PHÂN TÍCH ĐA DẠNG TRÌNH TỰ NUCLEOTID ADN TY THỂ VÀ MỐI QUAN HỆ DI Báo cáo khoa học : TRUYỀN CỦA BÒ H’MÔNG VỚI MỘT SỐ QUẦN THỂ BÒ KHÁC
lượt xem 8
download
Bò có vai trò chính trong sự phát triển của nền văn minh loài người và là một trong những loài vật nuôi thuần hoá có ý nghĩa kinh tế nhất. Có hai phụ loài chính đó là bò không có u (Bos taurus) và bò có u (Bos indicus) đều được cho là bắt nguồn từ bò rừng Châu Âu (Bos primigenius) đã tồn tại từ cách đây 8.000 - 10.000 năm và được thuần hoá riêng biệt (Epstein, 1971; Epstein và Mason, 1984; Machugh và cs, 1997; Loftus và cs, 1994). Các giống bò hiện nay đều là các biến thể của hai...
Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!
Nội dung Text: PHÂN TÍCH ĐA DẠNG TRÌNH TỰ NUCLEOTID ADN TY THỂ VÀ MỐI QUAN HỆ DI Báo cáo khoa học : TRUYỀN CỦA BÒ H’MÔNG VỚI MỘT SỐ QUẦN THỂ BÒ KHÁC
- PHẠM DOÃN LÂN – Phân tích đa dạng trình tự nucleotid ADN ty thể ... PHÂN TÍCH ĐA DẠNG TRÌNH TỰ NUCLEOTID ADN TY THỂ VÀ MỐI QUAN HỆ DI TRUYỀN CỦA BÒ H’MÔNG VỚI MỘT SỐ QUẦN THỂ BÒ KHÁC Phạm Doãn Lân1, Nguyễn Trọng Bình1, Trần Xuân Hoàn1, Vũ Chí Cương1, Lê Đình Lương2 và J.C. Maillard3 1 Phòng TN trọng điểm Công nghệ tế bào động vật -Viện Chăn nuôi - Thụy phương - Từ Liêm - Hà Nội 2 Đại học Khoa học Tự nhi ên - Đại học Quốc gia - Hà Nội 3 Giám đốc CIRAD vùng Đông Nam Á * Tác giả liên hệ: Phạm Doãn Lân - Phòng Thí nghiệm trọng điểm Công nghệ tế bào đ ộng vật Tel: (04).2.166.147 / 0914 366 975; Fax: (04) 8 389.775; Email: pdlanvn@yahoo.com ABSTRACT Mitochondrial DNA sequence diversity and phylogenetic relationships of H’Mong cattle to other cattle populations H ’mong cattle is an local breed with unclear origin. To assess the mitochondrial DNA sequence diversity and phylogenetic relationship of H’mong cattle to various other cattle populations, we analyzed for partial (530bp) of mtDNA D-loop sequences of 26 H’mong cattle samples in conjunction with previous published sequences from Northeast Asian (Korea, Japan), Europe, Africa, India and American bison cattle. The results showed that 14 haplotypes were observed in total of 26 analyzed cattle samples, indicating that the H’mong cattle population had a high diversity of mtDNA. In phylogenetic analysis, the H’mong cattle samples were clustered into two distinct genetic lineages: taurine (Bos taurus) and zebu (Bos indicus). The H’mong zebu lineages are closely related to Indian zebu cattle and are clearly separate from other cattle populations while the H’mong taurine lineages, Eropean, African, Japanese and Korean cattle clustered together. These results suggested that H’mong taurin lineages are closely related to cattle of Northeast Asian and Europe. Keywords: Mitochondrial DNA diversity, phylogenetic relationship, Bos indicus, Bos taurus ĐẶT VẤN ĐỀ Bò có vai trò chính trong sự phát triển của nền văn minh loài người và là một trong những loài vật nuôi thuần hoá có ý nghĩa kinh tế nhất. Có hai phụ loài chính đó là bò không có u (Bos taurus) và bò có u (Bos indicus) đều được cho là b ắt nguồn từ bò rừng Châu Âu (Bos p rimigenius) đ ã tồn tại từ cách đây 8.000 - 10.000 năm và được thuần hoá riêng biệt (Epstein, 1971; Epstein và Mason, 1984; Machugh và cs, 1997; Loftus và cs, 1994). Các giống b ò hiện nay đều là các biến thể của hai phụ loài Bos indicus và Bos taurus. Tính đa d ạng về di truyền, nguồn gốc, sự bảo tồn và lợi ích của các giống b ò này đã đ ược quan tâm nghiên cứu nhiều trên Thế giới. Bò H’mông hay bò Mèo là một giống bò địa phương đ ặc trưng của tỉnh Hà Giang, chúng gắn liền với đời sống và văn hoá của đồng b ào dân tộc H’mông. Cùng với người H’mông, bò H’mông sinh sống bán cô lập ở độ cao cao trên 1.000 mét so với mặt nước biển do đó chúng ít b ị lai tạp bởi các giống b ò khác. Theo một số giả thiết cho rằng bò vàng Việt Nam có nguồn gốc từ bò có u Ấn Độ (Bos indicus) và bò vàng Trung Qu ốc không có u (Bos taurus) (Lê Viết Ly và cs, 1999). Tuy nhiên, chưa có một bằng chứng nào ở mức độ phân tử về sự lai tạp và ngu ồn gốc giữa hai dòng bò có u và bò không có u ở bò Vàng Việt Nam nói chung và ở bò H’mông nói riêng được công bố. Trong nghiên cứu này chúng tôi trình bày: Một số kết quả phân tích sự đa dạng trình tự AND vùng D-loop ty thể, xác định sự lai tạp giữa hai loại bò có u và bò không có u ở quần thể bò 1
- VIỆN CHĂN NUÔI - Tạp chí Khoa học Công nghệ Chăn nuôi - Số 13-Tháng 8-2008 H’mông đồng thời so sánh mối quan hệ di truyền giữa b ò H’mông với một số quần thể bò khác của Nhật Bản, Hàn Qu ốc, Ấn Độ, Châu Phi, Châu Âu, và bò rừng Mỹ (Bison bison). VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Hai mươi sáu cá thể bò H’mông được chọn ngẫu nhiên ở các huyện Đồng Văn, Mèo Vạc, Xín Mần và Hoàng Su Phì của tỉnh Hà Giang. Trình tự nucleotid vùng D-loop ty thể của các mẫu bò Nhật Bản, Hàn Quốc, Ấn Độ, Châu Âu, Châu Phi b ò rừng Châu Mỹ được thu thập từ ngân hàng gen Quốc tế (GeneBank). Tách chiết ADN và nhân ADN đặc hiệu (PCR) Quy trình tách chiết ADN hệ gen từ các mẫu mô tai của 26 cá thể bò H’mông đ ược thực hiện theo bộ kít tách QIAamp của hãng Qiagen (Đức). Vùng ADN D-loop ty thể có kích thước 990 bp đ ược nhân đặc hiệu bởi phản ứng PCR với cặp mồi đặc hiệu có trình tự: Mồi xuôi: 5’-ACTAGGCATTTTCAGTGCCTTGCTT -3’ Mồi ngược: 5’-CCCAAAGCTGAAGTTCTATTTAAACTA-3’ Phản ứng PCR đ ược tiến hành trong tổng thể tích 50 µl bao gồm: Đệm PCR 1x, 1,5mM MgCl2, 200µM mỗi loại dNTP (A,T,G,C), 0,2 µM mỗi loại mồi xuôi, mồi ngược và 50-100 ng ADN khuôn. Phản ứng PCR đ ược thực hiện theo các b ước: Trước tiên ADN được biến tính ở 94oC trong 4 phút, tiếp theo đó với 32 chu kỳ, mỗi chu kỳ đ ược thực hiện ở điều kiện như sau: b iến tính ở 92 oC trong 1 phút, gắn mồi ở 55oC trong 1 phút, tổng hợp chu ỗi ADN ở 72 oC trong 1 phút 20 giây. Cuối cùng kết thúc phản ứng ở 72 oC trong 10 phút. Phản ứng giải trình tự Sản phẩm PCR sau đó được tinh sạch bằng bộ kít tinh sạch (QIAquick PCR Purification kit) của hãng Qiagen (Đức). Phản ứng giải trình tự đ ược thực hiện trực tiếp từ các sản phẩm PCR đ ã được tinh sạch với cả 2 mồi xuôi và ngược sử dụng bộ kít giải trình tự (DTCS-Quick Start Master Mix) của hãng Beckman Coulter và được tiến hành phân tích trên máy giải trình tự CEQ8000. Phân tích trình tự Trình tự nucleotid vùng D-loop ty thể của các mẫu bò H’mông được so sánh với trình tự các mẫu bò của Nhật Bản, Hàn Quốc, Ấn Độ, Châu Âu, Châu Phi, bò rừng Mỹ (Bos binson ) và trình tự toàn bộ ADN ty thể của hai mẫu bò không có u và có u đối chứng với mã truy cập trên ngân hàng gen tương ứng là V00654 và NC-005971 sử dụng công cụ CLUSTALW trong p hần mềm BIOEDIT và DNAsp. Khoảng cách di truyền giữa các trình tự vùng D-loop ty thể của các nhóm bò được tính theo p hương pháp của Tamura và Nei (1993). Cây quan hệ di truyền (phylogenetic tree) được xây d ựng bằng phần mềm MEGA phiên bản 4.0 (Kuma và cs, 1994). 2
- PHẠM DOÃN LÂN – Phân tích đa dạng trình tự nucleotid ADN ty thể ... KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Sự đa dạng trình tự ADN vùng D-loop ty thể ADN ty thể là một dạng vật liệu di truyền nằm ở ngo ài nhân được di truyền theo dòng mẹ. Chúng có tỷ lệ đột biến cao hơn 5 -10 lần so với hệ gen trong nhân, đặc biệt vùng điều khiển D-loop (displacement loop) có tỷ lệ thay đổi rất cao do đó thường đ ược sử dụng trong các nghiên cứu về đa d ạng di truyền, p hân loại và nguồn gốc tiến hoá của các loài. Tiến hành giải trình tự ADN vùng D-loop ty thể của các mẫu bò H’mông chúng tôi thu được đoạn trình tự nucleotid có độ d ài 530 bp (base pair) trên độ d ài 990 bp của sản phẩm PCR. Đo ạn trình tự này có vị trí từ nucleotid 15813 đến 16343 của to àn bộ trình tự ADN ty thể đ ược công bố bởi Anderson và cs (1982) với mã truy nhập trên ngân hàng gen Quốc tế là V00654. So sánh và phân tích trình tự vùng D-loop ty thể của 67 mẫu bò bao gồm: H’mông (26 mẫu); Hàn Quốc (4 mẫu bò vàng); Nhật Bản (9 mẫu bò đen), Ấn Độ (6 mẫu gồm các giống Harianna, Sahiwal, Tharparkar); Châu Phi (8 mẫu gồm các giống: Butana, Fulani, Kenana và N’Dama); Châu Âu (12 mẫu gồm các giống: Aberdeen Angus, Charolais, Friesian, Here ford, Jersey và Simantal) và 2 mẫu đối chứng của bò có u và không có u, kết quả cho thấy xuất hiện 39 kiểu di truyền đ ơn ty thể (haplotype) và có 50 điểm đa hình (polymorphic site) trên toàn bộ đoạn trình tự ADN được phân tích (530 bp). Trong số 26 mẫu bò H’mông đ ược phân tích thì có 14 kiểu di truyền ty thể đ ược xác định, kết quả đ ược trình bày ở Hình 1. Hình 1: Đa dạng trình tự vùng D-loop ty thể của 67 mẫu bò phân tích. Ký hiệu của các mẫu được thể hiện ở cột thứ nhất: EU (Châu Âu); AF (Châu Phi); JP (Nhật Bản); KR (Hàn Quốc); VN (Viêt Nam); IN (Ấn Độ). V00654 và NC005971- tương ứng là trình tự ADN ty thể chuẩn của mẫu bò không có u (Bos taurus) và bò có u (Bos indicus). Ký hiệu (-) chỉ sự tương đồng giữa các nucleotid, (*) mất hoặc thêm nucleotid. 3
- VIỆN CHĂN NUÔI - Tạp chí Khoa học Công nghệ Chăn nuôi - Số 13-Tháng 8-2008 Qua Hình 1 cho thấy trình tự ADN vùng D-loop ty thể ở bò H’mông đ ược tách biệt thành hai nhóm: nhóm H’mông 1 với các mẫu từ VN1 đến VN9 có trình tự của dòng bò không có u (Bos taurus); nhóm H’mông 2 với các mẫu từ VN10 đến VN14 có trình tự của dòng bò có u (Bos indicus). Trong số 26 mẫu bò H’mông được phân tích ngẫu nhiên. Kết qu ả cho thấy, có 14 mẫu thuộc dòng bò có u và 12 mẫu thuộc dòng bò không có u (Hình 2). Điều đó cho thấy rằng tính đa dạng ADN ty thể của quần thể bò H’mông là tương đối cao. Khoảng cách và mối quan hệ di truyền Khoảng cách di truyền trung b ình giữa các quần thể bò đ ược ước lượng dựa trên phương pháp của Tamura-Nei. Kết quả đ ược thể hiện ở Bảng 1. Bảng 1: Ma trận khoảng cách di truyền giữa các quần thể bò bao gồm cả bò rừng Mỹ theo Tamura-Nei [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [1] Châu Âu 0,000 [2] Châu Phi 0,008 0,000 [3] Ấn Độ 0,060 0,061 0,000 [4] Nhật Bản 0,007 0,013 0,065 0,000 [5] Hàn Quốc 0,007 0,011 0,063 0,009 0,000 [6] H’mông 2 0,058 0,060 0,004 0,064 0,062 0,000 [7] H’mông 1 0,007 0,012 0,058 0,009 0,010 0,057 0,000 [8] Bò rừng Mỹ 0,135 0,133 0,140 0,139 0,139 0,137 0,133 0,000 Qua Bảng 1 cho thấy, khoảng cách di truyền giữa bò rừng Mỹ và các qu ần thể bò khác (Châu Âu, Châu Phi, Ấn Độ, Việt Nam, Hàn Qu ốc, Nhật Bản) đều lớn hơn 0,1. Trong khi đó, kho ảng cách di truyền giữa bò Ấn Độ, H’mông 2 (thuộc dòng bò có u) và các quần thể bò thu ộc dòng không có u (Châu Âu, Nhật Bản, Hàn Quốc, Châu Phi, H’mông 1) lớn hơn 0,05. Khoảng cách di truyền giữa quần thể bò Châu Âu, Châu Phi, Nhật Bản, Hàn Quốc và H’mông 1 d ao động trong khoảng 0,007–0,013. Kho ảng cách di truyền giữa nhóm bò H’Mông 1 và bò có u Ấn Độ là 0,004. Cây phân loài d i truyền ở hình 2 cho thấy quần thể bò H’mông nhóm 1 và Châu Âu, Châu Phi, Hàn Quốc, Nhật Bản đều thuộc dòng bò không có u và có mối quan hệ gần nhau đồng thời chúng tách biệt so với bò có u Ấn Độ và bò rừng Mỹ. Trong khi đó nhóm bò H’mông 2 có mối quan hệ di truyền rất gần với quần thể bò có u Ấn Độ. Mặc dù kết quả tính khoảng cách di truyền trên Bảng 1 cho thấy, giữa nhóm bò H’mông 1 và bò Châu Âu, Hàn Qu ốc, Nhật Bản có mối quan hệ di truyền gần nhau hơn so với nhóm bò Châu Phi tương ứ ng là (0,007-0,01) và (0,012) nhưng ở cây phân loài d i truyền (Hình 2 ) không cho thấy có sự tách biệt hẳn giữa các nhóm bò Châu Phi và H’mông 1, Châu Âu, Hàn Quốc và Nhật Bản. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi giống với Kim và cs (2003), khi nghiên cứu mối quan hệ di truyền của một số giống bò của Hàn Quốc cũng không cho thấy sự tách biệt giữa bò Hàn Quốc, Châu Âu và Châu Phi. Trong khi đó, Mannen và cs (1998) khi nghiên cứu nguồn gốc của giống bò đ en Nhật Bản (Bos taurus) d ựa trên phân tích trình tự ADN ty thể đ ã cho thấy sự tách biệt giữa b ò Châu Âu với bò Châu Phi. Trong đó , một số cá thể b ò đ en của Nhật Bản có mối quan hệ di truyền gần gũi với bò của Châu Âu. 4
- PHẠM DOÃN LÂN – Phân tích đa dạng trình tự nucleotid ADN ty thể ... Ngoài ra, một số nghiên cứu khác cũng đã cho rằng hầu hết các giống bò ngày nay có nguồn gốc thuần hoá từ 3 khu vực khác nhau: Khu vực Tây Á là nguồn gốc của bò có u (Bos indicus) b ao gồm các giống bò có u Ấn Độ hiện nay, vùng Cận Đông và Châu Phi là ngu ồn gốc của bò không có u -Bos taurus (Bradley và cs, 1996; Loftus và cs, 1994; Troy và cs, 2001). Cho dù các giống bò Châu Phi hiện nay chúng có đặc điểm hình thái là d ạng trung gian của hai phụ loài Bos indicus và Bos taurus tuy nhiên nguồn gốc xuất hiện ban đầu ở Châu Phi được cho là bò Bos taurus. JP U87635 JP U87633 KR AF409056 JP U87639 JP U87638 JP U87637 JP U87636 VN8 JP U87634 Bos taurusV00654 VN22 VN5 VN13 VN14 JP U87640 EU L27716 EU L27726 JP U87650 EU L27734 EU L27717 Bò không u EU L27735 KR AF409055 EU L27718 Bos taurus EU L27719 EU L27727 EU L27712 EU L27725 KR AF409057 EU L27713 VN23 VN17 VN19 VN1 VN15 VN25 EU L27724 AF L27730 AF L27731 AF L27728 AF L27720 AF L27721 AF L27729 VN11 KR AF409054 AF L27714 AF L27715 VN4 VN20 VN24 IN L27723 VN18 IN L27722 IN L27732 IN L27736 IN L27737 Bò có u IN L27733 Bos indicusNC005971 VN2 Bos indicus VN43 VN6 VN7 VN9 VN10 VN12 VN16 VN21 VN26 Bison U12946 Bò rừng Mỹ Bison U51848 Bison U12936 Bison bison Bison U12955 Bison U12959 0.06 0.05 0.04 0.03 0.02 0.01 0.00 Hình 2: Cây phân loài di truyền của 67 mẫu bò ở Việt Nam (VN), Hàn Quốc (KR), Nhật Bản (JP), Ấn Độ (IN), Châu Âu (EU), Châu phi (AF), 5 mẫu bò rừng Châu Mỹ (Bison) và 2 mẫu bò có u và không có u đối chứng tương ứng là V00654, NC00597. 5
- VIỆN CHĂN NUÔI - Tạp chí Khoa học Công nghệ Chăn nuôi - Số 13-Tháng 8-2008 Theo tác giả Phillip s (1961) và Payne (1995) thì các giống b ò b ản địa của Trung Quốc và Việt Nam là sự lai tạp giữa bò có u (Bos indicus) và bò không có u (Bos taurus). Thực vậy nhận đ ịnh này phù hợp với kết quả nghiên cứu của chúng tôi trên qu ần thể b ò H’mông (t ỷ lệ bò có u chiếm 53,8%) cũng như kết quả nghiên cứu của Xin Cai và cs (2006) ở 18 giống bò bản địa trên toàn lãnh thổ Trung Quốc thì bò không u chủ yếu tập trung ở phía Bắc với tỷ lệ 81,8- 100% ở các giống và được cho là do du nhập từ Mông Cổ trong khoảng thời gian giữa 3766 - 3122 năm trước Công Nguyên. Trong khi đó bò không có u chủ yếu tập trung ở phía Nam Trung Qu ốc với tỷ lệ 63,3-100% ở các giống. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Qua phân tích sai khác trình tự ADN vùng D-loop ty thể trên qu ần thể b ò H’mông cho thấy tính đa d ạng di truyền ADN ty thể là tương đối cao. Qu ần thể b ò H’mông có nguồn gốc từ sự lai tạp củ a hai dòng bò không có u (Bos taurus) và có u (Bos indicus), tỷ lệ bò có u chiếm 53,8%. Dòng bò không có u ở quần thể bò H’mông có mối quan hệ di truyền gần với bò không u của Hàn Qu ốc, Nhật Bản (có nguồn gốc du nhập từ bò không u phía Bắc Trung Quốc) và Châu Âu, trong khi đó dòng bò có u có mối quan hệ di truyền gần gũi với bò có u Ấn Độ. Kết quả nghiên cứu đ ã b ước đầu cung cấp bằng chứng ở mức độ phân tử cho thấy p hù hợp với nhận định rằng b ò Vàng Việt Nam có nguồn gốc từ bò có u Ấn Độ (Bos indicus) và b ò Vàng Trung Qu ốc không có u (Bos taurus). TÀI LIỆU THAM KHẢO Anderson, S., de Bruiji, M. H., Coulson, A. R., Eperon, I. C., Sanger, F., and Young, I. g, (1982). Complete sequence of bovine mitochondrial DNA. Conserved features of the mammalian mitochondrial genome. J. Mol. Boil 156, pp. 683-717. Bradley, D. G., Machugh, D. E., Cunningham, P and Loftus, R. T, (1996). Mitochondrial diversity and the origins of African and European cattle. Poc. Natl. Acad. Sci. USA 93, pp. 5131-5135. Epstein, H., (1971). The origin of domestic animals of Africa. Aficana Publishing Corporation, New York. Vol.1, pp. 185-555. Epstein, H., and Mason, I. L, (1984). Evolution of domesticated animal. Edited by I. L. Mason. Long man, New York, pp.6-27. Kim, K. I., Lee, J. H., Lee, S. S and Yang, Y. H, (2003). Phylogenetic relationships of Northeast Asian cattle to other cattle populations determined using mitochondrial DNA D-Loop sequence polymorphism. Biochem. Gentic 41, pp. 91-98. Kuma, S., Tamura, K and Nei, M, (1994). Molecular evolutionary genetic analysis software for microcomputers. Comput.Appl.Biosci 10, pp. 189-191. Lê Viết Ly., Hoàng Kim Giao., Mai Văn Sánh., Võ Văn Sự., Lê Minh Sắt, (1999). Chuyên kh ảo bảo tồn n guồn gen vật nuôi ở Việt Nam. Tập I: Phần gia súc. Nhà xuất bản nông nghiệp, Hà nội. Loftus, R. T., Machugh, D. E.,Bradley, D. G., Sharp, P. M and Cunnigham, P, (1994). Evidence for two independent domestications of cattle. Proc.Natl. Acad. Sci. USA 91, pp.2757-2761. 6
- PHẠM DOÃN LÂN – Phân tích đa dạng trình tự nucleotid ADN ty thể ... Machugh, D. E., Shriver, M. D., Loftus, R. T.,Cunningham, P and Bradley, D. G (1997). Microsatellite DNA variation and the evolution, domestication and phylogeography of taurine and zebu cattle (Bos Taurus and Bos indicus). Genetic 146, pp.1071-1086. Mannen, H., Tsuji, S., Loftus, R. T and Bradley, D. G, (1998). Mitochondrial ADN variation and evolution of Japanese black cattle (Bos taurus). Genetic 150, pp. 1169-1175. Payne WJA, (1995). Diffusion of cattle throughout of Asia in tropical cattle: origins, breeds and breeding policy. Black well Sciences Ltd., Oxford, pp. 15-22. Phillips W, (1961). World distribution of the major types of cattle. J Heredity 86, pp. 248-249. Tamura, K., and Nei, M, (1993). Estimation of the number of nucleotide substitutions in the control region of mitochondrial DNA in humans and chimpanzees. Mol. Biol. Evol 10, pp. 512-526. Troy, C. S., Machugh, D.E., Balley, J. F., Magee, D. A., Loftus, R. T., Cunnigham, P., Chamberlain, A. T., Sykes, B. C., and Bradley, D. G, (2001). Genetic evidence for Near -Eastern origins of European cattle. Nature 410, pp. 1088-1091. Xin Cai., Hong Chen., Chuzhao Lei., Shan Wang., Kai Xue and Bao Zhang, (2006). mtDNA diversity and genetic lineages of eighteen cattle breeds from Bos Taurus and Bos indicus in China. Genetica, DOI 10.1007/s10709-006-9129-y Người phản biện: Ths. Trần Thị Thu Thủy. Ths. Nguyễn Thị Quỳnh Châu 7
CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD
-
Luận văn : Phân tích quan điểm Phát triển nhanh, hiệu quả và bền vững; tăng trưởng kinh tế đi đôi với thực hiện tiến bộ và công bằng xã hội, bảo vệ môi trường tự nhiên, bảo tồn đa dạng sinh học”
24 p | 1359 | 246
-
PHÂN TÍCH DẦM THÉP - BÊ TÔNG LIÊN HỢP CÓ XÉT ĐẾN TƯƠNG TÁC KHÔNG TOÀN PHẦN CỦA LIÊN KẾT CHỊU CẮT BẰNG PHƯƠNG PHÁP MA TRẬN ĐỘ CỨNG TRỰC TIẾP
11 p | 179 | 30
-
Luận văn: NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA QUẦN THỂ NẤM Corynespora cassiicola (Berk & Curt) Wei GÂY BỆNH TRÊN CÂY CAO SU (Hevea brasiliensis Muell. Arg.) TẠI TRẠI THỰC NGHIỆM LAI KHÊ, VIỆN NGHIÊN CỨU CAO SU VIỆT NAM BẰNG KỸ THUẬT RAPD (part 3)
26 p | 108 | 25
-
Phân tích đa dạng di truyền của đậu tương bằng chỉ thị SSR
8 p | 191 | 24
-
Luận văn Thạc sĩ Giáo dục học: Dạy học phân tích đa thức thành nhân tử ở trung học cơ sở
80 p | 127 | 23
-
ĐA DẠNG DI TRUYỀN MỘT SỐ LOẠI NẤM ĂN DỰA TRÊN TRÌNH TỰ ITS (INTERNAL TRANSCRIBED SPACER)
8 p | 132 | 17
-
Luận văn : XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP NHẬN DIỆN VÀ PHÂN TÍCH TÍNH ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA 21 DÒNG CACAO (THEOBROMA CACAO L.) BẰNG KỸ THUẬT MICROSATELLITE part 8
7 p | 117 | 16
-
Luận văn : PHÂN TÍCH ĐA DẠNG DI TRUYỀN MỘT SỐ MẪU NẤM Corynespora cassiicola (Berk. & Curt.) Wei GÂY BỆNH TRÊN CÂY CAO SU (Hevea brasiliensis Muell. Arg.) BẰNG PHƯƠNG PHÁP RFLP – PCR part 7
6 p | 120 | 15
-
Báo cáo: Đa dạng di truyền các giống xoài (mangifera sp.) bằng kỹ thuật sinh học phân tử
11 p | 145 | 14
-
Tiểu luận Quản lý Khoa học và Công nghệ: Phân tích Luật Khoa học và Công nghệ năm 2013 - Từ đó dẫn một số điều khoản để chứng minh rằng Luật Khoa học và Công nghệ đã và đang kéo lùi quá trình cải cách Khoa học và Công nghệ Việt Nam từ triết lý 4 về triết lý 3
5 p | 139 | 12
-
Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu đa dạng di truyền phân đoạn S7 của các chủng virus gây bệnh lúa lùn sọc đen
79 p | 86 | 11
-
Nghiên cứu đa dạng di truyền các giống lúa địa phương tỉnh Lào Cai bằng chỉ thị ADN
7 p | 99 | 10
-
Khóa luận tốt nghiệp ngành Dược học: Lựa chọn quy trình tách chiết DNA tổng số và bước đầu phân tích đa dạng di truyền nguồn gen Dây Thường Xuân (Hedera nepalensis K.Koch) ở Việt Nam dựa trên chỉ thị GBSSI
54 p | 53 | 8
-
Tạp chí khoa học: Đánh giá đa dạng di truyền một số dòng, giống hoa chi Lan Huệ (Hippeastrum herb.) bằng chỉ thị phân tử RAPD
8 p | 73 | 7
-
Luận án Tiến sĩ Sinh học: Xác định và phân tích hoàn chỉnh trình tự hệ gen ty thể của 6 giống lợn bản địa tại một số tỉnh Miền Bắc Việt Nam
146 p | 37 | 5
-
Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Phân tích đa dạng di truyền vùng siêu biến ADN ty thể người Việt Nam thuộc 5 dân tộc Kinh, Thái, Hmong, Lolo và Giarai
71 p | 23 | 5
-
Luận án Tiến sĩ Kinh tế học: Tác động của đa dạng hóa xuất khẩu đến tăng trưởng kinh tế - Bằng chứng thực nghiệm từ các nước đang phát triển
173 p | 11 | 1
Chịu trách nhiệm nội dung:
Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA
LIÊN HỆ
Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM
Hotline: 093 303 0098
Email: support@tailieu.vn