công  bố(16).  Đột  biến  gen <br /> braf  T1799A  được  xác  định  bằng  kỹ  thuật <br /> RealTime PCR kết hợp Blocker. Phản ứng được <br /> tiến hành với thể tích 20 μL, tỉ lệ các thành phần <br /> như sau: 2X PCR master mix SYBR Green (ABI), <br /> No.1: <br /> 5ʹ‐CTGTTTTCCTTTACTTACT <br /> mồi <br /> ACACCTCAGAT‐  3’  (0,375  pM),  mồi  đặc  hiệu <br /> alen No.2: 5’‐CCCACTCCATCGAGATTTCT‐ 3’ <br /> (0,375  pM)  và  300  pM  Blocker:  5’‐<br /> CATCGAGATTTCAC  TGTAGCTAGA‐PO4‐3’. <br /> 2,5  μL  ADN  tổng  số  và  0,5  μL  nước  cho  phản <br /> ứng  RealTime  PCR.  Phản  ứng  khuếch  đại  gen <br /> đặc  hiệu  alen  kết  hợp  Blocker  được  thực  hiện <br /> trên  máy  RealTime  PCR  7500,  Mỹ  với  chu  kỳ <br /> nhiệt như sau: 50°C/5 phút; 95°C/10 phút, 45 chu <br /> kỳ (95°C/15 giây, 60°C/1 phút). Do việc thiết kế <br /> trình  tự  mồi  đặc  hiệu  alen  kết  hợp  sử  dụng <br /> Blocker, phản ứng khuếch đại gen sẽ chỉ xẩy ra <br /> trên mạch khuôn ADN mang điểm đột biến và <br /> được  hiển  thị  ngay  sau  mỗi  chu  kỳ  nhiệt  của <br /> phản  ứng  qua  việc  ghi  nhận  tín  hiệu  huỳnh <br /> quang  của  SYBR  Green.  Trong  khi,  các  mẫu <br /> không có tín hiệu huỳnh quang là các mẫu kiểu <br /> dại không chứa đột biến gen braf T1799A(18). <br /> Phương pháp xác định trình tự axit nucleic <br /> Để kiểm định độc lập sự có mặt đột biến gen <br /> braf  T1799A  trong  mẫu  chuẩn  dương  HT‐29  và <br /> các  mẫu  bệnh  phẩm  FNAC  chúng  tôi  tiến  hành <br /> giải trình tự trực tiếp đoạn gen bằng cặp mồi (mồi <br /> No.1: <br /> 5ʹ‐<br /> CTGTTTTCCTTTACTTACTACACCTCAGAT‐ <br /> <br /> 64<br /> <br /> 3’, mồi No.3: 5’‐CAACTGTTCAA ACTGATGGG‐ <br /> 3’),  trên  hệ  thống  máy  CEQ  8800  sequencer <br /> (Beckman  Coulter,  Mỹ).  Kết  quả  giải  trình  tự <br /> được phân tích bằng phần mềm BioEdit và công <br /> cụ  so  sánh  trình  tự  trực  tuyến  Blast  search <br /> (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi). <br /> <br /> Phương pháp đánh giá độ nhạy,  độ  đặc  hiệu, <br /> chính xác của kỹ thuật ASB RealTime PCR <br /> phát hiện đột biến T1799A <br /> Độ  nhạy  của  kỹ  thuật  được  tính  theo  công <br /> thức sau:  <br /> Độ nhạy =(TP/(TP + FN)) x 100. <br /> Độ  đặc  hiệu  của  kỹ  thuật  được  tính  theo <br /> công thức sau:  <br /> Độ đặc hiệu =(TN/(TN + FP)) x 100. <br /> Độ  chính  xác  của  kỹ  thuật  được  tính  theo <br /> công thức sau:  <br /> Độ  chính  xác  =((TP  +  TN)/(TP  +  TN  +  FP  + <br /> FN)) x 100. <br /> Trong đó: TP: Là các mẫu FNAC phát hiện dương tính <br /> với đột biến T1799A và kết quả chẩn đoán mô bệnh học <br /> là ung thư tuyến giáp thể nhú; FP: Là các mẫu FNAC <br /> phát hiện dương tính với đột biến T1799A nhưng kết <br /> quả mô bệnh học là lành tính; TN: Là các mẫu FNAC <br /> âm tính với đột biến T1799A và kết quả chẩn đoán mô <br /> bệnh học là lành tính; FN: Là các mẫu FNAC âm tính <br /> với đột biến T1799A và kết quả chẩn đoán mô bệnh học <br /> là ung thư tuyến giáp thể nhú. <br /> <br /> Phân tích và xử lý số liệu <br /> Số  liệu  nghiên  cứu  được  tổng  hợp  và  xử  lý <br /> theo phương pháp thống kê y học sử dụng phần <br /> mềm STAT 7.0 và STAVIEW 4.57. <br /> <br /> KẾT QUẢ <br /> Kết  quả  chẩn  đoán  tế  bào  bằng  kỹ  thuật <br /> FNAC <br /> Bảng 1. Kết quả chẩn đoán tế bào bằng kỹ thuật <br /> FNAC và mô bệnh học. <br /> Bướu giáp lành tính<br /> Nghi ngờ carcinôm<br /> Carcinôm TG<br /> Tổng số<br /> <br /> FNAC<br /> 3<br /> 5<br /> 37<br /> 45<br /> <br /> Mô bệnh học<br /> 6<br /> 0<br /> 39<br /> 45<br /> <br /> Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh  <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 3 * 2013 <br /> Nhận xét: Sự phù hợp giữa mô bệnh học và <br /> FNAC  là  40/45  (88,9%),  có  5  bệnh  nhân  được <br /> chẩn đoán là nghi ngờ bằng FNAC, trong 5 BN <br /> này có 3 BN là UTTGTN, còn lại 2 BN là u tuyến <br /> giáp lành tính. <br /> <br /> Kết  quả  phát  hiện  đột  biến  gen  braf <br /> T1799A bằng kỹ thuật ASB RealTime PCR <br /> trên các mẫu FNAC <br /> Bảng 2. Kết quả phát hiện đột biến T1799A trên 45 <br /> mẫu bệnh phẩm FNAC. <br /> Kết quả chẩn đoán<br /> FNAC<br /> Bướu nang tuyến<br /> giáp<br /> Nghi ngờ carcinôm<br /> Carcinôm TG<br /> Tổng số (n, %)<br /> <br /> BRAF T1799A<br /> (+) (n, %)<br /> 2 (66,6)<br /> <br /> BRAF T1799A<br /> (-) (n, %)<br /> 1 (33,3)<br /> <br /> 3 (60)<br /> 32 (86,5)<br /> 37 (82,2)<br /> <br /> 2 (40)<br /> 5 (13,5)<br /> 8 (17,8)<br /> <br /> Nhận  xét:  Như  vậy,  trên  45  mẫu  FNAC <br /> chúng tôi phát hiện được 37 mẫu có đột biến gen <br /> braf  T1799A.  Tỷ  lệ  đột  biến  gen  braf  T1799A  ở <br /> nhóm UTTG cao hơn so với 2 nhóm còn lại. <br /> <br /> Giá trị của đột biến gen braf T1799A trong <br /> chẩn đoán ung thư tuyến giáp thể nhú <br /> Bảng 3. So sánh độ nhạy, đặc hiệu, chính xác của kỹ <br /> thuật ASB RealTime PCR phát hiện đột biến T1799A <br /> với kỹ thuật FNAC trong chẩn đoán UTTGTN. <br /> Phương pháp chẩn Độ nhạy<br /> đoán<br /> ASB RealTime PCR<br /> 92,3<br /> FNAC<br /> 90,5<br /> <br /> Độ đặc<br /> hiệu<br /> 83,3<br /> 33,3<br /> <br /> Độ chính<br /> xác<br /> 91,1<br /> 88,8<br /> <br /> Nhận xét: Độ chính xác, độ nhạy và độ đặc <br /> hiệu  của  kỹ  thuật  ASB  RealTime  là  cao  hơn  so <br /> với  FNAC  trong  chẩn  đoán  UTTGTN  (91,1%, <br /> 92,3% và 83,3% so với 88,8%, 90,5% và 33,3%). <br /> <br /> BÀN LUẬN <br /> Đột biến gen braf là một trong những dấu ấn <br /> phân tử giúp chẩn đoán phát hiện UTTGTN với <br /> độ nhạy và độ đặc hiệu tương ứng 80% và 99,7% <br /> khi kết hợp với kỹ thuật chẩn đoán tế bào(13). Xác <br /> định được đột biến gen braf T1799A sẽ giúp hạn <br /> chế  các  trường  hợp  chẩn  đoán  UTTGTN  bị  bỏ <br /> sót  bởi  kỹ  thuật  FNAC,  nâng  cao  chất  lượng <br /> chẩn đoán, theo dõi và quản lý bệnh nhân. Giá <br /> trị chẩn đoán xác định của các dấu ấn SHPT khi <br /> <br /> Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh <br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> kết hợp với chẩn đoán tế bào sẽ đem lại lợi ích <br /> cho  bệnh  nhân  trong  các  trường  hợp  bắt  buộc <br /> phải  phẫu  thuật,  phẫu  thuật  triệt  để  phòng <br /> chống ung thư tái phát. <br /> Trong  chẩn  đoán  ban  đầu,  giá  trị  lớn  nhất <br /> của dấu ấn phân tử này được thể hiện trong việc <br /> hỗ trợ kỹ thuật FNAC chẩn đoán chính xác hơn, <br /> đặc  biệt  trong  các  trường  hợp  chẩn  đoán  nghi <br /> ngờ hoặc không xác định. Trong công trình công <br /> bố  bởi  Suk  Kyeong  Kim  và  cộng  sự  năm  2011 <br /> cho  thấy,  trong  số  865  trường  hợp  FNAC  u <br /> tuyến giáp, 504, 141, 54, 140, 10 và 16 được chẩn <br /> đoán là bướu nhân, nghi ngờ, nghi ngờ ung thư, <br /> ung thư, nghi ngờ ung thư tuyến giáp thể nang <br /> và không đủ tiêu chuẩn. Thì tỉ lệ phát hiện đột <br /> biến  T1799A  trên  các  nhóm  được  chẩn  đoán <br /> FNAC  tương  ứng:  0%  với  nhóm  bướu  nhân, <br /> 45/141 (31,9%) với nhóm nghi ngờ, 46/54 (85,2%) <br /> với nhóm nghi ngờ ung thư, 129/140 (92,1%) với <br /> nhóm ung thư và 1/10 (10%) với nhóm nghi ngờ <br /> ung thư tuyến giáp thể nang. Đặc biệt trong số <br /> 45  trường  hợp  nghi  ngờ  phát  hiện  có  đột  biến <br /> T1799A, 30 trường hợp được làm xét nghiệm mô <br /> bệnh học sau mổ xác định 29 ca là UTTGTN và 1 <br /> ca  là  hạch  viêm  quá  sản(12).  Trong  nghiên  cứu <br /> của  chúng  tôi  với  45  mẫu  FNAC  thì  có  37,  5,  3 <br /> mẫu  được  chẩn  đoán  là  carcinôm  tuyến  giáp, <br /> nghi  ngờ  carcinôm  và  bướu  nang.  Tỷ  lệ  phát <br /> hiện  đột  biến  T1799A  trên  các  mẫu  này  tương <br /> ứng  là  32/37  (86,5%)  carcinôm  tuyến  giáp,  3/5 <br /> (60%)  nghi  ngờ  carcinôm  và  2/3  (66,7%)  bướu <br /> nang. Trong khi kết quả hồi cứu mô bệnh học có <br /> 39/45  (86,7%)  carcinôm  thể  nhú  và  6/45  (13,3%) <br /> bướu  tuyến  giáp  lành  tính,  tương  ứng  với  tỉ  lệ <br /> phát  hiện  đột  biến  T1799A  là  36/39  (92,3%)  và <br /> 1/6 (16,7%) (Bảng 1, 2 và Phụ lục 1). Trong số 05 <br /> mẫu FNAC chẩn đoán nghi ngờ carcinôm có 03 <br /> mẫu  phát  hiện  đột  biến  T1799A,  phù  hợp  kết <br /> quả  mô  bệnh  học  carcinôm  thể  nhú.  2/3  mẫu <br /> FNAC  bướu  nang  dương  tính  với  đột  biến <br /> T1799A,  xét  nghiệm  mô  bệnh  học  xác  nhận  01 <br /> mẫu  bướu  tuyến  giáp  lành  tính  và  01  mẫu  vi <br /> carcinôm thể nhú. Như vậy, kết quả nghiên cứu <br /> của chúng tôi cũng tương tự như những nghiên <br /> cứu trước đây. Từ những kết quả đó cho thấy độ <br /> <br /> 65<br /> <br /> Nghiên cứu Y học <br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 3 * 2013<br /> <br /> nhạy  của  ASB  RealTime  PCR  thấp  hơn  so  với <br /> FNAC (92,1% so với 97,6%), nhưng độ đặc hiệu <br /> thì cao hơn (83,3% so với 33,3%) và độ chính xác <br /> cũng cao hơn (90,9% so với 89,4%). <br /> <br /> KẾT LUẬN <br /> Xét  nghiệm  phát  hiện  đột  biến  gen  braf <br /> T1799A nên được kết hợp với FNAC trong thực <br /> hành  lâm  sàng  chẩn  đoán  ung  thư  tuyến  giáp <br /> thể nhú. <br /> <br /> 8.<br /> <br /> 9.<br /> <br /> 10.<br /> 11.<br /> 12.<br /> <br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO <br /> 1.<br /> <br /> 2.<br /> <br /> 3.<br /> <br /> 4.<br /> <br /> 5.<br /> <br /> 6.<br /> <br /> 7.<br /> <br /> Baloch ZW, LiVolsi VA, Asa SL, Rosai J et al (2008). Diagnostic <br /> terminology  and  morphologic  criteria  for  cytologic  diagnosis <br /> of  thyroid  lesions:  a  synopsis  of  the  National  Carcinôm <br /> Institute  Thyroid  Fine‐Needle  Aspiration  State  of  the  Science <br /> Conference. Diagn Cytopathol, 36:425–437. <br /> Cooper  DS,  Doherty  GM,  Haugen  BR  et  al  (2006). <br /> Management guidelines for patients with thyroid nodules and <br /> differentiated thyroid carcinôm. Thyroid, 16:109–142. <br /> Cooper  DS,  Doherty  GM,  Haugen  BR,  Kloos  RT  et  al  (2006). <br /> Management guidelines for patients with thyroid nodules and <br /> differentiated thyroid carcinôm, Thyroid, 16:109–142. <br /> Fukushima  T,  Suzuki  S,  Mashiko  M,  Ohtake  T  et  al  (2003). <br /> BRAF  mutations  in  papillary  carcinôms  of  the  thyroid. <br /> Oncogen, 22: 6455‐6457. <br /> Gharib H & Goellner JR (1993). Fine‐needle aspiration biopsy <br /> of the thyroid: an appraisal. Annals of Internal Medicine, pp. <br /> 282–289. <br /> Hoàng Quốc Trường và cs (2011). Chẩn đoán nhanh vi khuẩn <br /> lao  kháng  rifampicin  bằng  kỹ  thuật  khuếch  đại  gene  đa  mồi <br /> đặc hiệu alen. Tạp chí Y dược lâm sàng 108, 6(5):74–79. <br /> Hoàng Quốc Trường và cs (2012). Nghiên cứu xây dựng quy <br /> trình phát hiện đột biến gen braf T1799A trong ung thư tuyến <br /> giáp  thể  nhú  bằng  kỹ  thuật  ASB  RealTime  PCR.  Tạp  chí  Y‐<br /> Dược học Quân sự, 37: 20 – 25. <br /> <br /> 13.<br /> <br /> 14.<br /> <br /> 15.<br /> <br /> 16.<br /> <br /> 17.<br /> <br /> Kim  SK,  Hwang  TS,  Yoo  YB,  Han  HS,  Kim  DL,  et  al  (2011). <br /> Surgical  Results  of  Thyroid  Nodules  according  to  a <br /> Management  Guideline  Based  on  the  BRAFV600E  Mutation <br /> Status. J Clin Endocrinol Metab, 96(3): 658 – 64. <br /> Lang AH et at (2011). Optimized Allele‐Specific RealTime PCR <br /> assays  for  the  detection  of  common  mutations  in  KRAS  and <br /> BRAF. The Journal of Molecular Diagnostics, 13(1): 23 – 28. <br /> M  Xing  (2005).  BRAF  mutation  in  thyroid  carcinôm. <br /> Endocrine‐Related Carcinôm, 12: 245‐262. <br /> Mazzaferri  EL  (1993).  Management  of  a  solitary  thyroid <br /> nodule. N Engl J Med, 328:553–559. <br /> Nikiforov  YE,  Steward  DL,  Robinson‐Smith  T,  et  al  (2009). <br /> Molecular  testing  for  mutations  in  improving  the  fine  needle <br /> aspiration  diagnosis  of  thyroid  nodules.  Journal  of  Clinical <br /> Endocrinology and Metabolism, 94: 2092–2098. <br /> Pacini  F  et  al  (2010).  Impact  of  Proto‐Oncogene  Mutation <br /> Detection  in  Cytological  Specimens  from  Thyroid  Nodules <br /> Improves  the  Diagnostic  Accuracy  of  Cytology.  J  Clin <br /> Endocrinol Metab, 95(3):1365– 369. <br /> Robertson  ML,  Steward  DL,  Gluckman  JL,  Welge  J  (2004). <br /> Continuous  laryngeal  nerve  integrity  monitoring  during <br /> thyroidectomy:  does  it  reduce  risk  of  injury?  Otolaryngol. <br /> Head Neck Surg, 131:596–600. <br /> Sclabas GM, Staerkel GA, Shapiro SE, Fornage BD, et al (2003). <br /> Fine‐needle  aspiration  of  the  thyroid  and  correlation  with <br /> histopathology in a contemporary series of 240 patients. Am J <br /> Surg, 186: 702–709. <br /> Xing M et al (2005). BRAF mutation predicts a poorer clinical <br /> prognosis  for  papillary  thyroid  carcinôm.  J  Clin  Endocrinol <br /> Metab, 90: 6373‐6379. <br /> Yassa  L,  Cibas  ES,  Benson  CB,  Frates  MC,  Doubilet <br /> PM,Gawande AA, Moore Jr FD, Kim BW, Nose´ V, Marqusee <br /> E, Larsen PR, Alexander EK (2007). Long term assessment of a <br /> multidisciplinary  approach  to  thyroid  nodule  diagnostic <br /> evaluation. Carcinôm, 111:508–516. <br /> <br />  <br /> <br /> Ngày nhận bài báo <br />  <br />  <br /> Ngày phản biện nhận xét bài báo: <br /> Ngày bài báo được đăng: <br />  <br /> <br /> 18‐06‐2013 <br /> 20‐06‐2013 <br /> 15–07‐2013 <br /> <br />  <br /> <br /> 66<br /> <br /> Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh  <br /> <br />