B<br />
<br />
GIÁO D C VÀ ðÀO T O<br />
<br />
TRƯ NG ð I H C NÔNG NGHI P HÀ N I<br />
...........<br />
<br />
………<br />
<br />
VŨ NG C LAN<br />
<br />
NGHIÊN C U NHÂN GI NG IN VITRO<br />
KHÔNG S<br />
VÀ M T S<br />
<br />
D NG CH T ðI U TI T SINH TRƯ NG<br />
BI N PHÁP K<br />
<br />
THU T NUÔI TR NG<br />
<br />
HAI LOÀI LAN B N ð A (DENDROBIUM NOBILE LINDL.,<br />
DENDROBIUM CHRYSANTHUM LINDL.) T I HÀ N I<br />
<br />
LU N ÁN TI N SĨ NÔNG NGHI P<br />
<br />
Chuyên ngành : Tr ng tr t<br />
Mã s<br />
<br />
: 62 62 01 01<br />
<br />
Ngư i hư ng d n khoa h c: 1. PGS.TS. NGUY N TH LÝ ANH<br />
2. TS. NGUY N VĂN GIANG<br />
<br />
HÀ N I - 2012<br />
<br />
i<br />
<br />
L I CAM ðOAN<br />
Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên c u c a riêng tôi. Các s li u,<br />
hình nh, k t qu nghiên c u trình bày trong lu n án là trung th c và chưa<br />
t ng ñư c s d ng ñ b o v h c v nào. Các tài li u trích d n ñư c ch rõ<br />
ngu n g c và m i s giúp ñ ñã ñư c cám ơn.<br />
<br />
Tác gi<br />
<br />
Vũ Ng c Lan<br />
<br />
ii<br />
<br />
L I C M ƠN<br />
Trư c h t, tôi xin trân tr ng bày t<br />
<br />
lòng bi t ơn sâu s c nh t ñ n<br />
<br />
PGS.TS. Nguy n Th Lý Anh và TS. Nguy n Văn Giang, là th y cô ñã t n<br />
tình dìu d t, hư ng d n tôi trong quá trình th c hi n ñ tài.<br />
Tôi xin trân tr ng c m ơn các th y cô giáo cùng toàn th ñ ng nghi p<br />
Vi n Sinh h c Nông nghi p, B môn Sinh lý Th c V t, Khoa Nông h c,<br />
Khoa Công ngh th c ph m, Khoa Công ngh Sinh h c, Vi n ðào t o Sau ñ i<br />
h c, Phòng Khoa h c và H p tác Qu c t , Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà<br />
N i ñã t o ñi u ki n giúp ñ tôi trong su t quá trình th c hi n ñ tài.<br />
Tôi xin bày t lòng bi t ơn sâu s c ñ n ban lãnh ñ o cùng các chuyên<br />
viên V Khoa h c Công ngh và Môi trư ng B Giáo d c và ðào t o ñã t o<br />
ñi u ki n, hư ng d n t n tình ñ tôi ñư c th c hi n 01 ñ tài tr ng ñi m c p<br />
B , cũng chính là ngu n kinh phí ch y u ñ tôi ñ kh năng tri n khai<br />
nghiên c u và thu ñư c các k t qu trong b n lu n văn này.<br />
Tôi xin ñư c bày t t lòng bi t ơn và tình c m yêu thương nh t c a<br />
mình t i bô m , ch ng, anh ch em và b n bè ñã cho tôi ñ ng l c và t o ñi u<br />
ki n trong quá trình h c t p và nghiên c u<br />
<br />
Hà N i, ngày<br />
<br />
tháng<br />
<br />
Tác gi lu n án<br />
<br />
Vũ Ng c Lan<br />
<br />
năm 2011<br />
<br />
iii<br />
<br />
M CL C<br />
L i cam ñoan<br />
<br />
i<br />
<br />
L i c m ơn<br />
<br />
ii<br />
<br />
M cl c<br />
<br />
iii<br />
<br />
Danh m c các ch vi t t t<br />
<br />
viii<br />
<br />
Danh m c b ng<br />
<br />
ix<br />
<br />
Danh m c hình<br />
<br />
xii<br />
<br />
M ð U<br />
<br />
16<br />
<br />
1<br />
<br />
Tính c p thi t c a ñ tài<br />
<br />
16<br />
<br />
2<br />
<br />
M c tiêu và yêu c u c a ñ tài<br />
<br />
18<br />
<br />
3<br />
<br />
Ý nghĩa khoa h c và th c ti n c a ñ tài<br />
<br />
18<br />
<br />
4<br />
<br />
ð i tư ng và ph m v nghiên c u c a ñ tài<br />
<br />
19<br />
<br />
5<br />
<br />
ðóng góp m i lu n án v h c thu t và lý lu n<br />
<br />
19<br />
<br />
Chương 1 T NG QUAN TÀI LI U<br />
1.1<br />
<br />
21<br />
<br />
Gi i thi u chi lan Hoàng Th o (Dendrobium) và hai loài lan b n<br />
ñ a Dendrobium nobile Lindl. (D.nobile) và Dendrobium<br />
chrysanthum Lindl. (D.chrysanthum)<br />
<br />
21<br />
<br />
1.1.1<br />
<br />
Ngu n g c và phân b c a chi Hoàng Th o (Dendrobium)<br />
<br />
21<br />
<br />
1.1.2<br />
<br />
Phân b c a chi lan Hoàng Th o (Dendrobium) t i Vi t Nam<br />
<br />
21<br />
<br />
1.1.3<br />
<br />
ð c ñi m th c v t h c chi lan Hoàng Th o (Dendrobium)<br />
<br />
24<br />
<br />
1.1.4<br />
<br />
M t s ñ c ñi m chính v 2 loài lan b n ñ a Dendrobium<br />
nobile Lindl. và Dendrobium chrysanthum Lindl.<br />
<br />
1.1.5<br />
<br />
Giá tr s d ng và th c tr ng khai thác m t s loài lan Hoàng<br />
Th o b n ñ a t i mi n B c Vi t Nam<br />
<br />
1.2<br />
<br />
Cơ s khoa h c c a các k thu t nuôi c y nhân gi ng trong ñ tài<br />
<br />
1.2.1<br />
<br />
27<br />
<br />
K thu t nhân gi ng b ng nuôi c y mô t bào th c v t<br />
<br />
29<br />
32<br />
32<br />
<br />
iv<br />
<br />
1.2.2<br />
<br />
Nhân gi ng b ng bioreactor<br />
<br />
35<br />
<br />
1.2.3<br />
<br />
Môi trư ng dinh dư ng trong nuôi c y in vitro<br />
<br />
38<br />
<br />
1.3<br />
<br />
Các nghiên c u v nhân gi ng in vitro cây lan<br />
<br />
1.3.1<br />
<br />
Nghiên c u l a ch n m u nuôi c y<br />
<br />
42<br />
43<br />
<br />
1.3.2<br />
<br />
nh hư ng c a n n môi trư ng nuôi c y<br />
<br />
44<br />
<br />
1.3.3<br />
<br />
nh hư ng c a ngu n các bon h u cơ<br />
<br />
45<br />
<br />
1.3.4<br />
<br />
nh hư ng c a các h n h p ch t h u cơ t nhiên<br />
<br />
46<br />
<br />
1.3.5<br />
<br />
nh hư ng c a phương th c nuôi c y<br />
<br />
47<br />
<br />
1.3.6<br />
<br />
Nhân gi ng in vitro Dendrobium nobile và Dendrobium<br />
chrysanthum<br />
<br />
1.4<br />
<br />
Các nghiên c u v nuôi tr ng lan Hoàng Th o<br />
<br />
1.4.1<br />
<br />
Các ñi u ki n cơ b n ñ tr ng lan Dendrobium<br />
<br />
1.4.2. Nghiên c u v nuôi tr ng cây lan Dendrobium sau nuôi c y mô<br />
<br />
51<br />
53<br />
53<br />
57<br />
<br />
Chương 2 V T LI U, N I DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 60<br />
2.1<br />
<br />
V t li u nghiên c u<br />
<br />
60<br />
<br />
2.2<br />
<br />
N i dung nghiên c u<br />
<br />
61<br />
<br />
2.3<br />
<br />
Phương pháp nghiên c u<br />
<br />
62<br />
<br />
2.3.1<br />
<br />
B trí thí nghi m<br />
<br />
62<br />
<br />
2.3.2<br />
<br />
Các ch tiêu theo dõi và phương pháp ñánh giá<br />
<br />
72<br />
<br />
2.3.3<br />
<br />
ði u ki n thí nghi m<br />
<br />
73<br />
<br />
2.3.4<br />
<br />
Phương pháp x lý s li u<br />
<br />
73<br />
<br />
Chương 3 K T QU NGHIÊN C U<br />
<br />
74<br />
<br />
3.1<br />
<br />
Xác ñ nh l a ch n phương pháp kh trùng, cơ quan nuôi c y ñ<br />
t o ngu n v t li u in vitro v i hai loài lan D.nobile và<br />
D.chrysanthum<br />
<br />
3.1.1<br />
<br />
74<br />
<br />
Xác ñ nh hi u qu kh trùng ñ i v i ch i m m trong H2O2<br />
2% và HgCl2 0,1%<br />
<br />
74<br />
<br />