Khóa luận tốt nghiệp đại học: Khảo sát thành phần hóa học và hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase của cao hexan lá Bình bát dây Coccinia grandis (L.) J. Voigt. Họ Bầu Bí (Cucurbitaceae)

Chia sẻ: Huyền Thanh | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:48

Thêm vào BST

Báo xấu

31
lượt xem 7
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Mục tiêu của đề tài "Khảo sát thành phần hóa học và hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase của cao hexan lá Bình bát dây Coccinia grandis (L.) J. Voigt. Họ Bầu Bí (Cucurbitaceae)" là: Phân lập các chất tinh khiết từ lá Bình bát dây, xác định cấu trúc các chất đã phân lập được, khảo sát hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase. Mời các bạn cùng tham khảo để biết thêm nội dung chi tiết.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Khóa luận tốt nghiệp đại học: Khảo sát thành phần hóa học và hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase của cao hexan lá Bình bát dây Coccinia grandis (L.) J. Voigt. Họ Bầu Bí (Cucurbitaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP. HỒ CHÍ MINH KHOA HÓA HỌC  KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYM α-GLUCOSIDASE CỦA CAO HEXAN LÁ BÌNH BÁT DÂY COCCINIA GRANDIS (L.) J. VOIGT HỌ BẦU BÍ (CUCURBITACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC Chuyên ngành: Hóa hữu cơ Hướng dẫn khoa học: TS. LÊ TIẾN DŨNG Sinh viên thực hiện: TRẦN THỊ KIM HỒNG Tp HCM - 5/2013
LỜI CẢM ƠN Với tấm lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc,em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: • TS. Lê tiến Dũng – phòng hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học, thầy đãtận tình hướng dẫn, giúp đỡ, cung cấp kiến thức, dộng viên, tạo mọi diều kiện giúp em hoàn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp này. • TS. Mai Đình Trị - phòng hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học, thầy đã giúp đỡ, cho em những ý kiến quý báu để em hoàn thiện đề tài của mình • Thầy cô bộ môn hóa hữu cơ – Khoa hóa – Trường đại học Sư Phạm tp HCM và các thầy cô của viện khoa học và công nghệ Việt Nam đã tạo mọi điều kiện giúp đỡ em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp. • Anh Nguyễn Hữu An-khóa k33, ĐH Sư phạm đã hướng dẫn, giúp đỡ em hoàn thành khóa luận này. • Các bạn làm cùng phòng 19 – Viện khoa học và công nghệ Việt Nam, các bạn lớp hóa 4C đã động viên và giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài. • Con xin cảm ơn ba mẹ đã quan tâm, động viên và hỗ trợ con về mọi mặt trong suốt quá trình học tập, thực hiện đề tài tốt nghiệp này. Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 5 năm 2013 Sinh viên: Trần Thị Kim Hồng i
DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Kí hiệu Tiếng anh Tiếng việt H Hexane C Chloroform EA Ethyl acetate EtOH Ethanol M Methanol SKLM Sắc kí lớp mỏng SKC Sắc kí cột Nuclear Magnetic NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance 13 Carbon (13) nuclear Phổ cộng hưởng từ hạt nhân C-NMR magnetic resonance carbon (13) 1 Hydro (1) nuclear Phổ cộng hưởng từ hạt nhân H-NMR magnetic resonance proton (1) Heteronuclear Multiple Phổ tương tác dị hạt nhân qua HMBC bond Coherence nhiều liên kết Heteronuclear Single Phổ tương tác dị hạt nhân qua HSQC Quantum Coherence một liên kết δ Chemical shift Độ dịch chuyển hóa học ppm Part per million Phần triệu Mp Melting point Điểm nóng chảy s Singlet Mũi đơn d Doublet Mũi đôi dd Doublet of doublet Mũi đôi đôi ii
J Coupling constant Hằng số ghép spin (M)Hz (Mega) Hertz g Gram mg Milligram Kg Kilogram half maximal inhibitory IC 50 50% nồng độ ức chế tối đa concentration iii
DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1. Kết quả sắc ký cột cao BBD2(13,7g) ............................................. 23 Bảng 2.2. Kết quả sắc khí cột silica gel cao BBD2.10 (567,4mg). ................ 23 Bảng 3.1 Kết quả IC 50 của các mẫu cao Bình bát dây .................................... 26 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Điều chế mẫu thử hoạt tính ......................................................... 17 Sơ đồ 2.2 Phản ứng thủy phân enzym α-glucosidase với cơ chất là p- Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside ............................................................... 18 Sơ đồ 2.3 Điều chế cao thô ............................................................................ 21 Sơ đồ 2.4 Quy trình điều chế các phân đoạn từ cao n-hexan .................... 22 iv
DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Phân loại bệnh đái tháo đường ........................................................... 4 Hình 1.2 Bình bát dây ....................................................................................... 9 Hình 1.3 Lá bình bát dây ................................................................................... 9 Hình 1.4 Hoa và quả Bình bát dây .................................................................. 10 Hình 2.1 lá Bình bát dây khô .......................................................................... 16 Hình 2.2 Cấu trúc của Acid tannic (C 76 H 52 O 46 ) ............................................. 19 Hình 3.1 Một số tương quan HMBC của hợp chất BBD-H1 ......................... 28 Hình 3.2 Hợp chất BBD-H1 ............................................................................ 29 v
MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN ................................................................................................... i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ................................................................ ii DANH MỤC CÁC BẢNG ............................................................................. iv DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ ............................................................................ iv DANH MỤC CÁC HÌNH ............................................................................... v MỞ ĐẦU .......................................................................................................... 1 Chương 1: TỔNG QUAN ............................................................................... 3 1.1 BỆNH TIỂU ĐƯỜNG ............................................................................. 3 1.1.1 Định nghĩa ......................................................................................... 3 1.1.2 Phân loại ............................................................................................ 3 1.1.3 Các biến chứng của bệnh tiểu đường ................................................ 4 1.1.4 Phương pháp điều trị Bệnh tiểu đường ............................................. 6 1.2 TỔNG QUAN VỀ ENZYM ΑLPHA–GLUCOSIDASE] ....................... 7 1.2.1 Sơ lược về enzym .............................................................................. 7 1.2.2 Chất ức chế enzym ............................................................................ 7 1.2.3 Giới thiệu enzym α–glucosidase ....................................................... 7 1.2.4 Cơ chế hoạt động của enzym α–glucosidase .................................... 8 1.2.5 Tác nhân ức chế enzym α–glucosidase ............................................. 8 1.3 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT ............................................................... 8 1.3.1 Đặc điểm cây Bình Bát Dây .............................................................. 8 1.3.2 Tác dụng dược lý của Bình bát dây................................................. 10 1.3.3 Thành phần hóa học chung của Bình bát dây ................................. 11 Chương 2: THỰC NGHIỆM ....................................................................... 14 2.1. Hóa chất ................................................................................................ 14 2.2. Thiết bị .................................................................................................. 14 2.3. Phương pháp tiến hành ......................................................................... 15 2.3.1 Phương pháp cô lập các hợp chất .................................................... 15 vi
2.3.2 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học các hợp chất .................... 15 2.4. Nguyên liệu ........................................................................................... 15 2.5 Xử lí mẫu nguyên liệu .......................................................................... 15 2.6. Thử nghiệm hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase............................. 16 2.6.1 Điều chế mẫu thử ............................................................................ 16 2.6.2 Nguyên tắc....................................................................................... 17 2.6.3 Cơ sở phương pháp ......................................................................... 18 2.6.5 Cách tính kết quả ............................................................................. 19 2.7 Cô lập các chất từ lá bình bát dây .......................................................... 20 2.7.1 Điều chế các cao thô....................................................................... 20 2.7.2 Cô lập các chất từ cao hexan ........................................................... 21 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ................................................... 26 3.1 Kết quả thử nghiệm hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase .................. 26 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất .................................................................... 27 Chương 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ................................................... 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO ............................................................................ 33 vii
MỞ ĐẦU Đái tháo đường hay bệnh tiểu đường, là bệnh ngày càng phổ biến, gây nhiều biến chứng trầm trọng, ảnh hưởng đến cuộc sống bệnh nhân và xã hội. Đây là căn bệnh được xếp đứng thứ 4 nguyên nhân gây tử vong, gây giảm tuổi thọ trung bình từ 5 đến 10 năm; là nguyên nhân hàng đầu gây mù loà, suy thận giai đoạn cuối và cắt cụt chi không do chấn thương. Trung bình cứ 7 giây lại có một người chết do nguyên nhân đái tháo đường và các biến chứng; cứ 30 giây lại có một người đái tháo đường có biến chứng bàn chân bị cắt cụt chi (theo số liệu của Liên đoàn Đái tháo đường thế giới).Vì vậy, việc nghiên cứu các phương pháp điều trị bệnh đái tháo đường đang được các nhà khoa học quan tâm. Trong các hướng điều trị bệnh đái tháo đường loại 2, hướng điều trị bằng cách ức chế hoạt động của enzym α-glucosidase hiện đang được các nhà nghiên cứu quan tâm vì có cơ chế đơn giản, an toàn. Tuy nhiên, những loại thuốc ức chế enzym α- glucosidase đang sử dụng vẫn có nhiều tác dụng phụ, nên nhằm hạn chế những tác dụng phụ và đưa thêm nhiều lựa chọn cho việc điều trị bệnh đái tháo đường, cần phải nghiên cứu thêm các chất ức chế enzym α-glucosidase mới từ nhiều nguồn khác nhau. Các nhà khoa học trên thế giới đã có nhiều công trình nghiên cứu về hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase, cũng như cô lập được nhiều hợp chất thiên nhiên có hoạt tính ức chế mạnh.Và Việt Nam là nước có nguồn cây thuốc dồi dào, phong phú, và trong dân gian ta từ lâu đã lưu truyền nhiều bài thuốc chữa bệnh đái tháo đường bằng cây cỏ, thế nhưng chỉ có một vài nghiên cứu về vấn đề này. Bình bát dây có tên khoa học là Coccinia grandis L. thuộc họ Bầu Bí (Cucurbitaceae) là loại cây quen thuộc với người dân miền Nam, chúng mọc hoang ở nương, rẫy, bờ rào. Đọt và lá non có vị ngọt, tính mát thường được nấu canh ăn có tác dụng: Thanh nhiệt, mát phế, thanh vị, nhuận táo, sinh tân dịch, dưỡng âm, tiêu độc, trị tiểu đường… .Có thể dùng ngọn lá non cả hoa quả rửa sạch ăn sống hoặc xay nước uống đều được. Người bệnh tiểu đường hái lá non bình bát dây 100g, thịt 1
cua 50g, gia vị vừa đủ nấu canh ăn thường xuyên. Nhiều người sử dụng lá bình bát dây cho biết, có thể giảm được 50% liều thuốc Tây trị đái tháo đường loại 2 nhẹ. Mặt khác, để giảm chứng đái tháo đường thì người bệnh nên có chế độ ăn uống tập luyện điều độ, tránh béo phì, tránh các bệnh mạn tính như huyết áp, tim mạch, gan nhiễm mỡ... Tuy nhiên, những công trình nghiên cứu về thành phần hóa học cũng như hoạt tính sinh học về loài cây này chưa được nghiên cứu nhiều ở trên thế giới cũng như Việt Nam. Do vậy, đề tài “Khảo sát thành phần hóa học và hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase của cao hexan lá Bình bát dây Coccinia grandis (L.) J. Voigt. Họ Bầu Bí (Cucurbitaceae)” là cơ sở khoa học ban đầu cho những nghiên cứu tiếp theo, nhằm sớm đưa cây Bình bát dây thành một vị thuốc có giá trị và đóng góp thêm những hiểu biết về thành phần Hóa – Thực vật của loài Coccinia grandis (L.), qua đó nâng cao giá trị sử dụng của loài thực vật này. Mục tiêu của đề tài - Phân lập các chất tinh khiết từ lá Bình bát dây. - Xác định cấu trúc các chất đã phân lập được. - Khảo sát hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase. 2
Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 BỆNH TIỂU ĐƯỜNG[6],[14],[30],[31] 1.1.1 Định nghĩa Bệnh tiểu đường, còn gọi là Đái tháo đường, là một nhóm bệnh lý chuyển hóa, đặc trưng bởi tăng đường huyết do sự khiếm khuyết tiết insulin hoặc suy giảm hoạt tính insulin. Tăng đường huyết có thể gây ra các biến chứng cấp tính, tình trạng dễ bị nhiễm trùng và về lâu dài, gây tổn thương, rối loạn và suy giảm chức năng của các cơ quan khác nhau. Bệnh tiểu đường đã được mô tả từ thời cổ Hy Lạp có nghĩa là mật ong. 1.1.2 Phân loại 1.1.2.1 Bệnh tiểu đường loại 1 Loại bệnh tiểu đường này thường ảnh hưởng đến trẻ em, nhưng cũng có thể xảy ra ở người lớn.Trong Bệnh tiểu đường loại 1, cơ thể không thể sản xuất insulin. Do hệ thống miễn dịch của cơ thể, nhầm lẫn đã tấn công các tế bào trong tuyến tuỵ làm cho tế bào tuyến tụy không còn sản xuất được insulin. Khi không có Insulin, tế bào sẽ không sử dụng được Glucose, do đó Glucose trong máu sẽ tăng rất cao. Bệnh nhân cần được tiêm insulin để sống. 1.1.2.2 Bệnh tiểu đường loại 2 Đây là loại tiểu đường thường gặp nhất.Thông thường, với Bệnh tiểu đường loại 2, trong cơ thể vẫn còn sản xuất insulin, nhưng các tế bào không thể sử dụng nó.Điều này được gọi là đề kháng insulin.Theo thời gian, đường huyết sẽ tăng cao trong máu.Béo phì và ít vận động làm tăng nguy cơ phát Bệnh tiểu đường loại 2. 3
Hình 1.1 Phân loại bệnh đái tháo đường 1.1.2.3 Bệnh tiểu đường thai kỳ Đây là dạng tiểu đường xảy ra ở một số phụ nữ mang thai và chấm dứt sau khi sanh. Có thể gây ra các vấn đề trong quá trình mang thai. Phụ nữ bị Bệnh tiểu đường thai kỳ có nhiều khả năng phát triển thành Bệnh tiểu đường loại 2 sau này. 1.1.3 Các biến chứng của bệnh tiểu đường Các biến chứng được chia ra theo thời gian xuất hiện và mức độ tiến triển. 1.1.3.1 Biến chứng cấp tính Các biến chứng cấp tính là những bệnh cảnh cấp cứu nội khoa, thường gặp và đe dọa tính mạng, thường gặp ở các nước đang phát triển, gồm các loại biến chứng sau: - Nhiễm toan ceton: Là biến chứng thường gặp điển hình ở bệnh nhân tiểu đường loại 1. Cơ chế sinh lý bệnh chủ yếu là do thiếu insulin và sự tăng tiết các 4
hormon đối kháng gây giảm sử dụng glucose, rối loạn chuyển hóa lipid và tăng tạo các thể cetone gây tình trạng toan máu và rối loạn nước, điện giải. - Tăng áp lực thẩm thấu: bệnh nhân đái tiểu đường không được điều trị sẽ mất rất nhiều dịch do đi tiểu nhiều, gây ra tình trạng cô đặc máu làm áp lực thẩm thấu trong máu tăng cao. Biến chứng này thường gặp ở bệnh nhân tiểu đường loại 2 và có thể gây tử vong nếu không được điều trị. - Hạ đường huyết: bệnh nhân tiêm insulin sẽ gặp hiện tượng đường huyết hạ thấp quá mức do lượng insulin cần thiết cho cơ thể quá cao. Hạ đường huyết có thể được điều trị nhanh chóng bằng cách nạp đường vào cơ thể, ngược lại có thể dẫn tới ngất xỉu. -Tăng acid lactic trong máu: Là do sự tích tụ acid lactic trong cơ thể, nếu có quá nhiều acid lactic trong cơ thể thì độ cân bằng sẽ bị phá vỡ. Biến chứng này rất hiếm gặp và chủ yếu xuất hiện ở bệnh nhân bị tiểu đường loại 2. 1.1.3.2 Biến chứng mãn tính Các thể bệnh tiểu đường đều gây ra nhiều biến chứng mãn tính đa dạng trên nhiều hệ cơ quan khác nhau.Đa số các biến chứng là hậu quả của tổn thương các tổ chức mạch máu và thần kinh. - Biến chứng tim mạch: Bệnh tiểu đường làm tăng nguy cơ bị nhồi máu cơ tim, đột quị, tai biến mạch máu não và mạch máu ngoại biên đưa đến đoạn chi. - Biến chứng mắt: Bệnh lý võng mạc do tiểu đường là nguyên nhân hàng đầu gây mù lào, giảm thị lực. -Biến chứng thận: Là biến chứng mãn tính thường gặp của tiểu đường, gây bệnh thận giai đoạn cuối, suy thận. Điều trị cần chạy thận nhân tạo hay thẩm phân phúc mạc để duy trì cuộc sống. -Biến chứng thần kinh: Biến chứng thần kinh ngoại biên do tiểu đường gây mất cảm giác ở chân, tay hay dị cảm, tê, gây đau nhức…là nguy cơ của nhiễm trùng chân đưa đến đoạn chi. 5
1.1.4 Phương pháp điều trị Bệnh tiểu đường 1.1.4.1 Phương pháp điều trị bệnh tiểu đường loại 1 Với bệnh nhân mắc bệnh tiểu đường loại 1, họ sẽ phải tiêm insulin thường xuyên trong cả cuộc đời vì cơ thể họ không có khả năng tạo ra hormon này. 1.1.4.2 Phương pháp điều trị bệnh tiểu đường loại 2 Phụ thuộc vào tình trạng của bệnh nhân, phương pháp chữa trị gắn liền với việc ăn uống thích hợp, tăng cường hoạt động. Chỉ bệnh nhân tiểu đường loại 2 mới dùng thuốc kết hợp với những chất đặc hiệu nhằm làm giảm lượng đường huyết.Bệnh nhân có thể dùng riêng thuốc viên hoặc kết hợp với phương pháp tiêm insulin. Thuốc sử dụng để điều trị bệnh tiểu đường loại 2 chủ yếu chia 3 nhóm: • Nhóm thuốc thúc tụy tạng tiết thêm insulin như nhóm sufonylurea: Tolbutamide, Chlorpropamide, Glibenclamid, Gliclazid, Glimepirid, Glipizide, Glinide; nhóm meglitinide: Prandin, Starlix; nhóm sitagliptin: Januvia, Onglyza. • Nhóm thuốc giúp insulin hoạt động hữu hiệu hơn như nhóm biguanide: metformin (Glucophage, Glucophge XR, Metformin XR); nhóm thiazolidinedione (TZD)hay glitazone, (Rosiglitazone, pioglitazone ). • Thuốc ức chế men alpha-glucosidase(làm chậm hấp thu đường glucose từ ruột vào máu):Acarbose (Precose, Glucobay), miglitol (Glyset). Ngày nay, việc sử dụng nhóm thuốc chất ức chế alpha-glucosidase đang được chú ý nhiều. Thuốc ức chế α-glucosidase sẽ làm chậm quá trình hấp thu carbohydrat ở đường tiêu hóa, nhờ đó làm giảm độ tăng đường máu sau bữa ăn. Chất đường trong ruột sẽ được hấp thụ chậm vào cơ thể và đường ngay sau khi ăn sẽ không tăng cao trong máu. Tuy nhiên, chúng lại có nhiều tác dụng phụ như gây đầy hơi và sôi bụng, đôi khi gặp đau bụng và tiêu chảy, vì thuốc này làm chậm quá trình tiêu hóa chất bột đường trong lòng ruột.Chính vì vậy, việc nghiên cứu thêm những chất ức chế enzyme α-glucosidase từ nhiều nguồn khác nhau là rất cần thiết, giúp cho sự điều trị bệnh đái tháo đường loại 2 có nhiều lựa chọn tốt hơn. 6
1.2 TỔNG QUAN VỀ ENZYM ΑLPHA–GLUCOSIDASE[1],[2],[7] 1.2.1 Sơ lược về enzym Enzym là chất xúc tác sinh học có thành phần cơ bản là protein và có trong mọi tế bào sinh vật.Trong cuộc sống, nhờ có enzym mà xảy ra rất nhiều phản ứng hóa học với một hiệu suất cao mặc dù ở điều kiện bình thường về nhiệt độ, áp suất, pH. Như vậy,enzym là một loại protein xúc tác các phản ứng hóa học. Trong các phản ứng này, các phân tử lúc bắt đầu của quá trình được gọi là chất nền, enzym sẽ biến đổi chúng thành các phân tử khác nhau.Tất cả các quá trình trong tế bào đều cần enzym. Enzym có tính chọn lọc rất cao đối với chất nền của nó. Hầu hết phản ứng được xúc tác bởi enzym đều có tốc độ cao hơn nhiều so với khi không được xúc tác. Có trên 4000 phản ứng sinh hóa được xúc tác bởi enzym. Hoạt tính của enzym chịu tác động bởi nhiều yếu tố. Tác nhân ức chế là các phân tử làm giảm hoạt tính của enzym, trong khi yếu tố hoạt hóa là những phân tử làm tăng hoạt tính của enzym. 1.2.2 Chất ức chế enzym Là chất làm giảm hoạt tính của enzym do làm giảm ái lực của enzym với cơ chất hoặc làm enzym mất khả năng kết hợp với cơ chất. - Chất ức chế không đặc hiệu: Gây biến tính phân tử enzym, thậm chí phá hủy protein, tác dụng trên bất kì phân tử enzym nào, thường thì tác dụng đột ngột nhanh, không thuận nghịch. - Chất ức chế đặc hiệu: tác dụng vào những trung tâm phản ứng đặc biệt của từng enzym một. Tùy theo cách tác dụng chia làm hai nhóm: chất ức chế cạnh tranh và chất ức chế không cạnh tranh. 1.2.3 Giới thiệu enzym α–glucosidase Enzymeα-glucosidase với những tên khác như maltase, glucoinvertase, glucosidosucrase,maltase-glucoamylase, α−glucopyranosidase, glucosidoinvertase, α-D-glucosidase, α-glucosidase hydrolase, α-1,4-glucosidase, thuộc nhóm hydrolase (nhóm enzyme xúc tác các phản ứng thủy phân). 7
1.2.4 Cơ chế hoạt động của enzym α–glucosidase Chúng ta biết rằng carbohydrat chứa trong thức ăn là nguồn cung cấp chất đường cho cơ thể.Sau khi vào cơ thể, những carbohydrat được thủy phân thành những phân tử đường đơn bởi những enzyme trong ruột non và các phân tử đường này được tỏa ra nuôi các tế bào cơ thể.Tiến trình phân hóa này đòi hỏi tụy tạng phải tiết ra α-amylase dùng để phá vỡ các phân tử carbohydrat lớn thành oligosaccharid, màng tế bào ruột non lại tiết ra α-glucosidase để tiếp tục phân hóa các oligosaccharide thành các phân tử đường đơn rồi mới thẩm thấu vào máu. Chức năng chính của enzyme này là xúc tác cho việc cắt đứt liên kết 1,4-α-D-glucosid của cơ chất để giải phóng ra α-D-glucose. Bằng cách kiềm chế sự hoạt động của enzyme α-glucosidase, có thể làm giảm sự thủy giải của carbohydrat và làm chậm sự thẩm thấu glucose vào máu. 1.2.5 Tác nhân ức chế enzym α–glucosidase Việc tìm kiếm các hợp chất ức chế enzym α-glucosidase có ý nghĩa rất lớn trong các lĩnh vực như dược phẩm, thực phẩm…Đã có rất nhiều hợp chất được tìm thấy trong tự nhiên hoặc tổng hợp có khả năng ức chế enzym α-glucosidase.Tuy nhiên, những tác nhân ức chế enzym α-glucosidase hiện nay thường gây nhiều phản ứng phụ.Vì vậy, việc tìm kiếm các chất có khả năng ức chế enzym α-glucosidase vẫn đang được sự quan tâm của các nhà khoa học trên thế giới. 1.3 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT[3],[10],[23],[24],[25],[27],[28],[29] 1.3.1 Đặc điểm cây Bình Bát Dây Tên khoa học: Coccinia grandis (L.) J. Voigt Tên Việt Nam: dây Mảnh Bát, dây Bình Bát Tên tiếng Anh: Ivy Gourd, Baby Water Melon, Baby Gourd. Tên Ấn Độ là Kanduri Họ: Bầu Bí (Cucurbitaceae). 8
1.3.1.1 Mô tả cây Bình bát dây Cây thảo nhẵn và mảnh, mọc leo cao, đôi khi dài tới 5m hay hơn. (Hình 1.2). Hình 1.2 Bình bát dây Lá hình 5 cạnh, có răng, rộng 5 - 8cm, hình tim ở gốc, rất nhẵn, chia 5 thùy hình tam giác, có mũi nhọn cứng; tua cuốn đơn (Hình 1.3). Hình 1.3 Lá bình bát dây 9
Hoa đực và hoa cái giống nhau, mọc đơn độc hay xếp lại hai cái một ở nách lá, có cuống dài 2cm. Quả hình trứng ngược hoặc thuôn, dài 5cm, rộng 2,5cm, khi chín có màu đỏ và thịt quả đỏ chứa nhiều hạt (Hình 1.4). Hình 1.4 Hoa và quả Bình bát dây 1.3.1.2 Phân bố, thu hái và chế biến Loài phân bố ở Ấn Ðộ, Nam Trung Quốc, Việt Nam, Malaixia... Mọc hoang trên nương rẫy, ở rào, lùm bụi từ vùng thấp tới vùng cao khắp nước ta. Có thể thu hái các bộ phận của cây quanh năm. Lá non và quả dùng làm rau ăn. 1.3.2 Tác dụng dược lý của Bình bát dây.[10],[11] Lá và thân chống co thắt và là chất long đàm.Quả xanh có vị rất đắng.Quả xanh được nhai để chữa bệnh loét trên lưỡi. Ở Ấn Ðộ dịch lá và rễ dùng trị bệnh tiểu đường.Người ta dùng cả cây để làm thuốc trị bệnh lậu. Lá dùng đắp ở ngoài da trị phát ban da, trị ghẻ lở, mụn nhọt, các vết thương và các vết cắn của rắn rết. Lá Bình bát dây cho thấy rằng nó ức chế hoạt động của enzyme glucose-6-phosphatase và có hoạt tính chống ô xi hoá. Ở Campuchia người ta dùng dịch chiết từ thân cây để trị bệnh đau giác mạc. 10
Ở Inđônêxia, người ta còn dùng cây làm thuốc trị bệnh đậu mùa, đau dạ dày và ruột. Dân gian dùng củ ngâm rượu bóp chữa sưng đau hay các khớp bị viêm. Trong dân gian, Bình bát dây còn dùng điều trị bệnh vàng da, bệnh viêm cuống phổi, bệnh vẩy nến, herpes mảng tròn, bệnh lây lan qua đường tình dục như bệnh giang mai, bệnh lậu (Nadkarni và Nadkarni, 1976; Dash, 1987; Jain và DeFilipps, 1991; Kapoor, 1990). Trong y học cổ truyền, lá bình bát dây có vị ngọt, tính mát. Tác dụng: Thanh nhiệt, mát phế, thanh vị, nhuận táo, sinh tân dịch, dưỡng âm, tiêu độc. Người bệnh tiểu đường hái lá non bình bát dây 100g, thịt cua 50g, gia vị vừa đủ nấu canh ăn thường xuyên. Có thể dùng ngọn lá non cả hoa quả rửa sạch ăn sống hoặc xay nước uống đều được. 1.3.3 Thành phần hóa học chung của Bình bát dây[10],[25] G. Singh và các cộng sự cô lập được hợp chất đầu tiên có trong Bình bát dây là C 60 -polyprenol C 60 -polyprenol Trong cây có các thành phần: saponin, flavonoid, sterol và alkaloid. Một số hợp chất phân lập từ cây cùng chi Coccinia indica: Ở rễ cây đã tìm thấy các chất: Lupeol, β-amyrin, β-sitosterol, Stigmast-7-en-3-one. Cấu trúc các hợp chất: 11
β-sitosterol β-amyrin Lupeol Stigmast-7-en-3-one Ở trong trái bình bát dây có chứa các chất: β-carotene, lycopene, cryptoxanthin, β–sitosterol, taraxerol và apo-6’-lycopenal. Cấu trúc các hợp chất: β–carotene cryptoxanthin apo-6’-lycopenal 12